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文檔簡介
1、植物細(xì)胞工程重點, 老師上課時指點的。 0. 緒論 engineering ): 應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)方法,借助工程學(xué)的試驗方法 或技術(shù),在細(xì)胞水平上改造生物遺傳特性和生物學(xué)特性,已獲得特定的細(xì)胞、細(xì)胞產(chǎn)品或 新生物體的有關(guān)理論和技術(shù)方法的學(xué)科。 細(xì)胞工程的核心技術(shù):細(xì)胞培養(yǎng)與繁殖。 目的:獲得新形狀,新個體,新物質(zhì)。 2 為什么細(xì)胞工程是現(xiàn)代生物技術(shù)的橋梁和紐扣? 細(xì)胞工程把蛋白質(zhì)工程,基因工程, 生物制藥等學(xué)科和代謝工程, 動植物改良, 組織工程等 學(xué)科聯(lián)系在一起。 3 細(xì)胞工程研究范疇: 細(xì)胞工程研究范疇涉及細(xì)胞,組織,器官,胚胎的培養(yǎng),細(xì)胞融合和亞細(xì)胞操作技術(shù)。 4 細(xì)胞工程與相
2、關(guān)學(xué)科的關(guān)系 1)細(xì)胞工程的建立依賴于相關(guān)學(xué)科理論的發(fā)展; 2)細(xì)胞工程為生物學(xué)研究提供了新的實驗體系,從而又促進(jìn)了生物科學(xué)的迅速發(fā)展; 3)細(xì)胞工程必須與其他的生物技術(shù)相結(jié)合才能更好的發(fā)揮作用。 5 細(xì)胞工程的應(yīng)用和意義: 保護(hù)生態(tài)環(huán)境:生物工業(yè)避免化學(xué)工業(yè)污染;名貴藥物的細(xì)胞生產(chǎn)保護(hù)自然資源; 生物醫(yī)藥、生物材料的開發(fā)與應(yīng)用:以生物技術(shù)為依托的新型產(chǎn)業(yè)具有極大的商業(yè)潛力, 也是本世紀(jì)各國幾句競爭的領(lǐng)域之一。 6 本章小結(jié) 現(xiàn)代生物技術(shù)是一個綜合技術(shù)體系; 細(xì)胞工程在現(xiàn)代生物技術(shù)中起著橋梁和紐帶作用; 細(xì)胞工程的產(chǎn)生和發(fā)展依賴于生物科學(xué)相關(guān)領(lǐng)域的理論和技術(shù)發(fā)展; 細(xì)胞工程技術(shù)在現(xiàn)代農(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)
3、以及工業(yè)生產(chǎn)中具有廣泛的應(yīng)用前景。題型為:名詞解釋, 填空,單選,判斷,簡答。 1) 改善農(nóng)業(yè)生產(chǎn)技術(shù):動植物品種改良與繁殖; 1 細(xì)胞工程( cell 2) 1 基本實驗室包括:準(zhǔn)備室,無菌室,培養(yǎng)室。 2 滅菌 接種室滅菌:紫外燈照射 ( 無菌室、超凈臺 ) ;熏蒸滅菌 ( 無菌室 ) ;噴霧消毒 ( 超凈臺 ; 無菌 室)。 接種工具、容器的滅菌:干熱滅菌或濕熱滅菌。在無菌操作時,把鑷子、剪刀、解剖刀等 浸入 95%的酒精中,使用之前取出在酒精燈火焰上灼燒滅菌。冷卻后,立即使用。 培養(yǎng)基:一般用高溫蒸汽滅菌。 合物 )。(注:加粗字體部分的答案不確定是否如此) 4 常用的植物激素:生長素
