中藥新藥制備工藝研究的技術(shù)要求及問題分析

1、中藥新藥制備工藝研究的技術(shù)要求及問題分析制備工藝的研究是中藥新藥研究的一個(gè)重要環(huán)節(jié)，是藥效毒理研究、臨床研究的基礎(chǔ)。筆者結(jié)合近幾年新藥審評(píng)工作的實(shí)踐，就中藥新藥制備工藝研究的技術(shù)要求談?wù)勛约旱恼J(rèn)識(shí)，供同行參考。按照研究工作的實(shí)際步驟，可將工藝研究的內(nèi)容分為以下六部分： 一、處方的分析 對(duì)處方的分析即對(duì)處方所涉及的中醫(yī)藥理論的理解和對(duì)方劑中藥物進(jìn)行方藥分析。在實(shí)際工作中，對(duì)一個(gè)已經(jīng)立項(xiàng)準(zhǔn)備進(jìn)行研制的新藥，一般首先看到處方?？梢詮?方面對(duì)處方進(jìn)行分析：以中醫(yī)藥理論作指導(dǎo)了解本處方的君臣佐使、功能主治；了解本處方藥味的傳統(tǒng)用法；了解本處方藥味的性味歸經(jīng)。有毒無毒；確認(rèn)處方中藥味炮制與否、炮制的目的與

2、方法；檢索現(xiàn)代研究文獻(xiàn)，了解各藥味所含化學(xué)成分及其理化性質(zhì)，了解方中各藥味的藥理作用，特別是與本處方功能主治相關(guān)的藥理作用。對(duì)一類、二類新藥，應(yīng)能確定化學(xué)成分與藥效的關(guān)系，對(duì)三、四類新藥一般是復(fù)方而言，應(yīng)盡可能地掌握化學(xué)成分與藥效之間的關(guān)系。 以上所作工作的目的在于使后面工藝路線的設(shè)計(jì)有的放矢，避免盲目性。在審評(píng)中筆者見到有些實(shí)驗(yàn)者在對(duì)于處方不完全了解的情況下匆忙設(shè)計(jì)工藝路線、優(yōu)選工藝條件，往往使得工藝先天不足，存在難以彌補(bǔ)的缺陷。二、劑型的選擇1、 劑型是藥物使用的必備形式。在進(jìn)行提取工藝、制劑成型工藝研究之前，首先要選擇和確定劑型。選擇劑型時(shí)要考慮以下因素：臨床需要。例如治療急癥

3、、重癥的，注射劑當(dāng)屬優(yōu)選劑型。藥物性質(zhì)。例如一、二類新藥，有效成分或有效部位已經(jīng)明確時(shí)，應(yīng)根據(jù)它們的物理、化學(xué)性質(zhì)設(shè)計(jì)最佳劑型。用藥對(duì)象。例如兒科用藥應(yīng)盡可能選擇易于服用的劑型。處方劑量。處方劑量小時(shí)劑型選擇難度小，處方劑量大時(shí)應(yīng)選擇載藥量大的劑型。例如某三類新藥，膠囊劑，每粒內(nèi)容物重05g，1次6粒，1日3次。屬劑型選擇不當(dāng)。其他因素。藥物的味道、服用方便與否等等都應(yīng)在選擇劑型時(shí)予以考慮。 2、 在劑型選擇方面常見以下問題：新藥研制者往往忽視劑型選擇。在“工藝研究”資料中沒有劑型選擇內(nèi)容或是一筆帶過。新劑型少。這反映出中藥制劑整體水平滯后，中藥新藥的研制者勇于嘗試研究、使用新劑型的

