參芍膠囊對動脈粥樣硬化大鼠心肌功能的影響(一)

1、參芍膠囊對動脈粥樣硬化大鼠心肌功能的影響(一)    【摘要】 目的 觀察參芍膠囊能否影響高脂血癥大鼠心肌組織中一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、超氧化物歧化酶（SOD）及丙二醛（MDA）的水平。方法 將50只大鼠隨機分成對照組、模型組、治療組（低、中、高劑量），模型組給予高脂飲食，對照組給予普通飲食，治療組給予高脂飲食的同時給予參芍膠囊治療（低、中、高三個治療劑量）；42天后分別測定各組大鼠心肌組織中NO、 NOS、 SOD、MDA的含量、治療組與模型組比較，觀察各項指標有無統(tǒng)計學意義。結果 （1）與對照組相比：動脈粥樣硬化組大鼠心肌組織中NO

2、、 NOS水平降低，同時SOD水平降低，而MDA水平升高，差異有顯著性（P0.05）。（2）治療組與模型組相比較：給予參芍膠囊治療后心肌組織中NO、NOS及SOD水平均升高，而MDA水平降低，其中中劑量組與模型組相比差異有顯著性（P0.05），低劑量和高劑量組與模型組相比無統(tǒng)計學意義。結論 參芍膠囊可以通過影響大鼠心肌組織中NO、NOS、SOD及MDA水平，從而改善血管內皮細胞功能，治療冠狀動脈粥樣硬化性心臟病。 【關鍵詞】 參芍膠囊；心肌；一氧化氮（NO）；一氧化氮合酶（NOS）；超氧化物歧化酶（SOD）；丙二醛（MDA）Effects of shenshao capsules on the

3、 function of myocardium in rats with atherosclerosisLI Ya-qin,LIU Wen-min,HAN Xuan.Health College of Hebei University.Hebei 071000，China【Abstract】 Objective To investigate the effects of shenshao capsules on the levels of nitric oxide（ NO）, nitric oxide synthase （NOS）, superoxide dismutase （SOD） and

4、 malondialdehyde （MDA）in myocardium of rat with atherosclerosis.Methods 50 SD rats were randomly divided into model group,control group ,low dose, middle dose and hige dose treatment groups. Model group rats were given high-fat diet，the control group were given normal diet ,and the treatment groups

5、were given low -, middle- and hige- dose shenshao capsules, respectively. 42 days later , the levels of NO、NOS、SOD and MDA in rats myocardium were detected and analyzed.Results （1） Compared with the control group, the levels of NO,NOS and SOD in myocardium of rats with atherosclerosis decreased clea

6、rly （P0.05）, while the level of MDA increased clearly（P0.05）.（2） Compared with the model group ,shenshao capsules treatment could improve the levels of NO,NOS and SOD and decrease the MDA level in rats myocardium. There was significant difference between the middle-dose treatment group and model gro

7、up（P0.05）.Conclusion Shenshao casulps can decrease the level of MDA and increase the levels of NO,NOS and SOD in rats myocardium, and improve the function of the vascular endothelial cells,which may be a bases of the benificial effect of shenshao capsules in the treatment of atherosclerosis.【Key wor

8、ds】 Shenshao capsule; myocardium ;NO;NOS; SOD;MDA現(xiàn)代醫(yī)學已經(jīng)證實血管內皮細胞功能障礙是冠狀動脈粥樣硬化的一個主要原因，而超氧化物歧化酶（SOD）可以通過延緩細胞衰老,清除氧自由基,阻止自由基連鎖反應以及抑制炎性反應而維持內皮細胞功能1，丙二醛（MDA）是組織細胞損傷的產(chǎn)物，冠狀動脈粥樣硬化性心臟病由于長時間的血管病變導致心肌缺血，長時間的心肌缺血導致心肌功能障礙，心肌組織產(chǎn)生的一氧化氮（NO）及一氧化氮合酶（NOS）減少，進一步加重了心肌損害，促進心肌功能減低。本試驗通過給予動脈粥樣硬化大鼠參芍膠囊治療后檢測心肌組織中NO、NOS、SOD 及M

9、DA水平的變化，從而驗證參芍膠囊是否通過影響心肌組織中NO、NOS、SOD 及MDA而改善血管動脈粥樣硬化。1 材料與方法1.1 實驗動物 Wistar 大鼠50只，雌雄各半，體重（250±10）g，由河北醫(yī)科大學實驗動物中心提供，合格證編號805108。1.2 實驗藥品 膽固醇（分析純）購于上海新興化學試劑公司，膽酸鈉購于德國Serva公司，丙基硫氧嘧啶為上海復興制藥廠有限公司原料藥（質量標準符合C.P>2000版藥典），維生素D注射液購于上海第九制藥廠。參芍膠囊購于河北長天藥業(yè)有限公司，合格證號：Z10960062。NO、 NOS、SOD 及MDA試劑盒均購自南京建成生物制

10、品有限公司。1.3 實驗儀器 （1）雙功能水浴恒溫振蕩器，型號：SHA-BA，產(chǎn)地：金壇市杰瑞爾電器有限公司。（2）漩渦混勻器，型號：IKA-MSZ，產(chǎn)地： IKA Works Guangzhou。（3）低速臺式離心機，型號：TDL-5-A，產(chǎn)地：上海安亭科學儀器廠。（4）501-A型超級恒溫器， 產(chǎn)地：上海實驗儀器廠有限公司。（5）Stat-Fax-2100酶標儀，產(chǎn)地：Awareness technologying。（6）高速冷凍離心機，型號：GL-16G-型，產(chǎn)地：上海安亭科學儀器廠。1.4 動物模型的制備 正常飼料喂養(yǎng)1周后，隨機分成對照組及模型組和治療組，對照組給予普通飼料，模型組給

