糊精含量測定

1、糊精含量測定糊精的檢測方法中,研究了乳粉中糊精含量的檢測方法.樣品經(jīng)過質(zhì)量分數(shù)為85的乙醇溶液處理,提取物經(jīng)過鹽酸水解后進行還原糖含量的熱滴定,從而計算出樣品中糊精的量.結(jié)果表明,該方法用于檢測乳粉中糊精在0.8以上含量具有良好的重現(xiàn)性和回收率,同時方法操作簡單,結(jié)果準確,適用于乳品企業(yè)進行原料及產(chǎn)品中糊精的檢驗.據(jù)我所知國標還沒有,現(xiàn)在的檢測方法都是各企業(yè)自行研究的,有用苯酚硫酸法顯色光度法,也是測乳粉中糊精的.GB/T20884-2007是麥芽糊精產(chǎn)品的檢測食品中淀粉的測定 第一法 酶水解法一、目的與要求：1、明確與掌握各類食品中淀粉含量的原理及測定方法。2、掌握用酶水解法和酸水解法測定淀

2、粉的方法。二、原理樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用淀粉酶水解成雙糖，再用鹽酸將雙糖水解成單糖，最后按還原糖測定，并折算成淀粉。 三，試劑： 1、0.5淀粉酶溶液：稱取淀粉酶0.5克，加100毫升水溶解，數(shù)滴甲苯或三氯甲烷，防止長霉，貯于冰箱中。 2、碘溶液：稱取3.6克碘化鉀溶于20毫升水中，加入1.3克碘，溶解后加水稀釋至100毫升。3、乙醚4、85乙醇5、6N鹽酸：量取50毫升鹽酸加水稀釋至100毫升。6、甲基紅指示液：0.1乙醇溶液。7、20氫氧化鈉溶液。8、堿性酒石酸銅甲液：稱取34.639克硫酸銅(CuS04·5H2O)。加適量水溶解，加0.5毫升硫酸，再加水稀釋至

3、500毫升，用精制石棉過濾。 9、堿性酒石酸銅乙液：稱取173克酒石酸鉀鈉與50克氫氧化鈉，加適量水溶解，并稀釋至500毫升，用精制石棉過濾，貯存于橡膠塞玻璃瓶內(nèi)。 10、0.1000N高錳酸鉀標準溶液。 11、硫酸鐵溶液：稱取50克硫酸鐵，加入200毫升水溶解后，人100毫升硫酸，冷后加水稀釋至1000毫升。 四、操作方法： 1、樣品處理： 稱取2-5克樣品，置于放有折疊濾紙的漏斗內(nèi)，先用50毫升乙醚分5次洗除脂肪，再用約100毫升85乙醇洗去可溶性糖類，將殘留物移入250毫升燒杯內(nèi)，并用50毫升水洗濾紙及漏斗，洗液并入燒杯內(nèi)，將燒杯置沸水浴上加熱15分鐘，使淀粉糊化，放冷至60以下，加20

4、毫升淀粉酶溶液，在55-60保溫1小時，并時時攪拌。然后取1滴此液加1滴溶液，應(yīng)不顯現(xiàn)藍色，若顯藍色，再加熱糊化并加20毫升淀粉酶溶液，繼續(xù)保溫，直至加碘不顯藍色為止。加熱至沸，冷后移入250毫升容量瓶中，并加水至刻度，混勻，過濾，棄去初濾液。取50毫升濾液，置于250毫升錐形瓶中，并加水至刻度，沸水浴中回流1小時，冷后加2滴甲基紅指示液，用20氫氧化鈉溶液中和至中性，溶液轉(zhuǎn)入100毫升容量瓶中，洗滌錐形瓶，洗液并人100毫升容量瓶中，加水至刻度，混勻備用。 B、測定： 吸取50毫升處理后的樣品溶液，于400毫升燒杯內(nèi)，加入25毫升堿性酒石酸銅甲液及25毫升乙液，于燒杯上蓋一表面皿，加熱，控制

5、，在4分鐘內(nèi)沸騰，再準確煮沸2分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或c4垂融坩堝抽濾，并用60熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中，加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水，用玻棒攪拌使氧化亞銅完全溶解，以0.1000N高錳酸鉀標準溶液滴定至微紅色為終點。 同時量取50毫升水及與樣品處理時相同量的淀粉酶溶液，按同一方法做試劑空白實驗。計算：X1=(A1-A2)×0.9)/( m1×50/250×V1/100×1000)×100X1：樣品中淀粉的含量，；A1：測定用樣品中還原糖的含量，mg；A2：試劑空白中還原糖的