4、( Auxins );細(xì)胞分裂素( Cytokinins );赤霉素 (GA) 。 生長素 / 細(xì)胞分裂素。高:有利于根的形成和愈傷組織的形成;適中:有利于根芽的分化;低: 有利于芽的形成 5常用培養(yǎng)基: MS培養(yǎng)基,White培養(yǎng)基,B5培養(yǎng)基,N6培養(yǎng)基。其中, N6培養(yǎng)基是中國人朱 至靑發(fā)明的培養(yǎng)基。 6 植物離體培養(yǎng)類型:組織培養(yǎng),器官培養(yǎng),細(xì)胞培養(yǎng)。 7 外植體取材原則。 根據(jù)培養(yǎng)需求選擇植物部位; 多年生植物注意樹齡和季節(jié); 在不影響培養(yǎng)目的的前提下盡可能選擇自然繁殖器官作為外植體。 8 外植體滅菌:外植體 -清洗整理 - 殺菌劑滅菌 -無菌水清洗。 外植體無菌處理:組織清洗 -7
5、0%酒精浸1030s-滅菌劑處理-無菌水涮洗。(此步驟應(yīng)在超凈臺 上完成) ?。哼@兩個知識點好像說的是同一個意思,大家自己看著辦) 9 本章小結(jié)。 細(xì)胞工程的核心是無菌操作和培養(yǎng);1.第一章 1) 2) 4) 不耐熱類物質(zhì)的滅菌。過濾除菌:某些激素(如天然生長素 lAA、玉米素 ZT、赤霉素 GA 等)、維生素、抗生素等不耐熱或射線照射的物質(zhì)。 3 培養(yǎng)基基本成分 :水,無機(jī)鹽(大量元素和微量元素);有機(jī)成分,激素和其他。 培養(yǎng)基其他成分:瓊脂糖,活性炭,附加復(fù)合成分( 碳水化合物,維生素,肌醇,天然復(fù) 實驗室建立在滿足技術(shù)要求的同時要經(jīng)濟(jì)高效和實用; 設(shè)備配置應(yīng)根據(jù)工作性質(zhì)而定; 培養(yǎng)基是細(xì)
6、胞生長的必需營養(yǎng),根據(jù)細(xì)胞類型確定適宜配方; 適宜的外植體是培養(yǎng)的前提,光照、溫度是植物離體培養(yǎng)的基本條件。 2. 第二章 1 細(xì)胞全能性: 一個細(xì)胞所具有的產(chǎn)生完整生物個體的固有能力稱之為細(xì)胞的全能性。 脫分化 :培養(yǎng)條件下使已分化的細(xì)胞 回復(fù)到原始無分化狀態(tài)或分生細(xì)胞狀態(tài)的過程。 再分化: 離體條件下,脫分化后具有分生能力的細(xì)胞,再經(jīng)過細(xì)胞分化, 官、形成新個體的過程。 愈傷組織: 由外植體組織增生的細(xì)胞產(chǎn)生的一團(tuán)不定型的疏散排列的薄壁細(xì)胞。 形成。 7 本章小結(jié)。 細(xì)胞全能性是細(xì)胞工程的基本理論基礎(chǔ); 細(xì)胞全能性的表達(dá)能力與細(xì)胞分化程度有關(guān); 離體培養(yǎng)下細(xì)胞全能性表達(dá)是通過細(xì)胞分化和再分
7、化實現(xiàn)的; 器官發(fā)生和體細(xì)胞胚胎發(fā)生是植物細(xì)胞再生個體的基本途徑; 植物細(xì)胞離體再生能力是受遺傳調(diào)控和培養(yǎng)條件的雙重調(diào)節(jié)。 3. 第三章 1 細(xì)胞工程技術(shù)的雙重性:遺傳穩(wěn)定性,變異性。重新形成各類組織和器 2 離體培養(yǎng)條件下,細(xì)胞全能性的表達(dá)是通過細(xì)胞 脫分化 和 再分化 實現(xiàn)的。 3 細(xì)胞的脫分化分為 3 個階段: 啟動階段:液體蛋白體出現(xiàn)是脫分化的標(biāo)志; 演變階段:細(xì)胞核向中央移動,質(zhì)體演變成原生質(zhì)體; 終結(jié)階段:細(xì)胞回復(fù)到分生細(xì)胞狀態(tài),細(xì)胞分裂即將開始。 4 細(xì)胞脫分化調(diào)控的實質(zhì)就是 G0 期細(xì)胞回復(fù)到分裂周期的調(diào)控過程 5 器官發(fā)生方式:先芽后根,先根后芽,芽根同時。 6 器官發(fā)生過程
