第三章藥物的雜質(zhì)檢驗ppt課件

1、第三章第三章 藥物的雜質(zhì)檢查藥物的雜質(zhì)檢查第一節(jié) 藥物的雜質(zhì)及其來源 一、藥物的純度一、藥物的純度 指藥物純凈程度，反映了藥物質(zhì)量的優(yōu)劣，含有雜質(zhì)是影響藥物純度的主要因素。 雜質(zhì)impurity是指： 1. 有毒副作用的物質(zhì) 2. 本身無毒副作用，但影響藥物的穩(wěn)定性和療效的物質(zhì) 3. 本身無毒副作用，也不影響藥物的穩(wěn)定性和療效，但影響藥物的科學(xué)管理的物質(zhì)二、藥物中雜質(zhì)的來源二、藥物中雜質(zhì)的來源1. 生產(chǎn)過程中引入（1原料、反應(yīng)中間體及副產(chǎn)物 （2試劑、溶劑、催化劑類 （3生產(chǎn)中所用金屬器皿、裝置以及其他不耐酸、堿的金屬工具所帶來的雜質(zhì)2. 貯藏過程中產(chǎn)生 水解、氧化、分解、異構(gòu)化、晶形轉(zhuǎn)變、聚

2、合、潮解和發(fā)霉等 例在藥物生產(chǎn)過程中引入雜質(zhì)的途徑為 A. 原料不純或部分未反應(yīng)完全的原料造成 B. 合成過程中產(chǎn)生的中間體或副產(chǎn)物分離不凈造成 C. 需加入的各種試劑產(chǎn)生吸附，共沉淀生成混晶等造成 D. 所用金屬器皿及裝置等引入雜質(zhì) E. 由于操作不妥，日光曝曬而使產(chǎn)品發(fā)生分解引入的雜質(zhì) 三、雜質(zhì)的分類三、雜質(zhì)的分類 藥物中的雜質(zhì)按來源分為 1. 一般雜質(zhì)：如氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、酸、堿、水分、易炭化物、熾灼殘渣等。一般雜質(zhì)其檢查方法收載在中國藥典的附錄中。 2. 特殊雜質(zhì)：指某一個或某一類藥物在生產(chǎn)或貯藏過程中引入的雜質(zhì)，如阿司匹林中的游離水楊酸、異煙肼中的游離肼、甾體激素中

3、的其他甾體。特殊雜質(zhì)檢查方法收載在中國藥典正文各藥品的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中。四、藥物的純度與化學(xué)試劑的純度四、藥物的純度與化學(xué)試劑的純度 藥物的純度考慮雜質(zhì)的生理作用，藥品只有兩個等級：合格或不合格。 化學(xué)試劑有很多等級，如基準(zhǔn)試劑、優(yōu)級純GR）、分析純AR）、化學(xué)純CP）、色譜純、光譜純。第二節(jié)第二節(jié) 藥物的雜質(zhì)檢查法藥物的雜質(zhì)檢查法一、雜質(zhì)限量一、雜質(zhì)限量 指藥物中允許雜質(zhì)存在的最大量，通常用百分之幾或百萬分之幾ppm來表示 二、藥物的雜質(zhì)檢查法 1. 對照法 限量檢查法 特點：不需知道雜質(zhì)的準(zhǔn)確含量 2. 靈敏度法 系指在供試品溶液中加入試劑，在一定反應(yīng)條件下，不得有正反應(yīng)出現(xiàn)。 特點：不需對照品

4、 3. 比較法 含量測定法：測定雜質(zhì)的絕對含量，如測定吸光度、pH值等。 特點：準(zhǔn)確測定雜質(zhì)的量，不需對照品。三、三、 雜質(zhì)限量的計算雜質(zhì)限量的計算供試品量允許雜質(zhì)存在的最大量雜質(zhì)限量 %100ScVL供試品量標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液體積雜質(zhì)限量示例1：檢查某藥物中的砷鹽，取標(biāo)準(zhǔn)砷溶液2ml每1ml相當(dāng)于1g的As制備標(biāo)準(zhǔn)砷斑，砷鹽限量為0.0001，應(yīng)取供試品的量為 A. 0.20g B. 2.0g C0.020g D. 1.0g E. 0.10gg0 . 2%100%0001. 01012%1006LcVS知：c1 g/ml1106 g/mlV2ml L0.0001%第三節(jié)第三節(jié) 一般雜質(zhì)檢查

