第一章生物實驗技術緒論

1、 生物技術實驗生物技術實驗牡丹江醫(yī)學院生物技術實驗室牡丹江醫(yī)學院生物技術實驗室授課教師：周晶琳授課教師：周晶琳課程簡介課程簡介 生物技術實驗由生物技術實驗由生物化學生物化學、分子生分子生物學物學、遺傳學遺傳學和和細胞生物學細胞生物學四門課程四門課程的實驗課融合后形成的。課程類型為的實驗課融合后形成的。課程類型為專業(yè)基礎課，共專業(yè)基礎課，共5656學時。學時。教學安排教學安排理論部分（理論部分（8 8學時）學時）第一章第一章 緒論緒論 第二章第二章 常用分子生物學技術原理及應用常用分子生物學技術原理及應用第三章第三章 細胞生物學及遺傳學實驗技術原理及應用細胞生物學及遺傳學實驗技術原理及應用實驗部

2、分（實驗部分（4848學時）學時）第五章第五章 基礎實驗基礎實驗 （1010個實驗）個實驗）第六章第六章 臨床應用實驗（臨床應用實驗（5 5個實驗）個實驗） 考勤及實驗態(tài)度考勤及實驗態(tài)度 20 分分 實驗報告成績實驗報告成績 10 分分 理論考試理論考試 50 分分 實驗操作考核實驗操作考核 20 分分 考核方式考核方式 態(tài)度決定一切！態(tài)度決定一切！ 基因工程原理基因工程原理 吳乃虎吳乃虎 主編主編 現(xiàn)代生物技術現(xiàn)代生物技術 瞿禮嘉瞿禮嘉 主編主編 現(xiàn)代生物技術概論現(xiàn)代生物技術概論 劉群紅劉群紅 主編主編 中國生物化學與分子生物學雜志中國生物化學與分子生物學雜志 中國生物工程雜志中國生物工程雜

3、志教學參考書及雜志教學參考書及雜志 http:/ http:/ http:/ http:/ 相關網(wǎng)站相關網(wǎng)站第一節(jié)第一節(jié) 生物技術概述（生物技術概述（定義、發(fā)展定義、發(fā)展）第二節(jié)第二節(jié) 生物技術的相關技術生物技術的相關技術 第一章第一章 緒緒 論論第一節(jié)第一節(jié) 生物技術概述生物技術概述l 1944年年 闡明了闡明了DNA是遺傳信息的攜帶者；是遺傳信息的攜帶者；l 1953年提出年提出DNA的雙螺旋結構模型的雙螺旋結構模型,分子生物學研分子生物學研究的新紀元；究的新紀元；l 1961年年 破譯了遺傳密碼破譯了遺傳密碼l 1972年年 實現(xiàn)實現(xiàn)

4、DNA體外重組技術，標志著生物技術體外重組技術，標志著生物技術的核心技術，即基因工程技術的開始。的核心技術，即基因工程技術的開始?，F(xiàn)代生物技術是以現(xiàn)代生物技術是以70年代年代DNA重組技術的建立為標志重組技術的建立為標志u 生物技術的定義生物技術的定義 生物技術生物技術（Biotechnology）是七十年代初在是七十年代初在分分子生物學和細胞生物學子生物學和細胞生物學基礎上結合現(xiàn)代工程學的基礎上結合現(xiàn)代工程學的方法和原理而發(fā)展起來的一門綜合性科學技術，方法和原理而發(fā)展起來的一門綜合性科學技術，也稱為也稱為生物工程或生物工藝學生物工程或生物工藝學。是按照預先的設是按照預先的設計改造生物體計改造

5、生物體，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達到某，為人類生產(chǎn)出所需產(chǎn)品或達到某種目的。種目的。 轉基因牛轉基因牛乳汁中含有人生長激素的轉基因牛乳汁中含有人生長激素的轉基因牛( (阿根廷阿根廷) )轉基因大米轉基因大米湖南兒童參與轉基因大米試驗輿情研究？湖南兒童參與轉基因大米試驗輿情研究？第二節(jié)第二節(jié) 生物技術的相關技術生物技術的相關技術v 細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)技術技術v 遺傳學遺傳學技術技術v 分子生物學實驗分子生物學實驗技術技術v 生物化學實驗技術生物化學實驗技術l 細胞培養(yǎng)技術細胞培養(yǎng)技術細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)（cell culture）是指細胞的體外培養(yǎng)。是指細胞的體外培養(yǎng)。在無菌條件下，從機體取出小塊組織，

