實(shí)驗(yàn)二人類染色體核型分析

1、正常人G顯帶核型分析代課老師：五且昆代課老師：五且昆Company Logo 實(shí)驗(yàn)?zāi)康膶?shí)驗(yàn)?zāi)康膙熟悉人類染色體熟悉人類染色體G G顯帶的帶型特征顯帶的帶型特征v初步掌握初步掌握G G顯帶核型分析的基本方法顯帶核型分析的基本方法Company LogovG顯帶（G banding）是最常見的顯帶技術(shù)，它是將染色體標(biāo)本用堿、胰蛋白酶或其它鹽溶液處理后，再用Giemsa染液染色，在普通顯微鏡下，可見深淺相間的帶紋，稱G帶（G band）。G顯帶方法簡(jiǎn)便，帶紋清晰，染色體標(biāo)本可以長(zhǎng)期保存，因此被廣泛用于染色體病的診斷和研究。Company Logov關(guān)于G顯帶的機(jī)理目前有多種說法，較常見的有:1. L

2、ee等（1973）認(rèn)為染色體上與DNA結(jié)合疏松的組蛋白易被胰蛋白酶分解掉，染色后這些區(qū)段成為淺帶，而那些組蛋白和DNA結(jié)合牢固的區(qū)段可被染成深帶。Company Logov2. 有人認(rèn)為，染色體顯帶現(xiàn)象是染色體本身存在著帶的結(jié)構(gòu)。比如用相差顯微鏡觀察未染色的染色體時(shí)，就能直接觀察到帶的存在。用特殊方法處理后，再用染料染色，則帶更加清楚，隨顯帶方法不同，顯出來的帶特點(diǎn)也不一樣，說明帶的出現(xiàn)又與染料特異結(jié)合有關(guān)。Company Logov3. 一般認(rèn)為，易著色的陽性帶為含有AT多的染色體節(jié)段，相反，含GC多的染色體段則不易著色?？偟膩碚f，G顯帶的機(jī)理還未搞清。Company LogoCompany

3、 Logo正常人類正常人類G顯帶染色體的核型特征顯帶染色體的核型特征 定義：定義： 核型（核型（KaryotypeKaryotype）又稱染色體組型，是指將人又稱染色體組型，是指將人體體細(xì)胞內(nèi)的全部染色體，按其不同的體體細(xì)胞內(nèi)的全部染色體，按其不同的大小大小、形形態(tài)態(tài)、特征特征排列起來所構(gòu)成的圖像。排列起來所構(gòu)成的圖像。 核型分析（核型分析（ Karyotype analysisKaryotype analysis） 制備核型圖像并對(duì)其進(jìn)行觀察分析以制備核型圖像并對(duì)其進(jìn)行觀察分析以確定正常與確定正常與否否的全過程。的全過程。Company Logov根據(jù)染色體大小和著絲粒位置不同分為AG七組，

4、X列入C組，Y列入G組，并決定將副縊痕和隨體作為識(shí)別染色體的輔助指標(biāo)。Company Logo染色體中期分裂相照片的剪貼分析染色體中期分裂相照片的剪貼分析v1】用剪刀將每一條染色體小心剪下；v2】將剪下的染色體按照Denver體制的特征進(jìn)行分組、排號(hào)【、組（形態(tài)最大）、組（近端著絲粒染色體）、組（較小，中央、亞中央著絲粒染色體）組】，按順序從長(zhǎng)到短排列；v3】粘貼時(shí)短臂向上，長(zhǎng)臂向下,如兩條染色體長(zhǎng)度相等,短臂較長(zhǎng)者排前，每組的著絲粒在一條橫線上；v4】分析結(jié)果，記錄下核型。 Company Logo實(shí)驗(yàn)用品實(shí)驗(yàn)用品v解剖剪、培養(yǎng)皿、膠水、鑷子等解剖剪、培養(yǎng)皿、膠水、鑷子等v人類染色體人類染色

