血液透析患者生化項目檢測中抗凝劑的使用分析

1、血液透析患者生化項目檢測中抗凝劑的使用分析龔衛(wèi)鋒1,毛慧2(1西安市中心醫(yī)院輸血科,西安710003;2延安市中心血站摘要:目的建立一種防止透析患者血清自凝,以免影響檢測正常進行的方法。方法對透析患者血液中加肝素D甘露糖氟化鈉(heparin D-mannose sodium fluoride抗凝劑(HMF組和血清分離后加HMF抗凝劑組與無抗凝劑組樣本進行檢測。結(jié)果未加入抗凝劑組、加HMF抗凝劑組、血清分離后加HMF抗凝劑組各項生化指標中,除Na+與CK外,其余各項指標均無統(tǒng)計學差異。結(jié)論在血液透析患者血液或血清中加入抗凝劑再進行檢測是一種可靠、穩(wěn)妥的方法和手段。關(guān)鍵詞:血液透析;生化檢測;抗

2、凝劑中圖分類號:44611文獻標志碼:A文章編號:10076611(201307055403DOI:103969/JISSN10076611201307013血液透析是一個體外循環(huán)過程,血液與管道和透析膜的接觸可觸發(fā)機體的凝血系統(tǒng),導致血液凝固,因此,血液透析時常使用肝素抗凝劑預防凝血。但是對有嚴重活動性出血或自身凝血功能明顯異常或近期經(jīng)受大的手術(shù)或創(chuàng)傷的透析患者必須采用無肝素透析,未使用抗凝劑血液透析過程中發(fā)生凝血的機率更大,腎透析患者有血凝異常,或受透析液影響,其血液凝固性發(fā)生改變,所以在血液透析患者送檢血樣中加入合適的抗凝劑十分必要。本文主要探討使用肝素D甘露糖氟化鈉(HMF抗凝劑來解決

3、透析患者血清自凝影響生化項目檢測的問題。筆者為了探討肝素D甘露糖氟化鈉抗凝劑抗凝血漿用于生化指標測定的可行性,用肝素D甘露糖氟化鈉抗凝血漿與非抗凝管的血清進行28項生化指標的檢測,現(xiàn)將結(jié)果報道如下。1材料與方法11抗凝管配制肝素D甘露糖氟化鈉(HMF抗凝管:每管加含有60g/L D甘露糖和2g/L氟化鈉(NaF的水溶液300l,再加6250kU/L肝素鈉注射液5l1。12血標本留取抽取52名腎透析患者靜脈血液,各分裝3ml 于透析患者血液中加肝素D甘露糖氟化鈉(NaF抗凝劑(HMF組和血清分離后加HMF抗凝劑組與無抗凝劑組各組患者樣本試管內(nèi),用于分析血液生化檢測結(jié)果?？鼓褐锌鼓齽┖繛?

4、HMF管含肝素10kU/L,D甘露糖6g/L,NaF02 g/L。13測定項目與試劑本實驗室開展的28個實驗項目,K+、Na+、Cl、Ca2+測定用離子選擇電極法,肌酸激酶(CK、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT、天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST、堿性磷酸酶(ALP、-谷氨?；D(zhuǎn)移酶(GGT、膽堿酯酶(CHE、醛縮酶(ALD、-L巖藻糖苷酶(AFU、淀粉酶(AMS、LDH檢測采用速率法,總蛋白檢測采用雙縮脲法,白蛋白檢測采用溴甲酚綠法,總膽紅素(TBIL、直接膽紅素(DBIL檢測采用釩酸鹽氧化法,膽酐、HDL-C、LDL-C檢測采用酶法,TC、TG檢測采用氧化酶法,尿酸(UA檢測采用TOOS法,葡萄糖檢測

5、采用己糖激酶法,Apo A1、Apo B檢測采用透射比濁法,Mg2+檢測采用終點法, Beckman LX21全自動生化分析儀用于28個項目測定,28個項目試劑均購于北京中生公司。14方法不含抗凝劑的各管優(yōu)先檢測,以防其血清自凝,含上述抗凝劑的各管隨后檢測。不含抗凝劑的各管血清中加入抗凝劑與不含抗凝劑的各管檢測結(jié)果做對照。參照全國臨床檢驗操作規(guī)程及試劑盒說明進行相關(guān)檢測2。15統(tǒng)計學分析每例樣品經(jīng)3次重復測定,結(jié)果取均值,以珋xs表示。采用SPSS100統(tǒng)計軟件,使用抗凝劑處理血漿結(jié)果分別與非抗凝劑處理的血清結(jié)果進行比較,采用t檢驗。P005為差異有統(tǒng)計學意義。2結(jié)果不含和含上述抗凝劑的各管結(jié)

