遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎課件

1、遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎1遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎 Gnther KrmcziDepartment of Blood Group Serology and Transfusion MedicineMedical University of Vienna, Austria遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎2特殊血型表型特殊血型表型 遺傳性的遺傳性的- 血型變異血型變異 (A3, 弱弱 D, Kmod ) 出生時期的出生時期的- 血細胞嵌合體血細胞嵌合體 (多于多于1個合子個合子) 獲得性的獲得性的- 遺傳變異遺傳變異 鑲嵌現(xiàn)象鑲嵌現(xiàn)象遺傳性和

2、獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎3Rh 復雜的例子復雜的例子 RhD 變異體變異體 部分部分 D 類型類型 弱弱 D 類型類型 DEL 類型類型 獲得性獲得性 Rh 表型變化表型變化 遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎4RH 基因基因: RHD 和和 RHCE1p36.11遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎5Rh 多肽多肽: RhD 和和RhCcEe胞內(nèi)胞內(nèi)胞外胞外遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎6D 抗原抗原 (Rh 因子因子“)包括包括 30 D抗原決定簇胞外胞外Europe:83% D+17% D遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎7D = 最具有免疫原性的紅細胞抗原最具有免疫原性的紅細胞抗原

3、 anti-D 免疫接種免疫接種 of- D 病人病人 by D+ 輸血輸血 80%- D 孕婦孕婦 by D+ 胎兒胎兒 15%(沒有進行過沒有進行過 Anti-D 預防預防) 溶血輸血反應溶血輸血反應 胎兒和新生兒的溶血性疾病胎兒和新生兒的溶血性疾病可靠的可靠的D分型分型 !遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎8D抗原表達的血清學光譜抗原表達的血清學光譜 間接抗球蛋白檢測間接抗球蛋白檢測(IAT)中的紅細胞和中的紅細胞和 anti-D遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎9Dweak弱弱 D 類型類型胞內(nèi)胞內(nèi) RhD 變化變化1) RHD 點突變點突變沒有沒有D抗原表位的丟失抗原表位的丟失D 抗

4、原密度減少抗原密度減少遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎10弱弱 D 類型類型胞內(nèi)胞內(nèi) RhD 變化變化1) RHD 點突變點突變沒有沒有D抗原表位的丟失抗原表位的丟失D 抗原密度減少抗原密度減少Dweak部分部分 D胞外胞外 RhD 變化變化1) RHD 點突變點突變2) RH 基因雜交基因雜交 RHD-CE-DD 抗原表位丟失抗原表位丟失異體抗體異體抗體-D 可能存在可能存在遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎11數(shù)量和性質(zhì)的區(qū)別數(shù)量和性質(zhì)的區(qū)別遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎12弱弱 D 類型類型: 有限的有限的 D 抗原數(shù)量抗原數(shù)量沒有沒有 D 抗原的變化抗原的變化 (所有的所有的D抗

5、原決定族抗原決定族)遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎13D 抗原密度測定抗原密度測定 單克隆單克隆 IgG anti-D anti-IgG Fab-FITC 間接免疫熒光間接免疫熒光 流式細胞術流式細胞術 中位熒光強度中位熒光強度 與標準品相比對與標準品相比對遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎14典型典型D抗原密度抗原密度表現(xiàn)型表現(xiàn)型每個紅細胞表面每個紅細胞表面D抗原抗原正常正常 Rh 表型表型10.000 - 30.000weak D type 206.200DIV type 44.300weak D type 4.12.800weak D type 2550DVI type 1380we

6、ak D type 31130weak D type 3250weak D type 2630遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎15定性的定性的D抗原檢測抗原檢測針對單個針對單個D抗原表位的單克隆抗原表位的單克隆 anti-D抗體抗體 D 抗原表位圖譜抗原表位圖譜部分部分D抗原表位缺失抗原表位缺失遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎16常規(guī)血清學常規(guī)血清學Anti-D標準品標準品6 種不同的種不同的 anti-D 單克隆抗體單克隆抗體 (in IAT)遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎17 部分部分 D 類型的類型的D抗原表位資料抗原表位資料Scott 2002遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎

7、18譜系的上限譜系的上限 奧地利奧地利 女性女性, 74歲歲 常規(guī)血清學常規(guī)血清學: D+“ anti-D (titer 4) anti-LW排斥排斥 直接抗球蛋白檢測直接抗球蛋白檢測 陰性陰性 點突變點突變: RHD(M358T)遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎19一種一種 幾乎正常的幾乎正常的“ 部分部分 D: DWI 8.300 D 抗原抗原/紅細胞紅細胞 79例抗例抗D 單克隆抗體中只有單克隆抗體中只有1例沒有反例沒有反應應 少量少量 D 抗原表位丟失抗原表位丟失 異體異體anti-D (D+ 妊娠妊娠!)遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎20與與DWI陽性的親屬陽性的親屬 交叉配型