8、。 經(jīng)過愈傷組織的器官發(fā)生:愈傷組織的形成;生長中心的形成;器官原基及器官形成。 不經(jīng)過愈傷組織的器官發(fā)生:細(xì)胞第一次平周分裂; 生長中心形成;原初分生組織; 芽原基 2 本章小結(jié) 細(xì)胞工程技術(shù)對培養(yǎng)細(xì)胞具有遺傳穩(wěn)定性和變異性的雙重影響 體細(xì)胞變異在培養(yǎng)類型中具有普遍性,在變異形狀上具有局限性 體細(xì)胞變異可自發(fā)產(chǎn)生, 也可以通過理化因子誘導(dǎo)產(chǎn)生體細(xì)胞變異包括染色體數(shù)量和結(jié)構(gòu)變異, 但大多數(shù)可利用變異多為基因突變 利用體細(xì)胞變異可以直接培育品種也可作為生物學(xué)相關(guān)研究的基礎(chǔ)材料 4. 第四章 1 廣義的組織培養(yǎng)依 explant 不同,可分為:器官培養(yǎng),莖尖分生組織培養(yǎng),愈傷組織培養(yǎng),細(xì) 胞培養(yǎng),
9、原生質(zhì)體培養(yǎng)。 2 植物脫毒的基本原理和流程。 基本原理:病毒在植物體內(nèi)的分布具有不均勻性。 基本流程: ( 1)母體植株的選擇和預(yù)處理;( 2)莖尖分生組織培養(yǎng)再生植株;( 3)脫毒效果 檢測;( 4 )脫毒苗的保存與繁殖。 3 脫毒植物的鑒定方法: 直觀鑒定,指示植物鑒定,抗血清反應(yīng)鑒定,電鏡技術(shù)鑒定。 4 離體無性繁殖(快繁):人工控制的無菌環(huán)境下,使植物在培養(yǎng)基上繁殖的技術(shù),跟常規(guī)繁殖 技術(shù)相比是一種微型操作過程,有時稱之為微繁。 5 離體無性繁殖的操作過程:外植體選擇;外植體培養(yǎng);植物再生育增殖;生根培養(yǎng)。 6 花藥培養(yǎng)屬于器官培養(yǎng)范疇,花粉培養(yǎng)也稱小孢子培養(yǎng),屬于細(xì)胞培養(yǎng)范疇。 7
10、 花藥培養(yǎng) : 把發(fā)育到一定階段的花藥接種在人工培養(yǎng)基上 花粉培養(yǎng) (小孢子培養(yǎng) ): 從花藥中分離出花粉粒 ,使之成為分散的或游離狀態(tài) , 通過培養(yǎng)使花粉 粒脫分化 , 進(jìn)而發(fā)育成完整植株的過程。 1)縮短育種年限;( 2)提高了目標(biāo)基因型的選擇效 率;( 3)誘變育種中的作用;( 4)利于篩選隱性突變體,提高誘變效率,( 5)利于獲得 優(yōu)良植株,( 6)應(yīng)用于遠(yuǎn)緣雜交,克服不育性。 9 胚胎培養(yǎng): 胚胎培養(yǎng)是將植物的胚胎與母體分離,培養(yǎng)在已知化學(xué)成分的培養(yǎng)基獲得再生植株 的培養(yǎng)過程。 幼胚培養(yǎng):對發(fā)育早期的胚進(jìn)行培養(yǎng)。 幼胚培養(yǎng)的方法: 1、材料的選擇與滅菌:確定授粉后天數(shù)與胚胎發(fā)育的相應(yīng)
11、關(guān)系,對于遠(yuǎn)緣雜 種胚,要在其夭折前培養(yǎng)。 2、幼胚的分離及培養(yǎng)。( 1)分離:先取出胚珠,剝離珠被,取出完,使其發(fā)育和分化成為植株的過程。 8 花藥或花粉培養(yǎng)在作物育種中的作用: 整的幼胚,后培養(yǎng)。( 2 )培養(yǎng):胚離體培養(yǎng)發(fā)育時期分為異養(yǎng)期和自養(yǎng)期。在心形期轉(zhuǎn)入自養(yǎng) 生長。對于難培養(yǎng)的幼胚,可利用胚乳看護(hù)培養(yǎng)。 10 植物胚乳的發(fā)育特性。 植物胚乳可以分為兩大類:被子植物胚乳和裸子植物胚乳。 被子植物胚乳是雙受精的產(chǎn)物, 它由二個極核和一個雄配子融合形成, 屬于三倍體組織。 接分裂發(fā)育而成,因此它是單倍體組織。 胚乳按發(fā)育初期是否形成細(xì)胞壁可分為三種類型: 階段時間長短因植物不同而異。 細(xì)