4、也不多。在新藥中仍然存在工藝粗糙、劑型落后的問題。中藥制劑較之化學(xué)藥品比較突出的問題是服用量大。這個(gè)問題在中藥新藥中也普遍存在。其根本原因是粗提物多。在我國即將加入WTO的今天，使中藥國際化，優(yōu)化中藥劑型和工藝，使“有效的粗提物”變?yōu)椤坝行У木嵛铩币呀?jīng)成了我們必須重視并且在今后的新藥研制中予以解決的問題。 三、提取工藝的研究中藥新藥的研究大多數(shù)是以中藥材為起始原料。為了達(dá)到療效高、劑量小的要求，除少數(shù)情況直接使用藥材粉末外，一般藥材都需要經(jīng)過提取。 1、 藥材的鑒定與前處理 投料前的藥材必須經(jīng)過鑒定。鑒定的目的是辨明真假、優(yōu)劣?，F(xiàn)在中藥材市場(chǎng)情況復(fù)雜，從藥材公司購進(jìn)的藥材多數(shù)產(chǎn)地不明。中藥注

5、射劑的原料必須固定產(chǎn)地。一般口服、外用制劑的原料也提倡產(chǎn)地進(jìn)貨，特別是生產(chǎn)單位產(chǎn)地進(jìn)貨尤其必要。從藥材公司購入的中藥材，應(yīng)當(dāng)請(qǐng)有中藥鑒定專業(yè)知識(shí)的人員進(jìn)行初步鑒定，鑒定依據(jù)是中國藥典、部頒等藥材標(biāo)準(zhǔn)。沒有條件的或者對(duì)多來源的藥材，僅憑形態(tài)、氣味難以分辨的，應(yīng)當(dāng)送當(dāng)?shù)厮帣z所鑒定。藥材標(biāo)準(zhǔn)中有含量測(cè)定的應(yīng)對(duì)藥材進(jìn)行相關(guān)成分的含量測(cè)定。在工藝研究過程中我們發(fā)現(xiàn)某一指標(biāo)成分在提取物中的含量很低，如果沒有測(cè)定藥材的含量，就難以判斷是由于工藝條件設(shè)置不合理造成的，或是藥材本身含量低造成的。投料前的藥材應(yīng)經(jīng)過前處理。即對(duì)藥材進(jìn)行凈制、切制、炮炙、粉碎。對(duì)哪些藥材進(jìn)行什么樣的前處理，應(yīng)根據(jù)方劑對(duì)藥性的要求、藥

6、材質(zhì)地、特性和不同提取方法的需要來決定。需炮制的藥材應(yīng)明確炮制目的、炮制方法及其依據(jù)。炮制方法與中國藥典、省級(jí)中藥材炮制規(guī)范不同的，應(yīng)提供炮制方法的實(shí)驗(yàn)研究資料。特別需要注意的是，中藥炮制伴隨中醫(yī)藥的應(yīng)用已有千年以上的歷史，中國幅原遼闊，各個(gè)地區(qū)的炮制方選、用藥習(xí)慣大不相同，有些炮制方法、炮制所用輔料已經(jīng)不適應(yīng)現(xiàn)代化工業(yè)生產(chǎn)的要求，這樣的炙法一般應(yīng)避免采用。例如某新藥，有一味藥是用人乳汁炙的，就屬此例。2 、提取工藝路線的設(shè)計(jì)與選擇1） 提取工藝路線設(shè)計(jì)的原則是使中藥新藥的生產(chǎn)工藝具有科學(xué)性、先進(jìn)性及生產(chǎn)的可行性。2） 提取工藝路線設(shè)計(jì)的基礎(chǔ)是對(duì)處方進(jìn)行分析，即了

7、解方劑的功能、主治；通過查閱文獻(xiàn)分析每種藥材所含的有效成分與藥理作用。3） 工藝路線設(shè)計(jì)的方法是對(duì)于處方中藥味有效成分或有效部位基本清楚的，如一類、二類新藥，可以根據(jù)其理化性質(zhì)及提取原理，基本確定工藝路線或設(shè)計(jì)不同的工藝路線，根據(jù)提取物中有效成分含量的多少來選擇確定。對(duì)復(fù)雜問題應(yīng)全面考慮，設(shè)計(jì)多條路線，通過預(yù)試驗(yàn)加以選擇。加復(fù)方中有些藥味基礎(chǔ)研究（化學(xué)成分、理化性質(zhì)、藥理作用）幾乎是空白；有些藥味雖然所含化學(xué)成分有文獻(xiàn)報(bào)道，但藥理作用不甚明確；有的藥味在處方中為佐使藥起到引藥歸經(jīng)、調(diào)和諸藥的作用，該藥的作用與化學(xué)成分尚找不到相關(guān)性；有的處方是祖?zhèn)鞯尿?yàn)方，方中藥味是一般中醫(yī)極少用的，化

