流行性感冒裂解疫苗臨床安全性及免疫原性研究

1、流行性感冒裂解疫苗臨床安全性及免疫原性研究（作者: 單位：郵編：）【摘要】目的探討流行性感冒病毒裂解疫苗的臨床安全性與免疫效 果。方法采用隨機(jī)、雙盲原則分為試驗(yàn)組和對(duì)照組，分別接種試驗(yàn) 疫苗和對(duì)照疫苗，觀察接種反應(yīng)率和3型抗體陽轉(zhuǎn)情況，微量血凝抑 制試驗(yàn)測(cè)定流感抗體。結(jié)果接種試驗(yàn)疫苗后，兒童、成人、老年組 整體全身反應(yīng)率4.13%,局部反應(yīng)率為4.13%,與對(duì)照疫苗比較無 顯著差異。試驗(yàn)疫苗免疫后各血清HI抗體陽轉(zhuǎn)率分別為H1 XI 88.34%、H3X2 77.67%、B （亞）型83.62%,與對(duì)照疫苗比較無顯著 差異；血清保護(hù)率分別為 H1N1 99. 26% (400/403 )、H3

2、X2 97.27%(392/403). B (亞)型為 92. 31% (372/403)> H1N1 試驗(yàn)組高于對(duì)照 組，差異有顯著性；H1N1. H3N2和B （亞）型HI抗體GMT平均增長 倍數(shù)試驗(yàn)疫苗和對(duì)照疫苗分別為12.3. 10.8. 12.1和20.2、1&0、 9.7,平均增長倍數(shù)均大于2. 5倍，B （亞）型試驗(yàn)組高于對(duì)照組，差 異有顯著性。結(jié)論 試驗(yàn)疫苗的免疫效果達(dá)到歐盟標(biāo)準(zhǔn)，其安全性和免疫原性良好，適于推廣使用?！娟P(guān)鍵詞】流行性感冒病毒裂解疫苗安全性免疫原性discuss the safety andsplit influenza virus Abstrac

3、t Objective To immunogenicity of trivalent vaccine. Methods The test group and control group were devided based on randomized and double-blind principle . Two groups were inoculated with the test vaccine and the controlvaccine. Observed response rate and 3-antibody positiveconversion. The influenza

4、antibodies were tested by the micro-hemagglutination inhibition(HI)test. Results After test vaccine inoculated, the rate of systemic response was 4. 13% and the rate partial response was 4.13% in children group, adult group and elder group. It was no significant statistical difference comparing with

5、 the control vaccine. The anti-HI seroconversion rate were HlNl 88. 34%, H3N2 77. 67%, B-type 83. 62% after the test vaccine inoculated. It was no significant statistical difference comparing with the control vaccine. The rates of serum protection were HIM 99. 26% (400/403)，H3N2 97.27% (392/403) , B

6、-type 92.31% (372/403) , the HlNl group was higher than the control group, two of them had significant statistical difference. The average growth of multiples of anti-HI GMT of HIM, H3N2 and B-type groups of test group and control group were 12. 3, 10. 8, 12. 1 and 20. 2、16. 0, 9. 7, and the average

7、 growth of multiples of B-type test group was 2. 5 times higher than control group, which had significant statistical difference. Conclusion These results indicate that the trial vaccine has excellent safety and immunogenicity and may be suited for wide use.Key words split influenza virus vaccine ；

8、safety ；immunogenicity流行性感冒（以下簡稱流感）是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染 病，臨床表現(xiàn)為發(fā)熱、頭痛、肌痛、乏力、鼻炎、咽痛和咳嗽。近3 個(gè)世紀(jì)，流感一直是困擾人類的主要傳染病之一。隨著人們對(duì)流感嚴(yán) 重危害性的進(jìn)一步認(rèn)識(shí)，應(yīng)用流感疫苗進(jìn)行免疫預(yù)防正R益受到重 視。接種流感疫苗被認(rèn)為是預(yù)防流感發(fā)生與傳播的最佳方法1。為 探討澳大利亞CLS有限公司研制的流行性感冒病毒裂解疫苗（Fluavax）臨床安全性與免疫效果，論證其在國內(nèi)推廣使用的可行 性，實(shí)現(xiàn)其預(yù)防疾病的價(jià)值，根據(jù)國家藥品監(jiān)督管理局有關(guān)要求，我 中心于2007年5月2007年7月選擇廣西崇左市江州區(qū)為研究現(xiàn)場(chǎng) 對(duì)

