生物制藥工藝學(xué)習(xí)題(含答案

1、生物制藥工藝學(xué) 習(xí)題集（含答案）第一章 生物藥物概述一、 填空：1、我國藥物的三大藥源指的是化學(xué)藥物、生物藥物、中藥2、現(xiàn)代生物藥物已形成四大類型，包括基因重組多肽和蛋白質(zhì)、基因藥物、天然生化藥物、合成與部分合成的生物藥物3、請寫出下列藥物英文的中文全稱：IFN（Interferon）干擾素、IL(Interleukin)白介素、 CSF（Colony Stimulating Factor）集落刺激因子、EPO（Erythropoietin）促紅細(xì)胞生成素、 EGF（Epidermal Growth Factor）表皮生長因子、NGF（Nerve Growth Factor）神經(jīng)生長因子、 r

2、hGH（Recombinant Human Growth Hormone）重組人生長激素、Ins（Insulin）胰島素、HCG（Human Choriogonadotrophin）人絨毛膜促性腺激素、 LH 促黃體生成素、SOD超氧化物歧化酶、tPA 組織纖溶酶原激活物4、常用的-內(nèi)酰胺類抗生素有青霉素、頭孢菌素；氨基糖苷類抗生素有鏈霉素；大環(huán)內(nèi)酯類抗生素有紅霉素；四環(huán)類抗生素有土霉素；多肽類抗生素有桿菌肽；多烯類抗生素有兩性霉B； 蒽環(huán)類抗生素有阿霉素5、嵌合抗體是指用人源抗體恒定區(qū)替換鼠源抗體恒定區(qū)，保留抗體可變區(qū)；人源化抗體是指抗體可變區(qū)中僅CDR（決定簇互補(bǔ)區(qū)）為鼠源，其FR（骨架區(qū)

3、）及恒定區(qū)均來自人源。6、基因工程技術(shù)中常用的基因載體有質(zhì)粒、噬菌體（phage）、黏粒（cosmid）、病毒載體等。二、 選擇題：1、以下能用重組DNA技術(shù)生產(chǎn)的藥物為 （ B ） A、維生素 B、生長素 C、肝素 D、鏈霉素2、下面哪一種藥物屬于多糖類生物藥物 （ C ） A、洛伐他汀 B、干擾素 C、肝素 D、細(xì)胞色素C3、能用于防治血栓的酶類藥物有 （ D ） A、SOD B、胰島素 C、L-天冬酰胺酶 D、尿激酶4、環(huán)孢菌素是微生物產(chǎn)生的 （ A ） A、免疫抑制劑 B、酶類藥物 C、酶抑制劑 D、大環(huán)內(nèi)酯類抗生素5、下列屬于多肽激素類生物藥物的是 （ D ） A、ATP B、四氫葉

4、酸 C、透明質(zhì)酸 D、降鈣素6、蛋白質(zhì)工程技術(shù)改造的速效胰島素機(jī)理是 （ D ）A. 將豬胰島素B30位改造為丙氨酸，使之和人胰島素序列一致 B. 將A21位替換成甘氨酸，B鏈末端增加兩個精氨酸，使之在pH4溶液中可溶C. 將B29位賴氨酸用長鏈脂肪酸修飾，改變其皮下擴(kuò)散和吸收速度D. 將人胰島素B28位與B29位氨基酸互換，使之不易形成六聚體三、 名詞解釋：1、 藥物 Medicine(remedy)：用于預(yù)防、治療或診斷疾病或調(diào)節(jié)機(jī)體生理功能、促進(jìn)機(jī)體康復(fù)保健的物質(zhì)，有4大類：預(yù)防藥、治療藥、診斷藥和康復(fù)保健藥2、 生物藥物（biopharmaceutics）：是以生物體、生物組織或其成份

