高壓滅菌鍋的使用方法_第1頁
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高壓滅菌鍋的使用方法_第3頁
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文檔簡介

1、一、高壓滅菌鍋使用前要水加到水位線;二、將需滅菌的培養(yǎng)基、蒸餾水或其它器皿放入滅菌鍋內(nèi),關閉鍋蓋,檢查排氣閥、安全閥 狀態(tài),三、打開電源,檢查參數(shù)設置是否正確, 然后按下“work鍵,滅菌鍋開始工作;自動派冷氣, 到105 C時,底部排氣閥門自動關閉,然后壓力開始上升;四、壓力升至 0.15MPa (121C )時,滅菌鍋再次自動放氣,然后開始記時,一般培養(yǎng)基滅菌20min,蒸餾水滅菌 30min ;五、 達到規(guī)定的滅菌時間后,關閉電源,打開放氣閥緩慢放氣;當壓力指針降至O.OOMPa 時,放氣閥無蒸汽排除時,方可開啟鍋蓋。六、注意事項1、汽未放盡前,不得開啟高壓鍋;2、如果滅菌后的培養(yǎng)基在鍋

2、內(nèi)不及時拿出,需在蒸汽放盡后將鍋蓋打開,切忌將培養(yǎng)基封 閉在鍋內(nèi)過夜。3、壓力表指針在 0.05MPa以上時,不能過快放汽,以防止壓力急速下降,液體滾沸,從 培養(yǎng)容器中溢出。4、操作過程,請注意安全,小心燙傷。高溫滅菌鍋的使用方法1 首先將內(nèi)層滅菌桶取出,再向外層鍋內(nèi)加入適量的水,使水面與三角擱架相平為宜。2 .放回滅菌桶,并裝入待滅菌物品。注意不要裝得太擠,以免防礙蒸汽流通而影響滅菌效 果。三角燒瓶與試管口端均不要與桶壁接觸,以免冷凝水淋濕包口的紙而透入棉塞。3 .加蓋,并將蓋上的排氣軟管插入內(nèi)層滅菌桶的排氣槽內(nèi)。再以兩兩對稱的方式同時旋緊 相對的兩個螺栓,使螺栓松緊一致,勿使漏氣。4 .用

3、電爐或煤氣加熱,并同時打開排氣閥,使水沸騰以排除鍋內(nèi)的冷空氣。待冷空氣完全排盡后,關上排氣閥,讓鍋內(nèi)的溫度隨蒸汽壓力增加而逐漸上升。當鍋內(nèi)壓力升到所需壓力時,控制熱源,維持壓力至所需時間。本實驗用1 . 05kg/cm2 , 121 . 3 C, 20分鐘滅菌。5、滅菌所需時間到后,切斷電源或關閉煤氣,讓滅菌鍋內(nèi)溫度自然下降,當壓力表的壓力降至0時,打開排氣閥,旋松螺栓,打開蓋子,取出滅菌物品。如果壓力未降到0時,打開排氣閥,就會因鍋內(nèi)壓力突然下降,使容器內(nèi)的培養(yǎng)基由于內(nèi)外壓力不平衡而沖出燒瓶口或試管口,造成棉塞沾染培養(yǎng)基而發(fā)生污染。6、將取出的滅菌培養(yǎng)基放入 37C溫箱培養(yǎng)24小時,經(jīng)檢查若

4、無雜菌生長,即 可待用。不過有幾點要注意的:1. 鍋內(nèi)必須要有充足的水。2. 鍋的氣密性一定要很好。3. 使用完后一定要放到適合溫度才可以打開。超凈工作臺原理及使用方法超凈臺的優(yōu)點是操作方便自如,比較舒適,工作效率高,預備時間短,開機10分鐘以上即可操作,基本上可隨時使用。在工廠化生產(chǎn)中,接種工作量很大,需要經(jīng)常長久地工作時, 超凈臺是很理想的設備。超凈臺由三相電機作鼓風動力,功率145260W左右,將空氣通過由特制的微孔泡沫塑料片層疊合組成的超級濾清器”后吹送出來,形成連續(xù)不斷的無塵無菌的超凈空氣層流,即所謂高效的特殊空氣”它除去了大于0.3叩的塵埃、真菌和細菌孢子等等。 超凈空氣的流速為2