6、通過一定在無菌條件下，從機體取出小塊組織，通過一定的方法分離出細胞，置于培養(yǎng)器皿中，在一個合的方法分離出細胞，置于培養(yǎng)器皿中，在一個合適的環(huán)境中給以營養(yǎng)物質，使細胞能繼續(xù)生存、適的環(huán)境中給以營養(yǎng)物質，使細胞能繼續(xù)生存、生長、繁殖的一種方法。生長、繁殖的一種方法。相應實驗：第五章相應實驗：第五章 實驗一實驗一 細胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng)細胞的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng) 實驗二實驗二 培養(yǎng)細胞的形態(tài)觀察和計數(shù)培養(yǎng)細胞的形態(tài)觀察和計數(shù)l 遺傳學遺傳學技術技術 ( (染色體制備染色體制備技術技術) )相應實驗：第五章相應實驗：第五章 實驗六實驗六 人類外周血淋巴細胞染色體標本人類外周血淋巴細胞染色體標本 的制備

7、和觀察的制備和觀察 實驗七實驗七 人類性染色質標本的制備和觀察人類性染色質標本的制備和觀察 第六章第六章 實驗三十四實驗三十四 人類皮膚紋理分析人類皮膚紋理分析 實驗三十五實驗三十五 人類遺傳性狀的調查分析人類遺傳性狀的調查分析 實驗三十六實驗三十六 人類染色體人類染色體G G顯帶核型分析顯帶核型分析l 分子生物學實驗分子生物學實驗技術技術相應實驗：第五章相應實驗：第五章 實驗十七實驗十七 人類基因組人類基因組DNADNA提取提取 實驗十八實驗十八 DNADNA瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳 l 生物化學實驗技術生物化學實驗技術主要包括：主要包括：1 1、分光光度法、分光光度法2 2、電泳技術、

8、電泳技術3 3、離心技術、離心技術4 4、層析技術、層析技術1 1、分光光度法、分光光度法紫外分光光度法紫外分光光度法可見光光度法可見光光度法v根據(jù)朗伯-比爾定律，當k、l一定時，溶液的吸光度A與溶液的濃度成正比。因此，通過測定已知濃度的標準溶液和待測樣品溶液的吸光度，即可求出待測溶液的濃度。相應實驗：第五章相應實驗：第五章 實驗八實驗八 植物蛋白質的提取與含量測定植物蛋白質的提取與含量測定 第六章第六章 實驗三十實驗三十 血清谷丙轉氨酶（血清谷丙轉氨酶（GPTGPT）活性測定）活性測定 實驗三十一實驗三十一 胰島素與腎上腺素對血糖濃度胰島素與腎上腺素對血糖濃度 的影響的影響2 2、電泳技術、

9、電泳技術相應實驗：第五章相應實驗：第五章 實驗十一實驗十一 聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質聚丙烯酰胺凝膠電泳法分離蛋白質 實驗十八實驗十八 DNADNA瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳 3 3、離心技術、離心技術 是利用物體高速旋轉時產(chǎn)生強大的是利用物體高速旋轉時產(chǎn)生強大的離心力離心力，使置于旋，使置于旋轉體中的懸浮顆粒發(fā)生轉體中的懸浮顆粒發(fā)生沉降沉降或或漂浮漂浮，從而使某些顆粒達到，從而使某些顆粒達到濃縮濃縮或與其他顆?；蚺c其他顆粒分離分離之目的。之目的。相應實驗：第五章相應實驗：第五章 實驗三實驗三 細胞核與線粒體的分級分離細胞核與線粒體的分級分離 實驗六實驗六 人類外周血淋巴細胞染色體標本人

10、類外周血淋巴細胞染色體標本 的制備和觀察的制備和觀察 實驗八實驗八 植物蛋白質的提取與含量測定植物蛋白質的提取與含量測定 第六章第六章 實驗三十一實驗三十一 胰島素與腎上腺素對血糖濃度的影響胰島素與腎上腺素對血糖濃度的影響 4 4、層析技術、層析技術 層析法，又稱色譜法。利用混合物中各組分層析法，又稱色譜法。利用混合物中各組分理化性質理化性質的不同，在不同相態(tài)進行的不同，在不同相態(tài)進行選擇性分配選擇性分配，以流動相對固定相，以流動相對固定相中的混合物進行洗脫，混合物中各組分受到固定相的阻力中的混合物進行洗脫，混合物中各組分受到固定相的阻力和受流動相的推力不同，不同的物質會以不同的速度沿固和受流動相的推力不同，不同的物質會以不同的速度沿固定相移動，最終達到定相移動，最終達到分離的效果分離的效果。（一）吸附層析（一）吸附層析（absorption chromatography） 1、吸附柱層析、吸附柱層析 2、薄層層析、薄層層析（二）分配層析（二）分配層析（partition chromatography）（三）離子交換層析（三）離子交換層析（Ion Exchange Chromatography，IE