5、為原料（包括組織、細(xì)胞、細(xì)胞器、細(xì)胞成分、代謝、排泄物）綜合應(yīng)用生物學(xué)、物理化學(xué)與現(xiàn)代藥學(xué)的原理與方法加工制成的藥物3、 基因藥物（gene medicine）：是以基因物質(zhì)（RNA或DNA及其衍生物）作為治療的物質(zhì)基礎(chǔ)，包括基因治療用的重組目的DNA片段、重組疫苗、反義藥物和核酶等 4、 反義藥物：是以人工合成的十至幾十個反義寡核苷酸序列，它能與模板DNA或mRNA互補(bǔ)形成穩(wěn)定的雙鏈結(jié)構(gòu)，抑制靶基因的轉(zhuǎn)錄和mRNA翻譯，從而達(dá)到抗腫瘤和抗病毒作用 5、 生物制品（biologics）：是應(yīng)用普通的或以基因工程、細(xì)胞工程、蛋白質(zhì)工程、發(fā)酵工程等生物技術(shù)獲得的微生物、細(xì)胞及各種動物和人源的組織和

6、液體等生物材料制備的，用于人類疾病預(yù)防、治療和診斷的藥品 6、 RNA干涉（RNAi，RNA interference）： 是指在生物體細(xì)胞內(nèi)，dsRNA引起同源mRNA的特異性降解，因而抑制相應(yīng)基因表達(dá)的過程7、 siRNA (small interfering RNA) ：是一種小RNA分子（21-25核苷酸），由Dicer（RNAase 家族中對雙鏈RNA具有特異性的酶）加工而成。siRNA是siRISC (RNA-induced silencing complex由核酸內(nèi)切酶、核酸外切酶、解旋酶等構(gòu)成，作用是對靶mRNA進(jìn)行識別和切割）的主要成員，激發(fā)與之互補(bǔ)的目標(biāo)mRNA的沉默 四、

7、 問答題1、 基因重組藥物與基因藥物有什么區(qū)別？1. 答：基因重組藥物是指應(yīng)用重組DNA技術(shù)（包括基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)）制造的重組多肽、蛋白質(zhì)類藥物和疫苗、單克隆抗體與細(xì)胞因子等，藥物的化學(xué)成分屬于多肽或蛋白質(zhì)；基因藥物是以基因物質(zhì)（RNA或DNA及其衍生物）作為治療的物質(zhì)基礎(chǔ)，包括基因治療用的重組目的DNA片段、重組疫苗、反義藥物和核酶等，藥物的化學(xué)成分為核酸或其衍生物。2、 生物藥物有那些作用特點(diǎn)？2. 答：1）藥理學(xué)特性有：藥理活性高；治療針對性強(qiáng)；毒副作用較少，營養(yǎng)價值高；生理副作用常有發(fā)生等。2）理化特性有：生物材料中的有效物質(zhì)含量低，雜質(zhì)種類多且含量相對較高；生物活性物質(zhì)組

8、成結(jié)構(gòu)復(fù)雜，穩(wěn)定性差；生物材料易染菌，腐敗；生物藥物制劑有特殊要求。3.基因工程藥物主要有哪幾類？試舉例說明。3. 答：基因工程藥物是指應(yīng)用基因工程或蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造的重組活性多肽、蛋白質(zhì)及其修飾物，包括：1）重組細(xì)胞因子類：如干擾素（IFN）、白介素（IL）和腫瘤壞死因子（TNF）；2）重組生長因子類：如表皮生長因子（EGF）、神經(jīng)生長因子（NGF），以及促進(jìn)造血系統(tǒng)的生長因子：如促紅細(xì)胞生成素（EPO）、集落刺激因子等（CSF）；3）重組多肽與蛋白質(zhì)類激素：如重組人胰島素（rhInsulin）、重組人生長激素等（rhGH）；4）心血管病治療劑及酶制劑：如水蛭素、tPA（組織纖溶酶原激活物

