材料青霉素G的抗菌作用快而強(精)

1、得分評卷人、共20分材料：青霉素G的抗菌作用快而強，低濃度抑菌，高濃度殺菌。其抗菌譜較窄，主要對革蘭氏陽性及陰性球菌、革蘭氏陽性桿菌、螺旋體及放線菌有強大的抗菌作用。對革蘭氏陰性桿菌的作用較弱。對結(jié)核桿菌、真菌、立克次氏體、病毒等均無效。細菌對青霉素G可產(chǎn)生耐藥性，尤其是金黃色葡萄球菌的耐藥性較為常見。青霉素G毒性很低，最主要的不良反應(yīng)是過敏反應(yīng)。請將本材料中提到的微生物（下標線標示的）按照細胞水平進行分類；（3'）比較細菌、放線菌、真菌、病毒在繁殖（或增殖）方式方面的區(qū)別；（4'）結(jié)合所學(xué)的微生物學(xué)知識，闡述青霉素的藥理；（4'）闡述耐藥性產(chǎn)生的可能遺傳機制及生化機制

2、；（5'）結(jié)合所學(xué)的免疫學(xué)知識，闡述青霉素過敏反應(yīng)的機理；（4'）答：G原核細胞型微生物：細菌、螺旋體、放線菌、立克次氏體（1'）真核細胞型微生物：真菌（1'）非細胞型微生物：病毒（1'）細菌：二分裂無性繁殖（1'）放線菌：以產(chǎn)生無T抱子繁殖為主（1'）真菌：以產(chǎn)生無性抱子和有性抱子繁殖為主（1'）病毒：以復(fù)制的方式增殖（1'）無論是G+細菌還是G-細菌細胞壁中都有肽聚糖成分。（1'）青霉素的作用是抑制肽聚糖合成最后階段的交聯(lián)作用轉(zhuǎn)肽反應(yīng)，不論G+細菌還是G-細菌都是一樣，只不過具體作用位點不同。這樣，細菌不能形成

3、完整的細胞壁而裂解死亡。（2'）由于G-細菌外膜的通透屏障作用，使青霉素不易達到它的作用靶位，從而使G-細菌對青霉素不敏感（1'）遺傳機制：自發(fā)突變加藥物選擇（1'）;細胞間抗藥性的基因轉(zhuǎn)移（1'）生化機制：產(chǎn)生使抗生素結(jié)構(gòu)改變的酶（即鈍化酶）（1'）;作用靶位的改變（1'）;細胞通透性的改變（1'）青霉素分子量較小，單獨不能使機體產(chǎn)生抗體，其降解物青霉曝嚏酸或青霉烯酸，都能與人體蛋白結(jié)合，獲得免疫原性（1'）,刺激機體產(chǎn)生特異性IgE抗體（1'）,其Fc段與肥大細胞和/或嗜堿性粒細胞上FeeR結(jié)合，使機體致敏（1'

4、;）。當再次接觸青霉素時，即可能發(fā)生過敏性休克（1'）。青霉素稀釋成溶液后，一般在612小時可降解，因而使用青霉素要新鮮配制。少數(shù)情況下，初次注射青霉素也可發(fā)生過敏性休克，其原因可能是吸入過青霉菌池子或曾使用青霉素污染的注射器而被致敏。青霉素過敏與過敏體質(zhì)有密切關(guān)系。據(jù)統(tǒng)計約30%青霉素過敏患者曾有其它過敏史，如哮喘，過敏性鼻炎等。得分評卷人二、共15分材料：1998年，ErmakTH等報道利用基因敲除（geneknockout）的MHCI類分子缺陷小鼠、II類分子缺陷小鼠、B細胞免疫反應(yīng)缺陷小鼠進行實驗，分別以幽門螺桿菌（Hp）尿素酶和粘膜佐劑LT免疫小鼠，發(fā)現(xiàn)B細胞免疫反應(yīng)缺陷小鼠

5、與野生型小鼠一樣獲得免疫保護，改變了人們最初關(guān)于保護性免疫一定是由Hp特異性抗體所介導(dǎo)的看法，提示了CD4+T細胞（TH細胞）在抗Hp感染中的重要作用。請畫出免疫球蛋白（抗體）的基本結(jié)構(gòu)圖并標出各個功能區(qū)及木瓜蛋白酶和胃蛋白酶的酶切片斷（6'）由抗體介導(dǎo)的免疫是體液免疫還是細胞免疫？抗體介導(dǎo)的生物學(xué)效應(yīng)有哪些（6）請解釋MHC、B細胞、TH細胞在免疫應(yīng)答中的各自作用。（3'）CHJt CHJB-HU昌曼HLJ體液免疫（2'）,抗體介導(dǎo)的生物學(xué)效應(yīng)有：中和作用與粘膜免疫作用（1'）;激活補體溶解抗原靶細胞（1'）;通過調(diào)理作用促進吞噬細胞吞噬清除抗原（1&