5、一般雜質(zhì)檢查一、一般雜質(zhì)檢查規(guī)則一、一般雜質(zhì)檢查規(guī)則 藥品檢驗操作標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定： 1. 遵循平行操作原則（1儀器的配對性儀器的配對性 如納氏比色如納氏比色管應(yīng)配對，刻度線高低相差不超管應(yīng)配對，刻度線高低相差不超過過2mm，砷鹽檢查時導(dǎo)氣管長度，砷鹽檢查時導(dǎo)氣管長度及孔的大小要一致及孔的大小要一致（2對照品與供試品的同步操作對照品與供試品的同步操作 2. 正確的取樣及供試品的稱量范圍 1g不超過2%，1g不超過1% 3. 正確的比色、比濁方法 4. 檢查結(jié)果不符合規(guī)定或在限度邊緣時應(yīng)對供試管和對照管各復(fù)查二份 二、氯化物檢查法二、氯化物檢查法（一原理 對照法 白色渾濁藥物：AgClAgNOCl3HN

6、O3 白色渾濁）（對照：AgClAgNO,NaCl3HNO3 Vc（二檢查方法（二檢查方法 藥典附錄藥典附錄 除另有規(guī)定外，取各藥品項下除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml溶液如顯堿性，可滴加硝酸溶液如顯堿性，可滴加硝酸使成中性），再加稀硝酸使成中性），再加稀硝酸10m1；溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置溶液如不澄清，應(yīng)濾過；置50ml納氏比色管中，加水使成約納氏比色管中，加水使成約40m1，搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項搖勻，即得供試溶液。另取各藥品項下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)氯化鈉溶液，置50ml納氏比色管中，加稀硝酸納氏比色

7、管中，加稀硝酸10m1，加水，加水使成使成40m1，搖勻，即得對照溶液。，搖勻，即得對照溶液。于供試溶液與對照溶液中，分別加入于供試溶液與對照溶液中，分別加入硝酸銀試液硝酸銀試液1.0m1，用水稀釋使成，用水稀釋使成50m1，搖勻，在暗處放置，搖勻，在暗處放置5分鐘，同分鐘，同置黑色背景上，從比色管上方向下觀置黑色背景上，從比色管上方向下觀察，比較，即得察，比較，即得（三測定條件 1. 氯化物濃度以50ml溶液中含5080g的Cl所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)NaCl溶液58ml。 2. 反應(yīng)需在硝酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀硝酸10ml為宜。 （1加速AgCl渾濁的形成； （2

8、產(chǎn)生較好的乳濁； （3避免弱酸銀鹽如碳酸銀、磷酸銀以及氧化銀沉淀的形成。 3. 試劑：硝酸銀 5. 避光、暗處放置5分鐘后比濁，因氯化銀見光易分解。 4. 供試液和對照液稀釋后，再加硝酸銀溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀 6. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。 7. 平行操作原則 （四干擾及排除 1. 若供試品有色，需經(jīng)處理后方可檢查。 （1內(nèi)消色法：倍量法，為取供試品兩等份，其中一份經(jīng)處理，消除其中待測離子后加入一定標(biāo)準(zhǔn)量的待測離子作為對照管，另一份作為供試品管，在相同條件下依法操作，檢查待測離子是否超過限量 。 （2外消色法：外消色法為加入一定的有色物，如稀焦糖等，或經(jīng)處理降低

9、色度，不干擾測定，如高錳酸鉀中氯化物的檢查，可先加乙醇適量，使其還原褪色后再依法檢查。 2. 當(dāng)有其它干擾物質(zhì)存在時，必需在檢查前除去 （1碘中氯化物和溴化物的檢查 （2碘化物中氯化物的檢查 （3溴化物中氯化物的檢查 3. 不溶于水的有機藥物 （1加水振搖，過濾，取濾液進(jìn)行檢查。 （2加熱使供試品溶解，放冷，過濾，取濾液進(jìn)行檢查。 （3溶于有機溶劑如稀乙醇、丙酮，可加稀乙醇或丙酮溶解后進(jìn)行檢查。 三、硫酸鹽檢查法三、硫酸鹽檢查法（一原理 對照法白色渾濁藥物：4HCl224BaSOBaClSO白色渾濁）、（對照：4HCl242BaSOBaClSOKVc（二測定條件 1. 標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液:每1

10、ml 相當(dāng)于0.1mg的SO42，50ml溶液中含0.10.5mg的SO42所顯渾濁梯度明顯，相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)K2SO4溶液1.05.0ml。 2. 反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸2ml為宜。 3. 試劑：氯化鋇 5. 比濁方法：同置于黑色背景上，自上向下觀察。 4. 供試液和對照液稀釋后，再加氯化鋇溶液，使生成白色渾濁而不是白色沉淀 若供試品有色，也可用內(nèi)消色法即倍量法處理。 （三干擾及排除四、鐵鹽檢查法四、鐵鹽檢查法1. 原理 對照法 紅色藥物： 36SCNFeHCl6SCNFeFeFe3o23紅色、對照：36HCl3SCNFe6SCNFeVc（一硫氰酸鹽法 ChP2

