代寫醫(yī)學(xué)論文枳椇子水提取液治療非酒精性脂肪性肝炎的實驗研究

1、代寫醫(yī)學(xué)論文枳椇子水提取液治療非酒精性脂肪性肝炎的實驗研究    【摘要】  目的：觀察枳椇子水提取液對實驗大鼠非酒精性脂肪性肝炎（NASH）的治療作用。方法：用高脂飼料誘導(dǎo)非酒精性脂肪性肝炎大鼠模型8周后，灌服枳椇子水提取液治療2周，觀察對模型大鼠肝臟病理脂肪變、炎癥程度及血清ALT、AST、TNF、IL8、FFA、胰島素敏感性指標(biāo)（ISI）和肝組織MDA、SOD的影響，并與凱西萊聯(lián)合易善復(fù)治療進(jìn)行比較。結(jié)果：枳椇子能明顯減輕模型大鼠肝臟炎癥和脂肪變程度（P<0.01）；降低血清ALT、AST、TNF、IL8、FFA、肝組織MDA、SO

2、D、提高ISI（P<0.01或P<0.05）。除肝組織MDA、SOD外，其它指標(biāo)均明顯優(yōu)于對照組（P<0.05）。結(jié)論：枳椇子水提取液對高脂飼料誘導(dǎo)的大鼠NASH有明顯的治療作用，效果優(yōu)于凱西萊聯(lián)合易善復(fù)治療，其作用機(jī)制可能與提高胰島素敏感性、抗氧化、抑制炎癥細(xì)胞因子等有關(guān)?！娟P(guān)鍵詞】  非酒精性脂肪性肝炎 大 鼠 枳椇子Experimental Study on the Water Extract of Raisin Tree Seed in Treatment of Nonalcoholic Steatosis Hepatitis  ZHANG Yon

3、ghua, et al. Zhejiang Integrated Traditional Chinese and Western Medicine Hospital, Hangzhou (310003), China    Abstract  Objective:To observe the therapeutic efficacy of the water extract of raisin tree seed on nonalcoholic steatosis hepatitis (NASH) in rats. Methods:NASH rat mo

4、del was established after an 8week high fat diet. NASH rats were gavaged with the water extract of raisin tree seed for 2 weeks. Fatty change and inflammation in the liver was observed pathologically and serum alanine aminotransferase(ALT), aspartate aminotransferase(AST), tumor necrosis factor 

5、; (TNF), interleukin 8 (IL8), fatty acid, insulin sensitivity index (ISI), and malondialdehyde(MDA) and superoxide dismutase(SOD) in liver tissue were measured or calculated after the administration. Another group treated with Tiopronin combined with Essentiale Forte served as the control group. Res

6、ults:The extract of raisin tree seed dramatically improved the fatty change and inflammation in the liver (P<0.01), decreased ALT, AST, TNF, IL8, fatty acid, MDA and SOD, and increased ISI (P<0.01 or P<0.05). Compared to the control group, most of the parameters were better in the raisin tr

7、ee seed group except MDA and SOD (P<0.05). Conclusion:The exract of raisin tree seed has a better therapeutic efficacy on high fat dietinduced NASH compared to Tiopronin combined with Essentiale Forte. The underlying mechanism of this effect may be related to increasing insulin sensitivity, antio

8、xidation, and inhibiting inflammatory cytokines.    Key words  nonalcoholic steatosis hepatitis  rat  raisin tree seed    近年來，隨著人們生活方式和飲食結(jié)構(gòu)的改變等，脂肪性肝病的發(fā)病率不斷增加，在某些地區(qū)已成為僅次于慢性病毒性肝炎的第二大肝病1，目前尚缺乏有效的治療方法。我們根據(jù)中醫(yī)文獻(xiàn)記載和自己臨床經(jīng)驗，應(yīng)用枳椇子水提取液治療實驗大鼠NASH，現(xiàn)將結(jié)果報道如下。  

9、;  1  材料與方法    1.1  實驗動物  SD雄性大鼠40只，清潔級，體重200250g，由浙江省實驗動物中心提供，許可證號為SYXK(浙)2005-0074，飼養(yǎng)于浙江省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心。    1.2  造模方法  正常大鼠每天用高脂飼料(基礎(chǔ)飼料82.5%、膽固醇2%、膽酸鈉0.5%、蛋黃粉5%、豬油10%)持續(xù)飼養(yǎng)8周，誘導(dǎo)NASH大鼠模型。    1.3  藥物制備  枳椇子水提取液制備：取枳椇子（產(chǎn)

10、地陜西），壓扁，置小型提取器中，加水提取兩次，合并煎液，制取含生藥0.2g/ml濃度枳椇子水提取液。硫普羅寧和多烯磷脂酰膽堿混合藥液制備：硫普羅寧片(商品名：凱西萊，批號061207，河南省新誼藥業(yè)股份有限公司)和多烯磷脂酰膽堿片（商品名：易善復(fù)，批號D8096，北京安萬特有限公司）分別研粉，加蒸餾水配制成每毫升含硫普羅寧6mg/ml、多烯磷脂酰膽堿13.68mg的混合藥液。    1.4  分組及治療  40只大鼠隨機(jī)分為空白組、模型組、枳椇子組、對照組，每組各10只?？瞻捉M：正常飼養(yǎng)8周后，予蒸餾水10ml/kg，1天分2次灌服；模型組：造

