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文檔簡介
1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上1. 化妝品微生物檢測樣品的處理(摘至GB7918) 樣品的采集1.1所采集的樣品,應具有代表性,一般視每批化妝品數(shù)量大小,隨機抽取相應數(shù)量的包裝單位。檢驗時,應分別從兩個包裝單位以上的樣品中共取10g或10mL。包裝量小于20g的樣品,采樣時可適當增加樣品包裝數(shù)量。1.2 供檢驗樣品,應嚴格保持原有的包裝狀態(tài)。容器不應有破裂,在檢驗前不得打開,防止樣品被污染。1.3 接到樣品后,應立即登記,編寫檢驗序號,并按檢驗要求盡快檢驗。如不能及時檢驗,樣品應放在室溫陰涼干燥處,不要冷藏或冷凍。1.4 若只有一個樣品而同時需做多種分析,如細菌、毒理、化學等,則宜先取出部分樣品做
2、細菌檢驗,再將剩余樣品做其它分析。1.5 在檢驗過程中,從打開包裝到全部檢驗操作結(jié)束,均須防止微生物的再污染和擴散,所用器皿及材料均應事先滅菌,全部操作應在符合生物安全要求的實驗室中進行。供檢樣品的制備2.1 液體樣品2.1.1 水溶性的液體樣品,可量取10mL加到90mL滅菌生理鹽水中,混勻后,制成1:10檢液。2.1.2 油性液體樣品,取樣品10g,先加5mL滅菌液體石蠟混勻,再加10mL 滅菌的吐溫80,在4044水浴中振蕩混合10min,加入滅菌的生理鹽水75mL(在4044水浴中預溫),在4044水浴中乳化,制成1:10的懸液。2.2 膏、霜、乳劑半固體狀樣品5.2.1 親水性的樣品
3、:稱取10g,加到裝有玻璃珠及90mL 滅菌生理鹽水的三角瓶中,充分振蕩混勻,靜置15min。用其上清液作為1:10的檢液。2.2.2 疏水性樣品:稱取10g,放到滅菌的研缽中,加10mL滅菌液體石蠟,研磨成粘稠狀,再加入10mL滅菌吐溫80,研磨待溶解后,加70mL滅菌生理鹽水,在4044水浴中充分混合,制成1:10檢液。2.3 固體樣品稱取10g,加到90mL滅菌生理鹽水中,充分振蕩混勻,使其分散混懸,靜置后,取上清液作為1:10的檢液。如有均質(zhì)器,則采用無菌樣品袋,將上述水溶性膏、霜、粉劑等,稱10g樣品加入90mL 滅菌生理鹽水,均質(zhì)1min2min;疏水性膏、霜及眉筆、口紅等,稱10
4、g樣品,加10mL 滅菌液體石蠟,10mL吐溫80,70mL滅菌生理鹽水,均質(zhì)3min5min。補充知識:石蠟:不溶于水、甘油、冷。溶于苯、氯仿、熱乙醇。與除蓖麻油外大多數(shù)脂肪油能任意混合,樟腦、薄荷腦及大多數(shù)天然或人造均能被溶解。吐溫80:本品在水、乙醇、甲醇或醋酸乙酯中,在礦物油中極微溶解。吐溫80是一個親水性的表面活性劑,具有很強的破裂細胞膜的作用而引起刺激性,溶血性和組胺釋放(致敏性)。微生物繁殖速度:微生物一般20min繁殖一代,故微生物從稀釋到倒平板不宜超過20min。食品微生物檢測樣品的處理(摘自GB4789)1 樣品的稀釋1.1 固體和半固體樣品:稱取25 g 樣品置盛有 22
