貫葉連翹的研究進(jìn)展

1、貫葉連翹的研究進(jìn)展        【摘要】  貫葉連翹具有廣泛的藥理活性，在抑郁癥、愛滋病以及腫瘤方面的應(yīng)用前景而成為當(dāng)前國際研究開發(fā)的熱點(diǎn)。文章介紹了貫葉連翹的化學(xué)成分、活性成分的提取方法和藥理作用，為進(jìn)一步研究和開發(fā)貫葉連翹提供理論基礎(chǔ)。 【關(guān)鍵詞】  貫葉連翹； 化學(xué)成分； 藥理作用貫葉連翹又名貫葉金絲桃1，歐洲名為St.john's wort，俗稱為圣約翰草。貫葉連翹系藤黃科金絲桃屬多年生草本植物，是世界上分布最廣的天然植物。貫葉連翹在民間已有二千四百余年的藥用。傳統(tǒng)中醫(yī)藥學(xué)認(rèn)為

2、，其性平，味辛苦澀，具有清心明目、舒經(jīng)活血、止血生肌、解毒消炎、利濕之功效2。在歐洲等國主要用于治療抑郁癥、甲型和乙型肝炎及愛滋病等。近年來也發(fā)現(xiàn)其對惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤有抑制作用3。1  貫葉連翹的主要藥理成分    貫葉連翹具有多種化學(xué)成分。主要有苯并二蒽酮類化合物（Naphthodianthrones）、間苯三酚化合物（Phloro glucinols）、黃酮類化合物（Flavonoids）4。深入地研究使人們發(fā)現(xiàn)貫葉連翹中的黃酮類在抗抑郁作用中起著不可忽視的作用。1.1  苯并二蒽酮類化合物苯并二蒽酮類化合物主要包括金絲桃素（Hyperici

3、n）、偽金絲桃素(Pseudohypericin)、異金絲桃素（Isohypericin）、環(huán)金絲桃素（Cyclopseudohpericin）、原偽金絲桃素（Protitpseudohypreicin）等。其含量以金絲桃素和偽金絲桃素為主，鮮植物中含有的原金絲桃素和原偽金絲桃素在陽光下可分別轉(zhuǎn)化為金絲桃素和偽金絲桃素。1.2  間苯三酚化合物間苯三酚類物質(zhì)廣泛存在于藤黃科植物中。這類化合物的主要成分為貫葉金絲桃素（Hyperforin）和加貫葉金絲桃素（Adhyperforin）。貫葉金絲桃素含量為2%4.5%，加貫葉金絲桃素為0.2%1.9%。1.3  黃酮類化合物貫葉

4、連翹黃酮成分相當(dāng)豐富，全草達(dá)到了9.25%，而且比金絲桃素要穩(wěn)定，不用避光和熱，具有較好的開發(fā)前景。已經(jīng)鑒定的有槲皮素（Quercetin）、蘆?。≧utin）等，具有抗炎、抗病毒、收斂止血、止瀉等功效。2  貫葉連翹中活性成分提取方法2.1  金絲桃素的提取從化學(xué)結(jié)構(gòu)式分析，金絲桃素在極性溶劑和非極性溶劑中溶解度都很高，但在非極性溶劑中極易被氧化，在極性溶劑中如甲醇、乙醇、乙醚中具有較好的穩(wěn)定性，同時(shí)它具有多個酚羥基呈弱酸性，易溶于弱堿物質(zhì)5。醇提法存在產(chǎn)品易吸濕，發(fā)粘的缺點(diǎn)。盧群等6優(yōu)化出的最佳提取工藝是：藥材4倍量的甲醇，40浸提3次，12 h/次。王曉利等7以甲醇為

5、溶媒，采用回流提取與超聲振蕩提取，考察提取率，最后確定以甲醇超聲提取30 min提取率最高。2.2  黃酮類成分的提取關(guān)于貫葉連翹中黃酮物質(zhì)的提取方法少有報(bào)道。目前比較通用的方法有：水提取法、堿液提取法、微波或超聲波提取法、大孔樹脂法、超濾法以及超臨界萃取法等。瞿發(fā)林等8研究結(jié)果表明貫葉連翹中總黃酮的最佳提取條件為60%，乙醇80 ml，回流提取3 h。李瑩等9研究表明采用乙醇熱回流法，以金絲桃苷為指標(biāo)，用量分?jǐn)?shù)為80%乙醇10倍量，熱回流提取2次，每次0.5 h可以提高金絲桃苷的提取率。各種方法各有優(yōu)缺點(diǎn)，要根據(jù)提取物的性質(zhì)、提取成本、工藝設(shè)備等條件來選擇合適的提取工藝，提高黃酮類