5、體G G顯帶照片顯帶照片Company Logo實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法實(shí)驗(yàn)內(nèi)容與方法（一）認(rèn)識(shí)正常人體細(xì)胞各染色體（一）認(rèn)識(shí)正常人體細(xì)胞各染色體 顯帶的帶型特征顯帶的帶型特征（二）正常人體細(xì)胞染色體數(shù)目觀察（二）正常人體細(xì)胞染色體數(shù)目觀察（三）正常人顯帶核型分析（三）正常人顯帶核型分析Company Logo染色體觀察及核型分析染色體觀察及核型分析Company Logo染色體觀察及核型分析染色體觀察及核型分析一禿二蛇三蝶飛，四象鞭炮五黑腰。 六號(hào)短臂小白臉，七上八下九苗條。 十號(hào)長(zhǎng)臂三條帶，十一低來十二高。 十三十四十五號(hào)，三個(gè)一樣一二一。 十六長(zhǎng)臂近點(diǎn)深，十七遠(yuǎn)端帶腳鐐。 十八人小肚皮大，十九中間

6、一點(diǎn)腰。 二十頭重腳底輕，二十一象葫蘆瓢。二十二一點(diǎn)Y黑腰，X pq 一肩挑。 Company LogoA：1，2，3對(duì)染色體，體積大，易于區(qū)別，有中對(duì)染色體，體積大，易于區(qū)別，有中央著絲粒。第央著絲粒。第2對(duì)的著絲粒略偏離中央。無隨對(duì)的著絲粒略偏離中央。無隨體，體，1號(hào)常見次縊痕。號(hào)常見次縊痕。B：4，5兩對(duì)，體積大，有亞中部著絲粒，無隨兩對(duì)，體積大，有亞中部著絲粒，無隨體，彼此不易區(qū)分。體，彼此不易區(qū)分。C：包括：包括612對(duì)常染色體和對(duì)常染色體和X染色體，中等大小，染色體，中等大小，為亞中部著絲粒染色體。第為亞中部著絲粒染色體。第6對(duì)的著絲粒靠近對(duì)的著絲?？拷醒?，中央，X染色體大小接近

7、介于第染色體大小接近介于第6，7對(duì)之間。對(duì)之間。第第9對(duì)染色體長(zhǎng)臂上有一次縊痕，第對(duì)染色體長(zhǎng)臂上有一次縊痕，第11對(duì)染色對(duì)染色體的短臂較長(zhǎng)，第體的短臂較長(zhǎng)，第12對(duì)染色體的短臂較短。對(duì)染色體的短臂較短。D：13，14，15中等大小，有近端著絲粒，有隨體，彼此之間不中等大小，有近端著絲粒，有隨體，彼此之間不易區(qū)分。易區(qū)分。E：16，17，18較小，第較小，第16對(duì)有中央著絲粒，長(zhǎng)臂上有次縊痕，對(duì)有中央著絲粒，長(zhǎng)臂上有次縊痕，易于區(qū)別。第易于區(qū)別。第17，18對(duì)有亞中部著絲粒，難以區(qū)分，后者的對(duì)有亞中部著絲粒，難以區(qū)分，后者的短臂較短。短臂較短。F：19，20體積小，有中部著絲粒，無隨體，彼此之間

8、難以區(qū)分。體積小，有中部著絲粒，無隨體，彼此之間難以區(qū)分。G：21，22常染色體和常染色體和Y染色體。第染色體。第21，22對(duì)染色體體積最小，對(duì)染色體體積最小，近端部著絲粒，有隨體，長(zhǎng)臂常呈分叉狀，彼此不易區(qū)分。近端部著絲粒，有隨體，長(zhǎng)臂常呈分叉狀，彼此不易區(qū)分。Y染色體較前兩對(duì)略大，近端部著絲粒，無隨體，長(zhǎng)臂常常染色體較前兩對(duì)略大，近端部著絲粒，無隨體，長(zhǎng)臂常常彼此平行彼此平行。Company Logo中央著絲粒染色中央著絲粒染色體，體，短臂有兩條深帶；短臂有兩條深帶；長(zhǎng)臂遠(yuǎn)側(cè)段有長(zhǎng)臂遠(yuǎn)側(cè)段有4條深條深帶帶一號(hào)染色體一號(hào)染色體Company Logo亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體短臂可見短

