飼料生產(chǎn)的質(zhì)量管理方法及試驗參數(shù)對動物生長的影響

1、飼料生產(chǎn)的質(zhì)量管理方法及試驗參數(shù)對動物生長的影響程宗佳博士美國大豆協(xié)會飼料技術(shù)主任Warren G. Dominy 博士美國海洋研究所水產(chǎn)飼料和營養(yǎng)室Keith C. Behnke 博士美國堪薩斯州立大學(xué)谷物科學(xué)技術(shù)系前言飼料工業(yè),特別是水產(chǎn)飼料制造業(yè),在以往20年迅猛發(fā)展。人口增長和生活的改善促進(jìn)了對動物肉類、從而對飼料的需求。要生產(chǎn)高質(zhì)量飼料,就必須具備優(yōu)良的加工設(shè)備并掌握質(zhì)量管理方法。本文擬介紹在美國飼料工業(yè)界用于飼料質(zhì)量管理的幾項基本而重要的實驗室操作規(guī)程,希望對中國飼料工業(yè)的飼料質(zhì)量管理有用。一、顆粒飼料持久力指標(biāo)(美國農(nóng)業(yè)工程協(xié)會標(biāo)準(zhǔn)方法:ASAE 5269-3顆粒持久力指標(biāo)(Pe

2、llet durability index ,簡寫PDI用來衡量顆粒飼料(或粗屑飼料在散運中(如貨車抗御破碎的相對能力。這項操作規(guī)程由堪薩斯州立大學(xué)谷物科學(xué)技術(shù)系首創(chuàng),后被美國農(nóng)業(yè)工程協(xié)會采納。顆粒持久力測試裝置見圖1,該操作規(guī)程見附錄A。顆粒測試通常在冷卻后立即進(jìn)行,顆粒溫度降到室溫±5.6即視為冷卻。如果測試時間推遲,持久力測試結(jié)果應(yīng)標(biāo)注冷卻后推遲的小時數(shù)。例如在冷卻后4小時測得顆粒持久力為95,則測試結(jié)果寫為(954。如在冷卻之前進(jìn)行測試,水分蒸發(fā)會明顯丟失重量,使得表觀顆粒持久力偏低。這就必須在試樣翻滾前后做水分測定,從而確定水分蒸發(fā)丟失的重量,對最后重量作相應(yīng)補償。這種情況

3、下顆粒持久力結(jié)果寫為(95 (1。該操作規(guī)程可以修改變通,在試樣翻滾前加進(jìn)5個1.27cm六角形螺帽。圖1 顆粒飼料持久力指標(biāo)的測試裝置 顆粒持久力與動物生長密切相關(guān)。Stark等(1993報道,顆粒飼料飼喂仔豬(5.6 kg,斷奶后7至35天,與飼喂粉狀飼料的豬相比,其平均日增重(ADG高3.9%, 飼料轉(zhuǎn)化率(FCR,飼料/增重,注:FCR越低越好低11.3%;與飼喂含25%細(xì)粉的顆粒飼料的仔豬相比,增重相近,FCR低2.6%(圖2。Stark等(1993的另一個試驗發(fā)現(xiàn),用粉狀飼料或含60%細(xì)粉的飼料飼喂肥育的初產(chǎn)母豬(53.1kg,其ADG一般低于用顆粒飼料飼養(yǎng)的豬。用過篩顆粒養(yǎng)豬,其

4、FCR比用粉狀飼料養(yǎng)豬低4.7%,過篩顆粒飼料中的細(xì)粉含量會使FCR直線上升(圖3。這些試驗結(jié)果證明,降低顆粒飼料的持久力指標(biāo)會削弱顆粒飼料的優(yōu)點。圖2 顆粒質(zhì)量對哺乳仔豬生長的影響(Stark 等, 1993 圖3 顆粒質(zhì)量對肥育豬生長的影響(Stark 等, 1993二、粒度(美國農(nóng)業(yè)工程協(xié)會標(biāo)準(zhǔn):ASAE S319這一方法用來測定一種飼料或原料樣品的平均顆粒大小。計算粒度的數(shù)學(xué)公式很復(fù)雜,但我們只需了解如何使用計算機軟件即可。要測定粒度,首先要了解篩號和篩孔數(shù)的關(guān)系,表1列舉了篩號、篩孔數(shù)和顆粒大小之間的關(guān)系。粒度分析裝置見圖4。扼要地說,將12個下列篩號的篩層和一個篩底疊在一起,即Ty

5、ler篩號(或美國篩號8,10,14(12, 20(16,28(30,35(40,48(50,65(70,100,150(140,200,270;將100g樣品放進(jìn)篩的頂層,搖動10min;記錄每層篩的樣品重(圖5;然后將重量數(shù)據(jù)輸入計算機軟件,粒度即自動得出,并有粒度分布顯示(圖6。表1篩子和篩布規(guī)格用于篩理測試的美國標(biāo)準(zhǔn)局篩號(USBSUSBS篩號 Tyler標(biāo)志目 ASTM標(biāo)志µm 每in實際孔數(shù)USBS規(guī)格in 篩孔尺寸mm4 4 47604.220.1874.765 5 40004.980.41574.00 6 6 33605.810.1323.36 7 7 28306.8

