動(dòng)物細(xì)胞工程 名詞解釋綜合_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、整理者| CoCo | zhangcwj細(xì)胞工程(Cell engineering):是指應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的原理和方法,通過某種工程學(xué)手段,在細(xì)胞整體水平或細(xì)胞器水平上,按照人們的意愿來改變細(xì)胞內(nèi)的遺傳物質(zhì)或獲得細(xì)胞產(chǎn)品的一門綜合科學(xué)技術(shù)。轉(zhuǎn)基因動(dòng)物(Transgenic Animals):一種生物(通常是老鼠),將外來基因轉(zhuǎn)入其體內(nèi)成為其基因組的一部分。引入的基因先被分離出來并設(shè)計(jì)使其攜帶適當(dāng)片段。然后將這段基因注入受精卵試管嬰兒:采用人工方法讓卵細(xì)胞和精子在體外受精,并進(jìn)行早期胚胎發(fā)育,然后移植到母體子宮內(nèi)發(fā)育而誕生的嬰兒。性別控制(sex control):通過對(duì)動(dòng)物的正常生殖

2、過程進(jìn)行人為干預(yù),使成年雌性動(dòng)物產(chǎn)出人們期望性別后代人工器官:暫時(shí)或永久性地代替身體某些器官主要功能的人工裝置。動(dòng)物克?。簞?dòng)物克隆是一種通過核移植過程進(jìn)行無性繁殖的技術(shù)。發(fā)育早期的動(dòng)物胚胎細(xì)胞,或成年動(dòng)物的體細(xì)胞,經(jīng)顯微手術(shù)移植到去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中之后,在適當(dāng)?shù)臈l件下,可以重新發(fā)育成正常胚胎。光學(xué)顯微鏡:光學(xué)顯微鏡是利用光學(xué)原理,把人眼所不能分辨的微小物體放大成像,以供人們提取微細(xì)結(jié)構(gòu)信息的光學(xué)儀器顯微結(jié)構(gòu):在普通光學(xué)顯微鏡中能夠觀察到的細(xì)胞結(jié)構(gòu)。組織工程(tissue engineering):組織工程師應(yīng)用工程學(xué)和生命科學(xué)的原理來研究開發(fā)生物代替物,用于恢復(fù),維持或者改進(jìn)組織的生物學(xué)功

3、能。細(xì)胞學(xué)說(cell theory):1>所有生物都是由一個(gè)或多個(gè)細(xì)胞組成的(1838,Scheiden&Sehwann);2>細(xì)胞是生物形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位(1838,Scheiden&Sehwann);3>一切細(xì)胞只能來自原來的細(xì)胞,機(jī)體一切病理基于細(xì)胞的損傷(1885,Rudolf Virchow).分辨率(R-resolving power):(1)指能將非常靠近的兩個(gè)點(diǎn)(物像)清楚辨析的能力(微生物的解釋)(2)顯微鏡或人眼在25cm明視距離處,能清楚分辨被檢物細(xì)微結(jié)構(gòu)的最小間隔能力 人眼 R=100um 光學(xué)顯微鏡 R=0.2um (動(dòng)物細(xì)胞

4、工程資料上的解釋)光衍射效應(yīng)(diffraction effects): 光線并不是完全直線前進(jìn),光波沿各種有細(xì)微不同的路線通過一個(gè)光學(xué)系統(tǒng),以致相互干涉產(chǎn)生衍射紅外線(infraved ray):分辨極限(limit resolution):蘇木精(hematoxylin):對(duì)負(fù)電荷分子有親和性,常用于核酸的染色,能將細(xì)胞核染色伊紅(eosin):酸性染料,可以對(duì)細(xì)胞質(zhì)染色蘇丹染料(suclan dye):乙醇飽和液,可以將脂肪染成橘黃色或紅色,染色機(jī)制尚不清楚活性基因(cytochemistry):孚爾根反應(yīng)(Feulgen):熒光顯微技術(shù)(Fluorescence Microscope)

