2線粒體靶向納米材料與腫瘤治療特點

1、線粒體靶向納米材料與腫瘤治療優(yōu)勢1線粒體靶向納米材料線粒體靶向策略的最初應(yīng)用是對生物活性分子修飾線粒體靶向基團，使這些活性分子能夠直接靶向至線粒體，發(fā)揮更好的療效。例如，將輔酶Q10或維生素E的衍生物與TPP結(jié)合，已被證明能夠選擇性的靶向至線粒體并提高抗氧化效率。當親脂性的TPP與DO洪軻結(jié)合時，原本只能在耐藥的人乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞(MDA-MB-435/DOX兩胞漿中積累的DOX優(yōu)先選擇在線粒體中積累；與DOX原藥相比，TPP-DOXt歸夠增加caspase-3和PARP的剪切，誘導(dǎo)更明顯的細胞凋亡，具有逆轉(zhuǎn)MDR勺應(yīng)用潛力。在前文中已經(jīng)提及，將納米材料與抗腫瘤藥物結(jié)合形成納米醫(yī)藥或用納米載體

2、負載藥物，能夠在保持藥物原本完整的療效的同時，改善多種藥物的藥代動力學(xué)和生物分布。但在十年之前，關(guān)于線粒體靶向的納米載藥體系的報道并不多見，大部分納米靶向系統(tǒng)只靶向至細胞層面，納米載體進入細胞后靠隨機分布與包括線粒體在內(nèi)的亞細胞器作用。后期研究發(fā)現(xiàn)，納米遞送載體通過修飾特定靶向到亞細胞器，可以增加藥物與亞細胞器上特定位點作用的幾率，從而提高治療效率。因此，定點給藥的藥物遞送系統(tǒng)為目前暫時失敗的治療方法提供了新的可能性。為了將藥物運輸?shù)骄€粒體基質(zhì)并有效的控制釋放藥物到不同的線粒體組分，對納米遞送系統(tǒng)的設(shè)計和制備有著精確的要求：精確的尺寸、親脂性的表面、合適的電性和表面特定的靶向基團。此外,為保證

3、線粒體靶向的納米遞送系統(tǒng)在生物體內(nèi)的安全性，對這些納米材料的生物相容性與生物降解性也有一定的要求。我們對近年來報道的幾類線粒體靶向的納米平臺做一個簡單總結(jié)：1.1脂質(zhì)體基線粒體靶向納米材料靶向線粒體的脂質(zhì)體基材料，可以通過膜融合將其所載的藥物或活性分子帶入線粒體內(nèi)。DQAsom是一類研究要多的脂質(zhì)體基線粒體靶向納米材料，此外還發(fā)展了一系列利用親脂性陽離子TPP實現(xiàn)靶向功能的脂質(zhì)體基納米材料。2008年，Weissig課題組在NanoLetter上發(fā)表了他們制備的以脂質(zhì)體為核心TPP修飾的線粒體靶向載體：他們將TPP結(jié)合到十八烷醇上制備出STPP再和羅丹明B標記的磷脂酰乙醇胺制備脂質(zhì)體用于靶向線

4、粒體增加神經(jīng)酰胺的抗癌療效。為了克服上述STPP基脂質(zhì)體的非特異性細胞毒性，2012年，Torchilin等通過聚乙二醇-聚磷脂酰乙醇胺(PEG-PE)和端基為TPP的PEG共軻彳#到TPP-PEG-PE將此共輾結(jié)構(gòu)混入脂質(zhì)體的磷脂雙分子層合成得到一種新型的線粒體靶向的脂質(zhì)體基納米材料,這種材料能夠顯著提高其運載的抗癌藥物紫杉醇(PTX)的效率、細胞毒性和在小鼠體內(nèi)的抗癌效率。課題組制各了一種KLA修飾、pH敏感的新型脂質(zhì)體材料，能夠提高負載的PTX在線粒體中的積累量，可以用于逆轉(zhuǎn)人肺腺癌細胞（A549）的MDR1.2樹狀大分子基線粒體靶向納米材料樹狀大分子是一種從核心分子向周圍輻射，形成高度