6、00.1112.83 8 8 23807.890.09372.38 10 9 2000 9.210.07872.00 12 10 1680 10.720.06611.68 14 12 1410 12.580.05551.41 16 14 1190 14.660.04691.19 18 16 1000 17.150.03941.00 20 20 840 20.160.03310.84 25 24 710 23.470.02800.71 30 28 590 27.620.02320.59 35 32 500 32.150.01970.5040 35 420 38.02 0.0165 0.42 45

7、 42 350 44.44 0.0138 0.35 50 48 297 52.36 0.0117 0.297 60 60 250 61.93 0.0098 0.250 70 65 210 72.46 0.0083 0.210 80 80 177 85.47 0.0070 0.177 100 100 149 101.10 0.0059 0.149 120 115 125 120.48 0.0079 0.125 140 150 105 142.86 0.0041 0.105 170 170 88 166.67 0.0035 0.088 200 200 74 200.00 0.0029 0.074

8、230 230 62 238.10 0.0024 0.062 270 270 53 270.25 0.0021 0.053 325 325 44 323.00 0.0017 0.044圖4 飼料或原料粒度測試裝置 圖5 記錄樣品重量并計算豆粕樣品粒度用的表格 材料:豆粕,日期:91.11.01美國篩號 大小 m 重量 g % %以下lo g 直徑 重量×log 直徑 log 直徑-log DgW 重量(log 直徑-log DgW 26 3360 0.40 0.4199.59 3.06 1.44 0.79 0.25 8 2380 2.01 2.0897.513.45 6.94 0.6

9、4 0.82 12 1680 2.00 2.0795.443.30 6.06 0.49 0.48 16 1191 8.74 9.0486.403.15 27.54 0.34 1.01 20 841 20.99 21.7064.70 3.00 62.98 0.19 0.7530 594 21.48 22.2142.49 2.85 61.20 0.04 0.03-0.11 0.2540 420 20.04 20.7221.77 2.70 54.08-0.26 0.7850 297 11.28 11.6610.10 2.55 28.7470 212 6.09 6.30 3.81 2.40 14.61

10、-0.41 1.03-0.56 0.42 100 150 1.35 1.40 2.41 2.25 3.04140 103 1.23 1.27 1.14 2.09 2.58-0.72 0.63-0.87 0.77 200 73 1.01 1.040.09 1.94 1.96-1.02 0.06 270 53 0.06 0.060.03 1.79 0.11-1.16 0.04 篩底 37 0.03 0.030.00 1.65 0.05總和 96.71 100.00271.86 7.34647表面積(cm2/g 85.9 粒度,DgW圖6 豆粕樣品粒度分布 粒度與淀粉糊化、顆粒持久力、顆粒水穩(wěn)定度以

11、及動物生長密切相關(guān)。Palaniswamy 和Ali (1991試驗表明,將飼料原料的粒度降為500, 420, 300, 250, 210和 50 µm ,以210 µm 顆粒的水穩(wěn)定度最強。印度白蝦 Penaeus indicus用原料粒度為210 µm的飼料喂養(yǎng)時,生長速度最快,FCR和消化吸收都最佳。Obaldo 等 (1998將蝦飼料的原料粒度從603 µm 降為 586、 521、 408、 272、 124和 69 µm進(jìn)行試驗得出,當(dāng)粒度為124 µm時,顆粒持久力、顆粒水穩(wěn)定度、淀粉糊化度以及蝦的增重全都提高(分別示

12、于圖7、8、9、10。Mavromichalis 等 (1998報道,獲得哺乳期仔豬和肥育豬最佳生長表現(xiàn)的小麥粒度分別為600 m 和 400 m(圖11。圖7 粒度對蝦飼料顆粒持久力指標(biāo)的影響(Obaldo 等, 1998 圖8 粒度對蝦飼料顆粒水穩(wěn)定度指標(biāo)的影響(Obaldo 等, 1998 圖9 粒度對蝦飼料淀粉糊化度的影響(Obaldo 等, 1998 圖10 粒度對蝦增重的影響(Obaldo 等, 1998 圖11 粒度對哺乳仔豬和肥育豬生長的影響(Mavromichalis 等, 1998 三、淀粉糊化度淀粉糊化度或熟化度是指飼料原料或全價飼料中淀粉糊化的百分率。淀粉糊化后,其結(jié)晶