5、:相差顯微技術(shù)(Phase contrast microscope):顯微電影技術(shù)(Vedio-recording):電子顯微技術(shù)(Electron microscopy):掃描電子顯微鏡(Scanning election microscope):綠色熒光蛋白(GFP Fluorescent protein):干細(xì)胞(stem cell):遺傳診斷(genetic analysis):胚胎性生殖細(xì)胞():胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cell):肝臟干細(xì)胞(Fetal liver stem cells):星狀細(xì)胞(astrocyte monolayer):一種神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,可誘發(fā)

6、分化為多錢能的神經(jīng)樣干細(xì)胞少突細(xì)胞(Oligodendrocyte precursor cells OPC):一種神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,它負(fù)責(zé)制造包囊神經(jīng)細(xì)胞的髓鞘上皮干細(xì)胞(Epithelial stem cell):堿性磷酸酶(Akp):SSEA:胚胎干細(xì)胞的標(biāo)志物SSEAs 最初是用來鑒定識(shí)別糖脂表位的三個(gè)單抗。SSEA-1表達(dá)在前移植期的鼠胚表面(如八細(xì)胞期)并且也發(fā)現(xiàn)存在于畸胎瘤干細(xì)胞表面,但不存在分化的衍生細(xì)胞中。輸卵管上皮、子宮內(nèi)膜、附睪, 成年鼠腦和腎小管區(qū)域也發(fā)現(xiàn)和SSEA-1抗體反應(yīng)。SSEA-3和4在卵子發(fā)生時(shí)合成,在卵母細(xì)胞、受精卵和早期卵裂球細(xì)胞膜上存在。這些與糖鏈相關(guān)的分子

7、的生物學(xué)功能被認(rèn)為是調(diào)控發(fā)育期的細(xì)胞膜間的相互作用。未分化的靈長(zhǎng)類ES細(xì)胞,人的EC和ES細(xì)胞表達(dá)SSEA-3和SSEA-4,但不表達(dá)SSEA-1。未分化的小鼠ES細(xì)胞表達(dá)SSEA-1,但不表達(dá)SSEA-3或SSEA-4.ICM: 胚胎干細(xì)胞(embryonic  stem  cell,ESC)是指從早期胚胎的囊胚內(nèi)細(xì)胞團(tuán)(inner  cell  mass,ICM)分離出來的具有自我更新和多向分化潛能的細(xì)胞快綠染色法:飼養(yǎng)層(feeder layer):條件培養(yǎng)基(conditioned medium,

8、CM):分化抑制因子(differentiation inhibition activity):神經(jīng)干細(xì)胞(Neutral stem cell):神經(jīng)干細(xì)胞(neural stem cell,NSCs)是一類具有分裂潛能和自我更新能力的母細(xì)胞,它可以通過不對(duì)等的分裂方式產(chǎn)生神經(jīng)組織的各類細(xì)胞。需要強(qiáng)調(diào)的是,在腦脊髓等所有神經(jīng)組織中,不同的神經(jīng)干細(xì)胞類型產(chǎn)生的子代細(xì)胞種類不同,分布也不同。胚胎干細(xì)胞(Embryonic stem cell):一由早期胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)或原始生殖細(xì)胞經(jīng)體外分化抑制培養(yǎng),在傳代過程中篩選的具全能型的干細(xì)胞臍帶血肝細(xì)胞(Umbilical cord blood stem c

9、ells):臍帶血的采集是在新生兒出生以后,取嬰兒端3-8cm臍帶儲(chǔ)兩把止血鉗結(jié)扎、斷臍,嬰兒被抱走處理,貼近母端止血鉗處消毒并將針頭插入臍靜脈,采集臍血。臍血采集不同于傳統(tǒng)的骨髓采集,不需要進(jìn)行麻醉,無痛、無副作用,胎盤和臍帶原本在胎兒出生后,就是作為廢物扔掉的,臍血采集是在胎盤、臍帶與母體和胎兒完全分離以后進(jìn)行的,因此對(duì)母親和孩子沒有任何不良影響,屬于“廢物利用,變廢為寶”。臍帶血里頭含有大量的干細(xì)胞;而干細(xì)胞其實(shí)是人體的主要細(xì)胞,人的身體可以說是由干細(xì)胞所組成。外周血干細(xì)胞(peripheral blood stem cells):外周血是除骨髓之外的血液,臨床上常用一些方法把骨髓中的造