6、#39;）;以ADCCt徑殺傷抗原靶細胞（1'）C3MHC參與處理與遞呈抗原（1）,B細胞活化增殖為漿細胞，漿細胞分泌抗體從而介導(dǎo)體液免疫（1）,TH1細胞即遲發(fā)性超敏反應(yīng)T細胞，是細胞免疫的效應(yīng)細胞，TH2細胞輔助B細胞活化（1）。得分評卷人三、共10分某廠生產(chǎn)的一批維生素C片劑需要進行微生物限度檢查（按照藥典規(guī)定，合格產(chǎn)品細菌數(shù)1000個/g,霉菌、酵母菌數(shù)100個/g,大腸桿菌不得檢出），請根據(jù)你所學(xué)的微生物學(xué)知識設(shè)計試驗檢驗該批產(chǎn)品是否合格。答：1、細菌和霉菌總數(shù)待測用滅菌生理鹽水梯度稀釋成1:10、1:100、1:1000的濃度（2'）。分別吸取上述10倍稀釋的溶液各

7、1ml于無菌平皿中，再加入15ml恒溫于45c的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，混勻，待凝固后將平皿于3035c倒置培養(yǎng)48h,進行平板活菌計數(shù)測定細菌總數(shù)。霉菌總數(shù)和酵母菌總數(shù)的測定則需分別采用霉菌培養(yǎng)基（玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基）和酵母浸出粉月東葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基。每個稀釋度應(yīng)取3個平皿作平行試驗。細菌和霉菌的平板活菌計數(shù)法應(yīng)按規(guī)定報告結(jié)果。細菌宜選取平均菌落數(shù)在30300之間的稀釋級，霉菌宜選取平土菌落數(shù)在30100之間的稀釋級作為報告菌落計算的依據(jù)。（2'）2、控制菌檢查取膽鹽乳糖培養(yǎng)基3份，每份各100ml,2份分別加入規(guī)定量的供試液，其中1份加入對照菌液作陽性對照，第3份加入與供試液等量的稀釋劑作

8、空白對照。培養(yǎng)1824h（必要可延至48h）?？瞻讓φ諔?yīng)無菌生長（1）。其余2份培養(yǎng)物劃線接種于曙紅亞甲藍瓊脂平板或麥康凱瓊脂平板，培養(yǎng)1824ho當陽性對照的平板呈現(xiàn)陽性菌落時，供試品的平板無菌落生長，或有菌落但不同于下表所列的特征，可判為未檢出大腸桿菌（2'）。培養(yǎng)基菌落形態(tài)曙紅亞甲藍瓊脂呈紫黑色、淺紫色、藍紫色或粉紅色，菌落中心深紫色或無明顯暗色中心，圓形，稍凸起，邊緣整齊，表面光滑，濕潤，常有金屬光澤。麥康凱瓊脂鮮桃紅色或微紅色，菌落中心深桃紅色，圓型，扁平，邊緣整齊，表面光滑，濕潤。如生長菌落與表20-4所列特征相符或疑似者，應(yīng)挑選23個菌落分別接種于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基斜面，培養(yǎng)

9、18h,作以下檢查：革蘭染色、乳糖發(fā)酵試驗、甲基紅試驗、乙酰甲基甲醇生成試驗（V-P試驗）、枸檬酸鹽利用試驗。當空白對照試驗呈陰性，供試品檢查為革蘭陰性無芽胞桿菌；乳糖發(fā)酵產(chǎn)酸產(chǎn)氣或產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；IMViC試驗為陽性、陽性、陰性、陰性或陰性、陽性、陰性、陰性，判為檢出大腸桿菌。對可疑反應(yīng)的菌株，應(yīng)重新分離培養(yǎng)后，再作生化試驗證實（3'）。得分評卷人四、共15分配置液體培養(yǎng)基（配方見下表），接入大腸桿菌培養(yǎng)，測定生長曲線。請回答:葡萄糖1.0g(NH4b次NiiHaPOuH?。仇5g2H式)也1gKzHlQk5百蒸憎水1000nil什么是生長曲線？（1'）生長曲線包括哪些時期（圖示

