教學(xué)大綱編寫格式-基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)基礎(chǔ)教學(xué)中心-山東大學(xué)

1、醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)課程教學(xué)大綱課程名稱：醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)英文名稱：Medical morphological Experiment課程編號(hào)：實(shí) 驗(yàn) 課 性 質(zhì)：融合創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)課程負(fù)責(zé)人：開放實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目數(shù)： 8大 綱 主 撰 人： 武玉玲、張慶慧、郝晶等人大綱審核人：一、學(xué)時(shí)、學(xué)分課程總學(xué)時(shí)：32實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí)： 32課程總學(xué)分：實(shí)驗(yàn)學(xué)分：二、適用專業(yè)及年級(jí)供基礎(chǔ)、臨床醫(yī)學(xué)、預(yù)防、口腔醫(yī)學(xué)、護(hù)理學(xué)5、6、7 年制專業(yè)用三、實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的與基本要求通過醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)融合性實(shí)驗(yàn)教學(xué)，將人體解剖學(xué)、組織胚胎學(xué)和病理解剖學(xué)三個(gè)相關(guān)學(xué)科的交叉內(nèi)容進(jìn)行有機(jī)整合，形成系統(tǒng)化的知識(shí)。通過創(chuàng)新

2、實(shí)驗(yàn)的學(xué)習(xí)，使學(xué)生學(xué)會(huì)使用醫(yī)學(xué)形態(tài)學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的儀器，熟悉科研常用的技術(shù)方法，培養(yǎng)學(xué)生動(dòng)手能力、提高學(xué)生利用所學(xué)知識(shí)解決實(shí)際問題的能力，啟迪學(xué)生的科研思維和創(chuàng)新精神，以適應(yīng)研究型大學(xué)培養(yǎng)人才的要求。四、主要儀器設(shè)備1動(dòng)物：Wistar 大鼠，昆明小鼠2儀器設(shè)備：顯微圖像觀察系統(tǒng)、恒溫培養(yǎng)箱，手術(shù)器械、微量注射器、常用染料。五、實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容和學(xué)時(shí)分配學(xué)實(shí)指已導(dǎo)開序?qū)嶒?yàn)項(xiàng)目時(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容教/號(hào)名稱分要師未配求開1第 1、2 趾蹼間隙皮下注射0.2ml丁未Patent blue ， 10 分鐘后在腘窩及兆開腹股溝處切開皮膚，尋找藍(lán)染的淋習(xí)巴管及淋巴結(jié)（可追蹤至腹膜后隙）。觀察淋巴管及淋巴結(jié)的形態(tài)和分布。

3、2將一段小腸系膜平鋪于透明的載物臺(tái)上，用顯微圖像觀察系統(tǒng)觀察小腸系膜內(nèi)淋巴管的運(yùn)動(dòng)。注意分淋巴系統(tǒng)尋找淋巴管的瓣膜。小13小腸漿膜下注射適量Patent4組的組成blue 。觀察淋巴管的吸收功能及引進(jìn)流。行4追蹤腹膜后隙染色的淋巴結(jié)。5在腹股溝處結(jié)扎、切斷腹股溝淋巴結(jié)和淋巴管，造成淋巴引流障礙，觀察淋巴淤滯和淋巴水腫的形成。6觀察淋巴引流注射標(biāo)本，淋巴結(jié)和淋巴管組織切片?？偨Y(jié)淋巴系統(tǒng)的組成和功能。1、 將 Wista 大鼠麻醉固定于手術(shù)邢未臺(tái)。子開脊髓半切2、 切開背部皮膚， 暴露脊柱，分英損傷的手打開椎管，剪斷一半脊髓。小24組術(shù)試驗(yàn)觀3、 縫合背部肌及皮膚。進(jìn)察4、 待大鼠清醒后，觀察大鼠

