哮喘患者痰嗜酸性粒細(xì)胞凋亡與IL25 及sIL22R 相關(guān)性的研究

1、哮喘患者痰嗜酸性粒細(xì)胞凋亡與I L25及sI L22R相關(guān)性的研究許軍陽江鳳霞邱元吉(中山大學(xué)第五附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科,珠海519000中國圖書分類號R392文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號10002484X(20040920646202摘要目的:探討哮喘患者痰液嗜酸性粒細(xì)胞凋亡(E OS與I L25和sI L22R的關(guān)系。方法:選擇哮喘患者(哮喘組急性發(fā)作期和緩解期30例,20名健康人(正常組作對照。分別采用E LIS A法測定患者痰液白細(xì)胞介素5(I L25和可溶性白介素2受體(sI L22R,應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測痰液E OS凋亡。結(jié)果:哮喘患者急性發(fā)作期和緩解期痰液中I L25和sI L22R明顯升高,

2、E OS凋亡率增高,而正常組未發(fā)現(xiàn)E OS凋亡。急性發(fā)作期哮喘患者E OS凋亡率與I L25呈明顯的負(fù)相關(guān),r為-0178。結(jié)論:哮喘患者氣道局部有E OS凋亡現(xiàn)象,并受到I L25相互作用的調(diào)節(jié)。sI L22R與E OS凋亡率無明顯的相關(guān)性。關(guān)鍵詞哮喘;細(xì)胞因子;嗜酸性粒細(xì)胞;凋亡;相關(guān)性A kinetic study on the relationship betw een I L25,sI L22R and eosinophil apoptosis in asthmatic patients air w ay inflammationXU Jun2Yang,JIANG Feng2Xia,

3、QIU Yun2Ji.Department o f Respirtatory Medicine,The Fifth Hospital,Zhongshan Univer sity,Guangdong,Zhuhai,519000,ChinaAbstractObjective:T o explore the relationship between eosinophil(E OSand I L25,sI L22R in asthmatic patients in sputum.Meth2 ods:Thirty asthmatic patients(asthmatic groupduring exac

4、erbation and stable stage and twenty healthy pers ons were selected.I L25and sI L22R in sputum were determined by E LIS A,E OS apoptosis was identified by flow cytometre.R esults:I L25,sI L22R and E OS apoptosis percentages in the patients during exacerbation and stable stage in sputum were increase

5、d significantly,.There were no expression of E OS apoptosis in the healthy pers ons.Data analyses revealed a negative correlation between E OS apoptosis and the levels of I L25,and a closer correlation between the percentages and I L25.Conclusion:E OS underwent apoptosis in asthmatic airway and E OS

6、 apoptosis was regulated by I L25.There were no correlation between E OS apoptosis and sI L22R.K ey w ordsAsthma;Cytokines;E osinophil;Apoptopsis;relativity支氣管哮喘是以嗜酸性粒細(xì)胞(eosiniphil E OS、肥大細(xì)胞反應(yīng)為主的氣道變應(yīng)性炎癥(AAI和氣道高反應(yīng)性(AHR為特征的疾病。Sim on等認(rèn)為E OS凋亡受抑制可能是E OS增多的重要原因, E OS凋亡有利于哮喘過程中E OS炎癥的消退1。我們對30例哮喘患者痰液白細(xì)胞介素

7、5(I L25、可溶性白介素2受體(sI L22R和E OS凋亡進(jìn)行觀察,探討其變化規(guī)律。1材料與方法111材料來源哮喘患者(哮喘組急性發(fā)作期和緩解期30例,近2個月來未用過皮質(zhì)激素。男16例,女14例,年齡1365歲,平均年齡35±11歲。疾病診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2003年我國制定的支氣管哮喘防治指南2。所有患者排除心、肝、腎疾患、惡性腫瘤和肺部感染等。另選20名健康人(正常組作對作者簡介:許軍陽(1961年-,男,醫(yī)學(xué)碩士,主任醫(yī)師,主要從事哮喘免疫方面的研究。照,其中男9名,女11名,年齡1565歲,平均3913±1017歲。用3%NaCl霧化吸人,回收痰液于1500 rmi

8、n離心10分鐘,上清液貯于-20,在1月內(nèi)作細(xì)胞因子檢測。細(xì)胞用1ml Hank液重懸,在6小時內(nèi)作凋亡檢測。I L25、sI L22R測定試劑盒由Medgenix 公司提供。112痰液I L25、sI L22R測定用E LIS A方法測定。113E OS凋亡11311E OS的標(biāo)記痰液置10ml離心管中,加等量生理鹽水稀釋,離心洗滌(1200rmin,5分鐘,去上清;加入3ml生理鹽水重新懸浮細(xì)胞;取70m孔徑尼龍篩網(wǎng)過濾,濾過液低速離心(1000rmin,3分鐘,去上清;調(diào)整細(xì)胞濃度為106ml-1,加入C D49d2 FITC和C D152PE各10l,按操作程序在室溫避光孵育15分鐘后