8、交叉配型遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎21多種 如果肺炎的診斷成立，評價病情的嚴重程度、肺部炎癥的播散和全身炎癥反應程度。除此之外患者如有下列危險因素會增加肺炎的嚴重程度和死亡危險： （一）病史 年齡65歲；存在基礎疾病或相關因素，如慢性阻塞性肺疾?。–OPD）、糖尿病、慢性心、腎功能不全、慢性肝病、一年內(nèi)住過院、疑有誤吸、神志異常、脾切除術后狀態(tài)、長期嗜酒或營養(yǎng)不良。 （二）體佂 呼吸頻率30次/分；脈搏120次/分；血壓20X109/L；呼吸空氣時動脈血氧分壓（PaCO2）50mmHg; 血肌酐106umol/L或血尿素氮7.1mmol/L；血紅蛋白90g/L或血紅細胞比容0.30；血

9、漿白蛋白25g/L；感染中毒癥或彌散性血管內(nèi)凝血的證據(jù)，如血培養(yǎng)陽性、代謝性酸中毒、凝血酶原時間和部分激活的凝血活酶時間延長、血小板減少；X線胸片病變累及一個肺葉以上、出現(xiàn)空洞、病灶迅速擴散或出現(xiàn)胸腔積液。 重癥肺炎目前還沒有普遍認同的標準，如果肺炎患者需要呼吸支持(急性呼吸衰竭、氣體交換惡化伴高碳酸血癥或持續(xù)低氧血癥)、循環(huán)支持(血流動力學障礙、外周低灌注)和需要加強監(jiān)護和治療(肺炎引起的感染中毒癥或基礎疾病所致的其他器官功能障礙)可認為重癥肺炎。目前許多國家制定了重癥肺炎的診斷標準，雖然有所不同，但均注重肺部病變的范圍、器官灌注和氧合狀態(tài)。 我國制定的重癥肺炎標精品PPT課件 瀏覽免費 下

10、載后可以編輯修改。http:/遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎22極弱極弱RhD變體的免疫原性變體的免疫原性D 受血者的抗受血者的抗D免疫接種免疫接種 通過通過 weak D type 2450 D/cell 異常異常 weak D type 26 29-70 D/cell DEL types 需要極低的需要極低的D抗原劑量抗原劑量遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎26DEL 抗原表達抗原表達DEL 類型類型洗出液反應洗出液反應強度強度每個紅細胞所帶每個紅細胞所帶D抗原抗原RHD(IVS3+1ga)+ 22RHD(K409K)+ 22RHD(X418L)+ 22RHD(IVS5-38del4

11、)+ to + 22 to 26RHD(M295I)+ to +a)抗原表位圖譜抗原表位圖譜遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎30IgM anti-D的吸附的吸附/洗脫洗脫吸附作用吸附作用 RT時時 熱洗脫熱洗脫 檢測檢測 (中性凝膠中性凝膠)遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎31吸附吸附/洗脫作用檢測洗脫作用檢測DEL抗原表位圖譜抗原表位圖譜anti-DD epit.partial DELcomplete DELRHD(IVS3+1ga)RHD(K409K), RHD(X418L),RHD(IVS5-38del4), RHD(M295I)LHM70/451.2-+P3x2492.1+P3x2

12、903.1-+ESD14.1-+P3x355.4-+P3x2415.4+BRAD-36.2-+HM166.4-+BRAD-56.8-+P3x212118.2-+Birma D69.1-+遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎32在部分在部分 DEL 個體中的個體中的Alloanti-D 所有的案例均是所有的案例均是 RHD(IVS3+1ga):女女, 21歲歲: anti-D titer 32無輸血或（已知的）妊娠無輸血或（已知的）妊娠女女, 24歲歲: anti-D titer 256無輸血或（已知的）妊娠無輸血或（已知的）妊娠男男, 65歲歲: anti-D titer 4多次輸血多次輸血 3

13、0歲歲 之前之前遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎33連續(xù)區(qū)域連續(xù)區(qū)域: Dweak DEL RHD(M295I) with ce (in cis): weak D type 11 (200 D/cell) with Ce (in cis): DEL weak D type 32 (Ce in cis) no C in trans: 49 D/cell with C in trans: DEL weak D type 26 (29-70 D/cell)遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎34D表達譜表達譜正常正常 D 部分部分 D 弱弱 D 類類 部分部分 DEL 完全完全 DEL遺傳性和獲得性