9、該疫苗進(jìn)行了臨床研究與評(píng)價(jià)。1資料與方法L1 一般資料 觀察對(duì)象以知情同意，自愿參加為原則。選擇年齡3 歲以上江州區(qū)常住健康人群，近期無流感病毒感染史.無流感疫苗接 種史及其接種禁忌證，符合臨床研究入選標(biāo)準(zhǔn)者和排除標(biāo)準(zhǔn)者。研究 對(duì)象分成3個(gè)年齡組，即兒童組（3歲W年齡16歲）、成人組（16歲W年齡V60歲）、老人組（60歲W年齡W80歲）。每年齡組按受試到 達(dá)接種現(xiàn)場(chǎng)順序，采用隨機(jī)、雙盲原則分別接種試驗(yàn)疫苗和對(duì)照疫苗, 即分層整群的抽樣方法使受試人群隨機(jī)化。現(xiàn)場(chǎng)臨床反應(yīng)觀察以及標(biāo) 本檢測(cè)均按盲法進(jìn)行。L 2疫苗選擇1.2.1試驗(yàn)疫苗由澳大利亞CLS有限公司研制的流行性感冒病毒裂解疫苗（Flgv

10、ax）, 2006年用于疫苗生產(chǎn)的流感病毒株符合北半 球疫苗專家組（VEG）的推薦。疫苗為水針劑型，規(guī)格為0.5 ml/支, 批號(hào)：CTSLCHF0625A,有效期至2007年7月19日。每劑含45 mcg 流感血凝素抗原，2006/2007年度北半球已認(rèn)可的流感株15 mcg。1. 2. 2對(duì)照疫苗 由英國GSK公司生產(chǎn)的福祿立適（Fluarix）流感 裂解疫苗，己在中國注冊(cè)。疫苗為水針劑型，規(guī)格為0.5 Dll/支，批 號(hào)為XFLUA207AA,有效期至2007年7月。每劑含45 mcg流感血凝 素抗原，2006/2007年度北半球己認(rèn)可的流感株15 mcg。疫苗保存于 2 C8 C暗處，

11、嚴(yán)防凍結(jié)，在冷藏條件下運(yùn)輸。L 3方法L3, 1免疫程序及要求接種前測(cè)量腋下體溫并詢問健康狀況，合格 者于上臂三角肌附著處肌肉內(nèi)接種疫苗。每人接種0.5 mloL3.2接種效果觀察（1）臨床安全性于接種后30 min內(nèi)觀察即時(shí)反 應(yīng)，并連續(xù)3 R觀察局部反應(yīng)（紅、腫.熱、痛等）和全身反應(yīng)（發(fā)熱.肌痛、頭痛.皮疹等）；追蹤反應(yīng)者至反應(yīng)消退；隨訪接種者，了解 有無遲發(fā)性反應(yīng)發(fā)生。（2）免疫原性觀察對(duì)象于免疫前及免疫后4周 采集血標(biāo)本，分離血清于-20 C保存。統(tǒng)一用微量血凝抑制（HI）試驗(yàn) 檢測(cè)流感病毒分型抗體滴度。（3）安全性判定標(biāo)準(zhǔn)：按1997年版預(yù) 防接種手冊(cè)的判斷標(biāo)準(zhǔn)分類2。局部反應(yīng)：紅腫

12、直徑W0.5 cm 為無反應(yīng)；0. 62. 5 cm為輕反應(yīng)；2. 65. 0 CD1為中反應(yīng)；M5. 1 cm 為強(qiáng)反應(yīng)。全身反應(yīng)：腋下體溫W37.0 °C為無反應(yīng)；37. 1 C 37.5 °C為輕反應(yīng)，37.6 C385 °C為中反應(yīng)，5=38.6 C為強(qiáng)反 應(yīng)。（4）免疫原性判定標(biāo)準(zhǔn)（依據(jù)歐盟標(biāo)準(zhǔn)3）:抗體陽轉(zhuǎn)率：免 疫前HI抗體1 : 10者則免疫后應(yīng)： 40；免疫前HI抗體Ml : 10 者，以M4倍增長計(jì)算。1860歲分型抗體陽轉(zhuǎn)率應(yīng)240%, 60歲 分型抗體陽轉(zhuǎn)率230%。疫苗免疫前后血清HI抗體幾何平均滴度 （GMT）的增長倍數(shù)：免疫前HI抗體