5、支化的重復(fù)分支的功能高分子材料，其表面具有數(shù)量可控的、能夠用于實現(xiàn)多功能化的基團。樹狀大分子的中心內(nèi)核和支化空間可以包覆生物分子，表面基團的不同功能化使其能夠遞送多種藥劑或顯影分了。移位蛋白（TSPO）的一種分子量為18kDa的多聚體，在腫瘤的固醇類細胞的線粒體外膜高表達。Bornhop課題組用樹斗犬大分子G（4）-PAMAM架、1-（2-氯苯基）異唾咻-3-竣酸（C1PhIQAcid）和麗絲胺羅丹明（Lissamine）制備了靶向線粒體外膜TSPO的CIPhIQ-PAMAM-Liss,在C6大鼠膠質(zhì)瘤和人乳腺癌細胞中有良好的線粒體顯影效果。2012年，Torchilinh課題組利用（3-竣丙

6、基）三苯基澳化瞬的竣基和乙?；臉錉畲蠓肿拥牟钒l(fā)生酸胺縮合反應(yīng)制備了PAMAM基的G （5） -D-Ac-TPP,用熒光染料標記該納米載體， 細胞實驗結(jié)果顯示這種材料和線粒體共定位的效果較好，并且毒性也較低。在此工作的基礎(chǔ)上，Cheng等成功的用TPP修飾的PAMAM樹狀大分子實現(xiàn)了在人宮頸癌細胞和非洲綠猴腎纖維母細胞中的基因遞送，轉(zhuǎn)染效率可與商用的Lipofectamine2000相比擬，比SuperFect更高。1.3聚合物基線粒體靶向納米材料由生物相容性和生物可降解的聚合物制備的聚合物納米顆粒是另一種藥物遞送系統(tǒng)中最常用的材料。在2008年，Kopecek課題組構(gòu)建利用TPP作為線粒體

7、靶向劑、基于新型的羥丙甲丙烯酸甲酯（HPMA盛聚物的藥物遞送系統(tǒng)：他們設(shè)計了一種與賴氨酸共軻結(jié)合的HPM秋聚物，使賴氨酸一端的氨基連接TPP用于靶向至線粒體，另一端氨基連接藥物；所連接的熒光團BODIPYW光敏藥物Mce儲B通過激光共聚焦顯微鏡（CLSM注明該共聚物能夠靶向至線粒體。美國喬治亞大學(xué)的Dhara教授課題組合成了一系列線粒體靶向的聚合物納米顆粒。如圖1.13所示，其中最典型的是用TPP修飾FDA批準的可生物降解聚乳酸-羥基乙酸共聚物（PLGA）,制備得到靶向線粒體的聚合納米粒子，用這種納米粒子封裝氯尼達明（LND,抑制線粒體的糖醇解）、a-生育酚琥珀酸鹽（a-TOS,選擇性腫瘤藥物

8、）、姜黃素（淀粉-p蛋白（A3）的抑制劑，阿茲海默癥藥物）和2,4-二硝基苯酚（2,4-DNP,減肥藥物），測試藥物納米粒子對各類線粒體相關(guān)疾病的治療效果。與LND原藥對照組相比，線粒體靶向納米粒子運載的LND對腫瘤細胞的半數(shù)致死率是原藥的108倍。之后，他們利用這個載體負載TPP修飾的順鉗前藥（Platin-M）,將其遞送到神經(jīng)母瘤細胞的線粒體中，用于針對性的耐藥腦部腫瘤的治療；并以狗為動物模型，建立了這種線粒體靶向的順鉗納米遞送系統(tǒng)的生物分布評價模型。此外，TPP修飾其他聚合物，例如聚乙二醇-聚己內(nèi)酯納米顆粒和多聚賴氨酸納米顆粒等，用于線粒體靶向、遞送生物活性分子或抗癌藥物至線粒體的研究也

9、陸續(xù)見諸報道。圖1.13TPP修飾的載藥聚合納米顆粒靶向線粒體的示意圖。1.4無機納米碳納米金用于線粒體靶向的納米藥物載體的研究主要集中于以脂質(zhì)體或高分子聚合物作為載體材料，這兩種材料雖然具有許多優(yōu)點，但是它們皆有穩(wěn)定性差、藥物容易泄露的缺點。當以上兩種材料置于復(fù)雜的生物體內(nèi)液態(tài)環(huán)境時，由于高分子鏈的溶脹效應(yīng)及脂質(zhì)體自身動態(tài)不斷自組裝的本質(zhì)特征，它們的形狀、大小和表面化學(xué)性質(zhì)易變且很不確定。相對而言，無機納米材料具有穩(wěn)定的形態(tài)和結(jié)構(gòu)，將其用于構(gòu)建線粒體靶向的納米材料的報道也越來越多。最早發(fā)現(xiàn)有線粒體靶向功能的無機納米材料是金納米棒。2011年，Chen課題組發(fā)現(xiàn)金納米棒可以選擇性的殺死腫瘤細胞

