食品中沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)ppt課件

1、第一節(jié) 沙門(mén)氏菌檢驗(yàn)食品中腸道致病桿菌的檢驗(yàn)食品中腸道致病桿菌的檢驗(yàn) 沙門(mén)氏菌Salmonella是腸桿菌科中最復(fù)雜的菌屬,1880年Eberth首先發(fā)現(xiàn)傷寒沙門(mén)氏菌，1885年Salmon與Smith又分別出豬霍亂沙門(mén)氏菌，以后取名Salmon氏之名為本菌屬屬名。已發(fā)現(xiàn)近2000個(gè)血清型，我國(guó)已發(fā)現(xiàn)近200個(gè)血清型。 對(duì)人類(lèi)有致病性腸熱癥傷寒沙門(mén)菌，甲型副傷寒沙門(mén)菌、肖氏沙門(mén)菌、希氏沙門(mén)菌食物中毒鼠傷寒沙門(mén)菌、豬霍亂沙門(mén)菌、腸炎沙門(mén)菌敗血癥豬霍亂沙門(mén)菌最常見(jiàn)生物學(xué)性狀形狀染色 符合腸桿菌特點(diǎn)，革蘭氏染色陰性短桿菌，無(wú)莢膜，無(wú)芽胞，多數(shù)有鞭毛(周生毛菌)，有動(dòng)力也有無(wú)動(dòng)力的變種。鼠傷寒沙門(mén)菌s

2、amonella typhimurium 沙門(mén)氏菌革蘭氏染色照片培育特性EMB、SS上呈無(wú)色透明乳糖不發(fā)酵菌落沙門(mén)氏菌SS平板培育物黑色菌落 鼠傷寒沙門(mén)鼠傷寒沙門(mén)在SS培育基上構(gòu)成半透明較小菌落 在酸性條件下菌落中心產(chǎn)生H2S(SS培育基 生化反響 乳糖-，葡萄糖+/+，多數(shù)H2S+，動(dòng)力+，尿素- 抗原構(gòu)造 O抗原特異性低、穩(wěn)定、分群組 H抗原特異性高，不穩(wěn)定，分型 Vi抗原毒力抗原不穩(wěn)定，可阻止“O凝集 抵抗力 不強(qiáng)致病性與免疫性 致病物質(zhì) 侵襲力 菌毛吸附 型分泌系統(tǒng)穿入細(xì)胞，分散 Vi抗原微莢膜抗吞噬 內(nèi)毒素 外毒素個(gè)別鼠傷寒沙門(mén)菌產(chǎn)生，與ETEC腸毒素類(lèi)似 腸熱癥 臨床過(guò)程 埋伏期2

3、W 發(fā)病初期：第1W第一次菌血癥、高熱、肝脾腫大、皮疹、WBS等全身中毒病癥，此期血液80%、骨髓90%+有大量細(xì)菌 發(fā)病極期：第2-4W，全身病癥繼續(xù)加重，此期血、骨髓中仍有菌，但糞便60%、尿20%、皮疹液中可查到細(xì)菌， 由于型變態(tài)反響并發(fā)癥發(fā)生， 血液抗體到達(dá)陽(yáng)性規(guī)范肥達(dá)反響 恢復(fù)期：第周?chē)?，體溫下降，病癥消逝，恢復(fù)期帶菌1年糞便仍陽(yáng)性，血液抗體仍高 胃腸炎食物中毒 埋伏期短，6-24h，起病急，病程短2-4天，發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、腹瀉 敗血癥 經(jīng)口感染，經(jīng)腸道入血，敗血癥病癥明顯而腸道病癥不明顯 帶菌者 安康帶菌者，恢復(fù)期帶菌者 免疫性 腸熱癥，病后免疫結(jié)實(shí)，其它可反復(fù)感染微生物

4、學(xué)檢查與防治 分別培育與鑒定 標(biāo)本采取: 腸熱癥：第1-2W，血、骨髓；第2-3W，糞便、 食物中毒：糞便、嘔吐物、可疑食物 敗血癥：血 帶菌者：糞便 分別鑒定： 增菌血、骨髓EMB、SS生化反響血清鑒定血清學(xué)診斷肥達(dá)反響Widal 原理 用知傷寒沙門(mén)氏菌O抗原及H 抗原，以及引起副傷寒的沙門(mén)氏菌H抗原與待檢血清作凝集實(shí)驗(yàn)，測(cè)定待檢血清中有無(wú)相應(yīng)抗體及其效價(jià)。TO、TH、PA、PB 方法：試管凝集法定量 TO1：80，TH1：160，PA、PB均1：80才有意義 動(dòng)態(tài)察看：雙份血清抗體四倍升高有診斷意義臨床意義O抗體IgM， H抗體IgGO 、H抗體均升高，患傷寒的能夠性大O 、H抗體不升高，