13、1 ： 10者按1 ： 5計(jì)算，統(tǒng)計(jì)疫苗 免疫前后血清HI抗體GMT,進(jìn)行疫苗免疫前后HI抗體GMT比較。18 60歲分型抗體GMT增長應(yīng)22.5倍，60歲分型抗體GMT增長應(yīng)M2. 0 倍。疫苗的保護(hù)率：以免疫前HI抗體滴度1： 40為易感者，HI抗 體滴度： 40為非易感者，且以HI抗體滴度Ml : 40為陽轉(zhuǎn)和保護(hù) 水平陽性界限值。1860歲保護(hù)率應(yīng)$70%, 60歲保護(hù)率應(yīng)260%。以上3項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)中達(dá)到其中1項(xiàng)即可。L3.3統(tǒng)計(jì)學(xué)方法統(tǒng)計(jì)所有受試者接種疫苗后的局部和全身反應(yīng), 統(tǒng)計(jì)受試者有效血清的抗體陽轉(zhuǎn)率、GMT增長倍數(shù)、抗體保護(hù)率。不 同組之間的不良反應(yīng)發(fā)生率、血清抗體陽轉(zhuǎn)率、抗體保

14、護(hù)率采用2 檢驗(yàn)進(jìn)行比較，抗體GMT增長倍數(shù)采用t檢驗(yàn)進(jìn)行比較。2結(jié)果2. 1臨床安全性研究2. 1. 1臨床反應(yīng)觀察 共對(duì)690名兒童、成人、老年人進(jìn)行了臨床反 應(yīng)觀察，其中接受試驗(yàn)疫苗者460名（兒童組184名、成年組184名、 老年組92名），對(duì)照疫苗者230名（兒童組92名、成年組92名、老 年組46名），所有受試者均分別接種一劑疫苗后，均未觀察到即時(shí)反 應(yīng)。對(duì)接種試驗(yàn)疫苗者經(jīng)72 h隨訪觀察，有19例出現(xiàn)全身性反應(yīng)（發(fā)熱），反應(yīng)率4. 13% （其中輕度16例，占84.21%；中度3例, 占15. 79%）o接種對(duì)照疫苗經(jīng)72 h全身反應(yīng)隨訪觀察，有12例出 現(xiàn)發(fā)熱反應(yīng)，反應(yīng)率為5.

15、22% （其中輕度11例，占91.67%；中度1 例，占8.33%）。試驗(yàn)疫苗和對(duì)照疫苗的全身性反應(yīng)（發(fā)熱）率經(jīng)統(tǒng) 計(jì)學(xué)處理，顯示差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X 2=0. 42, P>0.5 ）。2. 1.2局部反應(yīng)觀察試驗(yàn)疫苗組接種疫苗后72 h系統(tǒng)觀察期內(nèi), 共觀察到19例局部反應(yīng)（反應(yīng)率為4. 13%）,其中輕度16例（84.21%）, 中度2例（10.53%）,重度1例（5. 26%）o癥狀分別為紅斑、疼痛、 硬結(jié)和腫。其中兒童組4例，均為輕度反應(yīng)；成人組6例（4例輕度、 2例中度）；老年組9例中，1例為重度反應(yīng)，腫塊（43 mm）在72 h 內(nèi)消退，其余8例為輕度反應(yīng)，未觀察到重度及其以

16、上局部反應(yīng)。對(duì)照疫苗接種后，共觀察到8例局部反應(yīng)（反應(yīng)率為3.48%）,全 部為輕度局部反應(yīng)，未觀察到中度及以上的局部反應(yīng)。癥狀分別為紅 斑、疼痛、硬結(jié)、腫和淤斑。其中兒童組有2例，成人組1例，老年 組5例。試驗(yàn)疫苗和對(duì)照疫苗的局部反應(yīng)率經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，顯示差異 無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（x2=0. 17, P>0, 5）,見表1。表1觀察對(duì)象接種疫 苗后局部反應(yīng)情況2.2免疫原性研究 木研究免疫前、后有效雙份血清樣木共610對(duì), 占所有受試者的88. 41% （610/690）；其中試驗(yàn)組有效樣木403對(duì)（兒 童組171對(duì)、成人組155對(duì)、老年組77對(duì)），占其總?cè)藬?shù)的87.61%（403/460）,