10、）？（4'）生長曲線對發(fā)酵生產(chǎn)及科學(xué)研究有什么意義？（至少舉3例）（3）如果在上述培養(yǎng)基中再添加1.0g乳糖，然后接入大腸桿菌培養(yǎng)，則大腸桿菌的生長曲線會發(fā)生什么變化（圖示）？根據(jù)所學(xué)的微生物學(xué)知識解釋這一現(xiàn)象（文字說明加圖示）。（7'）答：。將一定量的純種單細胞微生物接種到適宜的定量液體培養(yǎng)基中，在適宜的條件下培養(yǎng)，每隔一定時間取樣，測算菌數(shù)，以時間為橫坐標，菌數(shù)的對數(shù)為縱坐標，可繪制一條群體有規(guī)律的生長曲線，這就是微生物的典型生長曲線（growthcurve）。生長曲線代表了細菌在適宜的環(huán)境中生長繁殖直至衰老全過程的動態(tài)變化（1'）典型的生長曲線可分為延滯期、對數(shù)期

11、、穩(wěn)定期和衰亡期四個時期，正確認識和掌握生長曲線各期的特點對指導(dǎo)發(fā)酵生產(chǎn)和科學(xué)研究是十分必要的。（4'）穩(wěn)定期（平衡期）對數(shù)期（指數(shù)期）、衰亡期（苑亡期）延遲期（遲期）培養(yǎng)時間細菌群體生長中，延滯期的出現(xiàn)無疑是必須的。但在工業(yè)發(fā)酵和科研中，延滯期會使生產(chǎn)周期延長而產(chǎn)生不利影響，因此，深入了解延滯期產(chǎn)生的原因，影響延滯期長短的因素，采取有效縮短延滯期的措施，具有十分重要的意義。（1'）對數(shù)期（logarithmicphase）細胞是研究菌體生物學(xué)性狀如形態(tài)、大小、染色性和基本代謝、生理的良好材料，是噬菌體吸附的最適菌齡，也是發(fā)酵生產(chǎn)用作種第4頁共9頁子的最適菌齡。（1'）

12、穩(wěn)定期（stationaryphase）抗生素等次級代謝產(chǎn)物開始大量形成，抗生素發(fā)酵生產(chǎn)中應(yīng)考慮發(fā)酵液在此期放罐。（1'）會表現(xiàn)二次生長現(xiàn)象（1'）。結(jié)構(gòu)基因ttlRNACAM? CAPC'AP 合幽£呼虹一回叫?度 顫AP星失活狀念CAP息因塞d曲 磁臟？礴臟Y喊蛔CGFCAPCCB算蹴怖基因活他自cnlaiiolk寄rue nrtjvmioii protein)CAP；壞原書«受體生閂tfSGflSf AMP icccpwr protein)得分評卷人五、共10分苑硼降解物與.W的關(guān)系A(chǔ)TPr -環(huán)優(yōu)第 rAMT磅醺二F-AMP 前陶 酶葡的糖I

13、分解代謝產(chǎn)物材料：金黃色葡萄球菌是一種細菌，多數(shù)為非致病菌，少數(shù)可導(dǎo)致疾病。細胞球形，直徑1.0um左右，排列成葡萄狀。金黃色葡萄球菌無鞭毛，無芽胞，幾乎所有金黃色葡萄球菌菌株的表面有莢膜多糖抗原的存在。寫出金黃色葡萄球菌的學(xué)名（雙名法）（1'）名詞解釋：芽抱、莢膜、抗原（3'）金黃色葡萄球菌能否運動？如何證明（至少兩種方法）？（3'）寫出革蘭氏染色法的過程及金黃色葡萄球菌革蘭氏染色的結(jié)果（3'）第5頁共9頁答：。Staphylococcusaureus(1')某些細菌在一定營養(yǎng)條件下可向細胞壁表面分泌一層松散透明、粘度極大的膠狀物質(zhì)即為莢膜(1'

14、;);某些細菌，特別是G+桿菌，生長到一定階段，在細胞內(nèi)形成一個圓形或橢圓形的、折光性強的特殊休眠結(jié)構(gòu)稱為芽胞，又稱內(nèi)生抱子(endospore)(1');抗原(antigen,Ag)亦稱免疫原(immunogen)是指能刺激機體免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答，并能與相應(yīng)免疫應(yīng)答產(chǎn)物(抗體或致敏淋巴細胞)在體內(nèi)外發(fā)生特異性結(jié)合的物質(zhì)(1')。不能(1');鞭毛的功能主要是作為細菌運動的器官”，可采用懸滴法和暗視野映光法觀察細菌的運動狀況，還可以采用半固體瓊脂法穿刺培養(yǎng)，從細菌生長擴散情況就可以初步判斷細菌能否運動。(2')過程：涂片、干燥、固定一一結(jié)晶紫初染一一碘液媒染一