11、019）、USP24） 2. 檢查方法檢查方法 藥典附錄藥典附錄 除另有規(guī)定外，取各藥品項下除另有規(guī)定外，取各藥品項下規(guī)定量的供試品，加水溶解使成規(guī)定量的供試品，加水溶解使成25ml，移置，移置50ml納氏比色管中，納氏比色管中，加稀鹽酸加稀鹽酸4ml與過硫酸銨與過硫酸銨50mg，用，用水稀釋使成水稀釋使成 35m1后，加后，加30%硫氰酸銨溶液硫氰酸銨溶液3ml，再加水適量稀釋成再加水適量稀釋成50ml，搖勻；如顯，搖勻；如顯色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的色，立即與標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液一定量制成的對照溶液取各藥品項下規(guī)定量的標(biāo)對照溶液取各藥品項下規(guī)定量的標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液準(zhǔn)鐵溶液)，置，置50ml納氏比色管

12、中，納氏比色管中， 加水使成加水使成25ml，加稀鹽酸，加稀鹽酸4ml與過硫與過硫酸銨酸銨50mg，用水稀釋使成，用水稀釋使成35m1后，后，加加30%硫氰酸銨溶液硫氰酸銨溶液3ml，再加水適，再加水適量稀釋成量稀釋成50ml，搖勻比較，即得，搖勻比較，即得 3. 測定條件 （1用FeNH4(SO4)212H2O硫酸鐵銨配制標(biāo)準(zhǔn)鐵貯備液加入硫酸防止Fe3+的水解），標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液10g /ml，50ml溶液中含1050g的Fe3+顯色梯度明顯，一般取標(biāo)準(zhǔn)鐵溶液1.05.0ml （2反應(yīng)需在鹽酸酸性條件下進(jìn)行，且以50ml供試溶液中含稀鹽酸4ml為宜。 （3試劑：硫氰酸銨。

13、加過量硫氰酸銨，使反應(yīng)向正反應(yīng)方向進(jìn)行 （4檢查Fe2+和Fe3+ （5鐵鹽檢查時，加氧化劑氧化Fe2+為Fe3+。加過硫酸銨可氧化Fe2+為Fe3+，同時可防止光線使硫氰酸鐵還原或分解褪色。 加硝酸后加熱也可氧化Fe2+為Fe3+ （6比色方法：同置于白色背景上，自上向下觀察。 4. 干擾及排除干擾及排除 （1為了提高靈敏度或供試管與對照管色調(diào)不一致時，可用正丁醇提取后，分取正丁醇層比色。 （2具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，需經(jīng)700800熾灼破壞處理后再依法檢查。 （3干擾離子的影響五、重金屬檢查法五、重金屬檢查法 以鉛為代表以鉛為代表中國藥典2019年版共收載四法。 （一第一法 硫代乙酰胺法1.

14、 原理 對照法 SHCONHCHOHCSNHCH223pH3.5223 黃色棕黑色藥物：PbSSHPbpH3.522 黃色棕黑色、對照：PbSSHPbNOpH3.523 Vc 適用于溶于水、稀酸和乙醇的藥物。 2. 測定條件 （1用硝酸鉛配制標(biāo)準(zhǔn)鉛貯備液加硝酸防止Pb2+水解），標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液臨用前稀釋而成，標(biāo)準(zhǔn)硝酸鉛溶液10g Pb2+/ml，適宜比色范圍為27ml溶液中含1020g的Pb2+。 （2本法用2ml pH3.5的醋酸鹽緩沖液控制溶液pH值為33.5。 （3顯色劑：從ChP1990開始改用硫代乙酰胺做顯色劑 （1供試品如有色，需經(jīng)處理后方可檢查。 A. 外消色法：在對照管中加稀焦糖溶

15、液或其他無干擾的有色溶液。 B. 內(nèi)消色法 C. 微孔濾膜過濾法3. 干擾及排除 （2若供試品中有微量Fe3+存在，會氧化硫化氫生成單質(zhì)硫，干擾比色，加入抗壞血酸或鹽酸羥胺0.51.0g還原Fe3+為Fe2+，可消除干擾（3若藥物本身能生成不溶性硫化物時 ， 可 加 入 掩 蔽 劑 消 除 干 擾 。 如ZnSO4中重金屬的檢查，要在堿性下加KCN掩蔽Zn2+后，依第三法檢查。 （二第二法 熾灼殘渣法 適用于含芳環(huán)、雜環(huán)以及不溶于水、稀酸、乙醇及堿的有機藥物。 500600熾灼后的殘渣，經(jīng)處理后，依一法檢查。 1. 原理 對照法依一法檢查氯化物殘渣置坩堝中樣品：緩沖液左右調(diào)節(jié)至、熾灼殘渣 ml