9、臂可見4條深帶，中段的條深帶，中段的兩條深帶稍靠近。兩條深帶稍靠近。長(zhǎng)臂有長(zhǎng)臂有58條深帶條深帶二號(hào)染色體二號(hào)染色體Company Logo三號(hào)染色體三號(hào)染色體中央著絲粒染色體中央著絲粒染色體3號(hào)染色體著絲粒染色濃。在短臂和長(zhǎng)臂的中短各有一條明顯而寬闊的淺帶，呈呈蝴蝶結(jié)狀蝴蝶結(jié)狀Company Logo四號(hào)染色體四號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體短臂：短臂：可見1-2條深帶長(zhǎng)臂：長(zhǎng)臂： 可見均勻分布的4條深帶Company Logo五號(hào)染色體五號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體長(zhǎng)臂上有四條深染帶，其中長(zhǎng)臂上有四條深染帶，其中間三條深帶常集中在一起間三條深帶常集中在一起Compan

10、y Logo六號(hào)染色體六號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體短臂有兩條深帶，在近側(cè)、短臂有兩條深帶，在近側(cè)、遠(yuǎn)側(cè)深帶之間有一條寬闊而遠(yuǎn)側(cè)深帶之間有一條寬闊而明顯的淺帶，比擬為明顯的淺帶，比擬為“小白小白臉臉”Company Logo七號(hào)染色體七號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體長(zhǎng)臂上有三條深染帶，短臂長(zhǎng)臂上有三條深染帶，短臂有三條深帶，中間一條較淺，有三條深帶，中間一條較淺，遠(yuǎn)側(cè)深帶最深，猶如遠(yuǎn)側(cè)深帶最深，猶如“瓶蓋瓶蓋”Company Logo八號(hào)染色體八號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體長(zhǎng)臂上有三條深染帶，長(zhǎng)臂上有三條深染帶，遠(yuǎn)側(cè)深遠(yuǎn)側(cè)深帶最深帶最深Company Logo

11、九號(hào)染色體九號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體長(zhǎng)臂上有兩條深染帶，在長(zhǎng)臂上有兩條深染帶，在近著絲粒區(qū)有次縊痕，顯近著絲粒區(qū)有次縊痕，顯示出特有的示出特有的“苗條苗條”Company Logo十號(hào)染色體十號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體長(zhǎng)臂上有三條深染帶，近側(cè)的長(zhǎng)臂上有三條深染帶，近側(cè)的第一條深帶最深第一條深帶最深Company Logo十一號(hào)染色體十一號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體短臂近中段有一條深帶；長(zhǎng)臂短臂近中段有一條深帶；長(zhǎng)臂上有兩條深染帶，近側(cè)緊靠著上有兩條深染帶，近側(cè)緊靠著絲粒有一條深帶，遠(yuǎn)側(cè)一條深絲粒有一條深帶，遠(yuǎn)側(cè)一條深帶，中間有一條寬的淺帶。帶，中間有一

12、條寬的淺帶。Company Logo十二號(hào)染色體十二號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體短臂中段有一條深帶；長(zhǎng)臂短臂中段有一條深帶；長(zhǎng)臂上近側(cè)緊靠著絲粒有一條深上近側(cè)緊靠著絲粒有一條深帶，遠(yuǎn)側(cè)有帶，遠(yuǎn)側(cè)有34條深帶，中間條深帶，中間一條較寬的一條較寬的 淺帶。淺帶。Company Logo十三號(hào)染色體十三號(hào)染色體近端著絲粒染色體近端著絲粒染色體長(zhǎng)臂上有比較均勻分布長(zhǎng)臂上有比較均勻分布的四條深染帶，中間兩的四條深染帶，中間兩條最清楚條最清楚Company Logo十四號(hào)染色體十四號(hào)染色體近端著絲粒染色體近端著絲粒染色體著絲粒區(qū)深染，長(zhǎng)臂上著絲粒區(qū)深染，長(zhǎng)臂上有四條深染帶，中間一有四條深染帶，

13、中間一條深帶和遠(yuǎn)側(cè)一條深帶條深帶和遠(yuǎn)側(cè)一條深帶最清楚。最清楚。Company Logo十五號(hào)染色體十五號(hào)染色體近端著絲粒染色體近端著絲粒染色體著絲粒區(qū)深染，長(zhǎng)臂上著絲粒區(qū)深染，長(zhǎng)臂上可見一條清楚的深染帶。可見一條清楚的深染帶。Company Logo十六號(hào)染色體十六號(hào)染色體中央著絲粒染色體中央著絲粒染色體長(zhǎng)臂上靠近著絲粒區(qū)深長(zhǎng)臂上靠近著絲粒區(qū)深染可見一條清楚的深染染可見一條清楚的深染帶。帶。Company Logo十七號(hào)染色體十七號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體著絲粒區(qū)深染，長(zhǎng)臂遠(yuǎn)著絲粒區(qū)深染，長(zhǎng)臂遠(yuǎn)側(cè)段有一條深染帶，與側(cè)段有一條深染帶，與著絲粒之間有一條寬的著絲粒之間有一條寬的 淺帶