6、物質(zhì)的提取率和原料的利用效果。3  貫葉連翹提取物的藥理作用    目前已知，貫葉連翹提取物中至少含有10種成分有藥理作用。金絲桃素被認(rèn)為是貫葉連翹提取物中最具有生物活性的物質(zhì)，國內(nèi)外已完成了金絲桃素抗愛滋病期臨床試驗(yàn)10，治療惡性神經(jīng)膠質(zhì)瘤的臨床研究也在進(jìn)行之中。3.1  抗抑郁作用體外實(shí)驗(yàn)表明，貫葉連翹提取物的抗抑郁活性是多種成分綜合作用的結(jié)果，其機(jī)制也不是單一的，不同的活性成分具有不同優(yōu)勢的抗抑郁機(jī)制11。    金絲桃素的抗抑郁作用較為獨(dú)特，它以相近的效能同時(shí)抑制5-HT、多巴胺、去甲腎上腺素的攝取，并有廣

7、譜的攝取抑制作用，還可抑制-氨基丁酸和L-谷氨酸的攝取。這種廣譜的攝取抑制作用提示金絲桃素的抗抑郁作用機(jī)理可能與其他抗抑制藥不同，即它可能不是通過與不同的遷移分子上特定的位點(diǎn)結(jié)合，而是通過介入神經(jīng)遞質(zhì)轉(zhuǎn)化功能而發(fā)揮抗抑郁作用。    貫葉連翹中的金絲桃素對單胺氧化酶丙二醛（MAO）的抑制作用一直被公認(rèn)為貫葉連翹抗抑郁的主要作用機(jī)理，然而該假設(shè)并未在一些實(shí)驗(yàn)中得到證實(shí)。金絲桃素對神經(jīng)遞質(zhì)的攝取抑制作用為貫葉連翹抗抑郁作用的主要作用機(jī)理，其他的一些藥理作用也可以解釋其臨床療效。貫葉連翹的蒽酮部分也有抗抑郁作用，但是似乎不是其抗抑郁作用的主要成分，因?yàn)槿サ糨焱呢炄~連翹

8、提取物仍然具有抗抑郁作用。由于貫葉連翹提取物及其制劑與傳統(tǒng)化學(xué)抗抑郁藥相比具有療效好、副作用小等特點(diǎn)12，貫葉連翹已經(jīng)是世界上最暢銷的抗抑郁癥植物藥之一。其中最有說服力的是Linde等13的報(bào)道，治療輕度和中度抑郁癥患者時(shí)，含有金絲桃素類成分的貫葉連翹提取物治療效果明顯優(yōu)于安慰劑，與標(biāo)準(zhǔn)抗抑郁藥物（三環(huán)類）相比，療效相同而副作用小。3.2  抗病毒作用3.2.1  對HIV的作用朱曉薇等14報(bào)道了金絲桃素抗HIV逆轉(zhuǎn)錄酶的作用。金絲桃素2 g/ml與HIV一同培養(yǎng)，結(jié)果顯示HIV逆轉(zhuǎn)錄酶活性降低了75%。美國研究人員采用口服0.5 mg/kg金絲桃素，對30例愛滋病感染者進(jìn)

9、行臨床觀察，結(jié)果16人CD4值保持穩(wěn)定或有所上升，表明患者免疫狀況好轉(zhuǎn)。3.2.2  對包膜病毒的作用實(shí)驗(yàn)者將金絲桃素與病毒預(yù)培養(yǎng)后接種于細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)0.781.56 g/ml金絲桃素可有效殺滅型單純皰疹病毒（HSV-1）、流感病毒A（Brazil）和莫洛尼鼠白血病毒。Maraleda等15通過對乙肝病毒（DHBV）模型研究金絲桃素對乙肝病毒的抗病毒活性，結(jié)果表明濃度為110 g/ml，金絲桃素可在5 d或更長時(shí)間中阻斷感染DHBV的細(xì)胞產(chǎn)生病毒顆粒。3.3  抗腫瘤作用3.3.1  金絲桃素抗腫瘤作用金絲桃素是貫葉連翹中最具生物活性的物質(zhì)之一，也是貫葉連翹抗抑郁、

