【新步步高】2014-2015學(xué)年高二生物人教版選修3課時(shí)作業(yè):2.2.2 動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體 Word版含解析_第1頁
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文檔簡介

1、第9課時(shí)動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體目標(biāo)導(dǎo)航1.掌握動(dòng)物細(xì)胞融合與植物體細(xì)胞雜交的區(qū)別和聯(lián)系。2.簡述動(dòng)物細(xì)胞融合和單克隆抗體制備的過程。3.了解單克隆抗體在醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的應(yīng)用,并舉例說明。一、動(dòng)物細(xì)胞融合1概念:_或_動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成_的過程,也稱細(xì)胞雜交。2過程:不同DNA的兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞_細(xì)胞。3意義:細(xì)胞融合技術(shù)突破了_方法的局限,使_成為可能。二、單克隆抗體1傳統(tǒng)獲得抗體(1)方法:向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種_,使動(dòng)物產(chǎn)生_;從動(dòng)物_中分離所需抗體。(2)特點(diǎn):_、_、_。2單克隆抗體的制備(1)過程多種融合細(xì)胞_抗體(2)雜交瘤細(xì)胞的特點(diǎn):_,產(chǎn)生_。(3)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):_,_,產(chǎn)量大。

2、3單克隆抗體的應(yīng)用(1)作為診斷試劑,具有準(zhǔn)確、_、簡易、_的優(yōu)點(diǎn)。(2)用于_和_。知識(shí)點(diǎn)一動(dòng)物細(xì)胞融合1閱讀下列材料:材料一由于細(xì)胞的密度不同,在地面上受重力影響,細(xì)胞的融合非常困難,在太空進(jìn)行此實(shí)驗(yàn)比在地面實(shí)驗(yàn)的細(xì)胞融合率要高很多?!吧裰邸绷?hào)飛船上進(jìn)行了B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的融合、黃花煙草原生質(zhì)體和“革新”一號(hào)煙草原生質(zhì)體的融合兩個(gè)科學(xué)實(shí)驗(yàn),在電融合儀內(nèi)經(jīng)過160 min后,終于獲得成功。材料二如圖為哺乳動(dòng)物生殖過程及相關(guān)細(xì)胞工程的示意圖,其中b為卵細(xì)胞,c、d為體細(xì)胞。根據(jù)以上材料回答:(1)細(xì)胞融合技術(shù)與傳統(tǒng)的有性雜交相比,其優(yōu)越性在于_。在太空進(jìn)行細(xì)胞融合與在地面進(jìn)行細(xì)胞融合相

3、比,其優(yōu)越性在于_。(2)動(dòng)物個(gè)體甲、乙的產(chǎn)生分別屬于哪種生殖?_。(3)在“神舟”六號(hào)飛船上進(jìn)行的“太空融合”,與上圖中的方法_的原理相同。(4)人工誘導(dǎo)動(dòng)物細(xì)胞融合與誘導(dǎo)植物細(xì)胞融合的方法相同的是都可用物理法和化學(xué)法,此外動(dòng)物細(xì)胞融合還可用_作為誘導(dǎo)劑。知識(shí)點(diǎn)二單克隆抗體2某實(shí)驗(yàn)室做了下圖所示的實(shí)驗(yàn)研究,下列相關(guān)敘述,正確的是()A與纖維母細(xì)胞相比,過程形成的誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性較低B過程是誘導(dǎo)干細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和遺傳物質(zhì)發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程C每個(gè)Y細(xì)胞只產(chǎn)生一種抗體,故過程不需用選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行篩選D過程產(chǎn)生的單抗,不需細(xì)胞膜上載體蛋白的協(xié)助就能釋放到細(xì)胞外3近年來,我國死于狂犬病的人數(shù)有上升趨

