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文檔簡介

1、生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定導(dǎo)學(xué)提綱一、還原糖的鑒定1、什么是還原糖?常見的還原糖有哪些?還原性糖指含有醛基或酮基的糖,常見的有葡萄糖、果糖、麥芽糖。2、實(shí)驗(yàn)原理是什么?斐林試劑由質(zhì)量濃度為0.1g/ml的NaOH溶液和質(zhì)量濃度為0.05g/ml的CuSO4溶液配制而成的淡藍(lán)色Cu (OH) 2沉淀的懸濁液,葡萄糖溶液在加入斐林試劑后,在加熱條件下還原為磚紅色的沉淀,而葡萄糖氧化成葡萄糖酸。其反應(yīng)式為: CH2OH(CHOH)4CHO2Cu(OH)2 = CH2OH(CHOH)4COOHCu2O2H2O3、用斐林試劑鑒定還原糖時(shí),溶液顏色變化過程是怎樣的?淺藍(lán)色、棕色、磚紅色沉淀4、為

2、什么斐林試劑要現(xiàn)配現(xiàn)用,不能放置太久?時(shí)間一長,Cu(OH)2沉淀在溶液底部無法充分發(fā)生反應(yīng)5、為什么選擇白色或接近白色的植物組織?因?yàn)轭伾^深的植物組織中的色素會對顏色反應(yīng)起掩蓋作用。6、研磨小塊蘋果時(shí),為什么要加少許石英砂?使研磨更充分,否則還原糖少,顏色不明顯。7、為什么必須將斐林試劑的甲液和乙液混合均勻后再注入蘋果組織液中,而不能分別加入?如分別加入,組織液中的有機(jī)酸會與NaOH迅速反應(yīng),導(dǎo)致Cu (OH) 2不足。8、為什么最終的顏色中有時(shí)會出現(xiàn)紅褐色,甚至黑色?Cu (OH) 2對熱不穩(wěn)定,易脫水生成黑色氧化銅CuO。9、還可以用什么方法鑒定還原糖?班氏試劑(A液:硫酸銅溶液,B液

3、:檸檬酸納和碳酸溶液)或用銀鏡反應(yīng)。10、如何鑒定淀粉? 滴加碘液,淀粉遇碘變藍(lán)。二、蛋白質(zhì)的鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理是什么?將尿素加熱,兩分子尿素放出一分子氨而縮合成雙縮脲。雙縮脲試劑的成分是質(zhì)量濃度為0.1gmL的氫氧化鈉溶液(A)和質(zhì)量濃度為0.01gmL的硫酸銅溶液(B)。在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOCNHCONH2)能與Cu2+作用,形成紫色或紫紅色的絡(luò)合物,這個(gè)反應(yīng)叫做雙縮脲反應(yīng)。由于蛋白質(zhì)分子中含有很多與雙縮脲結(jié)構(gòu)相似的肽鍵,因此,蛋白質(zhì)可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng)。2、使用蛋清作實(shí)驗(yàn)材料,為什么要先稀釋?如果不稀釋,反應(yīng)后產(chǎn)生的化合物會吸附在試管壁,導(dǎo)致反應(yīng)不徹底。3、樣液

4、加入雙縮脲試劑A液后,溶液什么顏色?之后加入雙縮脲試劑B液,振蕩后溶液什么顏色?加雙縮脲試劑A后,溶液仍透明(或白色);加入B液振蕩均勻后,變紫色或紫紅色。4、為什么加入的雙縮脲試劑B液不能過量? 會生成大量藍(lán)色Cu (OH) 2,遮蔽產(chǎn)生的紫色。5、斐林試劑與雙縮脲試劑的主要不同點(diǎn)?(1)溶液濃度不同。斐林試劑中CSO4的濃度為0.05g/mL,雙縮脲試劑中CSO4的濃度為0.01 g/mL。(2)使用原理不同。斐林試劑實(shí)質(zhì)是新配制的Cu(OH)2溶液,雙縮脲試劑實(shí)質(zhì)是堿性條件下的Cu2。(3)使用方法不同。斐林試劑使用時(shí),先把Na0H溶液和CSO4溶液混合,而后立即使用。雙縮脲試劑使用時(shí),

5、先加入Na0H溶液,然后再加入CSO4溶液。三、脂肪的鑒定1、實(shí)驗(yàn)原理是什么?在制作臨時(shí)裝片的過程中用什么試劑洗去浮色? 2、為什么要取浸泡過的花生種子,而浸泡的時(shí)間又不宜過長?浸泡的種子易切片,而浸泡時(shí)間過長,組織較軟,切下的薄片不易成形。3、有些橘黃色的小顆粒并不在細(xì)胞之內(nèi),而在細(xì)胞的周圍,你認(rèn)為是什么原因呢?用刀片切取種子子葉薄片時(shí),切破了細(xì)胞,細(xì)胞中的脂肪分子游離到細(xì)胞之間。4、切取花生子葉薄片,要求實(shí)驗(yàn)技能較高,此步驟如何改進(jìn)可以更便于操作?改成刮取花生子葉泥制作臨時(shí)裝片,易做,效果又好?!炯皶r(shí)練】1、在生物組織中還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,對實(shí)驗(yàn)材料選擇的敘述錯誤的是:A、甘