8、學(xué)成分更不清楚。面對(duì)這些復(fù)雜情況，很難確定一種工藝路線，這時(shí)往往根據(jù)具體情況，設(shè)計(jì)多條路線，經(jīng)過預(yù)試驗(yàn)加以比較。較常見的方法是將不同工藝路線得到的提取物通過藥效學(xué)試驗(yàn)進(jìn)行比較，即用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)篩選工藝。提取工藝路線的選擇沒有一種固定的方法，換言之方法不限。研究者可以通過各種方法、手段來證明所選定的提取工藝最大限度地富集了有效成分、最大限度地發(fā)揮了方劑的療效。例：某一溶血栓的新藥，在工藝路線研究中，設(shè)計(jì)了不同的工藝路線，用體外溶栓實(shí)驗(yàn)進(jìn)行優(yōu)選。可見生物活性檢測(cè)法也可以用于工藝路線的優(yōu)選。 3、 工藝路線設(shè)計(jì)中應(yīng)予注意的問題1 ）對(duì)四類新藥進(jìn)行工藝路線設(shè)計(jì)時(shí)切忌不作考察盲目地照搬照

9、套原劑型的老工藝。如果原劑型是地標(biāo)升部頒的品種，原工藝大多沒有經(jīng)過實(shí)驗(yàn)優(yōu)選，依據(jù)不足。應(yīng)當(dāng)對(duì)新劑型的工藝進(jìn)行研究、優(yōu)選。如果原劑型是中國藥典品種，也應(yīng)當(dāng)對(duì)工藝進(jìn)行考察。有些研制者認(rèn)為，中國藥典收載的藥肯定是有效的，既然有效為什么還要研究工藝呢。此種想法有片面性。作為一個(gè)藥品，在確保療效的同時(shí)還要求它起效快、毒副作用小、質(zhì)量穩(wěn)定、服用方便、價(jià)廉易得。一個(gè)老藥，雖然有效，但可能存在著某一方面的缺點(diǎn)。研制四類新藥的目的應(yīng)當(dāng)是改掉其缺點(diǎn)，保持甚至增強(qiáng)療效。所以，1999年5月頒布的新藥審批辦法規(guī)件二“分類與申報(bào)資料的說明與注釋”第11條明確指出：“改變劑型的藥品，除按規(guī)定報(bào)送資料外，還應(yīng)提供原劑型的工

10、藝、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)資料及新劑型與原劑型在制備工藝、劑型、質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)、穩(wěn)定性和臨床對(duì)比試驗(yàn)的研究資料，說明新劑型藥品的優(yōu)、缺點(diǎn)”。2） 對(duì)傳統(tǒng)工藝，要繼承，但不能盲目地繼承，應(yīng)加以研究、探求機(jī)理，做到知其然共知其所以然。3 ）應(yīng)當(dāng)重視對(duì)提取溶媒的選擇。選擇溶媒應(yīng)當(dāng)考慮利于有效成分溶出、不影響藥物療效、化學(xué)成分清楚、質(zhì)量穩(wěn)定、安全、價(jià)廉易得等，而水和乙醇基本滿足這些條件。但是有些中藥新藥研制的基礎(chǔ)是驗(yàn)方，在過去的應(yīng)用歷史中有了比較成型的工藝，應(yīng)用了一些傳統(tǒng)的溶媒。這種情況要慎重對(duì)待。如某新藥配劑，方中螞蟻用44度白酒冷夏40d。對(duì)這樣一個(gè)工藝我們會(huì)提出為什么用白酒而不用乙醇？依據(jù)什么確