16、S0 . 25 . 3pHpH7.0OHNHOHHClHNO6005002323依一法檢查對照：空坩堝緩沖液溶液）（標(biāo)準(zhǔn)、 ml0 . 25 . 3pHNOPbOHOHNHHClHNOSOH232233422. 操作方法 （三第三法 硫化鈉法 適用于溶于堿而不溶于稀酸或在稀酸中生成沉淀的藥物。如磺胺類、巴比妥類。 1. 原理 對照法 黃色棕黑色藥物：PbSSNaPbNaOH22 黃色棕黑色、對照：PbSSNaPbNONaOH23 Vc2. 測定條件 （1NaOH堿性條件下（2顯色劑：硫化鈉 （四第四法 微孔濾膜法 適用于含25g重金屬雜質(zhì)及有色供試液的檢查。 依一法檢查，微孔濾膜過濾后比較色斑

17、。 USP23檢查重金屬時，使用硫檢查重金屬時，使用硫化氫試液顯色。檢查時，除用供試管、化氫試液顯色。檢查時，除用供試管、對照管，還規(guī)定用監(jiān)控管含對照管，還規(guī)定用監(jiān)控管含25ml供試供試品溶液和品溶液和2ml標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液），三管同法標(biāo)準(zhǔn)鉛溶液），三管同法檢查。檢查。 我國我國中規(guī)定，中規(guī)定，檢查新產(chǎn)品中重金屬時，應(yīng)用該法。檢查新產(chǎn)品中重金屬時，應(yīng)用該法。 六、砷鹽檢查法六、砷鹽檢查法 （一古蔡法 遇HgBr2試紙生成黃色棕色的砷斑，與2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液在相同條件下生成的砷斑比較1. 原理 對照法 3332AsHAsOHHClZn2. 操作方法（1標(biāo)準(zhǔn)砷斑用2ml標(biāo)準(zhǔn)砷溶液制備（2供試品需經(jīng)有機破壞

18、，則標(biāo)準(zhǔn)砷供試品需經(jīng)有機破壞，則標(biāo)準(zhǔn)砷溶液應(yīng)平行操作溶液應(yīng)平行操作3. 測定條件 （1標(biāo)準(zhǔn)砷溶液臨用新配，1g/ml。 （2酸為反應(yīng)物，酸量應(yīng)足夠，所以加濃鹽酸5ml。 （3酸性氯化亞錫及碘化鉀的作用是：A. 還原As5+為As3+，加快反應(yīng)速度； B. 碘化鉀被氧化生成的I2又可被氯化亞錫還原為I-，I-與反應(yīng)中生成的Zn2+能形成穩(wěn)定的配位離子，有利于生成砷化氫的反應(yīng)不斷進(jìn)行； C. 氯化亞錫與鋅作用，在鋅表面形成鋅錫齊，使氫氣均勻而連續(xù)地發(fā)生； D. 可抑制微量Sb的干擾，在實驗條件下，100 gSb存在也不干擾測定。 （4醋酸鉛棉花的作用是消除鋅粒及供試品中少量硫化物的干擾，醋酸鉛棉花

19、60mg裝管高度6080mm。 （5鋅粒應(yīng)無砷鋅粒應(yīng)無砷（6砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察砷斑不穩(wěn)定，應(yīng)立即觀察4. 干擾及排除干擾及排除（1供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、供試品若為硫化物、亞硫酸鹽、硫代硫酸鹽時，加硫代硫酸鹽時，加HNO3，使氧，使氧化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫化成硫酸鹽，以除去干擾，如硫代硫酸鈉中砷鹽的檢查。酸鈉中砷鹽的檢查。 （2供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯供試品若為鐵鹽，需先加酸性氯化亞錫試液，將化亞錫試液，將Fe3+還原為還原為Fe2+。如。如枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。枸櫞酸鐵銨中砷鹽的檢查。（3具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，要先行具環(huán)狀結(jié)構(gòu)的有機藥物，要先行有機破壞后再進(jìn)行檢查。有