5、5 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌均質(zhì)杯內(nèi),8000 r/min 10000 r/min均質(zhì)1 min2 min,或放入盛有225 mL稀釋液的無菌均質(zhì)袋中,用拍擊式均質(zhì)器拍打1 min2 min,制成1:10 的樣品勻液。 1.2 液體樣品:以無菌吸管吸取25 mL 樣品置盛有225 mL磷酸鹽緩沖液或生理鹽水的無菌錐形瓶(瓶內(nèi)預置適當數(shù)量的無菌玻璃珠)中,充分混勻,制成1:10 的樣品勻液。1.3 用1 mL無菌吸管或微量移液器吸取1:10 樣品勻液1 mL,沿管壁緩慢注于盛有9 mL稀釋液的無菌試管中(注意吸管或吸頭尖端不要觸及稀釋液面),振搖試管或換用1 支無菌吸管反復吹打使其混合均
6、勻,制成1:100 的樣品勻液。2 樣品的采集 2.1 采樣原則 2.1.1 根據(jù)檢驗目的、食品特點、批量、檢驗方法、微生物的危害程度等確定采樣方案。 2.1.2 應采用隨機原則進行采樣,確保所采集的樣品具有代表性。 2.1.3 采樣過程遵循無菌操作程序,防止一切可能的外來污染。 2.1.4 樣品在保存和運輸?shù)倪^程中,應采取必要的措施防止樣品中原有微生物的數(shù)量變化,保持樣品的原有狀態(tài)。 2.2 采樣方案 2.2.1 類型 采樣方案分為二級和三級采樣方案。二級采樣方案設有n 、c 和m值,三級采樣方案設有n 、c 、m和M 值。 n :同一批次產(chǎn)品應采集的樣品件數(shù); c :最大可允許超出m值的樣
7、品數(shù); m:微生物指標可接受水平的限量值; M: 微生物指標的最高安全限量值。 注1: 按照二級采樣方案設定的指標,在n個樣品中,允許有c 個樣品其相應微生物指標檢驗值大于m值。GB 4789.12010 注2: 按照三級采樣方案設定的指標,在n 個樣品中,允許全部樣品中相應微生物指標檢驗值小于或等于m 值;允許有c 個樣品其相應微生物指標檢驗值在m 值和M值之間;不允許有樣品相應微生物指標檢驗值大于M值。 例如:n=5 ,c=2 ,m=100 CFU/g ,M=1 000 CFU/g。含義是從一批產(chǎn)品中采集5 個樣品,若5 個樣品的檢驗結(jié)果均小于或等于m值(100 CFU/g ),則這種情況
8、是允許的;若2 個樣品的結(jié)果(X)位于m值和M 值之間(100 CFU/g <X1 000 CFU/g),則這種情況也是允許的;若有3 個及以上樣品的檢驗結(jié)果位于m值和M 值之間,則這種情況是不允許的;若有任一樣品的檢驗結(jié)果大于M 值(>1 000 CFU/g ),則這種情況也是不允許的。 2.2.2 各類食品的采樣方案 按相應產(chǎn)品標準中的規(guī)定執(zhí)行。 2.2.3 食源性疾病及食品安全事件中食品樣品的采集 2.2.3.1 由工業(yè)化批量生產(chǎn)加工的食品污染導致的食源性疾病或食品安全事件,食品樣品的采集和判定原則按4.2.1和4.2.2執(zhí)行。同時,確保采集現(xiàn)場剩余食品樣品。 2.2.3.2
9、 由餐飲單位或家庭烹調(diào)加工的食品導致的食源性疾病或食品安全事件,食品樣品的采集按GB 14938中衛(wèi)生學檢驗的要求,以滿足食源性疾病或食品安全事件病因判定和病原確證的要求。 2.3 各類食品的采樣方法 采樣應遵循無菌操作程序,采樣工具和容器應無菌、干燥、防漏,形狀及大小適宜。 2.3.1 即食類預包裝食品 取相同批次的最小零售原包裝,檢驗前要保持包裝的完整,避免污染。2.3.2 非即食類預包裝食品 原包裝小于500 g的固態(tài)食品或小于500 mL的液態(tài)食品,取相同批次的最小零售原包裝;大于500 mL的液態(tài)食品,應在采樣前搖動或用無菌棒攪拌液體,使其達到均質(zhì)后分別從相同批次的n 個容器中采集5
