血管內(nèi)皮生長因子在宮腔粘連患者子宮內(nèi)膜中的表達(dá)

1、血管內(nèi)皮生長因子在宮腔粘連患者子宮內(nèi)膜中的表達(dá)         11-05-19 09:35:00     編輯：studa20                   作者：韓燕華 王晶晶 孫世君 蘇園園 【摘要】  目的 通過檢測宮腔粘連(IUA)患者子宮內(nèi)膜血管內(nèi)皮生長因子(V

2、EGF)的表達(dá),探討VEGF在宮腔粘連發(fā)病中的作用。 方法 選擇經(jīng)宮腔鏡診斷為宮腔粘連的患者35例為IUA組，因男性不孕在本院行人工受精治療的女性25例為對(duì)照組，采用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化物酶連結(jié)法(SP)檢測兩組患者子宮內(nèi)膜組織中VEGF的表達(dá)水平。 結(jié)果 粘連組子宮內(nèi)膜VEGF表達(dá)水平為(3.53±0.16)分，對(duì)照組為(3.22±0.08)分，粘連組高于對(duì)照組;宮腔粘連患者VEGF表達(dá)水平重度為(3.87±0.25)分、中度為(2.45±0.10)分、輕度為(2.28±0.10)分，重度宮腔粘連患者VEGF表達(dá)水平明顯高于輕

3、、中度，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。 結(jié)論 子宮內(nèi)膜VEGF的異常表達(dá)，可能參與宮腔粘連的形成。 【關(guān)鍵詞】  宮腔粘連; 血管內(nèi)皮生長因子; 免疫組織化學(xué)【Abstract】 Objective To elucidate the possible mechanism of intrauterine adhesion (IUA) by detecting the expression of VEGF in endometrium. Methods A total of 35 patients who were diagnosed as IUA by hysterosco

4、py were included in the study group, and 25 women who receive in vitro fertilization treatment due to male factor were used as the control group. Immunohistochemical method was performed to detect the expression of endometrial VEGF in the two groups. Results The expression of endometrial VEGF increa

5、sed significantly in the study group compared with the control group (P<0.01). In the study group, the expression of endometrial VEGF of those with serious IUA was extremely higher than those with mild and moderate IUA (P<0.01). Conclusion The abnormal expression of VEGF may play a role in the

6、 occurrence of IUA.【Key words】 Intrauterine adhesion; Vascular endothelial growth factor; Immunohistochemical method近年來，由于盆腔炎性疾病發(fā)病率的升高及宮腔操作增多，宮腔粘連(intrauterine adhesion，IUA)在臨床上越來越常見，其主要臨床表現(xiàn)為閉經(jīng)或月經(jīng)過少、周期性腹痛、繼發(fā)不孕與反復(fù)流產(chǎn)、早產(chǎn)等。目前IUA的研究多集中于診斷及治療，對(duì)于其發(fā)病機(jī)制及預(yù)防的研究報(bào)道甚少。IUA發(fā)病的主要原因是子宮內(nèi)膜損傷，子宮內(nèi)膜損傷后的重建需要新生血管的支持，而血管內(nèi)皮生長

7、因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)是最重要的血管生長因子1，本研究通過檢測IUA患者子宮內(nèi)膜血管VEGF的表達(dá),探討VEGF在宮腔粘連發(fā)病中的作用。對(duì)象與方法一、對(duì)象2007年6月2009年6月在中山市人民醫(yī)院婦科行宮腔鏡檢查確診為IUA患者共35例為IUA組，年齡2235歲，平均年齡(28.3±4.1)歲。選擇同期由于男方不孕，到本院生殖中心行人工受精患者25例為對(duì)照組，年齡2435歲，平均年齡(27.5±4.0)歲，兩組年齡比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。兩組患者均無婦科內(nèi)分泌疾病，術(shù)前3個(gè)月內(nèi)未使用過任