6、果分析見表1。從表1可知,加HMF抗凝劑組和血清分離后加HMF抗凝劑組與無抗凝劑組各項生化檢查結(jié)果比較,除CK和Na+兩項指標有統(tǒng)計學差異外,其他各項均無統(tǒng)計學差異(P005。3討論WHO于2002年發(fā)表了一個專題報告,就不同抗凝劑制備的血漿在臨床檢驗中的應(yīng)用進行了詳盡的評述,并推薦在56項檢驗項目中使用血漿3。從455J Shanxi Med Univ,Jul2013,Vol44No7表1加HMF抗凝劑組和血清分離后加HMF抗凝劑組與無抗凝劑組各項生化檢查結(jié)果比較(n=52實驗項目無抗凝劑組加HMF抗凝劑組血清分離后加HMF抗凝劑組P1P2CK/(IU/L162372515116041542

7、604001005 ALT/(IU/L496834938150183005005 AST/(IU/L584915878858985005005 ALP/(IU/L1586671596531570642005005 GGT/(IU/L612846188160884005005 CHE/(IU/L326714123253144732831452005005 ALD/(IU/L861284138715005005 AFU/(IU/L480804708049083005005 AMS/(IU/L820130810140830150005005 LDH/(IU/L17506801760670177069

8、0005005總蛋白/(g/L702148714136693147005005白蛋白/(g/L435674297244578005005 TBIL/(mol/L163721637215871005005 DBIL/(mol/L482648264924005005肌酐/(mol/L963213972198983203005005 UA/(mol/L326414153283142332911437005005 TC/(mmol/L452224582345722005005 TG/(mmol/L186072189071187073005005 HDL-C/(mmol/L127056128054130

9、051005005 LDL-C/(mmol/L203082201087208082005005 Apo A1/(g/L132078134075133076005005 Apo B/(g/L153083151082154087005005葡萄糖/(mmol/L576133579137581135005005 Mg2+/(mmol/L089046091043088048005005 Ca2+/(mmol/L243112241114247115005005 K+/(mmol/L432151435142438146005005 Na+/(mmol/L14125731523592151959300500

10、5 Cl/(mmol/L101541710194121023408005005 P1值表示無抗凝劑組與加HMF抗凝劑組比較結(jié)果的P值,P2值表示無抗凝劑組與血清分離后加HMF抗凝劑組比較結(jié)果的P值表1可知,不含和含上述抗凝劑的各管結(jié)果大部分項目無統(tǒng)計學差異,所以為防止透析患者血液在樣本檢測期間發(fā)生自凝,最好選用加入抗凝劑管為佳,否則,樣本在檢測期間發(fā)生自凝,極易堵塞檢測分析儀管路系統(tǒng),造成管路堵塞,清洗費時,并且損耗清洗劑,不能及時發(fā)出結(jié)果。血清和HMF抗凝劑在未抗凝血血清中后期加入各管結(jié)果大部分檢測結(jié)果無統(tǒng)計學差異,所以為防止透析患者血液在樣本檢測期間發(fā)生自凝,最好選用加入抗凝劑管,未加入抗

11、凝劑管在血清分離后,加入抗凝劑也可以。除CK 和Na+兩項指標有統(tǒng)計學差異外,其余指標在加HMF抗凝劑組和血清分離后加HMF抗凝劑組與無抗凝劑組比較差異不明顯,這表明加入HMF抗凝劑代替血清檢測上述28項生化項目是可行的,加入抗凝劑節(jié)約了清洗儀器管路系統(tǒng)試劑,解決了因未加入抗凝劑透析患者血液分離不及時而不能按時發(fā)出實驗報告的麻煩,避免了未加入抗凝劑樣本易溶血而影響實驗結(jié)果的問題,有利于臨床檢驗工作提高檢驗速度和檢驗質(zhì)量,值得普及和推廣。在血液透析的過程中,透析液電解質(zhì)濃度與正常血漿相近,并可按臨床情況予以調(diào)整,如果產(chǎn)生凝血會使透析的效果下降,血管內(nèi)凝血會使血壓升高,引起脫水過多,造成透析患者血

