共振光散射光譜法論文：共振光散射光譜法紫外-可見吸收光譜法ctDNA絲裂霉素C酮洛芬鈷的配合物

1、共振光散射光譜法論文：共振光散射光譜法紫外-可見吸收光 譜法ctDNA 絲裂霉素 C 酮洛芬鉆的配合物【中文摘要】近年來，生物大分子核酸與藥物小分子之間的的相 互作用的研究已經(jīng)成為化學(xué)生物學(xué)與臨床醫(yī)學(xué)研究的重要部分。核酸不但是重要的生命遺傳物質(zhì)，而且在一些蛋白質(zhì)的合成中也起重要作 用。此外,核酸是構(gòu)成生物體遺傳功能、維持其生命的各種機(jī)能正常 運(yùn)行的基本單兀。在生長、遺傳、變異等一系列重大生命現(xiàn)象中起決 定性的作用。核酸在實(shí)踐應(yīng)用方面有極重要的作用，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)近兩千 種遺傳性疾病都和 DNA 吉構(gòu)有關(guān)。因此，在對藥物等小分子與核酸的 相互作用的研究上已經(jīng)變得十分有意義。 研究藥物與 DNA 兩者之

2、間的 相互作用方式，可以有助于理解并認(rèn)識某些疾病致病機(jī)制和藥物的藥 理機(jī)制，以及為藥物分子的結(jié)構(gòu)與藥效之間關(guān)系提供有利的信息，同 時也是指導(dǎo)新藥設(shè)計(jì)和藥物體外篩選的重要依據(jù)。 在過去的一段時間 藥物小分子與核酸之間的鍵合反應(yīng)已經(jīng)引起了研究工作者們的大量 的興趣。本論文主要研究了幾種不同的類型的藥物小分子與核酸之間 的相互作用，并采用以共振光散射技術(shù)為主的多種光譜手段探討兩者 反應(yīng)程度及作用機(jī)理。全文共分為四個部分：第一部分：小分子與核酸 之間反應(yīng)的研究方法及研究現(xiàn)狀主要介紹了核酸的分子結(jié)構(gòu)、性質(zhì)，以及核酸定量分析的方法，并詳細(xì)描述了用共振光散射光譜法對核酸 的定量測定。 總結(jié)了有機(jī)小分子與核酸

3、之間相互作用的研究方法及研 究現(xiàn)狀等。第二部分：多種光譜技術(shù)研究抗癌類藥物絲裂霉素 C 與ctDNA 的相互作用通過研究體系的共振光散射光譜和紫外吸收光譜的特征,并結(jié)合熒光分光光度法等，探求了絲裂霉素 C 與 ctDNA 的作用方 式。實(shí)驗(yàn)考查了 pH 離子強(qiáng)度、 濃度等參數(shù)對體系的影響并得出最 佳實(shí)驗(yàn)條件。共同揭示了絲裂霉素 C 與 ctDNA 的作用機(jī)理。結(jié)果表明，絲裂霉素 C 與DNA 勺相互作用存在有兩種結(jié)合模式：溝槽作用和嵌插 作用。通過這種混合作用模式使藥物與 DNA 形成穩(wěn)定的復(fù)合物而破壞 DNA 勺結(jié)構(gòu),發(fā)揮其抗癌作用。第三部分：多種光譜技術(shù)研究抗炎類藥 物酮洛芬與 DNA 兩

4、者之間的反應(yīng)采用以共振光散射為主的多種光譜 分析方法,如,紫外光譜、核磁波譜等技術(shù)對酮洛芬與小牛胸腺 DNA 之 間的相互作用進(jìn)行了研究，并對二者作用機(jī)理進(jìn)行了研究，機(jī)理研究 表明在 pH=6.5 的檸檬酸-Na2HP0 緩沖溶液中酮洛芬可以和 ctDNA 通 過溝槽鍵合的模式有效的結(jié)合成大離子的復(fù)合物，從而導(dǎo)致了共振光 散射強(qiáng)度的增強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)并考查了pH 酮洛芬濃度、緩沖溶液等對反 應(yīng)體系的影響。并根據(jù)酮洛芬與 ctDNA作用的 RLS 強(qiáng)度與 ctDNA 的濃 度呈線性關(guān)系，從而建立了一種簡單快速的定量測定 ctDNA 的新方 法。該方法具有靈敏度高、實(shí)用性好和操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。線性范圍 為:

5、1.20 - 9.88X10-6 mol/L,相關(guān)系數(shù) r=0.9989,檢測限為 1.33X10-9mol/L。第四部分：苯甲醛縮水合肼鉆配合物的合成及其與 ctDNA 相互作用的研究由本實(shí)驗(yàn)室合成金屬鉆配合物，并對其進(jìn)行紅外光譜 及元素分析，確定配合物的分子結(jié)構(gòu)。采用共振光散射光譜，紫外吸收 光譜,熒光光譜等多種技術(shù)研究鉆配合物與 DNA 相互作用的情況及其 作用方式。結(jié)果表明在 pH=5.0 的 Tris 緩沖溶液中鉆配合物可以和ctDNA 通過靜電結(jié)合的模式有效的結(jié)合成大離子的復(fù)合物，從而導(dǎo)致了共振光散射強(qiáng)度的增強(qiáng)。實(shí)驗(yàn)并考查了pH 離子強(qiáng)度、配合物濃度、緩沖溶液等對反應(yīng)體系的影響。并

6、根據(jù)配合物的共振光散射強(qiáng)度 在一定范圍內(nèi)與 ctDNA 的濃度成正比，建立了一種簡單快速測定納克 級核糖核酸的方法。該方法具有靈敏度高、線性范圍較寬和操作簡便 等優(yōu)點(diǎn)。線性范圍為(0.05 - 8.0 )卩 g/mL;相關(guān)系數(shù) r=0.9991,檢測 限為 4.31 ng/mL?！居⑽恼?In recent years, the study of the interaction of DNA withsmall molecules has bee n become an importa nt part in the field ofchemical biology and clinical

7、 medicine. Nucleic acid is not only the fundame ntal materials of life, but also play an important role in the synthesisof some proteins. In addition, the nucleic acid is the basic unit whichconstituted organism genetic function and maintained the normaloperationof various lifefunctions.And it also

8、plays the decisive rolein the series of major biological phe nomena. Nucleic acid has a veryimportant role in the practicalapplication,it has foundthat n early two thousa nd gen etic diseases have to do with DNA structure.Therefore, the research of the interaction between small molecules andDNA has become an importa