10、抗病毒、抗腫瘤的主要活性成分之一。目前用金絲桃素進(jìn)行腫瘤的光動力治療（PDT），在體外細(xì)胞藥效、動物實(shí)驗(yàn)等方面的研究十分活躍。金絲桃素的“抗癌譜”非常廣，對多種癌癥均有良好的療效，其中皮膚癌的PDT已經(jīng)進(jìn)入期臨床試驗(yàn)階段。目前已知金絲桃素的抗腫瘤機(jī)制至少有3種，即直接殺滅、引發(fā)凋亡和局部血管閉塞導(dǎo)致的續(xù)發(fā)性細(xì)胞死亡。3.3.2  貫葉金絲桃素抗腫瘤作用貫葉金絲桃素對光、氧氣、溫度敏感，極其不穩(wěn)定，存放幾個星期可以完全分解，因此它的藥效作用常被忽視。但隨著對貫葉連翹提取物活性作用的研究發(fā)現(xiàn)，貫葉金絲桃素不僅是貫葉連翹提取物抗抑郁的主要活性成分之一，且還具有顯著的抗腫瘤活性。Schemp

11、p CM等16認(rèn)為其機(jī)制可能是貫葉金絲桃素激活了線粒體介導(dǎo)的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路，從而誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡。Katarina Hostanska等17的報(bào)道證實(shí)了貫葉金絲桃素與金絲桃素在抑制K562和U937細(xì)胞生長時(shí)的協(xié)同作用。由于貫葉金絲桃素具有顯著的抗腫瘤活性、體內(nèi)低毒性、天然資源含量豐富，使其有望開發(fā)成一種新型的抗腫瘤藥物。3.3.3  黃酮類化合物抗腫瘤作用貫葉連翹中的槲皮素作為界分布最廣的黃酮類化合物，不僅對多種致癌劑、促癌劑有拮抗作用，而且可以抑制多類惡性腫瘤細(xì)胞的生長和轉(zhuǎn)移18。其他許多黃酮類物質(zhì)均有類似的抗癌活性。貫葉連翹中的黃酮類物質(zhì)含量相當(dāng)豐富，在貫葉連翹的抗癌活性中所起的

12、作用不容忽視。1         4  應(yīng)用成果    受社會競爭加劇和人口老齡化的影響，我國抑郁癥的發(fā)病率已呈現(xiàn)出上升趨勢。但在抗抑郁癥藥物開發(fā)方面許多化學(xué)藥物副作用給應(yīng)用帶來影響，國內(nèi)外已著眼于天然植物藥的提取與篩選，尋求療效更好的天然藥物及保健品。其中應(yīng)用較多的為貫葉連翹。200008，國家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)了德國威瑪舒培博士大藥廠的圣約翰草提取物片劑進(jìn)入，商品名為“路優(yōu)泰”。 據(jù)報(bào)道，在德國所有的抑郁癥藥物中，這一系列藥物占了臨床用藥的40%。貫葉連翹提取物及其制

13、劑在我國屬于中藥5類藥物，是當(dāng)前的熱門品類。國內(nèi)關(guān)注這一藥物的較多，而且貫葉連翹提取物其制備方法及藥物組合物的中國專利已被授權(quán)。據(jù)了解，湖北麗益科技有限公司、上海市中藥研究所、北大維信的開發(fā)工作均有了實(shí)質(zhì)性的進(jìn)展。    隨著貫葉連翹抗抑郁作用認(rèn)識的不斷深入，貫葉連翹及金絲桃素類成分已越來越成為國外醫(yī)藥工作者研究的熱點(diǎn)。貫葉金絲桃浸膏制劑已在德國上市，并占德國抗輕度、中度抑郁癥藥市場的50%。在抗病毒方面的研究工作發(fā)現(xiàn)金絲桃素在細(xì)胞培養(yǎng)中可抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒的復(fù)制，美國和以色列的家發(fā)現(xiàn)金絲桃素和偽金絲桃素具有抗逆轉(zhuǎn)錄病毒的作用，現(xiàn)已完成了它的抗愛滋病臨床研究。5

