豬血免疫球蛋白的研究進(jìn)展

1、52豬血免疫球蛋白的研究進(jìn)展臧盛張立娟吳明文孫西學(xué)郭晉育習(xí)曉博天津?qū)毜限r(nóng)業(yè)科技股份有限公司天津?qū)氎?3500摘要豬血富含多種營養(yǎng)成分和活性物質(zhì),特別是含有大量的免疫球蛋白。對(duì)豬血免疫球蛋白的性質(zhì)、提取方法、應(yīng)用現(xiàn)狀進(jìn)行了探討。關(guān)鍵詞豬血免疫球蛋白研究進(jìn)展Research progress on i m m unoglobuli n i n sw i n e bloodAbstract There are many nutriti onal co mpositi ons and active substances,es pecially many i m muno 2gl obulins in

2、s wine bl ood .The p r operties,commonly used extracti on methods and the app licati on situati on of i m munogl obulins in s wine bl ood were briefly su mmarized in this paper .Key words s wine bl ood;i m munoglubulin;research p r ogress免疫球蛋白(I m munogl obulin 是一類具有抗體活性或化學(xué)結(jié)構(gòu)與抗體相似的蛋白,普遍存在于哺乳動(dòng)物的血液、組織

3、液、淋巴液和體外分泌液中。目前,免疫球蛋白主要來源于動(dòng)物血液、初乳和蛋黃。但無論是卵黃中的,還是初乳中的,都是免疫細(xì)胞分泌產(chǎn)生的,由血液中轉(zhuǎn)移過去的。動(dòng)物血液具有抗體含量高、來源豐富、價(jià)格便宜等優(yōu)勢(shì),是一種很好的制備免疫球蛋白的原材料,特別是豬血中免疫球蛋白含量達(dá)2%左右,被專業(yè)人士公認(rèn)為提取免疫球蛋白的巨大資源庫1。我國具有豐富的豬血資源,每年豬血總量約為10億kg 。在當(dāng)今動(dòng)物蛋白資源短缺的情況下,開發(fā)利用豬血蛋白資源受到了中外學(xué)者的高度重視2,3。因此本文對(duì)豬血免疫球蛋白的性質(zhì)、提取方法及應(yīng)用的現(xiàn)狀進(jìn)行概述。1免疫球蛋白的性質(zhì)免疫球蛋白具有類似于蛋白的通性,如熱、酸、堿等對(duì)免疫球蛋白的活

4、性都有影響。所以在分離制備時(shí),應(yīng)注意保證其在加工過程中的穩(wěn)定性。1.1溫度免疫球蛋白一般在低于57時(shí),免疫活力幾乎沒有變化,但高于57后免疫活力開始下降,至近77基本喪失活性4。張津校等人研究發(fā)現(xiàn)在豬血清免疫球蛋白提取液的噴霧干燥工藝中,當(dāng)入風(fēng)口溫度150,出口溫度分別為60、70、80情況下,10%濃度的球蛋白溶液的活性損失分別為11.5%、11.98%、11.8%5。1.2壓強(qiáng)壓強(qiáng)對(duì)免疫球蛋白的活性也有一定的影響。研究表明,在200MPa 處理20m in,牛乳I gG 活性未發(fā)生變化。隨壓力升高,400MPa 時(shí),I gG 開始變性,至700MPa 時(shí),無蔗糖存在,則I gG 完全變性。

5、113pH 值4,所以免疫球蛋白在制備加工應(yīng)用中,應(yīng)在弱酸或中性的條件下進(jìn)行。2豬血免疫球蛋白的提取方法根據(jù)豬血中含有的各種蛋白質(zhì)的分子大小、電荷多少、溶解度以及免疫學(xué)特征等, 從血液中提取免疫球蛋白,常用的有鹽析法、有機(jī)溶劑沉淀法、有機(jī)MEAT I N DUSTRY2011年第1期總第357期綜述聚合物沉淀法、變性沉淀法等。本文只對(duì)常用的鹽析法和有機(jī)溶劑沉淀法進(jìn)行闡述。211鹽析法鹽析法是分離蛋白質(zhì)的重要方法之一,是利用抗體與雜質(zhì)之間對(duì)鹽濃度敏感程度的差異性進(jìn)行的。選擇一定濃度范圍的鹽溶液使部分雜質(zhì)呈“鹽析”(沉淀狀態(tài),抗體成分呈“鹽溶”(溶解狀態(tài)。離心去除鹽析沉淀狀態(tài)的雜蛋白,得到的上清液