10、，而對正常細胞和間充質(zhì)干細胞沒有影響，不同的細胞攝取方式、胞內(nèi)逃逸和溶酶體敏感性導(dǎo)致了這樣的差異性：金棒表面的十六烷基三甲基澳化鏤（CTAB）可以破壞溶酶體造成溶酶體逃逸，逃逸后金棒表面殘留的CTAB可以使其在多種腫瘤細胞模型中選擇性的在線粒體積累，與線粒體的長期作用導(dǎo)致線粒體膜電位下降，產(chǎn)生大量ROS從而殺死腫瘤細劇。與此同時，研究發(fā)現(xiàn)單壁碳納米管（SWCNTs利用其表面的正電性也可以穿過細胞膜，在腫瘤的細胞的線粒體中積累，并且結(jié)合近紅外光對SWNTS登射，可以實現(xiàn)針對腫瘤的線粒體靶向的光熱治療。此后，通過對無機納米材料修飾線粒體靶向基團實現(xiàn)靶向功能的研究才陸續(xù)報道出來。Prato等對多壁碳

11、納米管（MWCNTs）表面修飾線粒體靶向肽序列(KMSVLTPLLLRGLTGSARRLPVPRA頌現(xiàn)了其在藥物遞送中的線粒體靶向，CLSM察到靶向的MWCNT4巨噬細胞和人宮頸癌細胞的線粒體中大量積累，細胞電鏡進一步確認了這個結(jié)果。2014年，Ma等報道了另一種碳基材料的線粒體靶向，通過對CQDs修(TPP實現(xiàn)了對活細胞線粒體的單光子和雙光子顯影。之后，Lin課題組在實現(xiàn)TPP修飾的CQD的于線粒體顯影的同時，還開發(fā)了其檢測亞硝酸離子的分析功能。近年來的研究中人們也發(fā)現(xiàn)，某些無機納米粒子也具有線粒體靶向的能力，比如Ti02納米顆粒和金納米顆粒。王等人研究了并報道了表面包覆牛血清蛋白的金納米顆

12、粒在癌細胞A549中的作用機制。他們指出當金納米顆粒濃度在25-100M時能殺死A549細胞，同時對正常細胞的毒性較小。為了探尋這種毒性的差異產(chǎn)生的原因，他們對金納米顆粒進入細胞的過程進行了分析并對其進入細胞后的定位進行了監(jiān)測。結(jié)果表明，金納米顆粒是通過內(nèi)吞途徑進入到細胞內(nèi)，其大部分在溶酶體中，在正常細胞中，溶酶體中的納米顆粒很容易會被清除掉。而在癌細胞同不同，包覆了CTAB的金納米顆粒很容易從溶酶體中逃逸然后進入線粒體，這使得它很難被癌細胞清除，從而造成癌細胞死亡(Figure1-18)。Figure.1-18DifferentfatesandeffectsofAuNRsincancerce

13、ll,normalcell,andstemcellduetodistinctpathwaysforcellulartrafficking.2線粒體靶向腫瘤治療優(yōu)勢克服多藥耐藥腫瘤多藥耐藥是導(dǎo)致化療失敗的主要原因之一，外排蛋白P-糖蛋白(P-gP)的高表達，是腫瘤耐藥細胞的重要特征，耐藥細胞的P-gp可將化療藥物如阿霉素等外排，導(dǎo)致化療失敗。通過靶向腫瘤細胞線粒體，將抗腫瘤藥物直接遞送至線粒體靶點，可躲避胞漿及核的耐藥機制，如避免P-gp糖蛋白的外排，克服多藥耐藥，提高化療效果。Zhang等通過構(gòu)建線粒體靶向藥物遞釋系統(tǒng)遞送DO炸腫瘤細胞線粒體，加劇了腫瘤耐藥細胞的死亡。如圖4.1所示，以TPP