6、含量，mg；0.9：還原糖(以葡萄糖計)換算成淀粉的換算系數(shù)；m1：稱取樣品質(zhì)量，g；V1：測定用樣品處理液的體積，毫升(m1)。第二法 酸水解法 一、原理： 樣品經(jīng)除去脂肪及可溶性糖類后，其中淀粉用酸水解成具有還原性的單糖，然后按還原糖測定，并折算成淀粉。二、試劑：1、乙醚；2、85乙醇溶液；3、6N鹽酸溶液；4、40氫氧化鈉溶液；5、10氫氧化鈉溶液；6、甲基紅指示液：0.2乙醇溶液7、精密PH試紙8、20乙酸鉛溶液9、10硫酸鈉溶液10、乙醚11、堿性酒石酸銅甲液。 (配制見前)12、堿性酒石酸銅乙液； (配制見前)13、硫酸鐵； (配制見前)14、0.1000N高錳酸鉀標液三、儀器：1

7、、水浴鍋2、高速組織搗碎機：1200rmin3、皂化裝置并附250毫升錐形瓶。四、操作方法：1、 樣品處理A、糧食，豆類、糕點、餅干等較干燥的樣品，稱取2.0-5.0克磨碎過40目篩的樣品，置于放有慢速濾紙的漏斗中，用30毫升乙醚分三次洗去樣品中的脂肪，棄去乙醚。再用150毫升85乙醇溶液分數(shù)次洗滌殘渣，除去可溶性糖類物質(zhì)。并濾干乙醇溶液，以100毫升水洗滌漏斗中殘渣并轉(zhuǎn)移至250毫升錐形瓶中，加入30毫升6N鹽酸，接好冷凝管，置沸水浴中回流2小時。回流完畢后，立即置流水中冷卻。待樣品水解液冷卻后，加入2滴甲基紅指示液，先以40氫氧化鈉溶液調(diào)至黃色，再以6N鹽酸校正至水解液剛變紅色為宜。若水解

8、液顏色較深，可用精密PH試紙測試，使樣品水解液的PH約為7。然后加20毫升20乙酸鉛溶液，搖勻，放置10分鐘。再加20毫升10硫酸鈉溶液，以除去過多的鉛。搖勻后將全部溶液及殘渣轉(zhuǎn)入500毫升容量瓶中，用水洗滌錐形瓶，洗液合并于容量瓶中，加水稀釋至刻度。過濾，棄去初濾液20毫升，濾液供測定用。 B、蔬菜、水果、各種糧豆含水熟食制品：按1：1加水在組織搗碎機中搗成勻漿(蔬菜、水果需先洗凈、晾干、取可食部分)稱取5-10克勻漿(液體樣品可直接量取)，于250毫升錐形瓶中，加30毫升乙醚振搖提取(除去樣品中脂肪)，用濾紙過濾除去乙醚，再用30毫升乙醚淋洗兩次，棄去乙醚。以下按A自“再用150毫升85乙

9、醇溶液”起依法操作。 2、測定： 吸取50毫升處理后的樣品溶液，于400毫升燒杯內(nèi)，加25毫升堿性酒石酸銅甲液及25毫升乙液。于燒杯上蓋一表面皿加熱，控制在4分鐘沸騰再準確煮沸2分鐘，趁熱用鋪好石棉的古氏坩堝或G4垂融坩堝抽濾，并用60熱水洗滌燒杯及沉淀，至洗液不呈堿性為止。將古氏坩堝或垂融坩堝放回原400毫升燒杯中，加25毫升硫酸鐵溶液及25毫升水，用玻棒攪拌使氧化銅完全溶解，以0.1000N高錳酸鉀標液滴定至微紅色為終點。 同時吸取50毫升水，加與測樣品時相同量的堿性酒石酸銅甲乙液、硫酸鐵溶液及水，按同一方法做試劑空白試驗。計算： x2=(A3-A4)×0.9)/( M2

10、5;V2/500×100)-×100式中：X2：樣品中淀粉含量，；A3：測定用樣品中水解液中還原糖含量，mg；A4：試劑空白中還原糖的含量，mg；m2：樣品質(zhì)量，mg；V2：測定用樣品水解液體積，m1；500：樣品液總體積，ml； ，0.9：還原糖折算成淀粉的換算系數(shù)。淀粉的測定(戊糖的測定)在食品加工中往往用淀粉做增稠劑,用于改變食品的物理狀況.有的加淀粉為了使操作容易,如各種硬糖和奶糖,在成形過程中,加入淀粉可防止相互粘結(jié)和吸濕.有的食品不僅含淀粉高,而且都是用淀粉制造的比如粉絲粉條粉皮涼粉綠豆糕    淀粉測定方法大體上可分為兩類:1.用