13、態(tài)和折射消失,淀粉粒膨脹,溶劑和反應(yīng)物因而得以進(jìn)入淀粉分子。有幾個可用來測定淀粉糊化度的方法,詳見附錄 B (Chiang 和 Johnson, 1977。另一個詞,破損淀粉,借用于制粉工業(yè),原指碾磨后全麥粉中“糊化”的淀粉,飼料工業(yè)中,破損淀粉指粉碎后原料中“糊化”的淀粉。但在粉碎過程中并不給物料加水,所以淀粉只能破碎而不能“糊化”。在通過制粒機、膨脹機或擠壓機加工飼料時,蒸汽(熱和水注入物料,物料中的淀粉才會糊化。一種用來測試淀粉糊化度的裝置示于圖12。圖12 一種用于測試淀粉糊化度的裝置 淀粉糊化度與顆粒持久力和動物生長有相關(guān)關(guān)系。Traylor 等 (1998發(fā)現(xiàn),提高玉米為主的飼料中

14、的淀粉糊化度,使肥育豬飼料的顆粒持久力加大(圖13。Hongtrakul 等(1997 報道了一個18天試驗的結(jié)果,斷奶仔豬(6.8,21日齡的日糧分別含糊化玉米14.5、38.7、52.7、64.4、89.3%,其ADG和FCR分別為0.35、0.32、0.31、0.30、0.34和1.35、1.37、1.41、1.35、1.37。這說明淀粉糊化度對斷奶仔豬生長的影響是不規(guī)則的,但干物質(zhì)、氮和總能的表觀消化率在淀粉糊化度為64.4%時最佳(圖14。關(guān)于淀粉糊化度與顆粒持久力的關(guān)系存在一些誤解。許多人認(rèn)為,顆粒持久力上升的原因在于淀粉糊化度的提高。這只是部分原因,事實上,許多因素都影響顆粒的持

15、久力,例如,蛋白類型就對顆粒持久力和水穩(wěn)定度起重要作用。小麥面筋是一種天然的粘合劑,含有面筋的飼料, 圖14 擠壓玉米的淀粉糊化度對哺乳仔豬生長的影響(Hongtrakul等,1997 圖15 膨脹機錐體壓力對用玉米、高粱、小麥和小麥次粉制作的肥育豬顆粒飼料持久力指標(biāo)的影響(T raylor等,1998 顆粒持久力明顯提高。圖15顯示一種用玉米、高粱、小麥和小麥次粉制作的豬飼料的顆粒持久力,它清楚地表明,原料(蛋白類型也會影響顆粒持久力;以小麥為主的豬飼料所含的面筋粘合性最強。Cheng (2000比較過幾種含不同原料的蝦顆粒飼料的水穩(wěn)定度指標(biāo),即分別含有全麥粉、面粉、小麥淀粉加小麥面筋、小麥

16、淀粉、小麥面筋、麥麩、麥胚,發(fā)現(xiàn)含小麥面筋的蝦飼料水穩(wěn)定性最強(圖16。圖16 用小麥及小麥產(chǎn)品制作的蝦飼料在42ºC 和3種不同水分條件下用絞肉機加工所得的水穩(wěn)定度指標(biāo)(浸水1h 四、水穩(wěn)定度指標(biāo)顆粒的水穩(wěn)定度指標(biāo)(WSI現(xiàn)已用于蝦飼料的質(zhì)量管理。因為蝦是緩慢而間歇取食的,所以要求蝦飼料物理性質(zhì)穩(wěn)定,粘合牢固,能在水中停留不散的時間比大多數(shù)魚飼料更長。高度耐水飼料能減少養(yǎng)分流失并使顆粒保持合格的物理狀態(tài),從而減少水污染并改進(jìn)飼料轉(zhuǎn)化率(Meyers等,1972。為使蝦飼料能在水中停留數(shù)小時,必須讓飼料原料牢固粘合。通常使用粘合劑,諸如膨潤土、羧甲基纖維、纖維素衍生物、二十四磺酸鹽(

17、lignosulfonates,以改善用于家畜和魚的顆粒飼料質(zhì)量,但都不足以獲得水穩(wěn)定度合格的蝦顆粒飼料(Akiyama 等, 1992,而且對于蝦都沒有營養(yǎng)價值。全麥粉、小麥粉和小麥面筋是良好的粘合劑,而且確能給蝦提供養(yǎng)分。除了粘合劑,另外還有一些因素能影響蝦飼料的水穩(wěn)定度,包括:原料特性,如粒度,淀粉、脂類及液體含量;加工條件,如在攪拌機內(nèi)的物料水分,攪拌時間,攪拌均勻度,加工水溫和時間,制粒和烘干的溫度和時間;制粒機配置,如模孔尺寸和環(huán)模厚度;供水情況,如水流速度,水溫,水中氣流速度以及水的衛(wèi)生狀況;蝦的數(shù)量;以及飼料浸水的時間長短。早期Wood 等 (1954 研究鱒魚和鯉魚飼料時,涉