6、再選擇一定濃度范圍的鹽溶液使抗體成分呈鹽析狀態(tài),離心得到的沉淀物即為純化的目標(biāo)抗體。目前常用的鹽析法有飽和硫酸銨分步鹽析法、辛酸沉淀法、氯化鐵沉淀法、多聚磷酸鹽鹽析法等。21111飽和硫酸銨分步鹽析法(AS硫酸銨是鹽析法最常用的無機(jī)鹽,主要原因是它溶解度大,隨溫度變化小,對(duì)蛋白質(zhì)有保護(hù)作用,高濃度時(shí)可抑制微生物和蛋白酶的活性,價(jià)格也不貴。而且飽和硫酸銨分步鹽析法操作簡(jiǎn)單,對(duì)設(shè)備和操作條件要求不高,便于工業(yè)化生產(chǎn)。其具體步驟6為:取一定量血漿,加生理鹽水稀釋,邊攪拌邊緩慢加入飽和硫酸銨溶液至硫酸銨終濃度20%,4靜置1h,4000r/m in離心10m in,棄沉淀,上清液中繼續(xù)加入飽和硫酸銨溶

7、液至硫酸銨終濃度50%,濃氨水調(diào)pH值至7.0,4靜置2h,4000r/m in離心20m in,棄上清,將沉淀溶于生理鹽水,超濾除鹽濃縮,至濾液中無S O2-4為止,即得I gG粗提物。21112辛酸沉淀法辛酸沉淀法提取I gG時(shí),對(duì)設(shè)備和操作條件要求較高,如在離心時(shí),轉(zhuǎn)速為10000r/m in,普通離心機(jī)達(dá)不到要求。在調(diào)節(jié)溶液pH值時(shí),要控制得當(dāng),pH 值稍低或稍高對(duì)I gG的得率和純度都有很大影響,這些都限制了它的廣泛應(yīng)用。其具體步驟7為:取一定量的血清,加乙酸-乙酸鈉緩沖液稀釋,用0.1mol/L鹽酸調(diào)pH值至4.5;室溫下邊攪拌邊緩慢加入辛酸(按辛酸25l/mL血清混合液添加,繼續(xù)

8、攪拌30m in后,10000r/m in離心30m in,棄沉淀,留上清液,上清液用多層紗布過濾,留濾液,然后將濾液裝入透析袋中透析48h,每810h換一次透析液,最后超濾濃縮即得I gG粗提液。21113氯化鐵沉淀法氯化鐵沉淀法的原理是根據(jù)蛋白質(zhì)分子與金屬離子反應(yīng)形成鹽復(fù)合物的形式和種類的不同,達(dá)到分離不同蛋白質(zhì)的目的。其具體步驟為:取一定量的血漿(加抗凝劑,用生理鹽水稀釋后,邊攪拌邊緩慢加入三氯化鐵溶液,調(diào)pH值至4.5,攪拌混勻, 40水浴保溫60m in后,4000r/m in離心15m in,棄去沉淀,上清液調(diào)pH值至9.0,常溫靜置2h,離心去除沉淀,過濾,上清液經(jīng)超濾濃縮即得I

9、 gG粗提物。21114多聚磷酸鹽鹽析法多聚磷酸鹽作為一種食品添加劑,常被添加在肉制品中以提高產(chǎn)品的保水性,或者作為絮凝劑在食品加工中使用。多聚磷酸鹽作為沉淀劑具有安全和高效的特點(diǎn),是解決豬血清I gG大規(guī)模分離制備的有效途徑之一,但目前尚未有深入系統(tǒng)的研究。其具體步驟8為:取一定量的血清加入相應(yīng)量的多聚磷酸鹽溶液,以0.1mol/L鹽酸調(diào)至所需pH值,在一定溫度水浴中保溫反應(yīng)一段時(shí)間后,取出8000 r/m in離心10m in,棄沉淀,收集上清液,即為I gG粗提液。212有機(jī)溶劑沉淀法有機(jī)溶劑沉淀法廣泛用于生產(chǎn)蛋白質(zhì)制劑,常用的試劑是丙酮和乙醇等,其中以乙醇最為常用。目前,國際上常用冷乙

10、醇法有兩種,一種是美國等國主要使用的Cohn-Oncley法,另一種是西歐等國主要使用的Kistler和N itsch mann法。冷乙醇分離法是WHO規(guī)程和中國生物制品規(guī)程推薦用的方法,不僅分離物質(zhì)多,可同時(shí)分離多種血漿成分,分辨率高,提純效果好,而且有抑菌、清除和滅活病毒的作用,但是要需要在低溫下操作,一定程度上限制了它在工業(yè)化生產(chǎn)中的應(yīng)用。3血漿免疫球蛋白的應(yīng)用311用于功能性食品的開發(fā)免疫球蛋白可以作為功效因子用于功能性食品的開發(fā),作為嬰幼兒食品添加劑,可以提高嬰兒防病抗病能力,促進(jìn)生長,如第3代嬰兒配方奶粉;用于老年食品中,可以增強(qiáng)老年人的抵抗力。312用于生物技術(shù)等方面用于生物技術(shù)