14、修飾生育酚聚乙二醇琥珀酸酯（TPGS）與碳量子點（CQDs）自聚集形成膠束，包裹DOX構(gòu)建線粒體靶向藥物遞釋系統(tǒng)CQDs-TPGS-TPP/DOX該制劑一方面通過TPGS抑制P-gp糖蛋白的過表達，另一方面通過將DOX直接遞送至線粒體靶點，避免P-gp糖蛋白的外排，大幅度殺傷腫瘤耐藥細胞，克服了多藥耐藥。K4J 飛郭倬靶司荷粘連樣平詼克不聆淖多莉耐藥示意圖岫圖4.1線粒體靶句藥物遞釋系統(tǒng)克服腫瘤多藥耐藥示意圖抑制腫瘤轉(zhuǎn)移腫瘤轉(zhuǎn)移是導(dǎo)致腫瘤患者死亡的主要原因。手術(shù)及化療等傳統(tǒng)治療方法，可消除患者大部分腫瘤組織，卻無法抑制腫瘤的復(fù)發(fā)與轉(zhuǎn)移。磷酸月JL醇-3-激酶（Phosphoinositide-

15、3kinases,PI3K）是一種蛋白激酶，在很多癌癥患者中均存在PI3K異常，以PI3K為治療靶點開發(fā)的多種PI3K抑制劑，已處于不同的臨床驗證階段，但其效果并不理想。近來，Caino等發(fā)現(xiàn)單獨使用PI3K抑制劑進行癌癥治療，可能會促進腫瘤細胞的侵襲性而轉(zhuǎn)移至其他器官，導(dǎo)致患者病情惡化，這一過程主要依賴于線粒體功能應(yīng)答。如圖4.2所示，未經(jīng)抑制劑藥物處理的細胞，其線粒體主要圍繞細胞核分布，而用PI3K抑制劑（GDC-0941）處理腫瘤細胞，會引起線粒體向細胞膜特定區(qū)域移動，線粒體占據(jù)細胞周圍骨架這一重要位置能夠為細胞遷移和侵襲提供大量能量，這表明細胞運動和侵襲能力增強。PI3K抑制劑藥物，依

16、賴于線粒體參與細胞膜骨架的重新分配，提供細胞運動性、遷移性所需的能量與動力，促進腫瘤轉(zhuǎn)移和侵襲。因此，開發(fā)PI3K抑制劑藥物時，可聯(lián)合線粒體靶向藥物遞釋系統(tǒng)干預(yù)腫瘤轉(zhuǎn)移時的能量代謝過程，進而抑制腫瘤轉(zhuǎn)移。8 8Ri.illiniRi.illini小詞“Y圖4.2PI3K抑制劑促進腫瘤轉(zhuǎn)移依賴線粒體參與細胞膜骨架重新分配示意圖。（a）相差顯微鏡技術(shù)觀察PI3K抑制劑（GDC-0941）孵育前列腺癌PC3細胞Sh內(nèi)細胞形態(tài)和位置變化（b）共聚焦顯微鏡觀察線粒體向膜板狀偽足分布的3D示意圖，綠色熒光：纖維形肌動蛋白，紅色熒光：線粒體。提高光療效果由光敏劑接收特定波長激發(fā)光后，電子能級躍遷，產(chǎn)生單線態(tài)

17、氧和自由基，誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡（光動力療法，PDT）,或產(chǎn)生熱能，導(dǎo)致腫瘤細胞壞死（光熱療法，PTT）。線粒體是細胞內(nèi)能量生成的關(guān)鍵細胞器，90%ROST生于線粒體，且線粒體對熱刺激高度敏感，通過促使ROS產(chǎn)生，誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡。將線粒體靶向與PDMPTT聯(lián)合，可提高光療效果，降低激光照射功率及光敏劑劑量， 同時也降低了光毒性。 因此， 線粒體靶向的PDT和PTT已經(jīng)成為一種新的治療策略。Jung等通過TPP修飾香豆素氧化鐵（CIO）,獲得線粒體靶向的光敏劑Mito-CIO。如圖4.3所示，Mito-CIO可靶向Hela細胞線粒體，740nm激光照射刺激在線粒體內(nèi)產(chǎn)生過高熱，加劇腫瘤細胞死亡，獲

18、得更高效的PTTa圖4.3線粒體靶向的光敏劑用于腫瘤光熱治療示意圖很多光敏劑由于其在近紅外波段吸收強度有限，而需要使用較高的激光照射功率，超出了耐受限度，對周圍正常組織有潛在的損傷。如二氧化鐵（Ti02）由于優(yōu)良的光催化特性、光穩(wěn)定性，能夠產(chǎn)生不同細胞毒性的ROS引起腫瘤細胞嚴重死亡，被認為是用于PDT療法良好的光敏劑。黑色Ti02納米粒將其光吸收波段從紫外拓寬到近紅外區(qū)域，可用于PDT/PTT聯(lián)合治療。2但由于黑色Ti02在近紅外波段吸U史段弱，使其PTT治療的激光功率圖達2W/cm,超出了常規(guī)使用限度（980nm:0.72W/cm2）,對周圍正常組織有潛在傷害。線粒體靶向的PDT/PTT有