18、及改善顆粒水穩(wěn)定度的方法。他們的工作以及Combs and Burrows (1958的研究都考查過胍爾豆膠和羧甲基纖維的粘合性能。Hepher (1969研究過小麥面筋的粘合性。前后多人研究過各種養(yǎng)分的丟失,如維生素(Goldblatt 等, 1978, 1980; Slinger等, 1978;氨基酸(Yamada and Yone, 1985;礦物質(zhì)(Goldblatt 等, 1978;干物質(zhì)(Forster, 1972; Balazs 等, 1973; Farmanfarmaian 等, 1982; Taechanuruk and Stickney, 1982; Hashim and

19、Saat, 1992;以及蛋白、灰分、脂類和碳水化物(Cuzon 等, 1982。這些研究都對改善水產(chǎn)飼料的顆粒水穩(wěn)定度作出了重要貢獻(xiàn)。附錄C描述了一個測試水穩(wěn)定度指標(biāo)的簡單方法。Cheng等(2001a; 2002a應(yīng)用這個方法研究得出制作蝦顆粒飼料的最佳水分、加工水溫和浸水時間對水穩(wěn)定度的影響。他們還用實驗室絞肉機制作了用于研究的最佳WSI蝦顆粒飼料(Cheng 等, 2002b, 2002c。Bortone 等(1995 a證實,顆粒的水穩(wěn)定度指標(biāo)與下列指標(biāo)呈正相關(guān),即FCR(r=0.88, P<0.01,淀粉糊化度(r=0.88, P<0.05,白對蝦(Penaeus va

20、nnamei的增重(r=0.82, P<0.05。Bortone 等 (1995 b進(jìn)一步得出,顆粒水穩(wěn)定度指標(biāo)與FCR呈正相關(guān)(r=0.74, P=0.02,與淀粉糊化度呈正相關(guān)(r=0.86, P=0.002。美國夏威夷海洋研究所建立了一個測定蝦顆粒飼料的水穩(wěn)定度的修訂方法。測定蝦顆粒飼料的水穩(wěn)定度的裝置見圖17。圖17 一種測試蝦飼料顆粒水穩(wěn)定度指標(biāo)的修改裝置 五、總磷和植酸磷動物體的灰分70%以上是由鈣和磷組成(Maynard and Loosli, 1962。磷在骨骼形成和營養(yǎng)代謝中起著重要作用,磷缺乏癥,如幼畜的佝僂病可致動物死亡。因此,制定動物飼料配方必須考慮有適量的磷以滿

21、足動物需要。還必須有磷的實驗室分析,以保證飼料的含磷量與飼料包裝袋上標(biāo)明的規(guī)格相符。測磷不僅對畜禽飼料重要,對水產(chǎn)飼料也同樣重要。水產(chǎn)養(yǎng)殖是世界上增長最快的產(chǎn)業(yè)之一。不過,由于體系的強化,水產(chǎn)養(yǎng)殖也受到環(huán)境保護更多的關(guān)注和節(jié)制。磷是一種危險的水域污染物,過量的磷排放到清潔水域中會促使藻類和浮游生物生長,從而降低水溶的氧導(dǎo)致水污染(Miller 等, 1974; Beveridge, 1984; Boyd, 1990; Sugiura 等, 1999。因此,減少磷向水域的排放對養(yǎng)殖業(yè)的持續(xù)發(fā)展至關(guān)重要。用鱒魚和鮭魚做試驗得出的數(shù)據(jù)表明,在典型的商業(yè)飼養(yǎng)中,日糧的磷只有20%左右留在魚體中(Ket

22、ola, 1982; Philips and Beveridge, 1986; Ackefors and Enell, 1990; Holby and Hall, 1991; Ketola and Harland, 1993。這意味著大約80%的日糧磷未被利用,而是以可溶態(tài)和糞便形式排放到水域中。現(xiàn)已了解,不留存魚體內(nèi)的磷的數(shù)量取決于魚飼料中磷的含量和磷來源的生物利用率。魚粉是魚飼料的一種主要原料。但是,魚粉含有相當(dāng)多的磷和其它礦物質(zhì),而很多種魚,包括鱒魚和鮭魚,對磷的利用率是較低的(NRC 1993; Sugiura 等, 1998。目前魚粉供應(yīng)在世界范圍未見增長,這完全取決于捕魚產(chǎn)量。秘魯

23、和智利兩個國家生產(chǎn)的魚粉大約占全球魚粉產(chǎn)量的三分之二。但是,據(jù)漁業(yè)研究結(jié)果(Hardy, 1995,在尼爾諾年份,海洋變暖使得魚群遷離海岸,這些國家的魚粉產(chǎn)量可周期性地波動20%以上。再者,魚粉往往比大多數(shù)油粕如豆粕、谷物及其副產(chǎn)品,價格更高。因此,使用豆粕或谷物及其副產(chǎn)品對于制作經(jīng)濟而有利于環(huán)保的魚飼料就更加重要了。但是,豆粕或谷物及其副產(chǎn)品中的總磷,大約三分之二以植酸磷存在,而魚對植酸磷的生物利用率是非常有限的(Ogino 等, 1979; NRC, 1993; Raboy, 1997。Sugiura 等 (1998報道,虹鱒魚對豆粕中磷的利用率是22%。然而,Riche and Brow

