肺癌及癌旁組織EGR-1基因表達(dá)及與臨床病理的關(guān)系

1、肺癌及癌旁組織EGR-1基因表達(dá)及與臨床病理的關(guān)系         07-09-22 16:07:00     編輯：studa20                     作者：李曉斌毛志福房定珠張軍謝冰生左順慶  【關(guān)鍵詞】  肺癌【摘要】  目

2、的  通過研究肺癌及癌旁組織中早期生長反應(yīng)基因1（early growth response gene-1，EGR-1）的表達(dá)，探討EGR-1 mRNA表達(dá)與肺癌患者臨床病理生理特征的關(guān)系。方法  應(yīng)用RT-PCR技術(shù)檢測30例肺癌患者EGR-1 mRNA表達(dá)情況，并分析其臨床意義。結(jié)果  EGR-1 mRNA在正常肺組織表達(dá)最高，在癌旁組織表達(dá)次之，在癌灶中心組織表達(dá)最低；EGR-1 mRNA表達(dá)水平與患者年齡、性別無關(guān)，與原發(fā)腫瘤的部位無關(guān)；與癌細(xì)胞分化程度、P-TNM分期及有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移有密切的關(guān)系。結(jié)論  肺癌組織中抑癌基因EGR-1 mRNA表

3、達(dá)減弱可能參與了肺癌演化的過程。肺癌組織EGR-1 mRNA表達(dá)水平可作為肺癌惡性度及預(yù)后判斷的一個指標(biāo)。    【關(guān)鍵詞】  肺癌；病理生理學(xué)；基因，腫瘤抑制；基因表達(dá)Expression of EGR-1 mRNA in lung cancer and peri-cancer tissue and its correlation to clinicopathologic features【Abstract】  Objective  To study the expression of early growth response -

4、1（EGR-1） gene in  lung cancer tissue. To explore the relationship between EGR-1 with the clinicopathologic features of the tumor.Methods  The authors we collected and analyzed the clinicopathologic data of patients（age and sex of patient,primary tumor position,TNM stage, tumor cell differe

5、ntiation degree,lymph node metastasis and so on）.RT-PCR was performed to detect the expression of EGR-1mRNA in 30 cases of lung cancer tissues with peri-cancer tissues and 20 cases of normal lung tissue.Results  The expression of  EGR-1 mRNA was 0.321±0.302, 0.698±0.259 and 1.256

6、±0.271 in lung cancer tissue, pare-cancerous tissue and normal lung tissue,respectively.The expression of EGR-1 mRNA was not associated with age and sex of patients as well as primary tumor position,but related to primary tumor TNM stage and tumor cell differentiation degree and lymph node meta

7、stasis.Conclusion  The result indicates that decreasing level of EGR-1 expression may have a close relationship with lung carcinogenesis, and EGR-1mRNA expression in lung cancer tissue may be regarded as a standard to determine malignant degree and prognosis in lung cancer patients，then it will

8、 be applied to guide clinical treatment.【Key words】  lung cancer;pathophysiology;gene,tumor suppressor;gene expression原發(fā)性支氣管肺癌（又稱肺癌）是我國成年男性中最常見的惡性腫瘤之一。肺癌的發(fā)生發(fā)展是個逐漸演化的過程,該過程涉及到眾多原癌基因的激活和抑癌基因的失活。早期生長反應(yīng)基因（EGR-1）是一種抑癌基因，它的異常與許多癌癥的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)1。抑制細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡是抑癌基因發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)的重要機(jī)制之一。抑癌基因EGR-1的研究近年漸受重視。有關(guān)肺癌與

9、抑癌基因EGR-1的研究少有報道。本文通過對肺癌、癌旁組織及正常肺組織中EGR-1基因表達(dá)情況的研究，探討肺癌演化過程中EGR-1 mRNA表達(dá)情況及其與臨床病理生理特征的關(guān)系，從分子水平上尋找肺癌發(fā)生發(fā)展的理論依據(jù)，指導(dǎo)臨床治療。1  資料與方法1.1  一般資料  收集我院胸外科2003年1月1日2004年9月30日肺癌住院手術(shù)患者30例，男22例，女8例。年齡3079歲，中位年齡58歲。其中中央型肺癌11例，周圍型肺癌19例。全部病例術(shù)前均未接受過化療和放療，術(shù)后均經(jīng)病理證實為非小細(xì)胞肺癌。并收集20例正常肺組織（來源于自發(fā)性氣胸肺大皰切除患者的肺組織）為對

10、照組。每例肺癌標(biāo)本分別切取癌灶、癌旁組織各一小塊，對照組取正常肺組織一小塊，標(biāo)記后-180保存。1.2  試劑及方法  組織總RNA抽提試劑盒購于上海華舜生物工程有限公司，DL-2000Marker購于Takara公司，一步法RT-PCR試劑盒購于大連寶生物工程公司。肺癌組織及癌旁組織為試驗組，正常肺組織為對照組。應(yīng)用RT-PCR測定EGR-1 mRNA表達(dá)：（1）細(xì)胞總RNA提取和鑒定：組織/細(xì)胞總RNA提取按試劑盒說明書進(jìn)行操作，紫外分光光度計測定RNA純度及含量，各樣本OD260/OD280均在1.72.0。（2）引物合成：根據(jù)參考文獻(xiàn)提供的EGR-1、-actin的

11、cDNA序列2由北京賽百盛基因技術(shù)公司合成，純化。引物序列如下：EGR-1 sense 5-TGC AGA TCT TGA CCC GTTC-3  Antisense  5-GGA GAT GGT GCT GAG GACG-3；產(chǎn)物長度：489bp；-actin  sense  5-CCA AGG CCA ACC GCG AGA G-3  Antisense  5-AGG GTA CAT GGT GGT GCC GC-3；產(chǎn)物長度：587bp。（3）RT-PCR反應(yīng)：按一步法RT-PCR試劑盒推薦條件操作，以-actin為內(nèi)參照，反應(yīng)條件為94變性1min，57退火2min，72延伸2min，共行30次循環(huán)。（4）電泳：2%瓊脂糖凝膠電泳，以溴乙啶顯色后在GDS-8000凝膠成像系統(tǒng)上用Grab-軟件攝取電泳圖像，再用Gelworks ID分析軟件進(jìn)行分析，以各目的片段與-actin的像素值之比進(jìn)行半定量分析。1.3  統(tǒng)計學(xué)方法  采用t檢驗和方差分析處理相關(guān)數(shù)據(jù)。2  結(jié)果2.1  不同肺組織中EGR-1 mRNA表達(dá)情況  RT-PCR檢測發(fā)現(xiàn)30例肺癌組織及癌旁組