11、定用44度白酒，有否作過不同度數(shù)白酒的對(duì)比？釀造原料、釀造方法不同則白酒的成分、質(zhì)量不同，所以本品所用白酒應(yīng)固定釀造原料、釀造方法，制訂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。4） 在需要兩種以上溶媒提取時(shí)應(yīng)注意先后順序。 5 ）應(yīng)充分考慮大生產(chǎn)的可行性。6） 對(duì)熱不穩(wěn)定性成分應(yīng)注意減少受熱時(shí)間。例如某復(fù)方含丹參，考慮到丹參的水溶性成分丹參素類是有效成分，但是非水溶性成分丹參酮類也與療效相關(guān)。這兩部分都要保留，既要水煮又要醇提。研制者設(shè)計(jì)了先水煮，后醇提。這會(huì)帶來兩個(gè)問題，一是在大生產(chǎn)中水提后，藥渣已吸水，藥渣之間還有殘余的水溶液，再加醇很難控制醇濃度。再者，丹參酮類對(duì)熱不穩(wěn)定，在水煎煮時(shí)已有

12、大部分被破壞，使得醇提得率極低。修改工藝：先醇提再水提，將原工藝的提取液混合濃縮政為將第一次醇提取液單獨(dú)濃縮，大大縮短了丹參酮類成分的受熱時(shí)間，結(jié)果顯著提高了丹參酮類的提取轉(zhuǎn)移率。7） 不能將提取工藝路線的選擇與提取條件的選擇同時(shí)進(jìn)行，應(yīng)當(dāng)先初步確定工藝路線，再進(jìn)行具體工藝條件的篩選，否則往往使考察結(jié)果無法評(píng)價(jià)。4、 提取工藝技術(shù)條件的研究 提取工藝路線初步確定后，應(yīng)充分考慮可能影響提取效果的因素，進(jìn)行科學(xué)、合理的試驗(yàn)設(shè)計(jì)，采用準(zhǔn)確、簡便、具有代表性、可量化的綜合性評(píng)價(jià)指標(biāo)與方法，優(yōu)選合理的提取工藝條件。 1） 在影響因素比較少時(shí)，可采用單因素、多水平的對(duì)比研究。

13、例如提取莪術(shù)揮發(fā)油。莪術(shù)是植物的干燥根莖，形態(tài)是卵圓形、長圓形或紡錘形的，直徑154cm。對(duì)于這樣一個(gè)藥材，采用水蒸氣蒸餾法提油，影響提油量的因素主要是藥材粉碎程度和提取時(shí)間。對(duì)這2個(gè)因素，我們可以采取固定一個(gè)，考察另一個(gè)的單因素考察方法。也可以設(shè)計(jì)一個(gè)2因素、3水平的正交試驗(yàn)加以考察。2 )在大多數(shù)情況下，影響因素不是單一的，對(duì)多因素、多水平同時(shí)進(jìn)行考察，一般最常用的是正交試驗(yàn)方法。 5 、正交試驗(yàn)常見問題1）正交試驗(yàn)方法不清楚、指標(biāo)成分含量含義不明確，實(shí)驗(yàn)結(jié)果無從評(píng)價(jià)。2） 樣本量太小，實(shí)驗(yàn)誤差大，造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果與常理不符。 3)）正交試驗(yàn)中因素、水平設(shè)計(jì)不當(dāng)，

14、造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果沒有意義。為了避免此種情況的發(fā)生，我們提倡先作預(yù)實(shí)驗(yàn)。例如水提取正交試驗(yàn)，提取次數(shù)、時(shí)間、加水量均設(shè)2水平，結(jié)果提取2次明顯優(yōu)于1次。但3次如何，不得而知。所以選擇2水平設(shè)計(jì)時(shí)應(yīng)慎重，一般多為3水平。但是即使是3水平的設(shè)計(jì)，如果3水平不當(dāng)，也有可能正交試驗(yàn)結(jié)果是A，B，C3因素對(duì)提取效果均免顯著性影響，即3水平間均無顯著性差異，P值均大于0.05。4）對(duì)異常的數(shù)據(jù)不作重復(fù)實(shí)驗(yàn)，不加以分析，將錯(cuò)就錯(cuò)，聽之住之。5） 正交試驗(yàn)考察指標(biāo)選擇不當(dāng)或評(píng)分方法不當(dāng)?？疾熘笜?biāo)應(yīng)盡可能多地包含有效部位。如大黃1味單提，考察指標(biāo)選擇總蒽醌和結(jié)合蒽醌比選擇單一成分大黃酸或大黃素更合理。在2個(gè)

