DP314-離心柱型-N96血液

1、產(chǎn)品簡介：產(chǎn)品簡介：本試劑盒可以處理新鮮、凍存的全血材料。96孔吸附板CB3上的硅膠膜可以特異性吸附、 結(jié)合DNA?？勺畲笙薅热コs質(zhì)蛋白及細(xì)胞中其他有機(jī)化合物。提取的基因組 DNA片段大（最大可達(dá)50 kb，一般為20-30 kb），純度高，質(zhì)量穩(wěn)定可靠?？梢酝瑫r(shí)處理96個(gè)樣品。操作時(shí)無需酚/氯仿抽提，乙醇沉淀。本試劑盒同樣適用于從培養(yǎng)細(xì)胞或動(dòng)物組織中提取基因組DNA。 使用本試劑盒回收的DNA可適用于各種常規(guī)操作，包括酶切、構(gòu)建、PCR、文庫Southern雜交等實(shí)驗(yàn)。 提取得率：提取得率：材料 提取量 DNA產(chǎn)量全血 200 µl-600 µl 4-20 µ

2、g注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)：請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。請務(wù)必在使用本試劑盒之前閱讀此注意事項(xiàng)。 1 使用前請按照瓶上標(biāo)簽在緩沖液GD和漂洗液PW中加入相應(yīng)體積的無水 乙醇。2 血液樣品應(yīng)避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致提取的DNA片段較小且提取量也下 降。3 若緩沖液GB中有沉淀，可在37水浴中重新溶解。 4 所有的離心步驟均為室溫下進(jìn)行。 5 洗脫緩沖液體積不應(yīng)少于50 µl，體積過小影響回收效率體積過小影響回收效率?；厥招?6 洗脫液的pH對于洗脫效率有很大影響。若用去離子水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.08.5范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；且DNA產(chǎn)物應(yīng)7保存在-20

3、，以防DNA降解。 使用排槍時(shí)應(yīng)注意不要打濕96孔板孔口。離心時(shí)，封口膜務(wù)必封蓋嚴(yán)實(shí)， 以防離心過程中有液體濺出產(chǎn)生交叉污染。技術(shù)支持：01059822661 59822665 WWW.TIANGEN.COM 操作步驟：操作步驟：（以600µl血液處理量為例）血液處理量為例）1. 處理材料：將600µl的血液樣品加到96孔深孔板中，將每個(gè)樣品對應(yīng)相應(yīng)的標(biāo)記。向每孔樣品中加入2倍樣品體積的細(xì)胞裂解液CL（深孔板最多容量為2.2ml），槍頭抽打20次混勻，加蓋封口膜， 3600 rpm離心10分鐘，揭去封口膜，抽棄上清；2. 再次加入2倍樣品體積的細(xì)胞裂解液CL，槍頭抽打102

4、0次混勻，加蓋新的封口膜， 3600 rpm離心10分鐘，抽棄上清至剩余約200 µl殘留溶液。3. 配制蛋白酶K和緩沖液GA的混合溶液：200µl緩沖液GA中加入20 µl蛋白酶K (20 mg/ml)溶液，混勻。4. 揭去封口膜，加入220 µl蛋白酶K和緩沖液GA的混合溶液，槍頭抽打20次混勻。5. 加入200 µl緩沖液GB，槍頭抽打20次，加蓋新的封口膜，56放置30分鐘，且每10 min取出輕柔晃動(dòng)。注意不要?jiǎng)×一蝿?dòng)注意不要?jiǎng)×一蝿?dòng)，不要?jiǎng)×一蝿?dòng)，防止液體濺出產(chǎn)生交叉污染。防止液體濺出產(chǎn)生交叉污染。6. 揭去封口膜，加入200 &#

5、181;l 無水乙醇，槍頭抽打20次混勻。7. 將上一步所得溶液和絮狀沉淀都加入一個(gè)96孔吸附板CB3中 （吸附板吸附板放入新的放入新的96孔深孔板中孔深孔板中），3600 rpm離心10 min，倒掉深孔板中的廢液，將吸附板重新放在深孔板上。8. 向96孔吸附板CB3中加入700 µl緩沖液GD（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），3600 rpm離心10 min，倒掉深孔板中的廢液，將吸附板重新放在深孔板上。9. 向96孔吸附板CB3中加入700 µl 漂洗液PW（使用前請先檢查是否已加入無水乙醇），3600 rpm離心10 min，倒掉廢液，將吸附板重新放在深孔板上。

6、10. 向96孔吸附板CB3中加入700 µl 漂洗液PW，3600 rpm離心15min，倒掉廢液，將吸附板重新放在深孔板上。11. 3600 rpm離心10 min，目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除。注意注意：漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)（漂洗液中乙醇的殘留會(huì)影響后續(xù)的酶反應(yīng)（酶切、酶切、PCR等）實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)。 12.將96孔吸附板CB3轉(zhuǎn)入一個(gè)新的96孔深孔板中，向吸附膜的中間部位懸空 滴加50100 µl洗脫緩沖液TB，室溫放置5-10分鐘，3600 rpm離心10min 收集DNA, 用新的封口膜封口后用于下游實(shí)驗(yàn)或者-20保存。注意注意：洗脫液的pH對于

7、洗脫效率有很大影響。對于洗脫效率有很大影響。若用水做洗脫液應(yīng)保證其pH值在7.08.5范圍內(nèi)，范圍內(nèi)，pH值低于7.0會(huì)降低洗脫效率；會(huì)降低洗脫效率；且DNA產(chǎn)物應(yīng)保存 在-20，以防DNA降解降解。 DNA 濃度及純度檢測得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時(shí)間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。 回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測濃度與純度。DNA應(yīng)在OD260處有顯著吸收峰，OD260值為1相當(dāng)于大約50 µg/ml雙鏈DNA、40 µg/ml單鏈DNA。 OD260/OD280比值應(yīng)為1.71.9，如果洗脫時(shí)不使用洗脫緩沖液，而使用去離子水，比

8、值會(huì)偏低，因?yàn)閜H值和離子存在會(huì)影響光吸收值。本產(chǎn)品僅供科研使用。請勿用于醫(yī)藥、臨床治療、食品及化妝品等用途。TIANGEN BIOTECH (BEIJING) CO., LTD. Order:echnical:59822665 Toll-free: 800-990-6057版本號: DE081208TIANamp N96 Blood DNA Kit N96血液基因組DNA提取試劑盒（離心板離心板型）目錄號：目錄號：DP314試劑盒內(nèi)容試劑盒內(nèi)容：內(nèi)容：試劑盒組成 DP314-01 4板 細(xì)胞裂解液CL 4×250 ml 緩沖液GA 2×50 ml 緩沖液GB 2×50 ml 緩沖液GD 2×52 ml 漂洗液PW 3×50 ml 洗脫緩沖液TB 60 ml 蛋白