12、胞型胚乳 :和核型胚乳不同, 細(xì)胞型胚乳的發(fā)育不經(jīng)過游離核階段而按正常的細(xì)胞分裂方式進(jìn) 行。胚乳初生核第一次分裂后即形成兩個子細(xì)胞,以后每次分裂都形成細(xì)胞壁。 沼生目型胚乳 :沼生目型胚乳是核型與細(xì)胞型之間的中間型。初生胚乳核第一次分裂為細(xì)胞型, 以后兩個細(xì)胞中的核進(jìn)行游離核分裂。單子葉植物的某些類群。 11 本章小結(jié) 植物脫毒快繁是無性植物種苗生產(chǎn)的最有效技術(shù) 植物花胚是創(chuàng)造單倍體的有效途徑,被子植物胚乳培養(yǎng)可獲得三倍體 外植體選擇是植物組織培養(yǎng)的基本環(huán)節(jié),根據(jù)不同培養(yǎng)目的確定取材原則 培養(yǎng)物增殖方式和植株再生途徑直接影響遺傳穩(wěn)定性,應(yīng)根據(jù)培養(yǎng)類型和目的慎重選擇 5. 第五章(細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是
13、重點) 1 懸浮培養(yǎng): 懸浮培養(yǎng)是指將單個游離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖的技術(shù)。 2 由愈傷組織誘導(dǎo)進(jìn)行懸浮培養(yǎng)的過程(由組織器官經(jīng)愈傷組織分離單細(xì)胞)。 1) 誘導(dǎo)產(chǎn)生愈傷組織; 2) 愈傷組織反復(fù)繼代,使組織不斷增殖,提高愈傷組織松散性; 3)將愈傷組織在液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),建立懸浮培養(yǎng)物。 3 進(jìn)行細(xì)胞懸浮培養(yǎng)時, 幼胚、胚軸、子葉 是最常使用的外植體。 長迅速。(這道題很重要,你懂的所以, 在染色體倍性上它 裸子植物很特殊, 它的胚乳在受精前就已形成。 裸子植物的胚乳為配子體的一部分, 由大孢子直 核型胚乳 :胚乳最初發(fā)育經(jīng)過一段游離核階段, 絕大多數(shù)被子植物的胚乳屬于核型
14、胚乳。 游離核 4 一個成功的懸浮細(xì)胞培養(yǎng)體系必須滿足三個條件: 懸浮培養(yǎng)物分散性良好, 均一性好, 細(xì)胞生 5 細(xì)胞同步化: 細(xì)胞同步化是指統(tǒng)一懸浮培養(yǎng)體系的所有細(xì)胞都同時通過細(xì)胞周期的某個特定時 期。 6 獲得同步化細(xì)胞的方法: 饑餓法,抑制劑法,分選法,低溫處理。 7 單細(xì)胞培養(yǎng)的方法。 平板培養(yǎng)法 :將一定密度的懸浮細(xì)胞與融化的瓊脂培養(yǎng)基均勻混合后平鋪一薄層在培養(yǎng)皿底上的 培養(yǎng)法; 看護(hù)培養(yǎng) :操作方法是在固體培養(yǎng)基上置入一塊活躍生長的愈傷組織, 培養(yǎng)基上讓其迅速生長; 微室培養(yǎng) :對單細(xì)胞活體連續(xù)觀察。 這一方法同樣也可用于原生質(zhì)體培養(yǎng)觀察細(xì)胞壁的再生與細(xì) 胞分裂過程; 雙層濾紙植板
15、培養(yǎng) :Horsch 等( 1980)將平板培養(yǎng)與飼養(yǎng)層培養(yǎng)技術(shù)相結(jié)合,建立了雙層濾紙 植板培養(yǎng)方法。 8 本章小結(jié) 細(xì)胞規(guī)?;囵B(yǎng)有可能成為新型生化工業(yè)的重要途徑,細(xì)胞懸浮培養(yǎng)是細(xì)胞規(guī)?;囵B(yǎng)的基礎(chǔ) 各種單細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞克隆的基礎(chǔ)技術(shù),也適用于植物花粉培養(yǎng)和原生質(zhì)體培養(yǎng) 高等生物細(xì)胞規(guī)?;囵B(yǎng)體系的建立必須與生物反應(yīng)器的研制相匹配 根據(jù)目的產(chǎn)物建立包括培養(yǎng)基、種細(xì)胞、培養(yǎng)方式等在內(nèi)的一系列配套技術(shù)是商業(yè)化的前提 6. 第六章 1 原生質(zhì)體: 指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是說一個被質(zhì)膜所包圍的裸露細(xì)胞。 2 本章小結(jié) 原生質(zhì)體是植物除去細(xì)胞壁后的裸露細(xì)胞,是進(jìn)行各種細(xì)胞操作的理想系統(tǒng) 原生質(zhì)體的分