10、血干細(xì)胞釋放到血液中,再在從血液中提取分離得到造血干細(xì)胞,我們把這樣得到的干細(xì)胞成為外周血干細(xì)胞造血干細(xì)胞(haematopoietic stem cell HSC):造血干細(xì)胞(hemopoieticstemcellHSC)是存在于造血組織中的一群原始造血細(xì)胞,它不是組織固定細(xì)胞,可存在于造血組織及血液中單核細(xì)胞(monocytes):?jiǎn)魏思?xì)胞是體積最大的白細(xì)胞。其細(xì)胞核常偏位,呈多形性,如卵圓形、腎形(a)、馬蹄形(b)、不規(guī)則形(c)等,常有折疊感(c);染色質(zhì)呈疏松網(wǎng)狀,著色較淺。胞質(zhì)較多,嗜堿性,但因含大量細(xì)小的嗜天青顆粒而染成灰藍(lán)色,顆粒含過氧化物酶。血涂片,Giemsa染色嗜中性

11、粒細(xì)胞(neutrophil):嗜中性粒細(xì)胞描述:最多,圓形,胞質(zhì)淡紅色。胞核幼稚型的呈桿狀或馬蹄形,成熟的呈分葉狀,三葉的較多見。中性粒細(xì)胞來源于骨髓的造血干細(xì)胞,在骨髓中分化發(fā)育后,進(jìn)入血液或組織嗜曙紅粒細(xì)胞():肥大細(xì)胞(mast cells):嗜堿性細(xì)胞在結(jié)締組織和粘膜上皮內(nèi)時(shí),稱肥大細(xì)胞,其結(jié)構(gòu)和功能與嗜堿性細(xì)胞相似。細(xì)胞呈圓形或卵圓形,細(xì)胞核小,呈圓形或橢圓形,染色淺,位于細(xì)胞中央。細(xì)胞常成堆或單個(gè)分布于血管附近。細(xì)胞呈圓形或卵圓形,細(xì)胞質(zhì)中充滿大小一致、染成藍(lán)紫色的顆粒,均勻分布在核周圍。紅細(xì)胞(Erythrocytes):在所有的脊椎動(dòng)物及若干無脊椎動(dòng)物,其血紅素(無脊椎動(dòng)物也

12、有時(shí)是蚯蚓紅血朊)包含在特定的細(xì)胞中來進(jìn)行其機(jī)能活動(dòng),這種血球稱為紅細(xì)胞。多,小而圓,中央著色較淺,無核。紅細(xì)胞中含有血紅蛋白,因而使血液呈紅色巨核細(xì)胞(megacaryocyte):巨核細(xì)胞是骨髓中的一種從造血干細(xì)胞分化而來的細(xì)胞,核很大,但數(shù)量非常少,研究起來非常困難。系正常骨髓中的一種能生成血小板的成熟細(xì)胞,前身為顆粒巨核細(xì)胞。該細(xì)胞體積巨大,成熟的巨核細(xì)胞邊緣部分破裂脫落后形成血小板。每個(gè)巨核細(xì)胞平均能生成2000個(gè)左右的血小板。血小板(blood platelet):是哺乳動(dòng)物血液中的有形成分之一。形狀不規(guī)則,比紅細(xì)胞和白細(xì)胞小得多,無細(xì)胞核,成年人血液中血小板數(shù)量為100300&#

13、215;1000000000個(gè)/L,它有質(zhì)膜,沒有細(xì)胞核結(jié)構(gòu),一般呈圓形,體積小于紅細(xì)胞和白細(xì)胞。血小板在長(zhǎng)期內(nèi)被看作是血液中的無功能的細(xì)胞碎片。直到1882年意大利醫(yī)師JB比佐澤羅發(fā)現(xiàn)它們?cè)谘軗p傷后的止血過程中起著重要作用,才首次提出血小板的命名。細(xì)胞系(cell line):原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功即稱為細(xì)胞系(Cell Line),因此細(xì)胞系可泛指一般可能傳代的細(xì)胞。其中能夠連續(xù)傳代的細(xì)胞叫做連續(xù)細(xì)胞系或無限細(xì)胞系,不能連續(xù)培養(yǎng)的稱為有限細(xì)胞系。大多數(shù)二倍體細(xì)胞為有限細(xì)胞系淋巴前體(common lymphoid progenitor CLP):骨髓前體(common myeloid