11、予高脂飼料，即3%膽固醇、0.5%膽酸鈉、0.2%丙基硫氧嘧啶、5%白糖、10%豬油、81.3%基礎飼料，同時在喂食開始時一次性腹腔注射維生素D 60萬IU/kg；對照組給予同等體積的生理鹽水1。治療組在給予高脂飼料的同時給予參芍膠囊灌胃，其中高、中、低劑量組分別按125mg/kg、250m g/kg、500mg/kg的劑量。6周后處死大鼠，分別取其心肌組織，將心肌組織勻漿后進行檢測。1.5 實驗方法 將實驗動物隨機分成5組，對照組、模型組與治療組（低、中、高三個劑量治療組），各組動物均為雌雄各半。首先自由飲食1周，然后對照組給予普通飲食，模型組給予高脂飲食，治療組除給予高脂飲食外，治療組在給

12、予高脂飼料的同時給予參芍膠囊灌胃，其中高、中、低劑量組分別按125mg/（kg·d）、250mg/（kg·d）、500mg/（kg·d）的劑量。6周后處死大鼠，分別取其心肌組織，將心肌組織勻漿后進行NO、NOS、SOD及MDA水平的檢測。16 檢測指標及方法 分別檢測對照組、模型組與治療組中心肌組織中NO、NOS、SOD及MDA的水平，試劑盒均購自南京建成生物制品有限公司，具體操作步驟見試劑盒說明書。1.7 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)以均數(shù)±標準差（x±s）表示，采用F檢驗、q檢驗、t檢驗，檢驗水準=0.05。 結果見表1、表2。表1 各組心肌組織中NO

13、、TNOS水平的比較 注：（1）NO水平的統(tǒng)計學分析表明：模型組 vs對照組，P0.05，模型組vs低劑量組，P>0.05, 模型組vs中劑量，P0.05，模型組vs高劑量，P>0.05。（2）TNOS水平的統(tǒng)計學分析表明：模型組 vs對照組，P0.05，模型組vs低劑量組，P>0.05, 模型組vs中劑量，P0.05，模型組vs高劑量，P>0.05 表2 實驗組與對照組中大鼠心肌組織中SOD 、 MDA水平的比較3 討論本試驗結果表明，對冠狀動脈粥樣硬化造成的心肌功能的影響，本實驗體現(xiàn)為心肌組織產(chǎn)生的NO水平及NOS活性的降低，同時有SOD水平的降低和MDA水平的升高

14、，治療組分別給予參芍膠囊低、中、高劑量治療，6周后分別觀察心肌組織中各指標變化情況。通過統(tǒng)計學分析得出如下結論：與模型組相比：三種劑量組對心肌功能均有改善作用，但低劑量組和高劑量組對于心肌功能的影響差異無顯著性（P>0.05），只有中劑量組有明顯的改善心肌功能的作用，差異有顯著性（P0.05）。通過上述試驗結果可以看出，參芍膠囊可以通過影響NO、NOS、SOD及MDA的水平而改善冠狀動脈粥樣硬化性心臟病大鼠心肌功能的作用，驗證了參芍膠囊治療冠心病心肌缺血的機制。目前,大量的流行病學、基礎及臨床研究已經(jīng)公認,高脂血癥及其隨后形成的動脈粥樣硬化是導致缺血性心臟疾病最重要的危險因素2。長時間的

15、心肌缺血會導致心肌細胞功能障礙，進一步影響心臟舒張及收縮功能，導致冠狀血管損傷，血管內皮功能細胞障礙（endothelialdysfunction,ED）,最后導致缺血性心肌病 ，而內皮功能障礙又與動脈粥樣硬化的形成、發(fā)展密切相關，是一個惡性循環(huán)過程。參芍膠囊是根據(jù)中醫(yī)氣血相關理論組方制成治療冠心病心絞痛的高效新型中成藥,主要由其有效成分主要是人參莖葉皂苷及有活血化瘀滋陰止痛、降血脂的白芍。參芍膠囊以人參為君藥,用于補氣,以白芍為臣藥,行瘀止痛,養(yǎng)血和陰,兩藥合用,共奏活血化瘀,益氣止痛之功效。內皮功能障礙是指血管內皮細胞對非適應性功能狀態(tài)所作的有限調整,通常是內皮細胞功能特性改變或功能的部分

16、缺失。內皮細胞具有多方面的生理功能,主要為調節(jié)血管張力，維持凝血和纖溶系統(tǒng)之間的平衡，抑制血小板的聚集和活性等。它通過分泌具有擴血管作用的內皮源性舒張因子（EDRF,即NO）來調節(jié)血管張力,因此通常使用內皮依賴性的血管舒張功能來反映內皮功能3。內皮細胞功能障礙時其釋放到心肌組織中的NO、NOS均減少。本實驗以NO及一氧化氮合酶（NOS）作為監(jiān)測指標，可以較好地反映內皮細胞功能，NOS是NO合成過程中的關鍵酶，故可以從機制上探討心肌功能受損及改善的原因。MDA為脂質過氧化代謝產(chǎn)物，含量增高時，說明有明顯的組織或細胞損傷；SOD是組織自身產(chǎn)生的抗氧化酶，對組織或細胞具有保護作用，含量增高時說明組織或細胞抗氧化損傷的能力增強4，本實驗中，冠狀動脈粥樣硬化大鼠心肌組織中SOD水平降低，而MDA水平升高；給予參芍膠囊治療后，可見有明顯的MDA降低及SOD的升高，說明參芍膠囊有增強心肌抗氧化及抗損傷的功能。本實驗研究表明了參芍膠囊可以改善心肌細胞功能。其機制可能與下列方面有關：參芍膠囊是由人參莖葉皂苷、白芍組