9、）、天冬酰胺酶、超氧化物歧化酶（SOD）等。5）重組疫苗及單抗制品：如重組乙肝表面抗原疫苗（酵母）、腫瘤疫苗等第二章 生物制藥工藝技術(shù)基礎(chǔ)一、填空題1、從生物材料中提取天然大分子藥物時，常采用的措施有采用緩沖系統(tǒng)、添加保護(hù)劑、抑制水解酶作用等。2、生化活性物質(zhì)濃縮可采用的方法有鹽析濃縮、有機(jī)溶劑沉淀濃縮、超濾濃縮、真空減壓濃縮或薄膜濃縮、用葡聚糖凝膠濃縮、用聚乙二醇濃縮3、生化活性物質(zhì)常用的干燥方法有減壓干燥、噴霧干燥、冷凍干燥4、冷凍干燥是在低溫、低壓條件下，利用水的升華性能而進(jìn)行的一種干燥方法。5、微生物菌種的分離和純化可以用的方法有平板劃線法、稀釋后涂布平板法。6、微生物菌種的自然選育是

10、指利用微生物在一定條件下產(chǎn)生自發(fā)突變的原理，通過分離、篩選排除衰變型菌落，選擇維持原有生產(chǎn)水平的菌株。7、誘變時選擇出發(fā)菌株時應(yīng)考慮出發(fā)菌株的穩(wěn)定性、選用具備某種優(yōu)良特性、對誘變劑敏感、菌種的生理狀態(tài)及生長發(fā)育時間等問題。8、目前常用的誘變劑可分為物理誘變因子、化學(xué)誘變劑、生物誘變因子三大類。9、常用的菌種保藏方法有：斜面低溫保藏法、液體石蠟封藏法、冷凍干燥保藏法、液氮超低溫保藏法、甘油保藏法、 沙土管保藏等。10、微生物生長需要的六大營養(yǎng)要素是碳源、氮源、能源、生長因子、無機(jī)鹽、水。11、生物藥物制備過程中，常用的滅菌及除菌方法有：加熱滅菌、輻射滅菌（紫外殺菌）、介質(zhì)過濾除菌、化學(xué)滅菌法。1

11、2、獲得具有遺傳信息的目的基因的方法有鳥槍克隆法（DNA文庫）、cDNA文庫法、化學(xué)合成法、PCR法。13、PCR由3個基本反應(yīng)組成，即高溫變性、低溫退火、適溫延伸。14、基因工程中原核表達(dá)常用的宿主有大腸桿菌、枯草桿菌等；常用的真核表達(dá)系統(tǒng)有酵母、動物（植物）細(xì)胞等。15、大腸桿菌表達(dá)系統(tǒng)的缺點(diǎn)是不能進(jìn)行翻譯后加工（糖基化），因而像EPO等基因的表達(dá)需使用真核（酵母）表達(dá)系統(tǒng)。16、分泌表達(dá)是指將目的基因嵌合在信號肽基因下游進(jìn)行表達(dá)，從而使目的基因分泌到細(xì)胞周質(zhì)或培養(yǎng)基中。17、固定化酶常采用的方法可分為吸附、包埋、交聯(lián)、共價鍵結(jié)合四大類。18、下面酶固定化示例圖分別代表哪種固定化方法： A

12、吸附 B. 共價鍵結(jié)合 C. 交聯(lián) D. 包埋二、選擇題1、如果想要從生物材料中提取輔酶Q10，應(yīng)該選取下面哪一種動物臟器 （ D ） A、胰臟 B、肝臟 C、小腸 D、心臟2、目前分離的1000多種抗生素，約2/3產(chǎn)自 （ B ） A、真菌 B、放線菌 C、細(xì)菌 D、病毒3、由于目的蛋白質(zhì)和雜蛋白分子量差別較大，擬根據(jù)分子量大小分離純化并獲得目的蛋白質(zhì)，可采用 （ C ） A、SDS凝膠電泳 B、鹽析法 C、凝膠過濾 D、吸附層析4、以下可用于生物大分子與雜質(zhì)分離并純化的方法有 （ D ） A、蒸餾 B、冷凍干燥 C、氣相色譜法 D、超濾5、分離純化早期，由于提取液中成分復(fù)雜，目的物濃度稀，