4、勢(shì)??袢〔《镜暮怂崾荝NA,機(jī)體感染病毒后產(chǎn)生的特異性IgG抗體,能消除狂犬病病毒,這是接觸狂犬病病毒后及時(shí)注射疫苗和特異性抗體的重要依據(jù)。我國利用地鼠的腎細(xì)胞培養(yǎng)狂犬病疫苗,已取得良好效果。請(qǐng)根據(jù)上述材料,回答下列問題。(1)巴斯德利用固定毒株制成減毒活疫苗,預(yù)防狂犬病,制成減毒活疫苗需要用_培養(yǎng)。(2)特異性抗體獲取可用單克隆抗體制備。在制備單克隆抗體的過程中,應(yīng)用的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)是_。(3)下面是單克隆抗體制備過程示意圖,請(qǐng)據(jù)圖回答:圖中A過程從小鼠的脾臟中取得的“小鼠細(xì)胞”是_細(xì)胞,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生_。從小鼠體內(nèi)提取分離該細(xì)胞之前,給小鼠注射的特定的物質(zhì)是_。圖中B過程是細(xì)胞融合,該

5、過程需要用滅活的_、聚乙二醇或電激等誘導(dǎo)。特異性抗體獲取的方法也可以采用向動(dòng)物體內(nèi)反復(fù)注射某種抗原,使動(dòng)物產(chǎn)生抗體,然后從動(dòng)物血清中分離所需抗體。與這種方法制備的抗體相比,單克隆抗體具有_等優(yōu)點(diǎn)。(4)動(dòng)物細(xì)胞體外培養(yǎng)需要滿足的環(huán)境條件有_。(5)單克隆抗體的制備還有哪些用途?_?;A(chǔ)落實(shí)1科學(xué)家用滅活的病毒把骨髓瘤細(xì)胞與效應(yīng)B細(xì)胞融合,得到雜交瘤細(xì)胞,則滅活病毒的作用是()A病毒比較小,可鉆入到細(xì)胞內(nèi)B滅活的病毒已完全死亡,死亡的病毒可以讓細(xì)胞聚集C滅活的病毒已失去感染活性,對(duì)各種動(dòng)物細(xì)胞不造成破壞,但所保留的融合活性,可以使不同的動(dòng)物細(xì)胞進(jìn)行融合D滅活的病毒帶有目的基因,通過整合可以讓雜合

6、細(xì)胞帶有目的基因2單克隆抗體技術(shù)在疾病診斷和治療以及生命科學(xué)研究中具有廣泛的應(yīng)用。下列關(guān)于單克隆抗體的敘述,錯(cuò)誤的是()A特異性強(qiáng)、靈敏度高B與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”C體外培養(yǎng)B淋巴細(xì)胞可大量制備單克隆抗體D由效應(yīng)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞分泌3近幾年神舟飛船頻頻成功發(fā)射和著陸。在飛船上,科學(xué)家進(jìn)行了無人搭載的空間動(dòng)物細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)。該實(shí)驗(yàn)所依據(jù)的原理和促進(jìn)細(xì)胞融合的方法分別是()A細(xì)胞的全能性、滅活病毒誘導(dǎo)融合B細(xì)胞的全能性、電刺激融合C生物膜的流動(dòng)性、滅活病毒誘導(dǎo)融合D生物膜的流動(dòng)性、電刺激融合4由單克隆抗體研制而成的“生物導(dǎo)彈”由兩部分組成,一是“瞄準(zhǔn)裝置”,二是殺

7、傷性“彈頭”。下列對(duì)此敘述不正確的是()A“瞄準(zhǔn)裝置”是指識(shí)別腫瘤的單克隆抗體B“彈頭”是由化學(xué)藥物構(gòu)成的C“彈頭”具有特異性D“瞄準(zhǔn)裝置”具有特異性5將小鼠骨髓瘤細(xì)胞與一種B淋巴細(xì)胞融合,可使融合的細(xì)胞經(jīng)培養(yǎng)產(chǎn)生單克隆抗體,下列關(guān)于此項(xiàng)技術(shù)的依據(jù)、步驟及應(yīng)用的敘述不正確的是()AB淋巴細(xì)胞可以產(chǎn)生抗體,但不能無限增殖B骨髓瘤細(xì)胞可以無限增殖,但不能產(chǎn)生抗體CB淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞直接放入培養(yǎng)液中就能融合為雜交瘤細(xì)胞D單克隆抗體可用于疾病的診斷、治療和預(yù)防,也可用于研制治療癌癥的“生物導(dǎo)彈”能力提升6新技術(shù)的建立和應(yīng)用對(duì)生物學(xué)發(fā)展至關(guān)重要。下列技術(shù)(或儀器)與應(yīng)用匹配正確的是(多選)()APC