17、對(duì)照組有效樣本207對(duì)（兒童組83對(duì)、成人組81對(duì)、老年組43對(duì)），占其總?cè)藬?shù)的90% （207/230）；各年齡組受試者試驗(yàn) 和對(duì)照組人群采血率分布差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（X2兒童組=0, 62, P 兒童組>0.05； X2成人組=0. 72, P成人組>0. 05； x 2老年組=1.80,P老年組>0. 05)o2. 2. 1兩種流感疫苗免疫后HI抗體陽轉(zhuǎn)率比較試驗(yàn)疫苗免疫后各 血清HI抗體陽轉(zhuǎn)率分別為H1N1 88. 34%;H3X2 77.67%,B （亞）型 83.62%；對(duì)照疫苗免疫后各血清HI抗體陽轉(zhuǎn)率分別為H1N1 91. 30%；H3N2 82. 13%,

18、B （亞）型79.71%。試驗(yàn)疫苗與對(duì)照疫苗各（亞）型兩組 間差別均無顯著性(X 2H1N1=1.26> PH1N1>O. 25； x 2H3X2=1.65,PH3N2>0. 1； X 2B=1. 44, PB>0. Do見表2。表2兩種流感疫苗免 疫后HI抗體陽轉(zhuǎn)率比較2. 2.2兩種流感疫苗免疫后抗體GMT增長倍數(shù)的比較 試驗(yàn)疫苗組 和對(duì)照疫苗組免疫后H1N1亞型的平均增長倍數(shù)分別為12. 3和20. 2o 其中兒童組分別為13. 6和23.3,成人組分別為12. 3和19.8,老年 組分別為9. 7和1&0,對(duì)照疫苗組高于試驗(yàn)疫苗組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué) 意義。試

19、驗(yàn)疫苗組和對(duì)照疫苗組免疫后H3N2亞型的平均增長倍數(shù)分別為 10. 8、16. 0。其中兒童組分別為5. 9、6. 6；成人組分別為17. 4、27. 2, 老年組分別為16.1、32.5,對(duì)照疫苗組高于試驗(yàn)疫苗組，差異有統(tǒng) 計(jì)學(xué)意義。試驗(yàn)疫苗組和對(duì)照疫苛組免疫后B （亞）型的平均增長倍數(shù)分別為 12.1. 9.7,試驗(yàn)疫苗組高于對(duì)照疫苗組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其中成人組分別為13,1. 1LO老年組分別為12.3. 13. 4o兒童組分別 為11.1. 7.2,試驗(yàn)疫苗組高于對(duì)照疫苗組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。見 表3。2. 2.3兩種流感疫苗免疫后血清保護(hù)率的較試驗(yàn)疫苗免疫后各（亞） 型血清保護(hù)率

20、分別為H1N1 99. 26%(400/403KH3N2 97. 27%(392/403).B （亞）型92. 31% （372/403）；對(duì)照疫苗免疫后各（亞）型血清保護(hù)率 分別為 H1 門 96. 62% (200/207)、H3X2 99.03 % (205/207)> B (亞) 型88.41% （183/207）o H1N1試驗(yàn)疫苗組高于對(duì)照疫苗組，差異有統(tǒng) 計(jì)學(xué)意義（x2=438, PV0.05）； H3N2和B （亞）型組間差別無顯著 性(X 2H3N2=1.28> P>0 25； x 2B=2. 54> P>0l)。3討論流感是人類至今尚不能有效控制的世界性傳染病。自1957年以來的 3次流感世界性大流行的新亞型均首發(fā)于中國4,隨著國際的交流 增加，流感病毒傳播的可能性及范圍均擴(kuò)大，因此，流感的預(yù)防隨著 疫苗的開發(fā)和使用逐漸引起人們的關(guān)注。目前國內(nèi)對(duì)流感疫苗的研制 工作方興未艾。裂解型流表3流感疫苗免疫前后抗體GMT增長倍數(shù) 的比較注：*PV005感疫苗可降低全病毒滅活疫苗的接種不良反應(yīng)，并保持相對(duì)較高的 免疫原性，可擴(kuò)大疫苗的使用范圍1。木次對(duì)澳大利亞CSL有限公司和英國GSK公司研制的同類流行性感 冒病毒裂解疫苗觀察表