24、n (1996得出,虹鱒魚對豆粕中的磷根本不能利用。由此可見測磷的重要性了。測定總磷和植酸磷的簡化法分別列入附錄D和附錄E。盡管虹鱒魚對豆粕中的磷利用率低,但這實際上取決于豆粕來源和魚的大小。Cheng 等(2002d; 2002e最近發(fā)現(xiàn),虹鱒魚(體重223.4g對豆粕中磷的利用率為63.2% 。Cheng and Hardy (2002d還進(jìn)一步發(fā)現(xiàn),擠壓加工對豆粕中磷和氨基酸的利用率均無明顯影響(表2。這結(jié)果說明,擠壓加工對豆粕的磷和氨基酸不會造成明顯損害。表2豆粕的氨基酸組成(%,干基和虹鱒魚對豆粕中氨基酸的利用率(%氨基酸組成氨基酸利用率項目豆粕擠壓豆粕豆粕擠壓豆粕必需氨基酸99.5

25、 99.5精氨酸 3.27 3.29組氨酸 1.28 1.30 99.2 99.1異亮氨酸 2.14 2.29 98.6 98.6亮氨酸 4.41 4.61 98.9 98.7賴氨酸 2.80 2.80 99.4 99.4蛋氨酸0.76 0.76 99.5 99.3苯丙氨酸 2.54 2.60 99.1 98.9蘇氨酸 1.88 1.92 98.1 98.3色氨酸0.56 0.70 98.2 98.499.1 99.02.39纈氨酸 2.25(續(xù)氨基酸組成氨基酸利用率項目豆粕擠壓豆粕豆粕擠壓豆粕非必需氨氨酸丙氨酸 2.47 2.53 98.7 98.4天冬氨酸 5.22 5.29 98.8 9

26、8.7胱氨酸0.79 0.82 97.2 97.2 谷氨酸9.22 9.67 99.4 99.3 甘氨酸 1.92 1.94 98.9 98.9 脯氨酸 2.72 2.82 99.2 99.1絲氨酸 2.25 2.43 98.8 98.8酪氨酸 1.79 1.85 98.3 98.4來源:Cheng and Hardy, 2002提高豆粕中磷的利用率的另一途經(jīng)是給豆粕配制的動物飼料施用植酸酶。植酸酶是專一水解植酸的酶。許多動物的消化道都有這種酶,但通常數(shù)量很少,不足以將飼料中的植酸明顯分解(Bitar and Reinhold, 1972。給含有豆粕或谷物及其加工副產(chǎn)品的魚飼料施用植酸酶,不僅

27、可降低魚飼料的含磷量,還能減少向水域排放磷的數(shù)量。現(xiàn)在已有可添加到魚和其它動物飼料中的商品植酸酶出售。不過植酸酶的效力可能各有不同,這取決于酶的來源和飼料配方。Cheng 和 Hardy (2002d給干擠壓全脂大豆制作的虹鱒魚飼料施用植酸酶,得出植酸酶的最佳劑量大致是400 FTU/kg飼料(表3,表4。表3虹鱒魚對大豆中的干物質(zhì)、粗蛋白和礦物質(zhì)的表觀消化率(%,平均值±標(biāo)準(zhǔn)差,帶不同字母的同行平均值之間差異顯著(P < 0.05項目未加工添加植酸酶 (FTU/kg 飼料 的擠壓大豆壓榨大豆 0 200 400 600 800 1000大豆 P 值 干物質(zhì) 74.5 

28、7;1.6a 73.8 ± 8.2a 73.6 ± 3.6a 75.7 ± 3.7a 70.2 ± 3.5a 82.0 ±1.5a 74.2 ± 4.3a 75.9 ±3.3a 0.3829 粗蛋白 88.0 ±0.4a 97.2 ±1.1b 96.8 ±0.6b 96.0 ±2.3b 95.4 ±1.8b 97.8 ±0.4b 96.6 ±0.2b 97.9 ±0.2b 0.0005 鎂 68.5 ±0.4a 59.6 ±2

29、.7b 74.7 ±1.2c 80.0 ±0.3d 79.5 ±1.5d 83.4 ±0.5d 81.7 ±0.0d 68.0 ±3.3a <0.0001 硫 93.1 ±0.4a 97.0 ±0.7b 96.2 ±0.1b 96.8 ±0.0b 93.2 ±0.2b 97.2 ±0.0b 96.0 ±0.3b 97.3 ±0.2b <0.0001 總磷 21.2 ±0.1a 12.5 ±4.8b 81.3 ±3.

30、4c 92.2 ±0.0d 89.7 ±0.3d 95.2 ±0.6d 93.9 ±0.3d 31.7 ±6.5e <0.0001 植酸磷 29.9 ±1.2a 19.6 ±6.1a 60.9 ±1.9b 87.2 ±1.3c 93.8 ±1.2c 93.7 ±4.7c 93.8 ±1.4c 60.6 ±0.2b <0.0001 銅 89.9 ±0.2a 93.3 ±1.2a 92.1 ±1.6a 93.2 ±0.