15、或2個(gè)以上考察指標(biāo)時(shí)，正確的評(píng)分方法才能得出正確的結(jié)論。6 ）不夠重視對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析。一是直觀分析，二是方差分析。在2個(gè)以上考察指標(biāo)時(shí)，綜合直觀分析、方差分析結(jié)果，往往很難確定一個(gè)工藝條件，常常會(huì)在2，3個(gè)工藝條件上難以取舍，這時(shí)應(yīng)作驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)，最終確定工藝條件，并且應(yīng)當(dāng)注意驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)的樣本量不宜太小。 四、分離、純化、濃縮與干燥工藝研究1 、分離與純化工藝研究1） 常用的分離方法有沉降分離法、濾過分離法、離心分離法。常用的純化方法有水提醇沉法、醇提水沉法。其他的純化方法有酸堿法、鹽析法、透析法、吸附法、離子交換法、結(jié)晶法等。2 ）分離純化方法的選擇應(yīng)根據(jù)

16、新藥類別、劑型、給藥途徑、處方量及提取液性質(zhì)來決定。如丹皮酚有結(jié)晶性，可以通過結(jié)晶法達(dá)到純化目的；二類藥需要富集有效部位，所以吸附法常被應(yīng)用；注射劑對(duì)藥液中的不溶性微粒有嚴(yán)格限制，所以常用超濾方法；黃芩苷的提取應(yīng)用了酸堿法；在復(fù)方提取液純化中常常應(yīng)用水醇法和醇水法。3） 無論采用哪種方法，都應(yīng)當(dāng)說明該方法應(yīng)用的合理性，提供純化物含量指標(biāo)，必要時(shí)應(yīng)通過實(shí)驗(yàn)確定純化工藝的具體條件。如水提醇沉法應(yīng)優(yōu)選醇沉濃度；醇水法應(yīng)優(yōu)選加水量；酸堿法應(yīng)優(yōu)選pH值。 4 ）對(duì)于新建立的方法，還應(yīng)進(jìn)行方法的可行性、安全性研究，提供相應(yīng)的研究資料。如大孔吸附樹脂，特別是新型號(hào)的大孔吸附樹脂或是混合型

17、的大孔吸附樹脂。2、 濃縮與干燥工藝研究1） 常用的濃縮方法有減壓蒸發(fā)、薄膜蒸發(fā)；常用的干燥方法有減壓干燥、沸騰干燥、噴霧干燥、冷凍干燥。2） 濃縮、干燥方法應(yīng)根據(jù)藥物性質(zhì)來選擇。3） 濃縮、干燥方法的具體工藝參數(shù)應(yīng)經(jīng)實(shí)驗(yàn)優(yōu)選確定。例如常用的噴霧干燥法，其主要影響因素有4個(gè)：提取液的密度、霧滴大小、進(jìn)風(fēng)溫度和出風(fēng)溫度。4） 濃縮、干燥方法及條件的優(yōu)選，應(yīng)在有相應(yīng)生產(chǎn)設(shè)備的制藥企業(yè)中進(jìn)行。 五、 制劑成型工藝研究 制劑成型工藝是將藥物半成品與輔料進(jìn)行加工處理，制成劑型，形成最終產(chǎn)品的過程。輔料品種與用量應(yīng)經(jīng)實(shí)驗(yàn)優(yōu)選確定。應(yīng)當(dāng)明確選擇的目的、試驗(yàn)方法、結(jié)果、結(jié)論。應(yīng)注意處方量與最終制成量之間的關(guān)系。根據(jù)中藥用藥量大的特點(diǎn)，提倡應(yīng)用先進(jìn)的成型方法和設(shè)備，盡可能減少輔料用量，以期減少服用劑量。 六、中試研究 中試研究是對(duì)實(shí)驗(yàn)室工藝合理性研究的驗(yàn)證與完善，是保證工藝具有大生產(chǎn)可行性的必經(jīng)環(huán)