4、行損傷后的臨床表現(xiàn)。5、 討論并寫出試驗(yàn)報(bào)告1. 肥大細(xì)胞的制作與觀察：張未取健康大鼠一只，脫臼處死。艷開隨后剪取皮下組織，平鋪置于載玻敏片上。用 95乙醇溶液固定、 甲苯胺藍(lán)染色，最后樹膠封片。鏡下觀察肥大細(xì)胞形態(tài)、顆粒染色特點(diǎn)及分肥大細(xì)胞肥大細(xì)胞走形分布特點(diǎn)。小3 的制作與2. 大鼠型超敏反應(yīng)動(dòng)物模型4組觀察的建立進(jìn)取馬血清用生理鹽水按一定的比行例稀釋，然后給大鼠腹腔注射進(jìn)行被動(dòng)致敏。致敏后 14 日再用馬血清進(jìn)行腹腔注射進(jìn)行大鼠致敏實(shí)驗(yàn)。隨后剪取皮下組織，觀察肥大細(xì)胞脫顆粒情況。1活精子標(biāo)本的制備與觀察取育齡期雄鼠附睪，將其剪成小塊，制作小鼠活精子懸液。將懸液滴于載玻片上，低倍鏡觀察精子

5、的活動(dòng)情況。另取精子懸液涂片，用 0.3甲苯胺藍(lán)液染色，光鏡觀察精子的形態(tài)結(jié)構(gòu)。2體外抑精子實(shí)驗(yàn)（ 1）實(shí)驗(yàn)組：實(shí)驗(yàn)分組：在 37恒溫條件下，取 50 l精子懸液與等量一定濃度的抑精子藥液充分混合，分別于混合后 30 sec 、5 min 、 10 min和 30 min 時(shí)，取一滴混合液滴于載玻片上，顯微鏡下計(jì)數(shù)10 個(gè)視野，記錄活動(dòng)精子百分率（或用伊紅染料染色，計(jì)算精子存活率）。（ 2） 對照組：取 50 l 精子懸液與等量生理鹽水混合，其余操作方法同上。小鼠活精比較在處理后不同時(shí)間內(nèi)兩組子標(biāo)本的活動(dòng)精子的百分率。分小4 制作與精同時(shí)，分別取處理10 min 分鐘 4組進(jìn)子低滲腫后的實(shí)驗(yàn)組

6、及對照組的精子懸行脹試驗(yàn)液，以 1000 1500r/min 離心5min ，棄上清液，取沉淀于管底的精子涂片，用0.3 甲苯武未玉開玲胺藍(lán)液染色，光鏡觀察兩組精小鼠體外5受精實(shí)驗(yàn) 精子獲能實(shí)驗(yàn)取 12-16 周齡 ICR 雄鼠的附睪尾放在石蠟油中，用眼科剪在其頂端剪一小口，然后用眼科鑷子擠壓附睪尾部精子，將其挑到 200ul 平衡過夜的 HTF 受精獲能液滴中，置于37、5 CO2飽和濕度條件下培養(yǎng) 1h 使精子獲能， 顯微鏡下觀察精子的形態(tài)和運(yùn)動(dòng)。 .超排卵及收集卵細(xì)胞 ：取6-8 周齡 ICR 雌鼠，腹腔注射 7.5IU 只 PMSG，間隔 48h 后再注射 7.5IU 只 HCG，進(jìn)行

7、超排處理 （實(shí)驗(yàn)老師課前準(zhǔn)備）。注射HCG14h后，頸椎脫臼處死雌鼠，取出輸卵管在濾紙上除去血跡，放入培養(yǎng)皿分中，用解剖針刺破輸卵管的膨大小部，將流出的卵子團(tuán)引入到HTF培 4組養(yǎng)液滴中，顯微鏡下觀察卵丘復(fù)合進(jìn)體的形態(tài)。行3觀察受精過程 : 在卵子 HTF 培養(yǎng)液滴中 ,加入 5 1Oul 獲能精子 (200 個(gè)精子 u1)，顯微鏡下觀察精子向卵細(xì)胞周圍集聚。放入 CO2 培養(yǎng)箱培養(yǎng) 。4觀察精、 卵原核 : 精卵共同孵育 12-16h 后 ,將受精卵移至玻片上（多聚賴氨酸預(yù)處理） ，空氣干燥5min, 向玻片上滴加數(shù)滴甲醇 - 冰醋酸溶液（ 3:1）室溫（ 25）下固定 5min，滴加 1%