14、progenitor CMP):長(zhǎng)期體內(nèi)造血能力(long-term repopulation):腫瘤干細(xì)胞(cancer stem cell):a cell within a tumor that possess the capacity to self-renew and to cause the heterogeneous linkages of cancer cells that comprise the tumor是腫瘤內(nèi)具有自我更新能力,能產(chǎn)生表形多樣的腫瘤細(xì)胞群體,并驅(qū)動(dòng)腫瘤發(fā)生的一類干細(xì)胞Normal stem cells: Rare cells within organs w

15、ith the ability to self-renews and give rise to all types of cells within the organ to drive organogenesisCancer stem cells :Rare cells within tumors with the ability to self-renews and give rise to the phenotypically diverse tumor cell population to drive tumorigenesis流式細(xì)胞分離(flow cytomertry,F(xiàn)CM):是利

16、用流式細(xì)胞儀進(jìn)行的一種單細(xì)胞定量分析和分選技術(shù)。流式細(xì)胞術(shù)是單克隆抗體及免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)、激光和電子計(jì)算機(jī)科學(xué)等高度發(fā)展及綜合利用的高技術(shù)產(chǎn)物??贵w選擇(antibody selection):差異附著(differential adhesion):平衡鹽溶液(balanced salting solution):平衡鹽溶液主要是由無機(jī)鹽、葡萄糖組成,它的作用是維持細(xì)胞滲透壓平衡,保持pH穩(wěn)定及提供簡(jiǎn)單的營(yíng)養(yǎng)。主要用于取材時(shí)組織塊的漂洗、細(xì)胞的漂洗、配制其他試劑等。最簡(jiǎn)單的BSS是RingerCLSM confocal laser scanning microscope:用途:客隊(duì)細(xì)胞進(jìn)行三維

17、結(jié)構(gòu)圖像分析;細(xì)胞內(nèi)各種熒光標(biāo)記物的微量分析;細(xì)胞內(nèi)Ca2+,pH值等的動(dòng)態(tài)分析測(cè)定;細(xì)胞的受體移動(dòng);膜電位變化,酶活性和物質(zhì)轉(zhuǎn)運(yùn)的測(cè)定;以激光對(duì)細(xì)胞,染色體進(jìn)行切割,分離,篩選和克?。换虮磉_(dá)分析;對(duì)此包的多功能進(jìn)行全自動(dòng),高效,快速的微量定性和定量測(cè)定。特征:圖象清晰clear graphs;二維和三維圖像分析處理2-D with 3-D analysis;借助其他技術(shù)構(gòu)成多功能卻自動(dòng),高效,快速的微量定性和定量測(cè)定 automatic, high efficiency ,fast, trace and quantitative analysisTelomeres: keep chromo

18、some ends from accidentally becoming attached to each otherTelemeres lose: about 100 base pairs from their telomeric DNA at each mitosis全能干細(xì)胞(Totipotent stem cells):具有形成完整個(gè)體的分化潛能,如ES多能干細(xì)胞(Pluripotent stem cells):具有分化出多種組織細(xì)胞的潛能,但不能形成個(gè)體,如骨髓多能造血干細(xì)胞,只可分化成12多種血細(xì)胞單能干細(xì)胞(Unipotent stem cells):專能干細(xì)胞,只能向一種或密切

19、相關(guān)的兩種類型的細(xì)胞分化,如上皮組織基底層的干細(xì)胞,肌肉中的成肌細(xì)胞或叫衛(wèi)星細(xì)胞。核型分析(Karyotype analysis):染色體核型分析是分析生物體細(xì)胞內(nèi)染色體的長(zhǎng)度、著絲點(diǎn)位置、臂比、隨體大小等特征,其分析以體細(xì)胞分裂中期染色體為研究對(duì)象。胚胎干細(xì)胞標(biāo)志物(Markers of the ES cells):SSEAS-4 ;TRA-1-60(一類糖蛋白抗原);表達(dá)轉(zhuǎn)錄因子Oct4,同源異型盒基因家族成員之一(作用:抑制分化,在未分化肝細(xì)胞表達(dá)Oct4,對(duì)靶基因的作用使ES細(xì)胞保持未分化的增值狀態(tài))小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF):分化抑制因子(differentiation inhib