8、R技術(shù)擴(kuò)增蛋白質(zhì)B雜交瘤技術(shù)制備單克隆抗體C光學(xué)顯微鏡觀察葉綠體的基粒D花粉離體培養(yǎng)培育單倍體植物7用動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)獲取單克隆抗體,下列實(shí)驗(yàn)步驟中錯(cuò)誤的是()A將抗原注入小鼠體內(nèi),獲得能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞B用氯化鈣作誘導(dǎo)劑,促使能產(chǎn)生抗體的B淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合C篩選雜交瘤細(xì)胞,并從中選出能產(chǎn)生所需抗體的細(xì)胞群,培養(yǎng)后提取單克隆抗體D該雜交瘤細(xì)胞株的增殖方式和產(chǎn)物分別是有絲分裂和單克隆抗體8下列關(guān)于生物技術(shù)的有關(guān)說法,正確的是()A細(xì)胞具有全能性的原因是體細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個(gè)體的能力B雜交瘤細(xì)胞的主要特點(diǎn)是既能在體外大量增殖,同時(shí)又能分泌特異性抗體C在基因操作的基本步驟中,

9、目的基因的檢測和鑒定不進(jìn)行堿基互補(bǔ)配對(duì)D滅菌是指殺死一定環(huán)境中的所有微生物的細(xì)胞題號(hào)12345678答案9.下列各圖表示單克隆抗體制備過程的各階段圖解,請(qǐng)據(jù)圖回答下列問題:(1)請(qǐng)用箭頭把代表各圖解的字母按單克隆抗體制備過程的順序連接起來。_。(2)在單克隆抗體制備過程中,之所以選用B淋巴細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞,是因?yàn)樗鼈內(nèi)诤虾蟮碾s交瘤細(xì)胞具有_、_的特性。(3)由圖示可看出,單克隆抗體的制備過程運(yùn)用了_和_等動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)手段。綜合拓展10人類在預(yù)防與診療傳染性疾病過程中,經(jīng)常使用疫苗和抗體。已知某傳染性疾病的病原體為RNA病毒,該病毒表面的A蛋白為主要抗原,其疫苗生產(chǎn)和單克隆抗體制備的流程之一

10、如下圖:請(qǐng)回答:(1)過程代表的是_。(2)過程構(gòu)建A基因表達(dá)載體時(shí),必須使用_和_兩種工具酶。(3)過程采用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)是_,獲得的X是_。(4)對(duì)健康人進(jìn)行該傳染病免疫預(yù)防時(shí),可選用圖中基因工程生產(chǎn)的_所制備的疫苗。對(duì)該傳染病疑似患者確診時(shí),可從疑似患者體內(nèi)分離病毒,與已知病毒進(jìn)行_比較;或用圖中的_進(jìn)行特異性結(jié)合檢測。答案知識(shí)清單一、1.兩個(gè)多個(gè)一個(gè)細(xì)胞2.雜交3有性雜交遠(yuǎn)緣雜交二、1.(1)抗原抗體血清(2)產(chǎn)量低純度低特異性差2(1)脾臟細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞能分泌所需抗體的細(xì)胞單克隆(2)無限增殖單克隆抗體(3)純度高特異性強(qiáng)3(1)高效快速(2)治療疾病運(yùn)載藥物對(duì)點(diǎn)訓(xùn)練1(1)克服了遠(yuǎn)緣雜

11、交不親和的障礙解決了因兩種細(xì)胞密度不同而難以融合的問題(2)有性生殖;無性生殖(3)三(4)滅活的病毒解析(1)細(xì)胞融合與精卵結(jié)合相比,通過人工的方法克服了存在于物種之間的遺傳屏障的困難,從而能夠按照人們的主觀意愿,把來自不同物種的不同組織類型的細(xì)胞融合起來,克服了遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙。若在太空中進(jìn)行細(xì)胞融合,可以解決因兩種細(xì)胞密度不同而難以融合的問題。(2)動(dòng)物個(gè)體甲是通過精卵結(jié)合產(chǎn)生的,屬于有性生殖,而乙是通過體細(xì)胞核移植技術(shù)產(chǎn)生的,屬于無性生殖。(3)“太空融合”是細(xì)胞融合,與方法三的原理相同,都是細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(4)動(dòng)物細(xì)胞融合,除了可以利用誘導(dǎo)植物原生質(zhì)體融合的方法外,還可以采用滅