11、酸或淀粉酶將淀粉分解為單糖后測定2.用重金屬鹽將蛋白質(zhì),單寧等除去.用顯色劑顯色后進行比色分析。    除此之外,還有酸化酒精沉淀法,在含淀粉不高的樣品中準確性差(一).含多量淀粉樣品的測定方法:    本法適用于含淀粉量多的樣品如:小麥糖、米糖、山芋干、藕糖、子蹄糖、糖絲、糕干糖、代乳糖等根據(jù)反應(yīng)式:淀粉與葡萄糖之比為162.1:180.12=0.9:1； 說明0.9克淀粉水解后可得1克葡萄糖。2.試劑3.操作步驟:    稱干燥樣2-3克 乙醚洗滌4-5次.每次10毫升 用10%的乙醇150毫升分次洗

12、滌，以除去1克液 將殘留液用200毫升水流入三角瓶加稀鹽酸(2:1)20毫升至沸水浴溶解2.5HR冷卻用20%NaOH中和加鋁漿10毫升加入500毫升容量瓶 稀釋至刻度  過濾取濾液按總糖測定法測定葡萄糖含量所得葡萄糖量乘以0.9即為淀粉含量4.計算:淀粉%=葡萄糖(%)×0.9注意:A.用乙醚提取少量的脂肪,若樣品中僅含微量脂肪,乙醚洗滌可以省略.B.用10%乙醇洗滌,以除去可溶性糖類(包括糊精)等物質(zhì).(二) 含少量淀粉樣品的測定法.此法適用于含淀粉量少的植物性樣品.如蔬菜以及某些果品等.2.操作步驟:稱5-10克于250毫升三角瓶加1N硫酸100毫升入高壓蒸

13、汽鍋15秒冷卻用20%NAOH中和加入20%醋酸鉛20毫升使蛋白質(zhì)全部沉淀再加入硫酸鈉11.5毫升沉淀除鉛錐形瓶全部倒入250毫升容量瓶加水至刻度靜置過濾取濾液按測定總糖量的方法測定葡萄糖含量另取一分樣品按總糖量的測定方法進行轉(zhuǎn)換并測定轉(zhuǎn)化糖量(以葡萄糖計)二者之差為葡萄糖量即為1克淀粉水解而得.計算:淀粉%=水解后的總糖(以葡萄糖計%)-轉(zhuǎn)化糖(以葡萄糖計%)×0.9（三）熟肉制品中淀粉含量的測定法在熟肉制品中有的加入相當(dāng)多的淀粉，有的幾乎不加。它們的差別是很大的，在測定這類食品時，根據(jù)情況決定取樣量的多少。測定方法有重量法、容量法、比色法。樣品的前處理一般步驟如下：a.制品在加熱

14、過程中加NaOH和乙醇溶液，破壞其組織和皂化脂肪。b.加醋酸酸化，用C2H5OH使淀粉，沉淀并分離。c.將沉淀濾出稱重，或者溶解后加酸水解。d.按總糖的測定方法測葡萄糖并換稱成淀粉量(一)容量法：稱樣5g于500ml磨口錐型瓶中加100ml水和7ml濃鹽酸加熱回流1h冷卻用30%NaOH中和破壞組織、皂化脂肪用濾紙濾入500ml容量瓶（加5ml2%醋酸鋅+5ml6%亞鐵氰化甲）加水至刻度搖勻按Lane-Eynm Method測定轉(zhuǎn)化糖量（同時做空白試驗）計算：淀粉%=500/W×100/50×（A-b）×0.9/V×100/1000注：W：樣品重量100

15、/50：取50ml樣液進行轉(zhuǎn)化后定容至100mlA：樣品中淀粉相當(dāng)于還原糖的重量，（以葡萄糖計）mgB：試劑空白相當(dāng)還原糖重量，（以葡萄糖計）mgV：取Vml經(jīng)轉(zhuǎn)化后的樣液測定還原糖，ml0.9：還原糖（以葡萄糖計）換稱為淀粉的回數(shù)1000：將毫克換算成克100：在100克中含淀粉良500：樣品溶于500毫升之中（二）比色法稱樣5g于250ml離心管中加水40ml搖勻（加3ml2%醋酸鋅+3ml6%亞鐵氰化甲）于1500轉(zhuǎn)/分離心機中離心5分鐘倒出上清液加25ml水重復(fù)上面操作兩次（每次加1ml12%醋酸鋅+1ml6%亞鐵氰化鉀）殘渣移入濾紙上然后把殘渣移入250ml錐型瓶用50ml0.1N Hcl將殘渣清洗入瓶內(nèi)于68-70°C水浴上轉(zhuǎn)化攪拌保持1.5h加12%鹽酸（V/V）10ml移入100ml容量瓶加20%磷酸15ml加水至