5、430m/min,這已足夠防止附近空氣可能襲擾而引起的污染,這樣的流速 也不會妨礙采用酒精燈或本生燈對器械等的灼燒消毒。工作人員就在這樣的無菌條件下操作, 保持無菌材料在轉(zhuǎn)移接種過程中不受污染。但是萬一操作中途遇到停電,暴露在未過濾空氣中 的材料便難以幸免污染。這時應迅速結(jié)束工作,并在瓶上作出記號,內(nèi)中的材料如處于增殖階 段,則以后不再用作增殖而轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)。如為一般性生產(chǎn)材料,因極其豐富也可棄去。如處 于生根過程,則可留待以后種植用。超凈臺電源多采用三相四線制,其中有一零線,連通機器外殼,應接牢在地線上,另外三 線都是相線,工作電壓是 380V。三線接入電路中有一定的順序,如線頭接錯了,風機

6、會反轉(zhuǎn), 這時聲音正常或稍不正常,超凈臺正面無風 (可用酒精燈火焰觀察動靜,不宜久試 ),應及時切 斷電源,只要將其中任何兩相的線頭交換一下位置再接上,就可解決。三相線如只接入兩相, 或三相中有一相接觸不良,則機器聲音很不正常,應立即切斷電源仔細檢修,否則會燒毀電機。 這些常識應在開始使用超凈臺時就向工作人員講解清楚,免除不應造成的事故與損失。超凈臺進風口在背面或正面的下方,金屬網(wǎng)罩內(nèi)有一普通泡沫塑料片或無紡布,用以阻攔大顆粒塵埃,應常檢查、拆洗,如發(fā)現(xiàn)泡沫塑料老化,要及時更換。除進風口以外,如有漏氣 孔隙,應當堵嚴,如貼膠布,塞棉花,貼膠水紙等。工作臺正面的金屬網(wǎng)罩內(nèi)是超級濾清器, 超級濾清

7、器也可更換,如因使用年久,塵粒堵塞,風速減小,不能保證無菌操作時,則可換上 新的。超凈臺使用壽命的長短與空氣的潔凈程度有關。在溫帶地區(qū)超凈臺可在一般實驗室使用,然而 在熱帶或亞熱帶地區(qū),由于大氣中含有高量的花粉,或多粉塵的地區(qū),超凈臺則宜放在較好的 有雙道門的室內(nèi)使用。任何情況下不應將超凈臺的進風罩對著開敞的門或窗,以免影響濾清器 的使用壽命。無菌室應定期用70%酒精或0.5%苯酚噴霧降塵和消毒,用 2%新潔爾滅抹拭臺面和用具 (70%酒精也可),用福爾馬林(40%甲醛)加少量高錳酸鉀定期密閉熏蒸,配合紫外線滅菌燈(每次開啟15分鐘以上)等等消毒滅菌手段,以使無菌室經(jīng)常保持高度的無菌狀態(tài)。接種

8、箱內(nèi)部也 應裝有紫外線燈,使用前開燈 15分鐘以上照射滅菌,但凡是照射不到之處仍是有菌的。在紫 外線燈開啟時間較長時,可激發(fā)空氣中的氧分子締合成臭氧分子,這種氣體成分有很強的殺菌 作用,可以對紫外線沒有直接照到的角落產(chǎn)生滅菌效果。由于臭氧有礙健康,在進入操作之前 應先關掉紫外線燈,關后十多分鐘即可入內(nèi)。在超凈工作臺上亦可吊裝紫外線燈,但應裝在照明燈罩之外,并錯開照明燈平行排列, 這樣在工作時不妨礙照明。若將紫外線燈裝入照明燈罩(玻璃板)里面,這是毫無用處的,因為紫外線不能穿透玻璃,它的燈管是石英玻璃,而不是硅酸鹽玻璃制成的。接種室內(nèi)力求簡潔,凡與本室工作無直接關系的物品一律不能放入,以利保持無菌狀態(tài)。 接種室內(nèi)的空氣與外界空氣應絕對隔絕,預留的通氣孔道應盡量密閉。通氣孔道可設上下氣窗, 氣窗面積宜稍大,需覆上 4層紗布作簡單濾塵。在一天工作之后,可開窗充分換氣

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