16、離和純化是原生質(zhì)體操作和培養(yǎng)的前提 分離的原生質(zhì)體活性受供體材料和分離條件的影響 原生質(zhì)體屬于細(xì)胞工程精細(xì)技術(shù),培養(yǎng)技術(shù)的成熟程度將直接影響體系的應(yīng)用 性細(xì)胞原生質(zhì)體操作因具有眾多的優(yōu)點而成為未來研究的熱點 7. 第七章 1 體細(xì)胞雜交: 兩個離體細(xì)胞通過一定誘導(dǎo)技術(shù)使質(zhì)膜接觸而融合在一起隨后導(dǎo)致兩個細(xì)胞核物 質(zhì)融合的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交則是指除去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體融合。 2 根據(jù)融合時細(xì)胞的完整程度,原生質(zhì)體融合可分為兩大類: 對稱融合 ( asymmetric fusion )即兩個完整的細(xì)胞原生質(zhì)體融合。 非對稱融合 ( symmetric fusion )利用物理或化學(xué)方法使某親本的核或
17、細(xì)胞質(zhì)失活后再進(jìn)行融 合。 3. 原生質(zhì)體融合的方法。 PEG融合 優(yōu)點:融合成本低,勿需特殊設(shè)備;融合子產(chǎn)生的異核率較高;融合過程不受物種限制。 缺點:融合過程繁瑣, PEG可能對細(xì)胞有毒害。 電融合 與PEG融合比較起來,電融合有三大優(yōu)點:不存在對細(xì)胞的毒害問題;融合效率高; 融合技術(shù)操作簡便。 4 體細(xì)胞雜種的運(yùn)用 再在愈傷組織上放一小片 濾紙, 待濾紙濕潤后將細(xì)胞接種到濾紙上。 當(dāng)培養(yǎng)細(xì)胞長出微小細(xì)胞團(tuán)以后, 將其直接轉(zhuǎn)置瓊脂 獲得新物種;獲得新種質(zhì)和新品種;轉(zhuǎn)移細(xì)胞質(zhì)基因控制形狀。 5 影響原生質(zhì)體融合的因素 原生質(zhì)體質(zhì)量對細(xì)胞的融合起著至關(guān)重要的作用,高質(zhì)量的原生質(zhì)體是細(xì)胞融合的首
18、要條件; 融合方法;融合參數(shù),包括各種融合液都應(yīng)選擇適當(dāng)。 6 本章小結(jié) 植物體細(xì)胞雜交即原生質(zhì)體融合,是獲得胞質(zhì)雜種的理想途徑 體細(xì)胞雜交在遠(yuǎn)緣育種和新物種、新資源創(chuàng)造中具有深遠(yuǎn)意義 原生質(zhì)體融合技術(shù)主要有 PEG融合和電融合 雜種的成功培養(yǎng)是建立在原生質(zhì)體培養(yǎng)技術(shù)上的,選擇和鑒定是獲得細(xì)胞雜種的關(guān)鍵 提高融合效率和培養(yǎng)重復(fù)性是該技術(shù)研究的重點 細(xì)胞雜種是體細(xì)胞遺傳研究的良好體系 8. 第八章 1 人工種子: 任何一種繁殖體,無論是在涂膜膠囊中包裹的、裸露的或經(jīng)過干燥的,只要能夠發(fā) 育成完整的植株,均可稱之為人工種子。 2 人工種子的類型。 根據(jù)包被的需要程度可分為三類: 裸露的或休眠的繁殖