31、1a 92.1 ±0.4a 93.6 ±0.1a 93.4 ±0.2a 92.7 ±2.7a 0.1767 錳 20.3 ±0.4a 13.5 ±1.2a 46.2 ±2.9b 76.3 ±6.1c 78.1 ±0.4c 81.2 ±0.8c 81.4 ±1.2c 16.8 ±0.9a <0.0001 鋅14.6 ±5.7a 7.2 ±0.3a 48.4 ±3.3b 85.1 ±13.0c 73.7 ±2.1c 78.8

32、 ±0.5c 80.9 ±3.3c 15.7 ±5.6a<0.0001來源:Cheng and Hardy, 2002表4 虹鱒魚對大豆中的氨基酸的表觀消化率(%,平均值±標(biāo)準(zhǔn)差, 帶不同字母的同行平均值之間差異顯著(P < 0.05添加植酸酶 (FTU/kg 飼料 的擠壓大豆 氨基酸 未加工大豆 0 200 400 600 800 1000 壓榨大豆P 值 精氨酸 88.9 ± 1.0a 98.9 ± 0.2b 98.8± 0.0b 99.1± 0.2b 96.5± 0.5b 99.5

33、77; 0.0b 98.2 ± 0.1b 99.5 ± 0.0b <0.0001組氨酸 91.3 ± 0.3a 97.8 ± 0.2b 98.0± 0.1b 98.1± 0.3b 93.3± 0.6c 98.6± 0.1b 96.7 ± 0.3b 98.4 ± 0.2b <0.0001異亮氨酸 84.4 ± 0.9a 96.3 ± 0.3b 96.2± 0.6b 97.3± 0.5b 91.6± 0.4c 97.0± 1.1

34、b 94.6 ± 0.5b 97.1 ± 0.2b <0.0001亮氨酸 85.4 ± 1.1a 97.7 ± 0.3b 97.6± 0.0b 98.3± 0.1b 92.6± 0.7c 98.5± 0.1b 96.0 ± 0.1d 98.5 ± 0.1b <0.0001賴氨酸 93.4 ± 0.5a 98.0 ± 0.2b 98.4± 0.2b 98.7± 0.0b 94.3± 0.7c 99.1± 0.1b 97.5 &

35、#177; 0.1b 98.9 ± 0.1b <0.0001蛋氨酸 95.9 ± 0.1a 98.5 ± 0.0b 99.1± 0.0b 99.1± 0.3b 95.2± 0.3a 99.4± 0.2b 97.9 ± 0.1b 99.4 ± 0.1b <0.0001苯丙氨酸 84.4 ± 1.2a 97.7 ± 0.3b 97.7± 0.1b 98.1±0.2b 93.1± 0.8c 98.7± 0.0b 96.5 ± 0.

36、2b 98.7 ± 0.1b <0.0001蘇氨酸 86.5 ± 1.2a 96.1 ± 1.0b 96.4± 0.4b 96.6± 0.4b 91.6± 1.3c 98.0± 0.3d 94.6 ± 0.3b 97.4 ± 0.4d <0.0001色氨酸93.3 ± 0.2a 96.7 ± 0.8b 98.1± 0.6b97.8± 0.1b93.8± 0.3c97.8± 0.2b96.7 ± 0.7b98.7 ±

37、 0.4b<0.0001纈氨酸87.3± 0.6a97.6± 0.0b97.8± 0.7b98.4± 0.1b92.6± 0.7c98.4± 0.2b96.1± 0.2d98.6± 0.0b<0.0001丙氨酸86.7± 1.2a97.3± 0.5b97.4± 0.1b98.1± 0.2b94.0± 1.1c98.6± 0.0d96.5± 0.1b98.7± 0.2d<0.0001天冬氨酸81.9± 1.4a

38、97.6± 0.4b97.4± 0.0b98.2± 0.3c93.3± 0.9d98.9± 0.1c96.2± 0.2b98.9± 0.1c<0.0001胱氨酸77.2± 3.1a96.0± 3.1b97.4± 2.8b95.1± 3.5b90.1± 2.4b98.1± 2.1b95.4± 3.1b97.8± 3.2b0.0012谷氨酸89.8± 0.5a98.2± 0.1b98.3± 0.1b98.8

39、7;0.0bd93.8± 0.6c99.2± 0.0d96.8± 0.1e99.1± 0.0d<0.0001甘氨酸91.4± 0.7a98.3± 0.2b98.4± 0.0b98.6± 0.1b96.5± 0.5c99.0± 0.0d97.7± 0.1c98.9± 0.1d<0.0001脯氨酸92.7± 0.5a98.1± 0.2b98.3± 0.0b98.5± 0.1b93.4± 0.8a98.9± 0