15、一95%乙醇脫色一一復(fù)紅復(fù)染(2');金黃色葡萄球菌革蘭氏染色后為紫色，是G+(1')得分評卷人六、共10分科學(xué)家篩選出了兩種不同營養(yǎng)缺陷型的大腸桿菌K12突變株，其中菌株I是組氨酸營養(yǎng)缺陷型，菌株H是半胱氨酸氨酸營養(yǎng)缺陷型，將它們在完全培養(yǎng)基上混合培養(yǎng)后，再涂布于基本培養(yǎng)基(不含任何氨基酸)上。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在基本培養(yǎng)基上出現(xiàn)了的原養(yǎng)型菌落，而分別涂布的兩種親本菌株對照組都不出現(xiàn)任何菌落。解釋什么是菌株，什么是營養(yǎng)缺陷型菌株；(2')解釋轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)、接合這三種基因重組方式的差別(3')(5)設(shè)計實驗證明該實驗現(xiàn)象到底是由轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)導(dǎo)還是接合引起的。答：O菌株是同種而

16、不同來源的微生物的純培養(yǎng)物（1）營養(yǎng)缺陷型菌株是由于基因突變喪失了合成某種生長因子的能力，必須依靠外界提供的菌株（1）三者根本區(qū)別在于DNA轉(zhuǎn)移的方式不同轉(zhuǎn)化：供體DNA片斷一注入受體細胞，通過細胞膜（1'）接合：供體進入受體通過性纖毛（1'）轉(zhuǎn)導(dǎo)：供體DNA片斷通過媒介噬菌體攜帶進入受體（1）（3U形管（31+DNA酶（2'）得分評卷人七、10分關(guān)于病毒：闡述病毒結(jié)構(gòu)與化學(xué)組成（2'）3'）。（5'）根據(jù)核酸基因組類型和合成方法不同可將病毒分為哪些類型?試以dsDNA病毒為例，解釋病毒合成的基本過程（圖示）答：病毒主要由核酸和蛋白質(zhì)組成。核酸位

17、于病毒的中心，為病毒核酸基因組，其攜帶病毒復(fù)制所需的遺傳信息。蛋白質(zhì)是病毒的外殼，包圍著病毒核酸基因組，構(gòu)成病毒一定的形態(tài)。病毒的蛋白質(zhì)可分為結(jié)構(gòu)蛋白和非結(jié)構(gòu)蛋白。結(jié)構(gòu)蛋白構(gòu)成病毒的外殼、包膜子粒和存在于病毒體中的酶蛋白等，賦予病毒各種不同的形態(tài)；非結(jié)構(gòu)蛋白在病毒復(fù)制增殖過程中起一定的作用。所有的病毒蛋白基因均由病毒基因組編碼。（2'）根據(jù)核酸基因組類型和mRNA合成方法不同可將病毒分成6類：dsDNA(土DNA)、ssDNA(+DNA)、dsRNA(土RNA)、ssRNA(+RNA)、ssRNA(-RNA)、逆轉(zhuǎn)錄病毒ssRNA(+RNA)(3')早期轉(zhuǎn)錄早期翻譯親代iDNA

18、mRNA早期蛋白復(fù)制,晚期轉(zhuǎn)錄晚期翻譯子代iDNAmRNA晚期蛋白裝成配熟子代病毒粒子得分評卷人八、共10分現(xiàn)有大腸桿菌的兩種以雙鏈DNA為遺傳物質(zhì)的烈性噬菌體A和B?？茖W(xué)家提取了A的核心（用32P標記）和B的外殼（用35S標記）組裝成雜交病毒Co用C感染一般培養(yǎng)液中的無標記大腸桿菌，經(jīng)過短時間保溫以后（細胞尚未裂解），用組織搗碎器攪拌接著進行離心，分別測定沉淀物（主要是細胞）和上清液（主要是蛋白質(zhì)等分子）中的同位素標記。第8頁共9頁請問32P、35S分別存在于離心物的哪個部分？(2')比較烈性噬菌體、溶源噬菌體的生活史(5')如果本實驗改為長時間保溫，請問產(chǎn)生的子代噬菌體是哪一種噬菌體？(3')答：G32P存在于沉淀物中，35S存在于上清液(2')噬菌體感染宿主細胞后，在細胞內(nèi)迅速增殖，最后使細胞裂解而死亡，這類噬菌體稱為烈性噬菌體(virulentphage)。(1)噬菌體感染宿主細胞后，并不立即引起宿主細胞裂解，噬菌體與細胞建立穩(wěn)定的共存關(guān)系，噬菌體DNA整合(integration)至