14、60; 研究意義    貫葉連翹具有良好的藥理活性，因?yàn)槠湓谥委熞钟舭Y、愛滋病以及腫瘤方面的應(yīng)用前景而成為當(dāng)前國際研究開發(fā)的熱點(diǎn)。我國的貫葉連翹資源十分豐富，但研究和利用尚在起步階段，還未載入任何形式的法定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，在劑型標(biāo)準(zhǔn)和提取工藝上忽視了對貫葉金絲桃素的研究。貫葉連翹提取物及其制劑的研究不但涉及重大疾病的治療，而且還與重大社會問題有關(guān)。鑒于此，有必要對貫葉連翹的化學(xué)成分、活性成分的提取方法、藥理作用等方面進(jìn)行研究，以期能結(jié)合中西醫(yī)理論和臨床經(jīng)驗(yàn)，開發(fā)各類新藥?！尽?#160; 1 吳建銘，祝 建，夏春鏜，等.貫葉連翹中金絲桃素的合成與積累研究進(jìn)展J.熱帶亞熱

15、帶植物學(xué)報(bào)，2007，15(3)：263.2 中科院西北植物研究所.秦嶺植物志(第一卷，第三冊)M.北京：科學(xué)出版社，1981：303.3 Anke L,Gopalakrishna R,Jones KD, et al.Hypericin in adjuvant brain tumor therapyJ.Drugs of the Fubure, 1995,20(5):511.4 徐 皓.貫葉連翹化學(xué)成分及藥理作用研究J.安徽農(nóng)業(yè)科學(xué)，2007，35(14):4219.5 趙 晶，張致平，陳鴻珊.金絲桃素和乙基金絲桃素的合成及對人體免疫缺陷逆轉(zhuǎn)錄酶的抑制活性J.藥學(xué)學(xué)報(bào)，1998，33(1)：67

16、.6 盧 群.正交試驗(yàn)法研究金絲桃素提取工藝J.廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2002，18(4)：270.7 王曉利，張俊松，羅 謙，等.HPLC法測定貫葉連翹藥材及提取物中金絲桃素的含量J.中藥材，2006，29(10)：1047.8 瞿發(fā)林.貫葉連翹藥材中總黃酮的含量測定研究J.時(shí)珍國醫(yī)國藥，2004，15（7）：395.9 李 瑩，禹玉洪，楊書良，等.貫葉連翹的提取與除鞣工藝研究J.哈爾濱商業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)（科學(xué)版），2006，22(2)：12.10 楊得彼，甘良春，王冬梅.貫葉連翹薄膜片中金絲桃素和金絲桃素類化合物的HPLC和UV測定J.中國醫(yī)藥雜志，2004，35(9)：548.11 楊得彼，甘良春，

17、胡海燕.國外對貫葉連翹抗抑郁療效的臨床驗(yàn)證J.中西醫(yī)學(xué)結(jié)合學(xué)報(bào)，2004，2(3)：231.12 Anna R.B. etal Evaluation of chemical stability of st.John's wort commercial extract and some preparationsJ.Internation Journal of Pharmacentics. 2001，213：199.13 Linde K,Ramirez G, Mulrow CD, et al. st.John's wort for depression-an overview an

18、d meta-analysis of randomized clinical trialsJ.BMJ,1996,313(7052):253.14 朱曉薇.貫葉金絲桃研究進(jìn)展-藥代動力學(xué)、藥效學(xué)和臨床應(yīng)用J.國外醫(yī)藥：植物藥分冊，1998，13(5)：210.15 Maraleda g，wu tt,jilbert ar,et al.Inhibition of duck hepatitis Bvirus replication by hypericinJ.Antiviral Res,1993,20(3):235.16 Schempp cm,Kirkin v,Simon-haarhavs b et al. Inhibition of tumor cell growth by hyperforin, a novel anticancer drug from st.John's wort that acts by induction of apoptosisJ.oncogene,2002,21(8):1242.17 Katarina Hostanoka,Juergen Reichlin,Silvia Bommer, et al.Hyperforin a constituent of St.John's wort (