14、。淺帶。Company Logo十八號(hào)染色體十八號(hào)染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體短臂有一條淺帶，長(zhǎng)臂短臂有一條淺帶，長(zhǎng)臂近側(cè)段與遠(yuǎn)側(cè)段各有一近側(cè)段與遠(yuǎn)側(cè)段各有一條深染帶，它們之間有條深染帶，它們之間有一條寬的淺帶。一條寬的淺帶。Company Logo十九號(hào)染色體十九號(hào)染色體中央著絲粒染色體中央著絲粒染色體著絲粒區(qū)深染，其余全著絲粒區(qū)深染，其余全為淺帶。為淺帶。Company Logo二十號(hào)染色體二十號(hào)染色體中央著絲粒染色體中央著絲粒染色體著絲粒區(qū)深染，短臂有著絲粒區(qū)深染，短臂有一條深帶，長(zhǎng)臂著色較一條深帶，長(zhǎng)臂著色較淺。淺。Company Logo二十一號(hào)染色體二十一號(hào)染色體近端著絲

15、粒染色體近端著絲粒染色體短臂末端有時(shí)可見隨體，短臂末端有時(shí)可見隨體，長(zhǎng)臂中段可見一條寬的長(zhǎng)臂中段可見一條寬的清楚的深染帶。清楚的深染帶。Company Logo二十二號(hào)染色體二十二號(hào)染色體近端著絲粒染色體近端著絲粒染色體著絲粒區(qū)深染，長(zhǎng)臂近著絲粒區(qū)深染，長(zhǎng)臂近中段可見一條較寬的淺中段可見一條較寬的淺帶。帶。Company LogoX染色體染色體亞中著絲粒染色體亞中著絲粒染色體短臂和長(zhǎng)臂中段以著絲短臂和長(zhǎng)臂中段以著絲粒為中心各有一條深染粒為中心各有一條深染帶，像帶，像“照鏡子照鏡子”。Company LogoY染色體染色體近端著絲粒染色體近端著絲粒染色體短臂末端沒有隨體，兩短臂末端沒有隨體，兩長(zhǎng)

16、臂靠攏，有時(shí)在遠(yuǎn)側(cè)長(zhǎng)臂靠攏，有時(shí)在遠(yuǎn)側(cè)段可見兩條深帶，有時(shí)段可見兩條深帶，有時(shí)整個(gè)長(zhǎng)臂深染，像整個(gè)長(zhǎng)臂深染，像“小小砝碼砝碼” 。Company Logo19121912Company Logo46,XY112233445566778899101011111212Company Logo46,XY11223344556677888991010111112121313222214141515161617171818191920202121XYCompany Logo46,XX1122334455667788991010111112121313141415151616Company Logo46,XXXX171818191920202121221722Company LogoCompany Logo實(shí)驗(yàn)步驟實(shí)驗(yàn)步驟v取顯帶中期分裂相顯微鏡照片，計(jì)數(shù)染色體總數(shù)。取顯帶中期分裂相顯微鏡照片，計(jì)數(shù)染色體總數(shù)。v用解剖剪沿各染色體邊緣，稍留空隙，剪下每條染色用解剖剪沿各染色體邊緣，稍留空隙，剪下每條染色體，放在培養(yǎng)皿內(nèi)。再計(jì)數(shù)一次。體，放在培養(yǎng)皿內(nèi)。再計(jì)數(shù)一次。v按各號(hào)染色體顯帶帶性特點(diǎn)，在培養(yǎng)皿內(nèi)將同源染按各號(hào)染色體顯帶帶性特點(diǎn)，在培養(yǎng)皿內(nèi)將同源染色體一一配對(duì)，再按染色體分組標(biāo)準(zhǔn)，分成組。色體一一配對(duì)，再按染色