10、倍或以上檢驗單位的樣品;大于500 g 的固態(tài)食品,應用無菌采樣器從同一包裝的幾個不同部位分別采取適量樣品,放入同一個無菌采樣容器內(nèi), 采樣總量應滿足微生物指標檢驗的要求。 2.3.3 散裝食品或現(xiàn)場制作食品 根據(jù)不同食品的種類和狀態(tài)及相應檢驗方法中規(guī)定的檢驗單位,用無菌采樣器現(xiàn)場采集5 倍或以上檢驗單位的樣品,放入無菌采樣容器內(nèi), 采樣總量應滿足微生物指標檢驗的要求。 2.3.4 食源性疾病及食品安全事件的食品樣品 采樣量應滿足食源性疾病診斷和食品安全事件病因判定的檢驗要求。 2.4 采集樣品的標記 應對采集的樣品進行及時、準確的記錄和標記,采樣人應清晰填寫采樣單(包括采樣人、采樣地點、時間
11、、樣品名稱、來源、批號、數(shù)量、保存條件等信息)。 2.5 采集樣品的貯存和運輸 采樣后,應將樣品在接近原有貯存溫度條件下盡快送往實驗室檢驗。運輸時應保持樣品完整。如不能及時運送,應在接近原有貯存溫度條件下貯存。3.1 樣品處理 3.1.1 實驗室接到送檢樣品后應認真核對登記, 確保樣品的相關信息完整并符合檢驗要求。3.1.2 實驗室應按要求盡快檢驗。若不能及時檢驗,應采取必要的措施保持樣品的原有狀態(tài),防止樣品中目標微生物因客觀條件的干擾而發(fā)生變化。 3.1.3 冷凍食品應在 45 以下不超過15 min ,或2 5 不超過 18 h 解凍后進行檢驗。 3.2 檢驗方法的選擇 3.2.1 應選擇
12、現(xiàn)行有效的國家標準方法。 3.2.2 食品微生物檢驗方法標準中對同一檢驗項目有兩個及兩個以上定性檢驗方法時,應以常規(guī)培養(yǎng)方法為基準方法。 3.2.3 食品微生物檢驗方法標準中對同一檢驗項目有兩個及兩個以上定量檢驗方法時,應以平板計數(shù)法為基準方法。樣品處理(SN 0168 ) 1.1樣品制備1.1.1.以無菌操作取有代表性的樣品盛于滅菌容器內(nèi)。如有包裝,則用75%乙醇在包裝開口處擦拭后取樣。1.1.2制備樣品勻液1.1.2.1固體或半固體食品:以無菌操作取25 g樣品,放人裝有 225mL稀釋劑的滅菌均質(zhì)杯內(nèi),于8000 r/min均質(zhì)1-2min,制成1:10的樣品勻液。如樣品均質(zhì)時間超過2m
13、in,應在均質(zhì)杯外加冰水冷卻。4.1.2.2干燥或干粉食品:以無菌操作取25 g樣品,放入裝有225mL稀釋劑和適量玻璃珠的500ml-稀釋瓶中。迅速振搖,將樣品混勻,制成I:10的樣品勻液。振搖時,幅度為30cm,7s內(nèi)振搖25次,也可用機械振蕩器振蕩15s代替手搖。4.1.2.3液體食品:用滅菌吸管吸取25 mL樣品,放人裝有225 mL稀釋劑的500 mL稀釋瓶中,按4.1.2.2條中所述方法迅速振搖,制成1:10的樣品勻液。吸取樣品時,吸管插入液面下不要超過2cm。吸管內(nèi)液體要在2-4s內(nèi)完全排入稀釋劑中。不要在稀釋劑中吹洗吸管。4.2稀釋樣品勻液4.2.1用10mL滅菌吸管準確吸取10-1的樣品勻液10mL,放入
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