12、活的病毒。知識(shí)鏈接動(dòng)物細(xì)胞融合(1)概念:是指兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程,也叫細(xì)胞雜交。(2)原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性。(3)誘導(dǎo)融合的方法物理化學(xué)方法:與植物體細(xì)胞雜交相同,如聚乙二醇、電激法等生物方法:滅活的病毒(4)過程(5)總結(jié):過程:膜融合質(zhì)融合核融合融合成功的標(biāo)志:雜交細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂。重組細(xì)胞的特點(diǎn):雜交細(xì)胞具有兩個(gè)細(xì)胞的遺傳信息,能表現(xiàn)兩個(gè)親本的性狀。2D誘導(dǎo)干細(xì)胞的全能性比纖維母細(xì)胞高;誘導(dǎo)分化過程中遺傳物質(zhì)未發(fā)生改變,只是基因的選擇性表達(dá);Y細(xì)胞有很多種,故需用選擇培養(yǎng)基進(jìn)行篩選。單抗的分泌應(yīng)通過胞吐方式,不需載體協(xié)助但消耗能量。知識(shí)鏈接(1)單克隆抗體的制備流程

13、(2)原理3(1)活細(xì)胞(2)動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)(3)免疫的B淋巴抗體抗原(或狂犬病病毒)病毒(或仙臺(tái)病毒)特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可以大量制備(4)無菌、無毒、適宜溫度和pH、充足的氣體、營養(yǎng)物質(zhì)(5)作為診斷試劑、運(yùn)載藥物(或“生物導(dǎo)彈”)等解析病毒是營寄生生活的,所以體外培養(yǎng)只能利用活細(xì)胞進(jìn)行。單克隆抗體制備應(yīng)用的動(dòng)物細(xì)胞工程技術(shù)是動(dòng)物細(xì)胞的融合。圖示中A過程從小鼠的脾臟中獲取的“小鼠細(xì)胞”是免疫的B淋巴細(xì)胞,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生抗體,該細(xì)胞是受到相應(yīng)抗原刺激后才產(chǎn)生的。誘導(dǎo)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的促融劑是聚乙二醇、滅活的病毒等。單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高,并可大量制備

14、的優(yōu)點(diǎn)。動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)需要在無菌、無毒、溫度和pH適宜,充足的O2、營養(yǎng)物質(zhì)充足的條件下進(jìn)行。單克隆抗體可用于制備“生物導(dǎo)彈”和診斷試劑等。歸納提升1.制備單克隆抗體的關(guān)鍵思路及操作依據(jù)(1)關(guān)鍵思路克隆單一的B淋巴細(xì)胞,形成細(xì)胞群;將B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,獲得雜交瘤細(xì)胞。(2)用B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合的原因每一個(gè)B淋巴細(xì)胞只能分泌一種特異性抗體;不同種類的B淋巴細(xì)胞分泌的抗體不同;B淋巴細(xì)胞在體外培養(yǎng)時(shí)不能無限增殖;骨髓瘤細(xì)胞能夠無限增殖。2單克隆抗體制備過程中的篩選及原因(1)第一次篩選是在B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合之后,因?yàn)橛腥N融合情況:B淋巴細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合、骨髓瘤細(xì)胞