20、機破壞后再進(jìn)行檢查。 常用的有機破壞方法：常用的有機破壞方法：（4本法適用于不含Sb或含Sb量小于100g的供試品。 堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿堿破壞法：石灰法、無水碳酸鈉堿融法融法 酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查酸破壞法：如葡萄糖中砷鹽的檢查（二Ag-DDC法 檢查、含量測定 ChP(2019)、USP24）3332AsHAsOHHClZn3HDDC6Ag(DDCAs 6Ag(DDC)AsH33紅色） 對照法對照法 砷化氫與Ag-DDC溶液作用，復(fù)原AgDDC為紅色膠態(tài)銀，直接比色或于510nm波長處測定吸收度，進(jìn)行比較。 用有機堿吸收反應(yīng)產(chǎn)生的HDDC有利于反應(yīng)的進(jìn)行。USP24用吡啶

21、，ChP2019用三乙胺。 本法適用于含Sb量小于500g的供試品。 檢查不含金屬的有機藥物或揮發(fā)性無機藥物中混入的無機雜質(zhì)(金屬氧化物或無機鹽類)。 1. 原理 樣品炭化后+ H2SO4濕潤700800熾灼至恒重?zé)胱茪堅蛩峄曳郑?限量一般為0.1%0.2% 七、熾灼殘渣檢查法七、熾灼殘渣檢查法2. 操作方法殘渣（恒重）蒸氣除盡至放冷至全部黑色、無煙霧，熾灼至恒重的坩堝樣品高溫灼燒濕潤，直火加熱直火緩緩加熱8007004215 . 0SOHSOH42ml%100%供試品重空坩堝重殘渣及坩堝重?zé)胱茪堅?3. 本卷須知 （1供試品的取樣量應(yīng)根據(jù)熾灼殘渣限量和稱量誤差決定。 （3若殘渣需留作重金屬

22、檢查，則500600熾灼至恒重。 （2含氟的藥物對瓷坩堝有腐蝕，應(yīng)采用鉑坩堝。（4加硫酸處理是使雜質(zhì)轉(zhuǎn)化為穩(wěn)定的硫酸鹽，并幫助有機物炭化八、溶液顏色檢查法八、溶液顏色檢查法 控制藥物中有色雜質(zhì)限量的方法。 ChP(2000)采用三種方法檢查。 第一法第一法 目視比色法目視比色法 即與標(biāo)準(zhǔn)比色液即與標(biāo)準(zhǔn)比色液比較的方法，全波長范圍定性觀察比較的方法，全波長范圍定性觀察觀察方法觀察方法 顏色較深時平視顏色較淺時從上向下 標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制標(biāo)準(zhǔn)比色液的配制 個色號標(biāo)準(zhǔn)比色液種色調(diào)種色調(diào)標(biāo)準(zhǔn)貯備液溶液、不同量水稀釋不同比例5055CuSOCoClOCrK42722第二法 分光光度法 單一波長定量第三法

23、色差計法 全波長范圍定量 本法是通過色差計直接測定溶液的透視三刺激值，對其顏色進(jìn)行定量表述和分析的方法。 測色儀器一般為光電積分型色差計 九、易炭化物檢查法九、易炭化物檢查法 檢查藥物中遇H2SO4易炭化或易被氧化呈色的微量有機雜質(zhì)。 方法：H2SO4炭化后與對照液比較。 對照液：對照液：（1）“溶液顏色檢查項下的標(biāo)準(zhǔn)比溶液顏色檢查項下的標(biāo)準(zhǔn)比色液；色液；（2由比色用氯化鈷液，比色用重鉻由比色用氯化鈷液，比色用重鉻酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法酸鉀液，比色用硫酸銅液按規(guī)定方法配成的對照液；配成的對照液；比色：同置白色背景前，平視觀察比比色：同置白色背景前，平視觀察比較。較。 （3高錳酸鉀液十

24、、澄清度檢查法十、澄清度檢查法 檢查藥物中的微量不溶性雜質(zhì)，用作注射劑的原料藥一般應(yīng)作此項檢查。 1. 檢查方法 對照法 比較供試品溶液供試品規(guī)定級號的濁度標(biāo)準(zhǔn)液 2. 濁度標(biāo)準(zhǔn)液的配制 中國藥典規(guī)定用濁度標(biāo)準(zhǔn)液作為澄清度檢查的標(biāo)準(zhǔn)。 反應(yīng)原理：烏洛托品在偏酸性條件下水解產(chǎn)生甲醛，甲醛與肼縮合生成甲醛腙，不溶于水，形成白色渾濁。1.00硫酸肼溶液與10烏洛托品溶液等量混合配制濁度標(biāo)準(zhǔn)貯備液 濁度標(biāo)準(zhǔn)原液 濁度標(biāo)準(zhǔn)液5個級號）稀釋稀釋3. 判別 藥典中規(guī)定的“廓清”，系指供試品溶液的澄清度相同于所用溶劑，或未超過0.5號濁度標(biāo)準(zhǔn)液。4. 溶劑：水、酸、堿、有機溶劑有機酸的堿金屬鹽類藥物強調(diào)用“新