19、體、人工種皮包被的繁殖體、水凝膠包埋再包被人工種皮的繁殖體。 根據(jù)繁殖體的類型可分為兩類: 體細(xì)胞胚人工種子、非體細(xì)胞胚人工種子。 3 人工種子的生產(chǎn)流程。 繁殖體的人工誘導(dǎo)與生產(chǎn)增殖;繁殖體的篩選和預(yù)處理;人工種子的包埋。 4 本章小結(jié) 人工種子是在實驗室人工控制條件下生產(chǎn)的繁殖體,其應(yīng)用具有眾多生物學(xué)意義和社會意義 人工種子繁殖體包括體細(xì)胞胚、微型變態(tài)器官和微芽,根據(jù)植物種類不同可適當(dāng)選擇 人工種子應(yīng)用的基本條件是繁殖體的工廠化生產(chǎn)和配套技術(shù)的成熟 無性繁殖的植物種子有望最先得以應(yīng)用 9. 第九章(了解即可) 1 本章小結(jié) 生物細(xì)胞的低溫凍存是防止生物種質(zhì)滅絕的重要途徑 低溫凍存技術(shù)的應(yīng)用
20、取決于凍存技術(shù)和再培養(yǎng)技術(shù)的成熟程度 根據(jù)細(xì)胞類型選擇凍存和解凍方法是再培養(yǎng)成功的前提 凍存和恢復(fù)過程中的遺傳變異值得關(guān)注 各位,這是植物細(xì)胞工程平時的小測題目,答案是我自己填上去的,可以參考下 一、名詞解釋: 細(xì)胞工程: 應(yīng)用細(xì)胞生物學(xué)和分子生物學(xué)方法, 借助工程學(xué)的試驗方法或技術(shù), 在細(xì)胞水平上改 造生物遺傳特性和生物學(xué)特性, 已獲得特定的細(xì)胞、 細(xì)胞產(chǎn)品或新生物體的有關(guān)理論和技術(shù)方法 的學(xué)科 細(xì)胞脫分化: 培養(yǎng)條件下使一個已經(jīng)分化的細(xì)胞回復(fù)到原始無分化狀態(tài)或者分生細(xì)胞狀態(tài)的過程 就是細(xì)胞脫分化 體細(xì)胞無性系: 把由任何形式的細(xì)胞培養(yǎng)所產(chǎn)生的植株統(tǒng)稱為體細(xì)胞無性系 懸浮培養(yǎng): 是指將單個游
21、離細(xì)胞或小細(xì)胞團(tuán)在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)增殖的技術(shù) 花粉培養(yǎng): 從花藥中分離出花粉粒 ,使之成為分散的或游離狀態(tài) 育成完整植株的過程 . 外植體: 指用于離體培養(yǎng)的活的植物組織和器官等材料,它是植物離體培養(yǎng)的基礎(chǔ)材料 極性:指植物的器官、 組織甚至單個細(xì)胞在不同軸向上存在著某種形態(tài)結(jié)構(gòu)及生理生化上的梯度 差異,通過培養(yǎng)使花粉粒脫分化 ,進(jìn)而發(fā) 植物原生質(zhì)體:指除去細(xì)胞壁的細(xì)胞或是說一個被質(zhì)膜所包圍的裸露細(xì)胞。 植物體細(xì)胞雜交:兩個離體細(xì)胞通過一定誘導(dǎo)技術(shù)使質(zhì)膜接觸而融合在一起隨后導(dǎo)致兩個細(xì)胞 核物質(zhì)融合的技術(shù)。植物體細(xì)胞雜交則是指除去細(xì)胞壁的原生質(zhì)體融合 細(xì)胞同步化:是指統(tǒng)一懸浮培養(yǎng)體系的所有細(xì)
22、胞都同時通過細(xì)胞周期的某個特定時期 種質(zhì)資源低溫保存: 是指將植物的細(xì)胞或組織經(jīng)過防凍處理后,在 方法。 、填空題: 3、花粉原生質(zhì)體的具有 單倍體、原生質(zhì)體雙重優(yōu)點。 三、問答: 1、什么是細(xì)胞全能性?其內(nèi)在含義有哪些? 一個細(xì)胞所具有的產(chǎn)生完整生物個體的固有能力稱之為細(xì)胞的全能性。 內(nèi)在含義: 細(xì)胞全能性的相對性 (1 )不是所有基因型的所有細(xì)胞在任何條件下都具有良好的培養(yǎng)反應(yīng) (2 )即使對于植物細(xì)胞而言,細(xì)胞全能性也并不意味著任何細(xì)胞均可以直接產(chǎn)生植物個體 (3 )動、植物細(xì)胞全能性的表現(xiàn)程度存在明顯的差異 2、什么是體細(xì)胞胚?其內(nèi)含包括哪些方面? 概念:離體培養(yǎng)下沒有受精過程, 但經(jīng)