15、與骨髓瘤細(xì)胞融合、B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,而只有B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞的融合細(xì)胞才是需要的雜種細(xì)胞。(2)第二次篩選需先在多孔培養(yǎng)皿上培養(yǎng),在每個(gè)孔只有一個(gè)雜交瘤細(xì)胞的情況下開始培養(yǎng),然后再篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的細(xì)胞群。由于該細(xì)胞群是由單個(gè)雜交瘤細(xì)胞克隆來的,所以產(chǎn)生的抗體一定是化學(xué)性質(zhì)單一、特異性強(qiáng)的單克隆抗體。課后作業(yè)1C動(dòng)物細(xì)胞融合常用滅活的病毒作誘導(dǎo)劑,是因?yàn)闇缁畹牟《静辉倬哂懈腥净钚?,不?huì)對(duì)細(xì)胞造成破壞,但仍可穿透細(xì)胞膜,促使不同的動(dòng)物細(xì)胞融合。2C抗體是由B淋巴細(xì)胞分泌的,每一種淋巴細(xì)胞只能分泌一種抗體。要想獲得大量單一抗體,需要將某一種淋巴細(xì)胞大量克隆,但是在體外培養(yǎng)的條件

16、下,B淋巴細(xì)胞不能無限增殖。由效應(yīng)B淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合而成的雜交瘤細(xì)胞,能在體外培養(yǎng)的條件下大量增殖,并分泌單克隆抗體。單克隆抗體與常規(guī)抗體相比,特異性強(qiáng)、靈敏度高,與抗癌藥物結(jié)合可制成“生物導(dǎo)彈”,直接作用于癌細(xì)胞。3C不管是動(dòng)物細(xì)胞融合,還是原生質(zhì)體融合,都是利用了生物膜具有流動(dòng)性這一原理。動(dòng)物細(xì)胞融合時(shí)最常用的誘導(dǎo)手段就是利用滅活的病毒誘導(dǎo)。4C單克隆抗體具有特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞等的作用,可以作為確定目標(biāo)的“瞄準(zhǔn)裝置”。而“彈頭”是由具有殺傷力的藥物構(gòu)成的,但它不具有特異性識(shí)別腫瘤細(xì)胞的功能。5C雜交瘤細(xì)胞需要滅活的仙臺(tái)病毒或聚乙二醇的誘導(dǎo)才能融合。6BDPCR技術(shù)應(yīng)用于DNA的擴(kuò)增

17、,A選項(xiàng)錯(cuò)誤;葉綠體的基粒屬于細(xì)胞的亞顯微結(jié)構(gòu),只有通過電子顯微鏡才能觀察到,C選項(xiàng)錯(cuò)誤;單克隆抗體的制備是通過已免疫的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞雜交后實(shí)現(xiàn)的,屬于雜交瘤技術(shù),B選項(xiàng)正確;培育單倍體植物常采用花粉離體培養(yǎng)技術(shù),D選項(xiàng)正確。7BB淋巴細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合需要滅活的病毒、聚乙二醇或物理因素來誘導(dǎo),氯化鈣不能作為誘導(dǎo)劑。氯化鈣的作用是在基因工程中用于擴(kuò)大細(xì)胞壁的通透性,便于重組質(zhì)粒進(jìn)入微生物的細(xì)胞內(nèi)。8B基因的表達(dá)、轉(zhuǎn)錄和翻譯都有堿基的互補(bǔ)配對(duì)。滅菌指殺死一定環(huán)境中的所有微生物的細(xì)胞、芽孢和孢子。9(1)(2)無限增殖產(chǎn)生特異性抗體(3)動(dòng)物細(xì)胞融合動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)解析首先把小鼠骨髓瘤細(xì)胞與

18、經(jīng)特定抗原免疫過的小鼠B細(xì)胞進(jìn)行融合獲得雜交瘤細(xì)胞,然后篩選出能產(chǎn)生特異性抗體的雜交瘤細(xì)胞,最后分別在體外或體內(nèi)培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞,即可獲得單克隆抗體。10(1)逆(反)轉(zhuǎn)錄(2)限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶)DNA連接酶(兩空可以互換)(3)細(xì)胞融合雜交瘤細(xì)胞(4) A蛋白核酸(基因)序列抗A蛋白的單克隆抗體解析(1)中心法則中,對(duì)于少數(shù)的以RNA為遺傳物質(zhì)的病毒,其遺傳信息的傳遞過程需要補(bǔ)充的過程有RNA的逆轉(zhuǎn)錄和RNA的復(fù)制過程,圖中過程代表的是反轉(zhuǎn)錄的過程。(2)基因工程的步驟是:目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測和鑒定,其中構(gòu)建基因表達(dá)載體中需要限制酶來切割以獲取目的基因,同時(shí)需要相

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