![curveexpert 1.3 ELISA擬合說明_第1頁](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/26/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e1.gif)
![curveexpert 1.3 ELISA擬合說明_第2頁](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/26/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e2.gif)
![curveexpert 1.3 ELISA擬合說明_第3頁](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/26/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e3.gif)
![curveexpert 1.3 ELISA擬合說明_第4頁](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/26/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e4.gif)
![curveexpert 1.3 ELISA擬合說明_第5頁](http://file3.renrendoc.com/fileroot_temp3/2022-1/26/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e/349b7ff8-c0bc-41f4-84ad-dbb8591ef43e5.gif)
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文檔簡介
1、ELISA的標(biāo)準(zhǔn)曲線一般使用專門的曲線擬合工具,如:Curve Exert1.3下面以Curve Exert1.3為例說明怎么樣制作:1 啟動(dòng)“Curve Expert1.3”2 X軸輸入標(biāo)準(zhǔn)品的OD值,Y軸輸入所對(duì)應(yīng)的濃度值,如圖:3單擊運(yùn)行 按鈕(上圖紅圈圈),出現(xiàn)如下對(duì)話框 4單擊ok按鈕,出現(xiàn)如下兩個(gè)對(duì)話框,關(guān)閉下面一個(gè)對(duì)話框 關(guān)閉下面一個(gè)對(duì)話框 5. 在對(duì)話框的右上角出現(xiàn)一些曲線的名稱,從“1”開始依次點(diǎn)擊曲線名稱,在右下角會(huì)出現(xiàn)相應(yīng)擬合的曲線,。 根據(jù)擬合的曲線選取ELISA擬合度最佳的曲線雙擊,出現(xiàn)如下對(duì)話框:注意:選擇系數(shù)(即“r”值)最好的曲線方程來進(jìn)行運(yùn)算。在下面的對(duì)話框右
2、上角有“r”值 ,當(dāng)“r”值越接近1擬合度越好 7按Ctrl鍵+L鍵,(或者在上圖的界面上點(diǎn)擊鼠標(biāo)右鍵,出現(xiàn)analyze選項(xiàng)),出現(xiàn)如下對(duì)話框: 8輸入標(biāo)準(zhǔn)的OD值,單擊Calculate按忸,即可得到待測(cè)蛋白的實(shí)際含量。(標(biāo)本稀釋了N倍,運(yùn)算出的數(shù)值應(yīng)再乘以N)。9. 如想得到ELISA擬合曲線的方程,可在步驟6的對(duì)話框空白處右擊,選擇”Information” 10. 得到如下對(duì)話框:點(diǎn)擊“Copy”在你需要的位置粘貼即可得到如下數(shù)據(jù):Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx2)當(dāng)抗原或抗體濃度過高時(shí),對(duì)應(yīng)的ELISA讀數(shù)不會(huì)再顯著升高,這時(shí)會(huì)達(dá)到一個(gè)平臺(tái)期,同樣在低濃度時(shí)也有一個(gè)平臺(tái)期。只有在適當(dāng)?shù)臐舛葧r(shí)才會(huì)出現(xiàn)類似直線的曲線,所以一般數(shù)據(jù)都要進(jìn)行多參數(shù)擬和,才能得到能更準(zhǔn)
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