8、何激素類藥物或?qū)m內(nèi)節(jié)育器。為了避免不同月經(jīng)周期體內(nèi)雌孕激素水平變化對(duì)檢測結(jié)果的影響，兩組均選用術(shù)后經(jīng)病理證實(shí)子宮內(nèi)膜處于分泌期的患者。二、方法1.IUA診斷標(biāo)準(zhǔn)2：(1)輕度粘連。累及宮腔<1/4，粘連菲薄或纖細(xì)，輸卵管開口和宮腔上端病變很輕或清晰可見;(2)中度粘連。累及1/43/4宮腔，僅粘連形成，無宮壁粘連，輸卵管開口和宮腔上端部分閉鎖;(3)重度粘連。累及宮腔>3/4，宮壁粘著或粘連帶肥厚,輸卵管開口和宮腔上端閉鎖。2.手術(shù)方法：(1)術(shù)前準(zhǔn)備。術(shù)前1 d晚上常規(guī)陰道后穹隆放置米索前列醇400 g,術(shù)前30 min予肌注阿托品0.5 mg。(2)宮腔鏡檢查術(shù)。膨?qū)m壓力設(shè)為1

9、00 mmHg,灌流液流速為260 ml/min(日本Olympus公司生產(chǎn)的4.5 mm連續(xù)灌流宮腔檢查鏡)。(3)治療性宮腔鏡手術(shù)。術(shù)時(shí)取膀胱截石位,常規(guī)消毒鋪巾,靜脈全麻。檢查子宮位置、大小及附件情況,探測宮腔深度和方向,擴(kuò)張宮頸至8.09.0 mm。設(shè)定膨?qū)m壓力120 mmHg,流速150 ml/min(德國STORZ公司生產(chǎn)的被動(dòng)式連續(xù)灌流可旋轉(zhuǎn)電切鏡，灌流液為5 %甘露醇液。腹腔鏡監(jiān)護(hù)為美國Stryker公司生產(chǎn)的電子腹腔鏡系列)。針狀電極劃開宮頸及宮腔粘連并打開宮腔,環(huán)狀電極切取粘連組織以備送病理檢查及留作標(biāo)本。術(shù)畢宮腔形態(tài)基本恢復(fù)正常，以見兩側(cè)宮角與輸卵管開口為標(biāo)準(zhǔn)。術(shù)后常規(guī)置

10、“O”型金屬節(jié)育環(huán)1枚。(4)術(shù)后治療。常規(guī)抗生素預(yù)防感染治療35 d，術(shù)后第2 d開始每日服用戊酸雌二醇13 mg每天3次，連續(xù)3個(gè)月,最后1周加用安宮黃體酮 8 mg，每天1次，月經(jīng)來潮后復(fù)查宮腔鏡。3.標(biāo)本采集及檢測：IUA組在宮腔鏡手術(shù)同時(shí)取適量子宮內(nèi)膜，對(duì)照組于宮腔鏡檢查同時(shí)刮取適量子宮內(nèi)膜，所取標(biāo)本均常規(guī)石蠟包埋，5 m厚連續(xù)切片，常規(guī)病理組織檢查。VEGF 檢測采用免疫組織化學(xué)鏈霉菌抗生物素蛋白過氧化物酶連結(jié)法(streptavidinperosidase，SP)法染色(試劑均購自北京博奧森生物技術(shù)有限公司)。4.免疫織組化學(xué)檢查結(jié)果判定：陽性細(xì)胞根據(jù)染色強(qiáng)度分為4級(jí)。無棕黃色顆粒為陰性(),有較淺的棕色顆粒為弱陽性(+),有中等強(qiáng)度的棕黃色顆粒為陽性(+),有較多的深棕黃色顆粒為強(qiáng)陽性(+)。顯微鏡下觀察切片(OLYMPUS Bx51顯微鏡×400),每張切片隨機(jī)選擇5個(gè)視野,每個(gè)視野計(jì)數(shù)100個(gè)細(xì)胞,分別讀取其中不同染色強(qiáng)度的細(xì)胞數(shù),組織學(xué)積分Hscore方法進(jìn)行半定量分析。Hscore=Pi(i+1)。其中Pi代表同一染色強(qiáng)度的陽