19、可能提供新的契機解決這個難題。PDT/PTT聯(lián)合制劑G-Ti02-x-TPP,大幅度降低了激光照射頻率及給藥劑量， 提高了體內(nèi)安全性，為腫瘤治療臨床轉(zhuǎn)化提供了很好的思路。如圖4.4所示，通過超聲破碎法將黑色Ti02(B-Ti02)改良為綠色Ti02(G-Ti02),可獲得更穩(wěn)定的增強型近紅外吸收。經(jīng)TPP修飾，得線粒體靶向的Ti02納米粒G-Ti02-x-TPP。G-Ti02-x-TPP靶向至線粒體，在功率為0.72W/cm2的980nm激光照射條件下，就能產(chǎn)生很好的光療效果，體內(nèi)外給藥劑量大幅度降低，生物相容性較好。圖4.4線粒體靶向的光動力和光熱聯(lián)合治療腫瘤示意圖增強免疫治療免疫治療引入功

20、能性的抗原特異性免疫反應(yīng)，實現(xiàn)對腫瘤細胞長期的免疫記憶、預(yù)防和殺傷。腫瘤免疫療法包括腫瘤疫苗、人工抗原呈遞細胞治療、腫瘤免疫檢查位點治療及細胞療法等?；贒C細胞的腫瘤免疫治療臨床應(yīng)用的局限性之一，是產(chǎn)生腫瘤抗原特異性T細胞應(yīng)答的效率較低。因此，提高細胞毒性T細胞介導(dǎo)的細胞免疫應(yīng)答是解決這個問題的關(guān)鍵。PDT可通過產(chǎn)生ROS誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡，激活機體宿主免疫應(yīng)答。將光敏劑靶向輸送至線粒體，可促進產(chǎn)生更多的ROS加劇腫瘤細胞凋亡，釋放大量的腫瘤抗原，進一步提高腫瘤免疫治療的效果。Marrache等借助于線粒體靶向的光動力療法，大幅度激活了T細胞免疫應(yīng)答。如圖4.5所示，以TPP修飾的生物可降解聚

21、合物PLGA-b-PEG-TPP為載體，包封疏水性光敏劑ZnPc,構(gòu)建線粒體靶向納米粒T-ZnPc-NPs。該制齊ij將ZnPc有效遞送至線粒體后，660nmMou等設(shè)計線粒體靶向的SedigfiASedigfiAPnPn：tjjcvaidtjjcvaidt.iJinLt.iJinL用匚J-3-3T TG G激光照射加劇ROST生，誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡，釋放的腫瘤抗原促使DC細胞成熟，激活T細胞，產(chǎn)生更多的IFN-丫細胞因子，殺傷腫瘤細胞?；诰€粒體靶向的光療引起的促免疫應(yīng)答效應(yīng)，聯(lián)合現(xiàn)有的免疫檢查點療法，可能將起到協(xié)同增效的效果，為腫瘤治療提供較大的潛力價值。圈4.5線粒體靶向的光動力療法提高腫

22、瘤免疫治療示意圖。（aa）激光觸發(fā)線粒體靶向納米粒在線粒體內(nèi)產(chǎn)生ROS誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡和壞死（b）通過納米沉淀法合成T-ZnPc-NPs3作用于腫瘤線粒體靶點的藥物分子線粒體功能障礙在腫瘤發(fā)生發(fā)展過程中扮演著重要的角色,包括細胞能量代謝紊亂、ROS干擾、細胞凋亡受損、線粒體DNA（mtDNA突變等。深入了解調(diào)控這些關(guān)鍵環(huán)節(jié)中逆轉(zhuǎn)線粒體功能障礙的藥物分子及其作用機制，為后續(xù)實現(xiàn)腫瘤線粒體內(nèi)藥物遞送精準治療，降低脫靶效應(yīng)，發(fā)揮藥物最大抗腫瘤療效有重要意義。近年來，作用于線粒體靶點的藥物不斷出現(xiàn)，臨床批準應(yīng)用的抗癌藥如依托泊昔（VP-16）、長春瑞濱；臨床前研究的新靶點候選藥物，如神經(jīng)血:胺MKT0