25、沸過的冷水”十一、干燥失重測定法 干燥失重是指藥物在規(guī)定條件下經(jīng)干燥后所減失的重量，主要是水分，也包括其它揮發(fā)性物質(zhì)。測定方法： （一常壓恒溫干燥法（一常壓恒溫干燥法 適用于受熱較穩(wěn)定的藥物。干燥溫度一般為105。 干燥失重：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)干燥1h后進(jìn)行。 熾灼殘渣：第二次及以后各次稱重均應(yīng)在規(guī)定條件下繼續(xù)熾灼.5h后進(jìn)行。 （二干燥劑干燥法適用于受熱易分解或揮發(fā)的供試品。干燥劑：硅膠、濃硫酸、P2O5 。（三減壓干燥法 適用于熔點低，受熱不穩(wěn)定或水分難趕除的藥物。 除另有規(guī)定外，壓力應(yīng)在2.67kPa20mmHg以下。（四熱分析法（四熱分析法 熱分析法是在程序控制溫

26、度下，熱分析法是在程序控制溫度下，精確記錄待測物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的精確記錄待測物質(zhì)理化性質(zhì)與溫度的關(guān)系，研究其受熱過程所發(fā)生的晶型關(guān)系，研究其受熱過程所發(fā)生的晶型轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化轉(zhuǎn)變、熔融、升華、吸附等物理變化和脫水、熱分解、氧化還原等化學(xué)變和脫水、熱分解、氧化還原等化學(xué)變化，對物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)如熔點和化，對物質(zhì)進(jìn)行物理常數(shù)如熔點和沸點的確定、鑒別和純度檢查的方沸點的確定、鑒別和純度檢查的方法。法。 亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制亦可用于藥物的穩(wěn)定性研究及制劑輔料的優(yōu)選劑輔料的優(yōu)選1. 熱重法熱重法TGA） 熱重法是在程序控制溫度下，測量物質(zhì)質(zhì)量與溫度關(guān)系的一種技術(shù)。 記錄質(zhì)量變

27、化對溫度的關(guān)系曲線即熱重曲線。熱重曲線的縱坐標(biāo)為質(zhì)量(m)，橫坐標(biāo)為溫度(T)或時間(t)。 m 本法適用于藥物結(jié)晶水的測定和貴本法適用于藥物結(jié)晶水的測定和貴重藥物或在空氣中極易氧化藥物的干重藥物或在空氣中極易氧化藥物的干燥失重分析。燥失重分析。 特點：準(zhǔn)確測量物質(zhì)的質(zhì)量變化及變化速度、樣品用量少、速度快 2. 差熱分析法差熱分析法DTA） 差熱分析法是在程序控制溫度下，測量待測物質(zhì)和參比物之間的溫度差（T與溫度(或時間)之間的關(guān)系的一種技術(shù)。 差熱分析曲線記錄的縱坐標(biāo)為樣品與參比物的溫度差(T)，T與熱容量差(CRCs)成正比，橫坐標(biāo)為溫度。 T 本法可鑒別藥物或其多晶形，可檢查藥物的純度3

28、. 差示掃描量熱法差示掃描量熱法DSC） 差示掃描量熱法是在程序控制溫度下，測量輸給待測物質(zhì)和參比物的能量差與溫度(或時間)關(guān)系的一種技術(shù)。 本法可鑒別藥物或其多晶形、純度檢查以及熔點和水分等的測定。十二、有機溶劑殘留量測定法十二、有機溶劑殘留量測定法 1. 有機溶劑殘留量測定法 是用以檢查藥物在生產(chǎn)過程中引入的有害有機溶劑，包括苯、氯仿、二氧六環(huán)、二氯甲烷、吡啶、甲苯及環(huán)氧乙烷。 2. 檢查方法 中國藥典采用氣相色譜法檢查殘留有機溶劑 色譜條件：色譜條件：固定相：直徑為固定相：直徑為0.250.18mm的二乙的二乙烯苯乙基乙烯苯型高分子多孔小球烯苯乙基乙烯苯型高分子多孔小球載氣：氮氣檢測器：