40、.0b96.4± 0.2c98.5± 0.1b<0.0001絲氨酸85.9± 1.7a97.2± 0.8b97.6± 0.6b97.6± 0.5b91.8± 1.4c98.5± 0.5b95.4± 0.2b98.2± 0.3b<0.0001酪氨酸90.1± 0.9a95.0± 0.6b95.9± 2.9b96.0± 1.3b91.0± 0.6a96.1± 0.9b93.4± 0.6a95.6± 0.1b0

41、.0064來源:Cheng and Hardy, 2002表5測試顆粒飼料(或粗屑飼料持久力指標(biāo)的篩孔尺寸顆?；虼中即笮∫蟮暮Y孔尺寸分?jǐn)?shù)(in小數(shù)(編號*小數(shù)(cm所有粗屑No.12 0.1679 顆粒3/32 0.2383 No.10 0.1999 1/18 0.3175 No.7 0.2819 9/64 0.3571 No.6 0.3353 5/32 0.3970 No.6 0.3353 3/16 0.4763 No.5 0.3988 13/64 0.5159 No.4 0.4750 1/4 0.6350No.31/20.56645/16 0.7938 0.263 0.6731 3/8

42、0.9525 5/16 0.7938 1/2 1.2700 7/16 1.1113 5/8 1.5875 0.530 1.3462 3/4 1.9050 5/8 1.5875 7/8 2.2225 3/4 1.90501 2.5400 7/8 2.2225*美國測試和材料協(xié)會,ASTM E11-61,用于測試的金屬絲篩布規(guī)格。附錄A:顆粒持久力指標(biāo)1.設(shè)備:測定顆粒或粗屑的持久力,是將試樣放進(jìn)一個防塵筒中以50rpm轉(zhuǎn)速翻滾10分鐘。這裝置沿著一根軸旋轉(zhuǎn),軸垂直于30.5的一側(cè),固定在其中心點。一個5.1×22.9cm 的平板對稱地固定在從22.9cm 的一側(cè)到30.5×3

43、0.5cm一側(cè)的對角線上?？稍谄湟粋?cè)設(shè)一個防塵的門。盡量減少凸物(如鉚釘、螺釘,凸物外形要圓潤(見圖1。2.篩理:將樣品放在金屬絲篩布上過篩測定細(xì)粉,篩孔剛小于標(biāo)定的顆粒直徑。表5列有對各種直徑顆粒和粗屑的推薦篩號。3.測試規(guī)程:將待測的顆?；虼中紭悠酚煤线m的篩子清理除去細(xì)粉。如測試的顆粒直徑為1.27cm或更大,選出長度在3.23.8cm范圍的顆粒。將500g樣品放進(jìn)裝置中翻滾10 min ,取出樣品,過篩,計算完整顆?；虼中及俜致?。顆粒(或粗屑持久力指(PDI標(biāo)算式如下:顆粒(或粗屑翻滾前重量PDI (% =×100顆粒(或粗屑翻滾后重量附錄B:淀粉糊化度(Chiang and

44、Johnson, 1977 試劑:1.聯(lián)甲苯胺(o-Toluidine試劑:溶解1.5g硫脲于940ml冰醋酸,加60ml 聯(lián)甲苯胺,存于有色玻瓶中。2.乙酸鈉緩沖液:溶解4.1g無水乙酸鈉于1L蒸餾水,用乙酸調(diào)pH至4.5。3.葡糖淀粉酶溶液:將2g根霉葡糖淀粉酶(目錄號No.A-7255,Sigma Chemical Co.供貨分散于250ml乙酸緩沖液,用玻璃棉濾紙(Whatman No. GF/A迅速過濾,限2小時內(nèi)使用。葡糖淀粉酶的特異活性是在pH4.5溫度40下生成28.4 µmol葡萄糖/min/mg 蛋白。操作規(guī)程:1.制備淀粉部分糊化的樣品。將20mg樣品分散于50

45、ml離心管中的5ml蒸餾水中。2.制備淀粉完全糊化的樣品。將20mg樣品分散于50ml離心管中的3ml蒸餾水和1ml 1N NaOH中。5分鐘后加1ml 1N HCl。3.葡糖淀粉酶水解和測定葡萄糖。每個離心管加25ml葡糖淀粉酶溶液,40保溫30min。加2ml 25%的三氯乙酸鈍化葡糖淀粉酶(并使該酶和其它蛋白沉淀,以16,000×g 離心5min。4.取0.5ml上清液于試管中,加入4.5ml 聯(lián)甲苯胺(o-toluidine試劑,將試管置沸水中10min,用冷水冷卻,加5ml 冰醋酸,測定在630nm的吸收率。按下式計算淀粉糊化度:Y = 100*(BK/(AK; K = A