11、等方面的檢測(cè)和提取,如免疫親和層析法、免疫痕跡技術(shù)、免疫治療和免疫診斷等。在醫(yī)學(xué)診斷中由于免疫球蛋白可與特異性抗原結(jié)合,因而可用來標(biāo)記抗原。2011年第1期總第357 期MEAT I N DUSTRY綜述5354煙熏技術(shù)的研究謝姣1,2王華1任廷遠(yuǎn)1, 2李遠(yuǎn)虎1,2張銀1,21中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院柑桔研究所重慶北碚4007122西南大學(xué)食品學(xué)院重慶北碚400715摘要概述了煙熏的主要成分、發(fā)煙方法、煙熏爐的選擇、煙熏對(duì)肉品的影響以及煙熏的工藝等,其中著重介紹了發(fā)煙方法中的液體煙熏法以及煙熏工藝,并總結(jié)了液體煙熏的優(yōu)點(diǎn)。關(guān)鍵詞煙熏成分發(fā)煙方法工藝Study on s m ok i n g techn

12、ologyAbstract I n this paper,an overvie w was p r ovided about the main components of s moking,s moking methods,selecti on of s moking furnace,influence of s moking on meat p r oducts and s moking p r ocess etc .,in which the method of liquid fu m ing as well as liquid s moking technol ogy were e mp

13、hatically intr oduced and the advantages of liquid s moking method were su mmarized .Key words s moking,component,methods of fu m ing,technol ogy .熏制的實(shí)質(zhì)就是產(chǎn)品吸收木材分解產(chǎn)物的過程,因此,木材的分解產(chǎn)物是決定熏制作用的關(guān)鍵。如有許多不重要的成分如揮發(fā)性的油、脂肪酸、乙醇等被稱為木頭的提取物,它不僅能加快達(dá)到制品的熏烤要求,而且能阻止微生物的繁殖。熏烤具有以下特點(diǎn):賦于產(chǎn)品特殊的煙熏風(fēng)味,因制品局部的高溫,使其表面糊焦產(chǎn)生糊香味,引起人們的食欲

14、;防止脂肪的氧化,這是煙氣成分滲入到肉的內(nèi)部的作用;熏煙成分中含有醛和酚的聚合作用,在熏制品的表面形成茶褐色的有光澤且干燥的薄膜,不僅使產(chǎn)313免疫球蛋白在仔豬飼料中的應(yīng)用作為活性添加劑用于飼料,特別是幼畜的食物中可以預(yù)防和治療豬瘟、藍(lán)耳病、豬流感、傳染性胃腸炎、流行性腹瀉、豬丹毒、仔豬副傷寒、偽狂犬病等疾病;配合抗生素、抗病毒中藥制劑,還可治療無名高熱病及免疫抑制病;增強(qiáng)仔豬體質(zhì),提高仔豬成活率;增強(qiáng)仔豬抗應(yīng)激能力,降低應(yīng)激發(fā)生率。綜上所述,免疫球蛋白已廣泛應(yīng)用于保健食品、仔畜飼料以及生物新藥和醫(yī)藥生化診斷、檢測(cè)試劑等,已經(jīng)成為研究和商業(yè)等部門重要的物質(zhì)。隨著人們保健意識(shí)的增強(qiáng),免疫球蛋白功

15、能食品必將進(jìn)一步開拓市場(chǎng),產(chǎn)生更大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益,市場(chǎng)前景十分廣闊。參考文獻(xiàn)1卜春文,賈建波.豬血中I gG 的分離、純化放大試驗(yàn)工藝研究.食品工業(yè)科技,2003,24(650522徐琪壽,陳漢民,韋京豫.水解豬全血蛋白提取氨基酸混合物的營養(yǎng)評(píng)價(jià)J .營養(yǎng)學(xué)報(bào),1990,12(43393433馮詠梅,王文華.豬血制品的研究與開發(fā)J .食品研究與開發(fā),2002,23(671744楊嚴(yán)俊,王榮民等.豬血免疫球蛋白的分離機(jī)功能性研究.無錫輕工大學(xué)學(xué)報(bào),1996,15(21091145張津校,敖長金.噴霧干燥工藝對(duì)豬血清免疫球蛋白活性的影響.中國飼料,2004,(722236王重慶.分子免疫學(xué)基礎(chǔ)M .北京北京大學(xué)出版社,19992232257M ichella M 1M 1,Andrew P .A si m p le,non -chr om a