13、因而易采用 （ A ） A、分離量大分辨率低的方法 B、分離量小分辨率低的方法 C、分離量小分辨率高的方法 D、各種方法都試驗(yàn)一下，根據(jù)試驗(yàn)結(jié)果確定6、以下可用于菌種純化的方法有 （ B ） A、高溫滅菌 B、平板劃線 C、富集培養(yǎng) D、誘變處理7、能夠?qū)崿F(xiàn)微生物菌種定向改造的方法是 （ D ） A、紫外誘變 B、自然選育 C、制備原生質(zhì)體 D、基因工程8、能夠用沙土管保存的菌種是 （ C ） A、大腸桿菌 B、酵母菌 C、青霉菌 D、乳酸桿菌9、以下關(guān)于PCR的說法錯誤的是 （ C ） A、PCR反應(yīng)必須要有模板、引物、dNTP和DNA聚合酶 B、應(yīng)用PCR技術(shù)可以進(jìn)行定點(diǎn)突變 C、PCR的

14、引物必須完全和模板互補(bǔ)配對 D、PCR反應(yīng)中，僅介于兩引物間的DNA片段得到大量擴(kuò)增三、名詞解釋1、酶工程（enzyme engineering）：是從應(yīng)用目的出發(fā)，研究酶和應(yīng)用酶的特異催化功能，并通過工程化過程將相應(yīng)原料轉(zhuǎn)化成所需產(chǎn)物的技術(shù)2、固定化酶（immobilized enzyme）：是指借助于物理和化學(xué)的方法把酶束縛在一定空間內(nèi)并具有催化活性的酶制劑，酶經(jīng)固定化以后穩(wěn)定性有所提高，而且可以反復(fù)使用，并能實(shí)現(xiàn)反應(yīng)連續(xù)化、自動化，簡化產(chǎn)品的純化工藝 3、原生質(zhì)體融合：用脫壁酶處理將微生物細(xì)胞壁去除，制成原生質(zhì)，再用聚乙二醇（PEG）促進(jìn)原生質(zhì)體發(fā)生融合，從而獲得融合子的技術(shù) 4、雜交育

15、種：一般指將兩個基因型不同的菌株通過接合使遺傳物質(zhì)重新組合，再從中分離和篩選出具有新性狀的菌株。雜交后的雜種不僅能克服原有菌種活力衰退的趨勢，而且，雜交育種使得遺傳物質(zhì)重新組合，擴(kuò)大了變異范圍，改善了產(chǎn)品的質(zhì)量和產(chǎn)量 5、誘變育種：指有意識地將生物體暴露于物理的、化學(xué)的或生物的一種或多種誘變因子下，促使生物體發(fā)生突變，進(jìn)而從突變體中篩選具有優(yōu)良性狀的突變株的過程 6、感受態(tài)細(xì)胞：在分子克隆過程中，宿主細(xì)胞需經(jīng)過人工處理成能吸收重組DNA分子的敏感細(xì)胞才能用于轉(zhuǎn)化，此時的細(xì)胞稱為感受態(tài)細(xì)胞 7、原代細(xì)胞：是直接取自動物組織器官，經(jīng)過分散、消化制得的細(xì)胞懸液 8、二倍體細(xì)胞系： 原代細(xì)胞經(jīng)過傳代、

16、篩選、克隆，從而由多種細(xì)胞成分的組織中挑選強(qiáng)化具有一定特性的細(xì)胞株，其特點(diǎn)是：1）染色體組織仍然是2n的模型；2）具有明顯貼壁依賴和接觸抑制特性；3）具有有限的增殖能力；4）無致癌性四、問答題1、生物藥物分離制備的基本特點(diǎn)有哪些？答：1）生物材料組成非常復(fù)雜；2）有些化合物在生物材料中含量極微；3）生物活性成分離開生物體后，易變性破壞，因而須注意保護(hù)其生理活性；4）生物制藥中的分離方法常帶有很大的經(jīng)驗(yàn)成分；5）生物制藥中的分離方法多采用溫和的“多階式”方法進(jìn)行；6）生物產(chǎn)品最后均一性的證明與化學(xué)上純度的概念不完全相同2、 簡述單克隆抗體（monoclonal antibody）的制備原理。答：