12、液丟失,嚴重者會導致貧血;持續(xù)而嚴重的貧血,使心臟發(fā)生無法逆轉(zhuǎn)或只能部分逆轉(zhuǎn)的變化,如左心室肥大或左心室擴張,增加血液透析患者死亡機會。因此,如何減少透析555山西醫(yī)科大學學報,2013年7月,第44卷第7期膜發(fā)生嚴重凝血現(xiàn)象非常重要。對于檢驗方面,防止血液異常凝固對實驗檢測正常進行十分重要。維持性血透病人的血鈣水平多數(shù)偏低,透析液鈣含量應(yīng)在15175mmol/L之間,血鈣水平偏低會影響凝血功能,使血液凝固時間增加。通常透析患者出現(xiàn)低鈣血癥,需要補充鈣鹽、活性VitD3,并提高透析液的鈣濃度。但下列情況可產(chǎn)生高鈣血癥:繼發(fā)性甲狀腺機能亢進、血漿磷濃度迅速降低、大量補充鈣鹽、活性VitD3、急性

13、高鈣血癥、使用鈣離子交換樹脂或噻嗪類藥物。而鈣離子濃度升高會促進血液凝血系統(tǒng)活性增加,是透析患者血清自凝的原因之一。HMF抗凝劑穩(wěn)定性好,是一種能較好地運用于生化檢測的實驗試劑,對于透析患者來說,透析過程中加入肝素量過少或補充鈣制劑過多都會對血液凝血系統(tǒng)造成影響,有些患者凝血系統(tǒng)異常,所以,加入適當抗凝劑是必要的。肝素是通過與抗凝血酶結(jié)合,加強抗凝血酶滅活絲氨酸蛋白酶的作用,從而阻止凝血酶的形成,并有阻止血小板聚集等多種抗凝作用4。有文獻報道肝素對陽離子有一定的螯合作用,使抗凝靜脈血陽離子檢測結(jié)果偏低5。肝素鈉抗凝血漿鈉的濃度與血清鈉濃度也存在差異(P005這與抗凝劑本身所含成分有關(guān),但是這種

14、差異在臨床中無實際意義6。有報道指出肝素對第一代-L-巖藻糖苷酶(AFU試劑有基質(zhì)效應(yīng)7,改進后的第二代-L-巖藻糖苷酶(AFU試劑采用了目前最先進的對硝基苯酚速率法,用MG-2氯對硝基苯酚-L巖藻糖苷作為底物,靈敏度、精密度、抗干擾及試劑穩(wěn)定性都很高8?？傊?相對枸櫞酸鈉、HM、HMF和QAAC抗凝劑,其中以HMF作用最好,且較適用多種生化檢查,對透析患者引起的凝血異常標本最為適用,從實驗結(jié)果看,未加入抗凝劑組、加HMF抗凝劑組、血清分離后加HMF抗凝劑組各項生化指標大部分無統(tǒng)計學差異,因此,在透析患者凝血異常標本中加入HMF抗凝劑節(jié)約了檢測時間,同時預防了標本異常凝固引起的儀器阻塞現(xiàn)象的發(fā)

15、生?？鼓齽ΡＷC血漿和細胞的快速分離,縮短患者等候時間具有重要意義。肝素D甘露糖氟化鈉抗凝能避開血液凝固過程,可盡快分離標本,故其測定值更能反映體內(nèi)真實情況。雖然一些干擾因素可能會影響實驗室測試結(jié)果,我們的數(shù)據(jù)表明,心臟肌鈣蛋白I檢測結(jié)果在安全劑量下在不同的采血管結(jié)果無統(tǒng)計學上的差異,與此相反,CK-MB和肌紅蛋白檢測結(jié)果因抗凝劑的有無及抗凝劑的種類變化而改變,這與臨床診斷沒有相關(guān)性9。文獻報道肝素被認為是對生化結(jié)果影響較小的抗凝劑10,此次實驗結(jié)果與其結(jié)論亦相符。參考文獻:1孫永順血糖測定四種抗凝劑的比較和評價J中華醫(yī)學檢驗雜志,1991,14(2:872葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜全國臨床檢驗操

16、作規(guī)程M3版南京:東南大學出版社,2006:6186473WHOUse of anticoagulants in diagnostic laboratory investigationsEB/OLhttp:/whqlibdocwhoint/hq/2002/WHO_DIL_LAB_991_ev2pdf,200224溫潔,王雅杰,張麗君真空采血管的使用與生化檢驗的質(zhì)量控制J哈爾濱醫(yī)科大學學報,2002,36(5:4064075唐龍泉不同儀器檢測電解質(zhì)結(jié)果分析J醫(yī)學信息,2010,23(4:106910706任繼欣兩種肝素抗凝血漿對檢測8項生化指標的影響J國際檢驗醫(yī)學雜志,2012,33(16:204720487楊永紅肝素抗凝血漿用于檢測十項酶活力生化指標的探討J檢驗醫(yī)學與臨床,2005,2(4:1801828段俊林-L巖藻糖苷酶的研究進展J國際檢驗醫(yī)學雜志,2008,29(8:7317329J Daves M,Trevisan D,Ce