20、itory activity,DIA)白血病抑制因子(LIF):誘導(dǎo)干細(xì)胞(induced pluripotent stem cells iPS):“萬能細(xì)胞”,使干細(xì)胞無需克隆。將皮膚細(xì)胞轉(zhuǎn)化為誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞的過程需要使用病毒,即用病毒作為載體將基因物質(zhì)注入皮膚細(xì)胞中,促使其轉(zhuǎn)化。這一方法具有引發(fā)癌癥的風(fēng)險(xiǎn)。研究人員利用一種基因“轉(zhuǎn)位子”來替代病毒作為運(yùn)輸所需基因的載體。用這種方法得到的誘導(dǎo)多功能干細(xì)胞,同樣具有和其他干細(xì)胞類似的特性,但卻使臨床應(yīng)用的風(fēng)險(xiǎn)大大減小。支架(seafold)組織工程支架是細(xì)胞附著的基本框架和代謝場(chǎng)所,作為組織工程的平臺(tái),不僅提供了細(xì)胞生長(zhǎng)的框架,使之形成特定的

21、組織或器官形狀,而且作為細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)成分之一,是細(xì)胞間的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和相互作用的媒介,同時(shí)也是細(xì)胞生長(zhǎng)所必須的生物活性劑,其形態(tài)和功能直接影響所構(gòu)成的組織形態(tài)和功能。細(xì)胞外基質(zhì)(extracellular matrix)hydrated gel-like ground substance with fibers embedded in it。生物相容性:生物醫(yī)用材料與人體之間相互作用產(chǎn)生各種復(fù)雜的生物,物理,化學(xué)反應(yīng)的一種概念。細(xì)胞微環(huán)境(microenvironment)組織細(xì)胞生長(zhǎng)的最佳環(huán)境,給細(xì)胞提供一個(gè)能夠生長(zhǎng),增值,分化的良好環(huán)境。球蛋白家族(globin)主要作用是表達(dá)細(xì)胞的免

22、疫和炎性應(yīng)答,識(shí)別抗原和負(fù)責(zé)細(xì)胞間傳遞整合素家族(intergrin)主要作用是對(duì)細(xì)胞之間及細(xì)胞與保外基質(zhì)進(jìn)行連接。整合素大多為特異性細(xì)胞粘附分子,其作用依賴于Ca2+。介導(dǎo)細(xì)胞與細(xì)胞間的相互作用及細(xì)胞與細(xì)胞外基質(zhì)的相互作用。選擇蛋白(selectins)膜整合糖蛋白的一個(gè)家族,它能夠識(shí)別從另外一個(gè)細(xì)胞表面伸展出來的特異的糖基團(tuán),并與之特異性結(jié)合,因此它也是細(xì)胞表面受體。作用是使淋巴,血小板,和白細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞之間相互作用,負(fù)責(zé)血細(xì)胞與內(nèi)皮細(xì)胞的鏈接。生長(zhǎng)因子(growth factor)能誘導(dǎo)或直接作用于基因表達(dá),因而作用于細(xì)胞的增殖和分化的因子。哺乳動(dòng)物細(xì)胞基因表達(dá)系統(tǒng):(gene exp

23、ression systems in mammalian cells)利用基因和細(xì)胞工程技術(shù)高水平表達(dá)外源蛋白質(zhì),具有重要理論和實(shí)踐意義。病毒載體(viral vector)是一種常使用于分子生物學(xué)的工具,可將遺傳物質(zhì)帶入細(xì)胞,原理是利用病毒具有傳送其基因組進(jìn)入其他細(xì)胞,進(jìn)行感染的分子機(jī)制。可發(fā)生于完整活體(in vivo)或是細(xì)胞培養(yǎng)(in vitro)中。可應(yīng)用于基礎(chǔ)研究、基因療法或疫苗。可供利用的病毒可分為逆轉(zhuǎn)錄病毒、慢病毒與腺病毒。質(zhì)粒載體(plasmit vector)常常是穿梭質(zhì)粒(shuttle vector)即在細(xì)菌和哺乳動(dòng)物細(xì)胞兩者體內(nèi)都能擴(kuò)增的質(zhì)粒。電泳沖介導(dǎo)技術(shù)(Elec