23、77CD437氯尼達明、 樺木酸等， 報道顯示這些分子可直接作用于線粒體觸發(fā)凋亡研究發(fā)現(xiàn)，這些線粒體靶點藥物，受自身理化性質(zhì)限制，體內(nèi)分布到腫瘤細胞線粒體的數(shù)量有限，需要借助于藥物遞釋系統(tǒng)，以期實現(xiàn)線粒體靶點藥物的高效安全治療。參與細胞代謝轉(zhuǎn)變的藥物線粒體是細胞內(nèi)參與能量代謝的重要亞細胞器。線粒體是正常細胞的主要供能單位，而腫瘤細胞即使在有氧的條件下也以無氧糖酵解為主要的獲能方式（即Warburg效應(yīng)）。腫瘤細胞的線粒體數(shù)量并沒有明顯減少，提示腫瘤細胞的線粒體功能是異常的。通過建立不同背景的線粒體和細胞核融合模型，發(fā)現(xiàn)功能異常的線粒體具有促進細胞生長和克隆形成的能力，而正常細胞的線粒體則不具備

24、這一功能。脫氧葡萄糖可抑制糖酵解。3-澳丙酮酸，乳酸類似物,顯示較好的抑制腫瘤生長的特性氯尼達明，可抑制糖酵解，提高阿霉素和順鉗的細胞毒性。此外，根皮素，可使得癌細胞在低氧條件下對道諾霉素更敏感，具有抗腫瘤活性、促凋亡和克服耐藥等功能。二氯乙酸鹽，可抑制腫瘤細胞的丙酮酸脫氫酶激酶關(guān)鍵酶，應(yīng)用于腦瘤和一些實體瘤，均有明顯的抗腫瘤效果。調(diào)控ROSW導(dǎo)細胞損傷的藥物細胞內(nèi)90%A上的ROS要來源于線粒體。一些藥物可通過提高ROSK平治療腫瘤。二氧化二神可通過干預(yù)氧化磷酸化引起電子泄露增加,進而導(dǎo)致ROSK平提高，誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡。維生素E類似物白II期臨床研究，應(yīng)用于黑色素瘤、前列腺癌、結(jié)直腸癌、間

25、皮瘤、乳腺癌治療。I/II期臨床研究證明2-甲雌二醇可選擇性殺死人白血病細胞,并且可使患有惡性腫瘤或多發(fā)骨髓瘤的病人病情穩(wěn)定。此外，丁硫氨酸亞磯胺和伊美克也處于I期臨床研究。介導(dǎo)線粒體凋亡通路的藥物細胞凋亡主要有兩種途徑。一種是由死亡受體介導(dǎo)，另一種則是由線粒體介導(dǎo)。線粒體在調(diào)控細胞凋亡中占有很重要的地位。其中，Caspase-3,Caspase-9表達增加或激活，是介導(dǎo)線粒體凋亡通路最主要的路徑。細胞色素C釋放可激活Caspases家族，誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡。細胞色素C釋放或增加，最直接的方法是線粒體膜通透性轉(zhuǎn)換(Mitochondrialpermeabilitytransition,MPT),

26、通透性增加。傳統(tǒng)的化療成分主要通過生理凋亡控制的內(nèi)在因素，引起線粒體膜通透性增加。然而，很多處于研究階段的抗癌藥物，包括氯尼達明、亞神酸鹽、樺木酸、CD437和一些兩親性陽離子”-螺旋肽，直接作用在線粒體膜，或者線粒體滲透性轉(zhuǎn)換孑L(Mitochondrialpermeablitytransitionpore,PTPC)?？沟蛲龅鞍譈cl-2家族蛋白可調(diào)控線粒體膜穩(wěn)定性，抑制細胞凋亡。腫瘤細胞線粒體外膜高表達抗凋亡蛋白Bcl-2,減弱Bax蛋白促凋亡效應(yīng)。靶向特定的PTPC復(fù)合物，可克服Bcl-2介導(dǎo)的抗凋亡。一種方法包括交聯(lián)PTPC的關(guān)鍵氧化還原敏感硫醇基；另一種方法包括應(yīng)用線粒體苯二氮受體的配體。針對Bcl-2RN附列的特定反義寡核普酸(如G3139),可顯著抑制腫瘤細胞增殖或增加化療藥物敏感性。G3139和棉子酚，BH3類似物，與化