46、*(CB/(A2B+C;其中,A =全糊化淀粉的吸收率;B =部分糊化淀粉和經(jīng)過30min酶水解的完整淀粉混合物的吸收率;C =部分糊化淀粉和經(jīng)過 60min酶水解的完整淀粉混合物的吸收率;K = 1% 完整淀粉經(jīng)30min水解后的吸收率。這對每種淀粉或特定處理的淀粉是一個常數(shù),常規(guī)分析中只需測定一次。這規(guī)程也可用來計算總淀粉%:用葡萄糖溶液(720 µg/ml 制定標(biāo)準(zhǔn)曲線。按前法第2和第3步驟處理樣品,根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線讀取葡萄糖濃度。按下式計算淀粉含量: 淀粉總量% =葡萄糖 X 0.9 X 100 / 樣品重(干基附錄C:水穩(wěn)定度指標(biāo) (Cheng 等, 20021.2g顆粒飼料放

47、進(jìn)U.S.#12不銹鋼圓筒測試籃(直徑5cm,高1.5cm 中,加蓋以防濾浸時試樣外溢。2.3份顆粒飼料重復(fù)樣品分別放進(jìn)52L養(yǎng)魚缸中,在下列水質(zhì)參數(shù)和近似養(yǎng)殖水流的條件下分別濾浸1h、2h、4h(水含鹽度34 ppt,水溫26 °C ,氣流180L/h,水流52L/h。3.濾浸后,將測試籃仔細(xì)地浸到蒸餾水中三次以除鹽,去掉蓋子,將濾浸后的顆粒放烘箱內(nèi)按預(yù)定溫度和時間(135°C,4h烘干。最初的顆粒(未濾浸,按AOAC標(biāo)準(zhǔn)方法(AOAC, 1990在135°C烘干2h。4.計算濾浸顆粒和最初顆粒的干物重。水穩(wěn)定度指標(biāo)為濾浸顆粒干物重與最初顆粒干物重之比乘100。

48、附錄D:總磷釩鉬磷酸法(標(biāo)準(zhǔn)方法 15版,1981。APHA等:將0.5g飼料(0.1g糞便在550 °C 過夜灰化,稱取灰分量;加 1ml濃縮HCl和 1ml 濃縮HNO3,室溫放置6h;以酚酞作指示劑,用NaOH中和樣品溶液,定容至100ml,加HCl 使溶液呈弱酸性。試劑:溶液A:1.25g鉬酸胺(NH46MO7O24.4H2O/15ml 蒸餾水;溶液B: 0.0625 g 偏釩酸胺(NH4VO3;冷卻,加16.5ml濃縮HCl,冷卻至室溫;將溶液A注入溶液B,混合,稀釋至50ml。操作規(guī)程:1ml 樣品溶液(0.05-1.0mg P+ 1ml釩酸鹽鉬酸鹽試劑;混合;讀取在40

49、0-490nm的吸收率(10min -幾天都穩(wěn)定P濃度讀吸收率所在分光度1-5ppm 400nm2-10ppm 420nm4-18ppm 470nm溶液P濃度×稀釋系數(shù)總P(%=所用樣品量附錄E:植酸磷(Latta and Eskin, 1980提取:20ml 2.4%HCl(0.65N (54ml HCl / L 蒸餾水;50ml離心管,植物材料(1g,室溫下?lián)u動 3h;離心,稀釋,洗脫,顯色:1.5ml +0.2ml CHCl3置MC管中,搖動5min,以12000rpm離心5min;0.5ml (飼料樣品1.0ml上清液用蒸餾水稀釋至10ml;先用15ml 0.7M NaCl

50、淋洗陰離子交換柱;用大約15ml 蒸餾水再淋洗一遍,廢棄洗脫液;讓10ml樣品溶液通過0.5g(6 cm柱內(nèi)陰離子交換柱(淋洗3份樣品后廢棄離子交換樹脂;用15ml 0.1M NaCl (5.85g NaCl/L,2.925g/500ml洗脫,收集(25ml洗脫液含有酸溶P,用其它方法分析;換管,加 15ml 0.7M NaCl (40.95 g NaCl/L,20.475g/500ml 洗脫,收集(這一組份含植酸;3ml 整分+1ml威德試劑(0.03% Fe C l3.6 H2O + 0.3% 磺基水楊酸;混合(溶液混濁時離心10min;讀取在500nm的吸收率;標(biāo)準(zhǔn):5-40 µ

51、;g 植酸鹽/ml 0.7M NaCl; 1ml標(biāo)準(zhǔn)液+0.333ml威德試劑;混合,離心,讀取在500nm的吸收率。所用標(biāo)準(zhǔn):十二烷基植酸鈉C6H6O24P6Na12,FW 923.8, 純度99%,含水12%。計算:溶液的植酸鹽濃度×稀釋系數(shù)×植酸鹽含P量P(飼料中%=樣品重量參考文獻(xiàn)Ackefors, H. and M. Enell. 1990. Discharge of nutrients from Swedish fish farming to adjacent sea areas. Ambio. 19: 28-35.Akiyama, D.M., W.G. Dom

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