11、模8周后，予蒸餾水10ml/kg，1天分2次灌服；枳椇子組：造模8周后，予枳椇子水提取液10ml/kg，1天分2次灌服；對照組：造模8周后，予硫普羅寧和多烯磷脂酰膽堿混合藥液10ml/kg，1天分2次灌服，均連續(xù)2周。    1.5  觀察指標(biāo)  實驗結(jié)束后，股動脈取血，采用奧林巴斯全自動生化儀測定肝功能（ALT、AST）和血糖(FBG)；采用ELIAS法測定血清腫瘤壞死因子(TNF)、白介素8（IL8)、脂肪酸（FFA）；采用放射免疫法測定胰島素(FINS)，以1/FBG×FINS計算胰島素敏感性指標(biāo)（ISI），因為非正態(tài)分布，統(tǒng)計

12、時取其自然對數(shù)。處死大鼠，取肝組織加生理鹽水(19)勻漿取上清夜，采用化學(xué)比色法測定丙二醛（MDA）、超氧化歧化酶（SOD）。取肝組織HE染色，參考中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)會分會脂肪肝和酒精性肝病學(xué)組“非酒精性脂肪肝診斷標(biāo)準(zhǔn)”2觀察病理改變。    2  結(jié)  果    2.1  各組肝組織脂肪變、炎癥程度  模型組肝組織脂肪變及炎癥積分均較空白組明顯增高（P<0.01）；枳椇子組肝組織脂肪變及炎癥積分較模型組明顯減輕（P<0.01）；枳椇子組脂肪變、炎癥程度明顯低于對照組（P<0.0

13、5），見表1。    2.2  各組ALT、AST和ISI  模型組血清ALT、AST較空白組明顯增高（P<0.01），ISI較空白組明顯降表1  各組肝組織脂肪變、炎癥程度積分比較    與空白組比較，*P<0.01；與模型組比較，P<0.01；與對照組比較，P<0.05低（P<0.01）；枳椇子組血清ALT、AST較模型組明顯降低（P<0.01），而ISI較模型組明顯升高（P<0.05）；枳椇子組ALT、AST明顯低于對照組（P<0.05）、ISI明顯高

14、于對照組（P<0.05），見表2。    23  各組血清炎癥細(xì)胞因子水平  模型組血清TNF、IL8、FFA水平較空白組明顯增高（P<0.01）；枳椇子組血清TNF、IL8、FFA水平較模型組明顯減輕（P<0.01或P<0.05）；枳椇子組與對照組比較，血清IL8、FFA水平明顯降低（P<0.05），見表3。    24  各組肝組織MDS、SOD  模型組肝組織SOD較空白組明顯減低（P<0.01），MDA較空白組明顯增高（P<0.01）；枳椇子組肝

15、組織SOD較模型組明顯增高（P<0.01），MDA較模型組明顯減低（P<0.05）；枳椇子組SOD明顯低于對照組（P<0.05），見表4。    3  討  論    枳椇子是鼠李科植物枳椇的成熟果實和種子，無毒，為藥食兩用物品。本草綱目記載該藥“甘，平，無毒。止煩除渴，去膈上熱，潤五臟，利大小便”。我國民間也常用該藥養(yǎng)肝保肝?，F(xiàn)代研究證明其對酒精性肝病有較好的防治作用3，但對非酒精性肝病研究較少。    非酒精性脂肪肝(NAFL)確切的發(fā)病機(jī)制目前尚不明確。大多數(shù)學(xué)

16、者認(rèn)可“二次打擊學(xué)說”4。表2  各組ALT、AST和ISI比較與空白組比較，*P<0.01；與模型組比較，P<0.05,P<0.01；與對照組比較，P<0.05表3  各組血清TNF、IL8、FFA比較表4  各組肝組織MDS、SOD比較    與空白組比較，*P<0.01；與模型組比較，P<0.05,P<0.01；與對照組比較，P<0.05其中胰島素抵抗為NAFLD和NASH發(fā)病機(jī)制的第一次打擊，氧應(yīng)激和脂質(zhì)過氧化則是第二次打擊。本研究在觀察枳椇子水提取液對NASH模型大鼠肝功能指標(biāo)

17、和肝臟病理影響的同時，觀察了其對炎癥細(xì)胞因子和自由基指標(biāo)的影響。實驗結(jié)果表明，通過高脂飼料持續(xù)喂養(yǎng)8周后，大鼠肝臟發(fā)生明顯的脂肪變和炎癥，肝功能明顯異常，提示造模成功；血清炎癥細(xì)胞因子水平和肝組織MDS、SOD明顯升高，ISI明顯降低，說明大鼠NASH的發(fā)病機(jī)制與人類基本一致。枳椇子水提取液治療后大鼠肝臟脂肪病變、炎癥程度明顯改善，ISI指數(shù)明顯提高，血清肝功能、TNFa、IIL8、FFA和肝組織MDS、SOD水平均明顯下降，提示枳椇子水提取液對非酒精性脂肪性肝炎具有較好作用，其作用機(jī)制與枳椇子增加胰島素敏感性、抗氧化、抑制炎癥細(xì)胞因子等作用有關(guān)?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1 范建高,朱 軍,李新建,等.上海市成人脂肪肝患病率及其危險因素流行病學(xué)調(diào)查.中華肝臟病雜志,2005,2（13）:83882 中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會脂肪肝和