8、美藍(lán)染色液室溫5min，水洗， 90%、 95%和純酒精脫水各 2 分鐘，二甲苯透明，樹膠封片，高倍顯微鏡下觀察受精卵的卵原核和精原核。郝未晶開1. 肉眼及鏡下觀察正常肝臟的大體形態(tài)特點(diǎn)及正常組織結(jié)構(gòu)。2. 鏡下觀察固有結(jié)締組織的形態(tài)特點(diǎn)。3. 肉眼及鏡下觀察肝硬化的標(biāo)本及病理切片，對照肝臟正常結(jié)構(gòu)找結(jié)締組織出肝硬化的病理組織學(xué)特點(diǎn)。6增生與肝4. 互動(dòng)式討論： 肝臟結(jié)構(gòu)與功能的硬化關(guān)系，固有結(jié)締組織的功能以及在創(chuàng)傷愈合中的作用，結(jié)締組織增生與肝硬化的關(guān)系，肝硬化時(shí)肝臟多種功能降低的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)以及如何防止肝硬化的發(fā)生。張未慶開慧，甄軍分暉小4 組進(jìn)行1. 肉眼觀察矽肺、塵肺的病理標(biāo)本；2. 顯微

9、鏡觀察活體染色的疏松結(jié)締組織鋪片，重點(diǎn)觀察吞噬了染料顆粒的巨噬細(xì)胞，成纖維細(xì)胞和膠原纖維；3顯微鏡觀察正常肺切片， 熟悉肺組織的正常結(jié)構(gòu)，觀察肺間質(zhì)中的塵細(xì)胞；4顯微鏡觀察矽肺、 塵肺的病理切片，與正常肺切片對照比較，以理解巨噬細(xì)胞與矽肺、塵肺發(fā)病的關(guān)系；5學(xué)生自己動(dòng)手， 給小鼠腹腔巨噬細(xì)胞注射或皮下注射臺(tái)盼藍(lán)，2 小與矽肺、7時(shí)后取腹腔液制作涂片，或取塵肺的發(fā)皮下組織制作鋪片，伊紅染色，生顯微鏡觀察吞噬了染料顆粒的巨噬細(xì)胞；6教師和學(xué)生互動(dòng)式討論巨噬細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)和生理功能，矽肺、塵肺的病理過程，巨噬細(xì)胞與矽肺、塵肺病理過程的相關(guān)關(guān)系，吸煙的危害；7教師和學(xué)生互動(dòng)式討論巨噬細(xì)胞在特異性免疫和

10、非特異性免疫中的作用，討論巨噬細(xì)胞在矽肺、塵肺、結(jié)核病、動(dòng)脈粥樣硬化等疾病發(fā)生、發(fā)展和歸宿中的意義；甄未軍開暉分小4 組進(jìn)行1.取大鼠稱重。一組腹腔注射腎上腺素22.5mg/kg 體重，另一組腹腔注射相同量的生理鹽水做對照，注射后觀察記錄兩只大鼠的一般情況和呼吸等臨床表現(xiàn)。15min20min 后處死動(dòng)物（注意結(jié)扎氣管以免液體外溢），取出肺和心臟。2.用濾紙吸去肺表面的液體，用天平稱兩肺的重量，計(jì)算肺重系數(shù)（ 肺重 量g/ 體重肺組織結(jié)kg* 100%），若肺重系構(gòu)特點(diǎn)與數(shù)>1%，比較兩組大鼠8急性肺淤的肺重系數(shù)。若肺重血、肺水系數(shù) >1%，表明肺水腫腫的觀察已形成。3.對比觀察 2 組大鼠肺的外觀，記錄包括大小、顏色、質(zhì)地、及切面外觀，將2 組大鼠的肺臟用10%的甲醛固定。4.鏡下觀察