23、過了胚胎發(fā)生過程形成的胚的類似物 體細(xì)胞還是生殖細(xì)胞),統(tǒng)稱為體細(xì)胞胚或胚狀體。 內(nèi)含有: (1) 體細(xì)胞胚是離體培養(yǎng)的產(chǎn)物,只限于離體范圍使用,以區(qū)別于無融合生殖胚 (2) 體細(xì)胞胚起源于非合子細(xì)胞,以區(qū)別于合子胚 (3) 體細(xì)胞胚形成經(jīng)過了胚胎發(fā)育過程,以區(qū)別與離體培養(yǎng)器官發(fā)生形成個體的途徑 3、植物脫毒原理以及基本流程? 原理:病毒在植物體內(nèi)的分布具有不均勻性-80 C以下的超低溫下保存的 1、離體培養(yǎng)中器官發(fā)生的方式有: 先芽后根、先根后芽、在愈傷組織的不同部位形成芽和 2、細(xì)胞工程技術(shù)的雙重性: 遺傳穩(wěn)定性、變異性 4、原生質(zhì)體融合的種類: 對稱融合 非對稱融合 (不管培養(yǎng)的細(xì)胞是
24、基本流程: 脫毒效果檢測 (1) 母體植株的選擇和預(yù)處理 (2) 莖尖分生組織培養(yǎng)再生植株 (4) 脫毒苗的保存與繁殖 4、人工種子的概念和類型? 概念:人工種子又稱合成種子或體細(xì)胞種子,任何一種繁殖體, 無論是在涂膜膠囊中包裹的、 裸 露的或經(jīng)過干燥的,只要能夠發(fā)育成完整的植株,均可稱之為人工種子。 類型:人工種子根據(jù)包被情況和繁殖體類型有兩種分類方法 (1)根據(jù)包被的需要程度可分為三類: 裸露的或休眠的繁殖體、人工種皮包被的繁殖體、水凝膠包埋再包被人工種皮的繁殖體 (2)根據(jù)繁殖體的類型可分為兩類: 體細(xì)胞胚人工種子、非體細(xì)胞胚人工種子 5、金屬制品、玻璃器皿、活性物質(zhì)、溶液分別采用何種滅
25、菌的方法? (不好意思,這題的答案 不是很確定) 金屬制品:使用前可采用干熱滅菌;使用過程中的滅菌通常是將其浸泡在 70 %酒精中,再以火 焰將酒精燒去,待冷卻后使用。 玻璃器皿:干熱滅菌: 160-180 C ,1.5-2.0h ;濕熱滅菌:121 C , 20-30min 活性物質(zhì):不耐熱類物質(zhì):過濾滅菌:某些激素(如天然生長素 IAA、玉米素 ZT、赤霉素 GA 等)、維生素、抗生素等不耐熱或射線照射的物質(zhì)。 溶液:不穩(wěn)定的藥品溶液:過濾滅菌。穩(wěn)定的溶液:高壓蒸汽滅菌 填空題20” 1、培養(yǎng)基的固化劑有瓊脂、 等。 2、植物細(xì)胞工程是一門以 條件下 的植物組織和細(xì)胞的 3、 時變異幅度大
26、的品系,可以從這些群體中選 ,進(jìn)行 ,生產(chǎn)出 的大量種 苗。 4、 是區(qū)別于 的一種特殊的 誘變方法。 5、 技術(shù)用于克服遠(yuǎn)源雜交不親和, 技術(shù)用于得到雜 合細(xì)胞, 技術(shù)只可用于品種復(fù)壯。 6、組培中污染的原因主要有: 設(shè)備和 備、 等原因。 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 9、 10、 判斷題10” 植物組織培養(yǎng)是植物細(xì)胞工程的同義詞或近義詞 培養(yǎng)基不凝固可能是缺鈣。 MS培養(yǎng)基沒有加入氯化鈣,但是加入了碘化鉀。 由不定胚誘導(dǎo)出愈傷組織是脫分化而不是再分化。 植物組織培養(yǎng)中出現(xiàn)的突變有一些只是表型上的變異。 在植物組織培養(yǎng)的滅菌與處理中,熱療法是具有普遍效果的方 化學(xué)滅菌劑中的次氯酸鈉是
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