17、B細(xì)胞群受抗原刺激后能產(chǎn)生針對抗原決定簇的特異性抗體，一個集體可產(chǎn)生多達(dá)100萬種特異性不同的抗體，但一個B細(xì)胞卻只能分泌一種特異性抗體。將B細(xì)胞與小鼠骨髓瘤細(xì)胞融合后，用有限稀釋法把產(chǎn)生不同抗體的雜交瘤細(xì)胞分開，挑選出單個雜交瘤細(xì)胞，每個雜交瘤細(xì)胞只分泌一種特異性抗體。培養(yǎng)單個雜交瘤細(xì)胞，使之無性繁殖形成細(xì)胞集落（稱之為克隆），同一個克隆的雜交瘤基因相同，合成并分泌的特異性抗體質(zhì)地均一，這種抗體稱為單克隆抗體3、 簡述生物活性物質(zhì)分離純化的主要原理。答： 生物大分子分離純化的主要原理是：1）根據(jù)分子形狀和大小不同進(jìn)行分離，如差速離心與超離心、膜分離、凝膠過濾等；2）根據(jù)分子電離性質(zhì)（帶電性）

18、差異進(jìn)行分離，如離子交換法、電泳法、等電聚焦法；3）根據(jù)分子極性大小及溶解度不同進(jìn)行分離，如溶劑提取法、逆流分配法、分配層析法、鹽析法、等電點(diǎn)沉淀及有機(jī)溶劑分級沉淀等；4）根據(jù)物質(zhì)吸附性質(zhì)的不同進(jìn)行分離，如選擇性吸附與吸附層析等；5）根據(jù)配體特異性進(jìn)行分離，如親和層析法等第三章 生物材料的預(yù)處理、細(xì)胞破碎和液-固分離(答案)一、填空題1、 確定生物材料的預(yù)處理方法的依據(jù)是生物活性物質(zhì)存在方式與特點(diǎn)、后續(xù)操作的要求、目的物穩(wěn)定性。2、 高價金屬離子的去處常用的方法：離子交換法、沉淀法。3、 常用的細(xì)胞破碎方法：機(jī)械法、物理法、化學(xué)法、生物法。物理法主要包括：干燥法、反復(fù)凍融法、滲透壓沖擊法。生物

19、法主要包括：酶解法、組織自溶法。4、 常規(guī)的固液分離技術(shù)主要有過濾和離心分離等。二、問答1、簡述錯流過濾的優(yōu)點(diǎn)及其原因。 答：過濾收率高，由于過濾過程中，洗滌充分、合理，少量多次，故濾液稀釋量不大的情況下，獲得高達(dá)97-98%的收率。濾液質(zhì)量好，凡體積大于膜孔的固體，包括菌體、培養(yǎng)基、雜蛋白等均不能通過膜進(jìn)入濾液，大部分雜質(zhì)被排除掉，給后續(xù)分離及最終產(chǎn)品質(zhì)量均帶來好處。減少處理步驟，鼓式真空過濾器一般需涂助濾劑，板框過濾器則需清洗，拆裝費(fèi)時、費(fèi)力，而錯流過濾只需在18-20h連續(xù)操作之后，用清水沿原管流洗4-6h。對染菌罐易于批處理，也容易進(jìn)行擴(kuò)大生產(chǎn)。2、 簡述影響液-固分離的因素。答：微生