24、tric pulse)在盛有細(xì)胞和線性DNA的電擊小室中,給予高壓電泳沖,細(xì)胞便可通透DNA,并攝取外源DNA磷酸鈣DNA共沉淀法: 核酸以磷酸鈣-DNA共沉淀物的形式出現(xiàn)時(shí),可使DNA附在細(xì)胞表面,利于細(xì)胞吞入攝取,或通過細(xì)胞膜脂相收縮時(shí)裂開的空隙進(jìn)入細(xì)胞內(nèi),進(jìn)入細(xì)胞的DNA僅有1%5%可以進(jìn)入細(xì)胞核中,其中僅有不到1%的DNA可以與細(xì)胞DNA整合,在細(xì)胞中進(jìn)行穩(wěn)定表達(dá),基因轉(zhuǎn)導(dǎo)的頻率大約為10-4,這項(xiàng)技術(shù)能用于任何DNA導(dǎo)入哺乳類動(dòng)物進(jìn)行暫時(shí)性表達(dá)或長(zhǎng)期轉(zhuǎn)化的研究。此方法對(duì)于貼壁細(xì)胞轉(zhuǎn)染是最常用并首選的方法。逆轉(zhuǎn)錄病毒介導(dǎo)技術(shù)脂質(zhì)體介導(dǎo)轉(zhuǎn)染細(xì)胞器操作線粒體遺傳體細(xì)胞融合也稱體細(xì)胞雜交(c

25、ell hybridization)指在實(shí)驗(yàn)條件下把兩種不同的體細(xì)胞融合在一起,使其融合成一個(gè)雜合的細(xì)胞。融合后的細(xì)胞稱為雜種細(xì)胞。(cell hybrid)異核細(xì)胞:也稱雜合細(xì)胞(heterokaryon)當(dāng)兩種動(dòng)物細(xì)胞如人與小鼠的細(xì)胞融合為一個(gè)細(xì)胞以后它就包含了兩種不同的核,這種細(xì)胞稱為異核細(xì)胞。合子核細(xì)胞(synkaryon)或者雜種細(xì)胞(hybrid cell):異核體通過有絲分裂形成的子細(xì)胞中,每一個(gè)核內(nèi)都包含了雙方的染色體,(注意:僅存在一個(gè)核)染色體丟失現(xiàn)象:當(dāng)兩種動(dòng)物細(xì)胞,如人和小鼠的細(xì)胞融合為一個(gè)雜種細(xì)胞以后,最初幾代培養(yǎng),含有兩種親代的全部染色體。但是在隨后的增殖傳代過程中

26、,人類的染色體會(huì)逐漸丟失,最后甚至可能只剩下少數(shù)幾條或1條人類染色體的雜交細(xì)胞。丟失具隨機(jī)性23.染色體分離種間雜種細(xì)胞所顯示的優(yōu)先排除一物質(zhì)種染色體和保留另一種染色體的現(xiàn)象24.逆向分離25細(xì)胞電融和技術(shù)十章試管動(dòng)物test-tube baby其核心是IVF-ET體外受精加上胚胎移植IVF體外受精也稱試管內(nèi)受精in vitro fertilizationET embyro transfer胚胎移植獲能capacitation精子和卵子結(jié)合之前精子必須過得受精的能力血清白蛋白BSA可改變精子膜的通透性,促進(jìn)獲能顯微受精技術(shù)Micro-fetilization 借助顯微操作儀將精子這接注入卵子的過程,也即是人工輔助受精技術(shù)卵母細(xì)胞質(zhì)內(nèi)精子注射intracytoplasmic sperm injection ICSI卵周隙精子入射sub-zonal injection SUZI嵌合體動(dòng)物chimera將不同來源的不同品系的胚胎細(xì)胞放在一起發(fā)育形成雜合胚胎,進(jìn)而發(fā)育成新

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