29、氫火焰離子化檢測器檢測柱溫：80170色譜系統(tǒng)適用性試驗：中國藥典規(guī)定，色譜系統(tǒng)適用性試驗：中國藥典規(guī)定，在殘留溶劑測定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用在殘留溶劑測定前應(yīng)作色譜系統(tǒng)適用性試驗。性試驗。（1用待測物的色譜峰計算的理論板數(shù)應(yīng)大于1000；（2用內(nèi)標(biāo)法測定時，內(nèi)標(biāo)物與待測物色譜峰的分離度應(yīng)大于1.5；（3用內(nèi)標(biāo)法測定時，取標(biāo)準(zhǔn)溶液含限量待測溶液與內(nèi)標(biāo)液進(jìn)樣5次，待測物與內(nèi)標(biāo)物峰面積之比值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于5；若用外標(biāo)法測定，待測物峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于103. 測定法 殘留溶劑的測定有直接進(jìn)樣法第一法和頂空進(jìn)樣法第二法兩種。 第一法 溶液直接進(jìn)樣法 第二法 頂空進(jìn)樣法 從方法的精密度考慮

30、，二氧六環(huán)、吡啶宜用第一法；苯、甲苯、氯仿、二氯甲烷可用第一法或第二法，環(huán)氧乙烷直接用第二法。第三節(jié)第三節(jié) 特殊雜質(zhì)檢查方法特殊雜質(zhì)檢查方法 不同的藥物，由于其合成工藝，原料不同的藥物，由于其合成工藝，原料和結(jié)構(gòu)性能等不同，在生產(chǎn)和貯藏過和結(jié)構(gòu)性能等不同，在生產(chǎn)和貯藏過程中可能引入特有的雜質(zhì)，即特殊雜程中可能引入特有的雜質(zhì)，即特殊雜質(zhì)。藥物中特殊雜質(zhì)的檢查，主要是質(zhì)。藥物中特殊雜質(zhì)的檢查，主要是根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)上根據(jù)藥物和雜質(zhì)在物理和化學(xué)性質(zhì)上的差異來進(jìn)行的，方法的專屬性十分的差異來進(jìn)行的，方法的專屬性十分關(guān)鍵。關(guān)鍵。 （一利用藥物和雜質(zhì)在物理性質(zhì)上的差異，檢查藥物中的特殊雜質(zhì)

31、1、如利用藥物和雜質(zhì)在臭味及揮發(fā)性上的差異、顏色的差異雜質(zhì)有色，檢查溶液顏色），溶解行為的差異主藥可溶于水、有機溶劑或酸、堿，雜質(zhì)不溶，檢查溶液澄清度）、旋光性質(zhì)的差異限定藥物溶液的比旋度范圍，從而限定雜質(zhì)的含量）、對光吸收性質(zhì)的差異如雜質(zhì)有UV最大吸收波長而藥物無） ，則限定藥液在該波長處的A值來控制雜質(zhì)；雜質(zhì)與藥物UV譜重疊時，控制供試液的UV吸收度比值來控制雜質(zhì)的量。雜質(zhì)與藥物的紅外吸收光譜中某些特征峰的頻率、峰形和強度出現(xiàn)顯著差異，可用以檢查藥物中低效或無效晶型雜質(zhì)。此外尚有原子吸收分光光度法用于雜質(zhì)金屬元素限量檢查；熒光分析法用于雜質(zhì)限量檢查等。 2、利用吸附或分配性質(zhì)的差異檢查藥物

32、中的、利用吸附或分配性質(zhì)的差異檢查藥物中的特殊雜質(zhì)特殊雜質(zhì) 藥物中的一些雜質(zhì)，如反應(yīng)的中間體、副藥物中的一些雜質(zhì)，如反應(yīng)的中間體、副產(chǎn)物、分解產(chǎn)物等，和藥物的結(jié)構(gòu)相近，與某產(chǎn)物、分解產(chǎn)物等，和藥物的結(jié)構(gòu)相近，與某些試劑的反應(yīng)也相同或相似，必須分離后再檢些試劑的反應(yīng)也相同或相似，必須分離后再檢查。由于色譜法可以利用藥物與雜質(zhì)的吸附或查。由于色譜法可以利用藥物與雜質(zhì)的吸附或分配性質(zhì)的差異，將它們分離、檢測，因而廣分配性質(zhì)的差異，將它們分離、檢測，因而廣泛應(yīng)用于藥物的雜質(zhì)檢查中。色譜法檢查特殊泛應(yīng)用于藥物的雜質(zhì)檢查中。色譜法檢查特殊雜質(zhì)的方法有：雜質(zhì)的方法有：TLC、紙色譜法和、紙色譜法和HPLC。

33、 （1TLC法法 TLC簡便、快速、靈敏度也較高，又簡便、快速、靈敏度也較高，又不需要特殊設(shè)備，在雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多。常用的不需要特殊設(shè)備，在雜質(zhì)檢查中應(yīng)用很多。常用的方法有：方法有： 雜質(zhì)對照品法：適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對雜質(zhì)對照品法：適用于已知雜質(zhì)并能制備雜質(zhì)對照品的情況。供試液和雜質(zhì)對照品溶液分別點樣于照品的情況。供試液和雜質(zhì)對照品溶液分別點樣于同一硅膠同一硅膠G薄層板上，用展開劑展開后，顯色，供薄層板上，用展開劑展開后，顯色，供試品溶液如顯與對照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，其顏色試品溶液如顯與對照品相應(yīng)的雜質(zhì)斑點，其顏色或熒光強度與對照品溶液的主斑點顏色或熒或熒光強度與對照品溶液的主斑點顏色

