HPLC法測(cè)定心舒康膠囊中人參皂苷Rg1、Re的含量

1、HPLC法測(cè)定心舒康膠囊中人參皂苷Rg1、Re的含量                         【摘要】  目的:建立心舒康膠囊中人參皂苷Rg1和Re含量的測(cè)定方法。方法：應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)，固定相：C18柱，流動(dòng)相：乙腈-0.05%磷酸溶液(1:4)；檢測(cè)波長(zhǎng)203nm，測(cè)定心舒康膠囊中人參皂苷Rg1、Re，的含量。結(jié)果:該方法

2、測(cè)定人參皂苷Rg1、Re的線性范圍為1.0-10.0g，其加樣回收率為95.3-100.4%，精密度2%。結(jié)論：方法簡(jiǎn)便準(zhǔn)確，可為心舒康膠囊的含量測(cè)定方法提供借鑒。 【關(guān)鍵詞】  心舒康膠囊；人參皂苷Rg1、Re；高效液相色譜法 心舒康膠囊由三七、丹參、黃芪等中藥組成，經(jīng)科學(xué)方法提取有效成分精制而成，用于益氣活血、補(bǔ)心腦，為我院治療心血管疾病的經(jīng)驗(yàn)方。其中三七(Radix et rhizoma notoginseng)是我國(guó)名貴的中藥材，其主要活性成分為多種皂苷，且具有多種顯著的藥理作用，含三七的復(fù)方制劑常以其作為指標(biāo)成分進(jìn)行含量測(cè)定。    采用高效液

3、相色譜檢測(cè)法對(duì)心舒康膠囊中人參皂苷Rg1、Re進(jìn)行了含量測(cè)定。在樣品預(yù)處理中，采用大孔樹(shù)脂吸附分離法直接對(duì)樣品提取液進(jìn)行凈化處理，并采用C18柱，以乙腈-0.05%磷酸溶液(1:4)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)203nm，可取得滿意的結(jié)果。    1  材料    1.1  儀器  Waters 515高效液相色譜儀，Waters  Millennium32色譜工作站。轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海青浦滬西儀器廠)，F(xiàn)QC100超聲波清洗機(jī)(無(wú)錫福尼達(dá)電子公司,頻率為40KHZ)，SC2021型電熱恒溫干燥箱(通州市滬通

4、制藥機(jī)械設(shè)備廠)，F(xiàn)A1004型十萬(wàn)分之一電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，電熱恒溫水浴鍋(上海醫(yī)療器械五廠)。    1.2  試藥  人參皂苷Rg1和Re對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所)，心舒康膠囊(解放軍102醫(yī)院制劑室提供，批號(hào):040513、041016、050431)，乙腈為Merck色譜純，純凈水，其他試劑均為分析純。    2  方法與結(jié)果    2.1  色譜及檢測(cè)條件  色譜柱：C18柱；流動(dòng)相：乙腈0.05%磷酸溶液(1:4)；流

5、速：1ml/min；柱溫：室溫；在上述色譜條件下，人參皂苷Rg1和Re分離效果良好。    2.2  供試品溶液的制備  取本品裝量差異項(xiàng)下的內(nèi)容物，混勻，取約0.25g，精密稱定，置索氏提取器中，精密加入甲醇30ml，置80水浴上加熱回流3h，殘?jiān)鼡]干，加水10ml使溶解，加石油醚(30-60)提取2h，每次10ml，棄去醚液，水液通過(guò)D101大孔樹(shù)脂柱(內(nèi)徑1.5cm,長(zhǎng)15cm)，以水50ml洗脫，棄去水液，再用20%乙醇洗脫，棄去洗脫液，用80%乙醇洗脫，收集洗脫液70ml，蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⑥D(zhuǎn)移至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻

6、，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得。    2.3  對(duì)照品溶液的制備  取人參皂苷Rg1和Re對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇分別制成每1ml含0.2mg的溶液，即得。    2.4  線性關(guān)系考察  分別精密吸取對(duì)照品液50、40、25、10、5l進(jìn)樣，按上述色譜條件分別測(cè)定峰面積；以峰面積值為縱坐標(biāo)，對(duì)照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，回歸方程分別為：Rg1：lgY6.20+1.28 lgX(r0.9998)，Re：lgY6.06+0.23 lgX(r0.9998)，線性范圍為1.0-10.0g。 

7、;                                2.5  精密度試驗(yàn)  取對(duì)照品溶液適量連續(xù)進(jìn)樣5次,測(cè)得各峰面積,計(jì)算RSD,結(jié)果見(jiàn)表1。表1  精密度2.6  穩(wěn)定性試驗(yàn)  取同一樣品供試品溶液，分別在0、2、4、6、8h進(jìn)樣測(cè)

8、定，測(cè)定結(jié)果表明在8h內(nèi)穩(wěn)定，RSD2.1%。    2.7  重現(xiàn)性試驗(yàn)  取同一樣品(批號(hào)：041016)，按供凝血酶(上海試品溶液制備項(xiàng)操作，制備5份,按色譜條件測(cè)定含量。結(jié)果人參皂苷Rg1、人參皂苷Re的含量(mg/g)RSD分別為1.9924(1.6%)，0.7630(1.7%)(n5)。    2.8  樣品測(cè)定  取樣品供試品溶液在上述色譜條件下測(cè)定，結(jié)果見(jiàn)表2、表3。表2人參皂苷Rg1樣品測(cè)定結(jié)果表3  人參皂苷Re樣品測(cè)定結(jié)果2.9  加樣回收率試驗(yàn)

9、0; 精密稱取己知含量的樣品適量(批號(hào)：050431)，分高中低量加入一定量對(duì)照品，按供試品溶液制備項(xiàng)操作，制備溶液，測(cè)定，計(jì)算,結(jié)果見(jiàn)表4、表5。表4  人參皂苷Rg1加樣回收率試驗(yàn)3  討論    心舒康膠囊中多為水溶性成分，而待測(cè)成分極性亦較大，如何除去其他成分對(duì)測(cè)定的干擾，是預(yù)處理中首要解決的問(wèn)題。在含皂苷樣品預(yù)處理中，多用正丁醇液萃取1及大孔樹(shù)脂柱層析純化2-3的方法，研究發(fā)現(xiàn)大孔樹(shù)脂柱層析分離除去干擾成分的效果較好，而且具有樣品用量少、操作步驟簡(jiǎn)單、快捷等優(yōu)點(diǎn)。    參考藥典方法4可以很好測(cè)定本品中人參皂苷Rg1、人參皂苷Re的含量，有利于很好的控制本品的質(zhì)量?！緟⒖嘉墨I(xiàn)】  1吳廣宣.野山參與園參中皂甙含量的對(duì)比分析J.藥學(xué)通報(bào)；1988，23(7)：397.2唐第光.大孔樹(shù)脂吸附法提取三七總苷工藝探討J.中成藥；19