5、患傷寒的能夠性小只需H升高，那么能夠是預(yù)防接種過(guò)或非特異性回想反響，只需O升高而H不高，那么能夠是感染早期或其他沙門(mén)菌的交叉反響。 沙門(mén)氏菌主要寄生在人體、哺乳動(dòng)物和家禽的腸道內(nèi)，可伴隨糞便的排泄污染水源，食品與藥品。沙門(mén)氏菌的種類(lèi)繁多，有些對(duì)人有致病力，如傷寒沙門(mén)菌和副傷寒沙門(mén)氏菌；有些對(duì)動(dòng)物有致病力，如鴨沙門(mén)氏菌和雛沙門(mén)氏菌；尚有一些對(duì)人和動(dòng)物皆有致病力，如腸炎沙門(mén)氏菌、鼠傷寒沙門(mén)氏菌和豬霍亂沙門(mén)氏菌等。它們能引起人類(lèi)傷寒癥、急性胃腸炎和敗血癥等。 帶有這些細(xì)菌的人與動(dòng)物?？芍苯踊蜷g接地污染藥品的消費(fèi)環(huán)境、工具設(shè)備和原料輔料，以及半廢品和廢品等。特別是用動(dòng)物臟器制成的藥品,污染機(jī)率較高，影

6、響患者用藥平安，并有能夠經(jīng)過(guò)藥品的流通而傳播。故將沙門(mén)氏菌，應(yīng)列為某些藥品的必檢工程。 一增菌培育： 取供試品稀釋液毫升，接種于備妥的毫升膽鹽乳糖增菌液內(nèi)。置培育小時(shí)，進(jìn)展增菌。 二分別培育： 取上述增菌培育物，劃線接種于瓊脂和瓊脂平板各一個(gè)劃線時(shí)，適當(dāng)添加瓊脂平板的涂抹量-環(huán)，可提高陽(yáng)檢率，置培育-小時(shí)。凡沙門(mén)氏菌，在和瓊脂平板上，菌落普通無(wú)色透明或半透明，圓形，周邊整齊，外表光滑潮濕，在瓊脂平板上中心有時(shí)呈黑褐色。如有上述疑似菌落，應(yīng)選取-個(gè)分別進(jìn)展純培育，按以下方法鑒別。 傷寒沙門(mén)菌在SS瓊脂平板上的菌落特征傷寒沙門(mén)菌在CHROMagar顯色培育基上的菌落特征傷寒沙門(mén)菌在CHROMaga

7、r顯色培育基上呈紫色菌落沙門(mén)氏菌SS平板培育物黑色菌落沙門(mén)氏菌在BS平板上的典型菌落產(chǎn)H2S菌株沙門(mén)氏菌在BS平板上的菌落Salmonella typhimurium 三初步鑒別： 將上述純培育物分別穿刺并劃線接種三糖鐵瓊脂，置培育小時(shí)。凡在瓊脂中不分解乳糖及蔗糖即上部斜面呈堿性，不變色，下層底部分解葡萄糖呈酸性變黃色有氣泡或無(wú)氣泡，有動(dòng)力或無(wú)動(dòng)力，以及產(chǎn)生或不產(chǎn)生黑褐色的硫化氫反響，并經(jīng)涂片染色鏡檢為革蘭氏陰性桿菌，都應(yīng)繼續(xù)做生化實(shí)驗(yàn)和血清學(xué)檢查。 沙門(mén)氏菌三糖鐵沙門(mén)氏菌革蘭氏染色照片 四生化實(shí)驗(yàn)： 取上述疑似菌落的純培育物、分別接種至葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇和蔗糖等發(fā)酵管培育基，并接種蛋白胨水和尿素培育基，經(jīng)培育-天，察看結(jié)果。沙門(mén)氏菌普通生化反響和動(dòng)力檢查，絕大數(shù)應(yīng)為、葡萄糖，乳糖，麥芽糖，甘露醇，蔗糖，靛基質(zhì)，硫化氫，尿素酶，動(dòng)力。當(dāng)普通生化實(shí)驗(yàn)符合時(shí)，應(yīng)做賴(lài)氨酸脫羧酶及氰化鉀實(shí)驗(yàn)。沙門(mén)氏菌賴(lài)氨酸脫羧酶實(shí)驗(yàn)，氰化鉀。沙門(mén)氏菌氨基酸脫羧酶沙門(mén)氏菌蛋白胨水尿素瓊脂實(shí)驗(yàn)出現(xiàn)異常,緣由能夠是沙門(mén)氏菌變種 (五動(dòng)力實(shí)驗(yàn)： 取上述純培育物穿刺接種半固體培育基，于培育小時(shí)后，察看動(dòng)力表現(xiàn)。無(wú)動(dòng)力表現(xiàn)的培育物，應(yīng)在室溫左右保管-