34、或熒光強度比較，不得更深。光強度比較，不得更深。 雜質(zhì)限量計算：假設(shè)供試液濃度為雜質(zhì)限量計算：假設(shè)供試液濃度為0.10gml-1，對照品雜質(zhì)溶液濃度為對照品雜質(zhì)溶液濃度為0.50 mgml-1，點樣量，點樣量均為均為5l： L=（0.505/0.11035）1000.5 供試品自身的對照法 適用于雜質(zhì)的結(jié)構(gòu)不能確定，或無雜質(zhì)對照品的情況。要求供試品與所檢雜質(zhì)對顯色劑所顯的顏色應(yīng)相同，顯色靈敏度也應(yīng)相同或相近。方法：取供試品制成供試品溶液濃度假設(shè)為20mgml-1）。取供試品溶液加溶劑稀釋制成對照品溶液濃度假設(shè)為0.4 mgml-1）。各取10l，分別點樣于同一硅膠G薄層板上，展開劑展開，晾干，

35、顯色劑顯色。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點，不得多于1個或數(shù)個，視具體藥品而定），其顏色與對照品溶液所顯的主斑點比較，不得更深。雜質(zhì)限量計算L=0.410/20102 對照藥物法對照藥物法 （2HPLC法法 HPLC法不僅分離效能高，而法不僅分離效能高，而且可以準(zhǔn)確地測定各組分的峰面積，在雜質(zhì)且可以準(zhǔn)確地測定各組分的峰面積，在雜質(zhì)檢查中應(yīng)用日益增多。檢查中應(yīng)用日益增多。 采用采用HPLC法檢查雜質(zhì)時，應(yīng)對儀器進(jìn)行法檢查雜質(zhì)時，應(yīng)對儀器進(jìn)行系統(tǒng)適用性試驗柱理論板數(shù)、分離度、拖系統(tǒng)適用性試驗柱理論板數(shù)、分離度、拖尾因子等），以保證儀器達(dá)到要求。尾因子等），以保證儀器達(dá)到要求。HPLC法檢查雜質(zhì)的方法有五種

36、類型，僅舉兩法檢查雜質(zhì)的方法有五種類型，僅舉兩種類型，其余請自閱。種類型，其余請自閱。 峰面積歸一化法：通常用于粗略考察供試品峰面積歸一化法：通常用于粗略考察供試品中的雜質(zhì)。中的雜質(zhì)。 方法：取供試品溶液適量，進(jìn)樣，經(jīng)方法：取供試品溶液適量，進(jìn)樣，經(jīng)HPLC分離，測定后，計算出各雜質(zhì)峰面積及其總和分離，測定后，計算出各雜質(zhì)峰面積及其總和占總峰面積含藥物的峰面積，不含溶劑峰面占總峰面積含藥物的峰面積，不含溶劑峰面積做空白試驗確定）的百分率，不得超過積做空白試驗確定）的百分率，不得超過限量。限量。 本卷須知本卷須知 峰面積歸一化法檢查雜質(zhì)雖簡便、峰面積歸一化法檢查雜質(zhì)雖簡便、易行、但當(dāng)雜質(zhì)與藥物的

37、吸收程度不一致時，易行、但當(dāng)雜質(zhì)與藥物的吸收程度不一致時，測定誤差大。測定誤差大。應(yīng)用示例：利巴韋林中有關(guān)物質(zhì)的檢查應(yīng)用示例：利巴韋林中有關(guān)物質(zhì)的檢查 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水或以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以水或0.03mol/L硫酸銨溶液為流動相，檢測波長為硫酸銨溶液為流動相，檢測波長為207nm。取供試品，加水分別制成每。取供試品，加水分別制成每1ml中含中含0.4mg的供試品溶液與每的供試品溶液與每1ml中含中含5g的對照溶的對照溶液，取對照溶液液，取對照溶液10 l注入液相色譜儀進(jìn)行預(yù)試，注入液相色譜儀進(jìn)行預(yù)試，調(diào)整檢測靈敏度，使主成分色譜峰高度達(dá)滿量調(diào)整檢測靈敏度，使主成分色譜峰高度達(dá)滿量程的程的20-25；再取供試品溶液；再取供試品溶液10 l注入液注入液相色譜儀，