14、血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎35臨床應用臨床應用正常正常 D 部分部分 D 弱弱 D 類型類型部分部分 DEL 完全完全 DEL可以被可以被 anti-D 免疫免疫抗原表位丟失抗原表位丟失 只進行只進行 D- 輸液輸液, anti-D預防預防引出引出 anti-D遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎36遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎37后天的后天的 Rh 表型變化表型變化未輸血或未輸血或HSCT基因型基因型: CcDdee遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎38不同血型的混合凝集反應不同血型的混合凝集反應輸血輸血造血干細胞移植造血干細胞移植母胎傳遞母胎傳遞操作失誤操作失誤嵌合現(xiàn)象嵌合現(xiàn)象遺傳變異遺傳變

15、異 鑲嵌現(xiàn)象鑲嵌現(xiàn)象遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎39自發(fā)混合自發(fā)混合 Rh 型型9例病人例病人: 4例男性例男性, 5 例女性例女性 (平均年齡平均年齡 63 歲歲) 3 例有血液腫瘤疾病例有血液腫瘤疾病 D+ 紅細胞組分紅細胞組分: 22-85% 平均追蹤平均追蹤 33 個月個月 RhD 狀態(tài)狀態(tài) 從穩(wěn)定的混合態(tài)從穩(wěn)定的混合態(tài) 到到 完全丟失完全丟失遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎40RhD 表型分解表型分解D+ and D紅細胞紅細胞55%55%遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎41正常正常: ABO MNS P Lu Kell Fy JkPat.基因型基因型RhDCEce1CcD

16、dee+/-+/-+2CcDdee+/-+/-+3CcDdee+/-+/-+4CcDdee+/-+/-+5CcDdee+/-+/-+6CcDdee+/-+/-+7ccDdEe+/-+/-+8CcDdee+/-+/-+9CcDdee+/-+/-+單體型分析單體型分析Rh 抗原丟失抗原丟失 ?遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎42 D+C+ D+C+ DC DC單體型分析單體型分析Rh 表型分解表型分解D+C+遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎43配型配型遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎44微衛(wèi)星標記檢測微衛(wèi)星標記檢測: 非嵌合態(tài)非嵌合態(tài)最大最大.各自各自2個等位基因個等位基因Patient 1

17、遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎451號染色體上的微衛(wèi)星標記號染色體上的微衛(wèi)星標記血細胞雜合性缺失血細胞雜合性缺失!指甲指甲發(fā)根發(fā)根血液血液遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎46一號染色體上一號染色體上雜合性丟失雜合性丟失僅在骨髓細胞僅在骨髓細胞遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎47雜合性丟失的雜合性丟失的變異擴張變異擴張1號染色體號染色體遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎48有核的紅細胞前體有核的紅細胞前體: BFU-E單克隆的單克隆的DNA分離分離遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎49RH-PCR 的的 單個單個 BFU-E 集落集落病人病人RH基因型基因型BFU-E 克隆數(shù)克隆數(shù)總數(shù)總

18、數(shù)RH特異性陽性特異性陽性CcDe只有只有cecDEe2CcDdee301317n.a.3CcDdee1183n.a.6CcDdee36297n.a.7ccDdEe36n.a.2115遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎50LOH（血細胞雜合性）血細胞雜合性）只在只在 RHD BFU-E 克隆中克隆中血血BFU-E: CcDeBFU-E: 只有只有 ce (CD)遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎51FISH: 1p (RH, green) and 1q (red)體細胞復制重組體細胞復制重組缺失缺失骨髓的骨髓的淋巴細胞對照淋巴細胞對照1x RH2x RH遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎52骨

19、髓干細胞的雜合性缺失骨髓干細胞的雜合性缺失純合子的純合子的 cde/cde所有其他的病人所有其他的病人半合子的半合子的 cde/- - -病人病人 3遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎53基因分量及基因分量及Rh抗原表達抗原表達遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎54自發(fā)自發(fā) Rh 表型分解表型分解嵌合體嵌合體(只有很少的嵌合體只有很少的嵌合體)染色體染色體 1上的上的LOH（血細胞雜合性）（血細胞雜合性）骨髓干細胞骨髓干細胞重疊或缺失重疊或缺失腫瘤形成腫瘤形成腫瘤抑制因子腫瘤抑制因子 on 1pLOH 癌癥癌癥遺傳指數(shù)會老化遺傳指數(shù)會老化 ?嵌合式供血者的抗嵌合式供血者的抗D免疫免疫遺傳性和獲得性血型轉(zhuǎn)變的免疫學基礎55做出貢獻的科學家們做出貢獻的科學家們Shenzhen (China): Chao-Peng ShaoBristol (UK): Geoff DanielsTokyo (Japan): Makoto UchikawaGraz (Austria): Thomas WagnerVienna (Austria):