6、蔗莖的薄壁組織、馬鈴薯的塊莖等,都含有較多的糖且近于白色,因此可以用于進(jìn)行還原糖的鑒定B、花生種子含脂肪多且子葉肥厚,是用于脂肪鑒定的理想材料C、大豆種子蛋白質(zhì)含量高,是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的理想植物組織材料D、雞蛋清含蛋白質(zhì)多,是進(jìn)行蛋白質(zhì)鑒定的動物材料2、下列敘述不正確的是:A、雙縮脲試劑A是為反應(yīng)提供堿性環(huán)境 B、在花生子葉薄片上滴加50%酒精是為了溶解組織中的油脂C、所有的蛋白質(zhì)均可與雙縮脲試劑發(fā)生顏色反應(yīng) D、蘇丹可用來鑒定生物組織中的脂肪3、鑒定蛋白質(zhì)時(shí),事先留出一些黃豆組織樣液,主要目的是:A、重復(fù)兩次,結(jié)果準(zhǔn)確   B、再用于還原糖的鑒定  &

7、#160;C、與加入雙縮脲試劑后的顏色作對照     D、失敗后還可重做4、用蘇丹染液檢驗(yàn)脂肪,脂肪顆粒被染成橘黃色,但要立即觀察,否則脂肪顆粒將溶解。能溶解脂肪顆粒的是:   A、染液中的蘇丹            B、染色反應(yīng)中的熱量   C、染液中的水分            

8、60; D、染液中的酒精5、脂肪鑒定實(shí)驗(yàn)中,切片做好后應(yīng)進(jìn)行的操作步驟依此是:A、染色洗浮色制片鏡檢     B、制片染色洗浮色鏡檢 C、制片鏡檢染色洗浮色      D、染色制片洗浮色鏡檢6、下列哪組試劑在使用過程中,必須經(jīng)過加熱:A、蘇丹或鑒定脂肪           B、斐林試劑鑒定可溶性還原糖C、雙縮脲試劑鑒定蛋白質(zhì)      &

9、#160;        D、碘化鉀試劑鑒定淀粉7、在還原糖、脂肪和蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)中,需要使用顯微鏡的是: A、還原糖的鑒定     B、蛋白質(zhì)的鑒定      C、脂肪的鑒定       D、全都要8、對斐林試劑和雙縮脲試劑的配方,敘述不正確的是:A、都含有氫氧化鈉溶液和硫酸銅溶液B、斐林試劑的配制是將45滴的0.05 g/mL的硫酸銅溶液滴入2 mL 0.1 g

10、/mL的氫氧化鈉溶液中即成C、雙縮脲試劑含有兩種試劑:0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液和0.01 g/mL的硫酸銅溶液D、雙縮脲試劑是將34滴的0.01 g/mL的硫酸銅溶液滴入2 mL 0.1 g/mL的氫氧化鈉溶液中混合而成的9、下列操作步驟的敘述中,正確的是:     A、用于鑒定可溶性還原糖的斐林試劑甲液和乙液,可直接用于蛋白質(zhì)的鑒定   B、脂肪的鑒定需要用顯微鏡才能看到被染成橘黃色的脂肪滴     C、鑒定可溶性還原糖時(shí),要加入斐林試劑甲液搖勻后,再加入乙液   D

11、、用于鑒定蛋白質(zhì)的雙縮脲試劑A液與B液要混合均勻后,再加入含樣品的試管中,且必須現(xiàn)配現(xiàn)用10、做生物組織中可溶性還原糖、脂肪、蛋白質(zhì)的鑒定實(shí)驗(yàn)時(shí),需要根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要選擇不同的實(shí)驗(yàn)材料。請根據(jù)下表所列各種材料回答問題:各種可供實(shí)驗(yàn)的材料梨黃桃胡蘿卜黃豆花生種子小麥種子其中適合于鑒定還原糖的是_,理由是_,你打算用什么試劑鑒定_。小麥種子不如花生種子更適合用來鑒定脂肪,這是因?yàn)開,你怎樣進(jìn)行鑒定 。適合于鑒定蛋白質(zhì)的是_,理由是_,鑒定所用的試劑是_。答案:梨 梨的組織細(xì)胞顏色為白色,并且糖含量較高 斐林試劑或班氏試劑。小麥種子的脂肪含量不如花生種子高,也不容易做切片 用蘇試劑鑒定。黃豆 蛋白質(zhì)含量高 雙縮脲試劑。11、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì):通常情況下,正常人的尿液中沒有葡萄糖。當(dāng)一次食用大量糖時(shí),尿液中是否有葡萄糖存在?試運(yùn)用對照的方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行鑒定。原理:還原糖+斐林試劑磚紅色沉淀,加熱。材料:大量食糖者尿液、正常人尿液、葡萄糖溶液。試管、量筒、大燒杯、酒精燈、鐵架臺、試管夾、石棉網(wǎng)、火柴等。試劑:新配制的斐林試劑。步驟:取3支干凈的試管分別標(biāo)號1、2、

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