9、,加入5ml P BS緩沖液離心洗滌,去上清。11312流式細(xì)胞儀檢測凋亡率根據(jù)有關(guān)方法并加以改進(jìn)3。114統(tǒng)計學(xué)分析實驗數(shù)據(jù)均以x±s表示。組646中國免疫學(xué)雜志2004年第20卷間比較采用兩樣本均數(shù)資料t 檢驗,兩變量的相關(guān)程度采用直線相關(guān)分析。2結(jié)果211哮喘患者痰液I L 25、sI L 22R 和E OS 凋亡率的變化哮喘組急性發(fā)作期和緩解期患者痰液I L 25和sI L 22R 的表達(dá)較正常組明顯增加(P <0105,緩解期E OS 的凋亡率略較急性期升高(見表1。212急性發(fā)作期哮喘患者痰液E OS 凋亡率與I L 25和sI L 22R 的相關(guān)關(guān)系哮喘組急性發(fā)作

10、期患者痰液E OS 凋亡率與I L 25呈負(fù)相關(guān)(見圖1,r 值分別為-0178(P <0105,而與sI L 22R 無明顯相關(guān)性。表1哮喘組和正常組I L 25、sI L 22R 和EOS 凋亡率的變化(x ±s T ab 11Concentrations of I L 25,sI L 2sR and EOS apoptosisinpercentage in asthm atic and control groups(x ±s G roupsnI L 25(ng L sI L 22R (ng L E OS apoptosispercentage (%C ontro

11、l group 2010125±7133365132±1321560197S table group1101N ote :1P <0105com pared with control group.圖1急性發(fā)作期哮喘患者痰液E OS 凋亡率與I L 25的相關(guān)性Fig.1Correlation betw een I L 25and EOS apoptosis percentagein asthm atic p atients during exacerb ation3討論哮喘氣道局部存在嗜酸性細(xì)胞凋亡現(xiàn)象,可能是炎癥消散的重要途徑。有證據(jù)表明凋亡亦參與炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié),凋

12、亡小體(apoptotic body ,很快被鄰近的薄壁細(xì)胞和巨噬細(xì)胞吞噬,不觸發(fā)機(jī)體免疫2炎癥反應(yīng),因此在炎癥消散過程中具有生理性保護(hù)意義4。我們在動態(tài)觀察中發(fā)現(xiàn),哮喘急性發(fā)作期患者痰液中E OS 明顯增多,而緩解期逐漸減少,說明哮喘患者確實存在氣道中E OS 的浸潤。緩解期E OS 的凋亡率較急性期升高,表明E OS 凋亡參與和調(diào)節(jié)哮喘患者的免疫2炎癥反應(yīng)。E OS 凋亡機(jī)制的實驗表明,I L 23、I L 25能明顯抑制E OS 的凋亡,而且在一定范圍內(nèi)呈劑量和時間依賴關(guān)系5。本研究證實,急性發(fā)作期哮喘患者痰液E OS 凋亡率與I L 25呈明顯負(fù)相關(guān),說明I L 25確實對E OS 凋

13、亡有明顯的抑制作用。我們還發(fā)現(xiàn)哮喘患者痰液sI L 22R 與E OS 凋亡率無明顯的相關(guān)性,這可能與sI L 22R 是T 細(xì)胞激活的一個特異性標(biāo)志和敏感的定量指標(biāo),對細(xì)胞的增值和分化起免疫調(diào)節(jié)作用,而對E OS 的凋亡無明顯抑制或促進(jìn)作用有關(guān)。4參考文獻(xiàn)1S im on H U ,Blaser K.Inhibition of programmed eosinophil death ,a key pathogenic event for eosinophilia.Immunol.T oday ,1995;16:53255.2中華醫(yī)學(xué)會呼吸病學(xué)分會哮喘學(xué)組.支氣管哮喘防治指南J .中華結(jié)核和呼吸雜志,2003;26(3:1322138.3彭黎明.6種細(xì)胞凋亡檢測方法的比較J .中華病理學(xué)雜志,1999;19(1:55258.4K odama T ,M asuyama T ,M iyata S et al .K inetics of apoptosis in the lung of mice with allergic airway in flammation J .Clin Exp Allergy ,1998;28(11:1432158.5S tern M ,M eagher L ,Savil J et al .Apoptosis in human eosin