消毒劑對食(飲)具消毒效果的模擬現(xiàn)場鑒定試驗

1、消毒劑對食 ( 飲)具消毒效果的模擬現(xiàn)場鑒定試驗2.1.2.1.1目的鑒定消毒劑對食 (飲)具上細菌的殺滅作用， 以驗證該消毒劑對食 (飲) 具消毒的實用劑量。2.1.2.1.2試驗器材(1) 大腸桿菌(8099) 。對尚需用于殺滅其他特定細菌者，可增用該特 定細菌進行試驗。菌懸液制備按 2.1.1.2 規(guī)定的方法和要求進行。(2) ) 磷酸鹽緩沖液 (PBS，0.03mol/L ， pH7.2)(3) 稀釋液：見附錄 A。(4) 中和劑(按 2.1.1.5 方法鑒定合格者 )(5) 胰蛋白胨大豆瓊脂培養(yǎng)基(6) 無菌棉拭(7) 規(guī)格板( 用可略彎曲的軟性材料制備，中央留一大小為5.0cmX5

2、.0cm 空格作為采樣部位)。(8) 試驗用食 (飲)具樣本 瓷碗(盤)或竹(木)筷前端(周長 2.0cm， 長度為12.5cm。2.1.2.1.3操作程序(1)按產(chǎn)品使用說明書的用法，選定本試驗擬用濃度和作用時間，分別進行大腸桿菌殺滅試驗。(2)用無菌規(guī)格板在試驗用瓷碗(盤)中間標出染菌區(qū)(5.0cmx5.0cm)。用無菌吸管吸取菌懸液， 分別滴加于染菌區(qū)， 每區(qū) 0.1ml，用無菌 L 棒在區(qū)內(nèi)涂勻，置 37C恒溫箱干燥。對筷子取前端 12.5cm 長度，蘸染預(yù)定量菌液后，并置 37C或室溫干燥。（3）試驗組：將 30 個染菌碗或 3 0 個筷子樣本，依次定時放入含消 毒劑溶液的容器中，使

3、其完全浸沒。作用至規(guī)定時間后取出，棄掉消 毒劑，向瓷碗 （盤） 內(nèi)的染菌區(qū)加入 5ml 中和劑， 用 L 棒刮洗染菌區(qū)，作用 10min后，分別取 1.0ml 樣液傾注接種 2 塊平皿。將筷子放入含 20ml25ml 中和劑的試管中，使其完全浸沒在中和劑中，電動混勻器 震蕩 60s 或振敲 200次，作用 10min 后，分別取 1.0ml 樣液傾注接種 2 塊平皿。將接種好的平皿放 37C恒溫箱培養(yǎng) 48h，計數(shù)菌落數(shù)，作 為試驗組。（ 4）陽性對照組：將 3 個染菌碗或 3 只筷子樣本不浸泡消毒劑，直 接向瓷碗 （盤） 內(nèi)的染菌區(qū)加入 5ml 中和劑， 或直接將筷子放入含 20ml25ml

4、中和劑的試管中。待試驗組消毒處理完畢后，隨試驗組進 行采樣和檢測。陽性對照組菌量應(yīng)為 1.25x107cfu/樣本 1.25x108cfu/ 樣本（相當于 5x105cfu/cm25x106cfu/cm2）。（ 5）陰性對照組：待試驗組與陽性對照組試驗結(jié)束后，將未用過的 同批次中和劑、PBS 接種培養(yǎng)基和未種菌的培養(yǎng)基等與上述兩組樣本 同時進行培養(yǎng)，作為陰性對照。（6）按下式計算每件食具上的生長菌落數(shù)。每件食具樣本生長菌落數(shù)（cfu/樣本）二平板上平均菌落數(shù)x檢測時 樣本稀釋倍數(shù)（ 7）計算殺滅對數(shù)值。2.1.2.1.4評價規(guī)定以每種食(飲)具 30 個樣本中大腸桿菌殺滅對數(shù)值均3.00 所用消 毒劑的濃度和作用時間為消毒合格劑量。2.1.2.1.5注意事項(1) 試驗操作過程必須采取嚴格的無菌技術(shù)。 直接或間接接觸 樣本的器