20、物種類對液固分離的影響；發(fā)酵液的粘度；發(fā)酵液的PH、溫度和加熱時間。3、 簡述離心分離法的優(yōu)缺點(diǎn)。答：離心分離法速度快，效率高，操作時衛(wèi)生條件好，占地面積小，能自動化、連續(xù)化和程序控制，適合于大規(guī)模的分離過程，但是設(shè)備投資費(fèi)用高、耗能也較高。4、 簡述細(xì)胞及蛋白質(zhì)的預(yù)處理方式。答：加入凝聚劑；加入絮凝劑；變性沉淀；吸附；等電點(diǎn)沉淀；加各種沉淀劑沉淀第四章 萃取分離法（答案）一、 填空題1、 常用的萃取方法有：單級萃取、多級錯流萃取、多級逆流萃取。2、 影響溶劑萃取的因素：乳化和破乳化、PH的影響、溫度和萃取時間的影響、鹽析作用的影響、溶劑種類、用量及萃取方式的影響。3、 破乳方法有：加入表面活

21、性劑、離心、加電解質(zhì)、加熱、吸附法破乳、高壓電破乳、稀釋法、超濾、反應(yīng)萃取。4、 常用的破乳劑有：陽離子表面活性劑、陰離子表面活性劑。二、 名詞解釋1、 液-液萃?。菏侵赣靡环N溶劑將物質(zhì)從另一種溶劑（如發(fā)酵液）中提取出來的方法，根據(jù)所用溶劑的性質(zhì)不同或萃取機(jī)制不同，可將液-液萃取分為多種類型。2、 萃?。涸谌軇┹腿≈?，被提取的溶液稱為料液，其中與提取的物質(zhì)稱溶質(zhì)，而用以進(jìn)行萃取的溶劑稱為萃取劑。料液與萃取劑接觸后，料液中的溶質(zhì)向萃取劑轉(zhuǎn)移的過程稱為萃取，達(dá)到萃取平衡后，大部分溶質(zhì)轉(zhuǎn)移到萃取劑中，這種含有溶質(zhì)的萃取劑溶液稱為萃取液，而被萃取出溶質(zhì)以后的料液稱為萃余液。3、 反萃取（strippi

22、ng）：是將萃取液與反萃取劑（含無機(jī)酸或堿的水溶液，有時也可以是水）相接觸，使某種被萃入有機(jī)相的溶質(zhì)轉(zhuǎn)入水相，可把這種過程看作萃取的逆過程。4、 分配定律：即在一定溫度，一定壓力下，某一溶質(zhì)在互不能相溶的兩種溶劑間分配時，達(dá)到平衡后，在兩相中的活度之比為一常數(shù)。5、 萃取因素：也稱萃取比，其定義為被萃取溶質(zhì)進(jìn)入萃取相的總量與該溶質(zhì)在萃余相中總量之比，通常以E表示。6、 萃取率（percentage extraction）：生產(chǎn)上常用萃取率來表示一種萃取劑對某種溶質(zhì)的萃取能力，計(jì)算萃取效果，其公式為：7、 分離因素：在同一萃取體系內(nèi)兩種溶質(zhì)在同樣條件下分配系數(shù)的比值。三、 問答1、 簡述溶劑萃取

23、法的優(yōu)點(diǎn)。答：操作可連續(xù)化，反應(yīng)速度快，生產(chǎn)周期短；對熱敏物質(zhì)破壞少；采用多級萃取時，溶質(zhì)濃縮倍數(shù)大、純化度高。2、 簡述選擇萃取溶劑應(yīng)遵守的原則。答：分配系數(shù)愈大愈好，若分配系數(shù)未知，則可根據(jù)“相似相容”的原則，選擇與藥物結(jié)構(gòu)相近的溶劑；選擇分離因數(shù)大于1的溶劑；料液與萃取溶劑的互溶度愈小愈好；盡量選擇毒性低的溶劑；溶劑的化學(xué)穩(wěn)定性要高，腐蝕性低，沸點(diǎn)不宜太高，揮發(fā)性要小，價格便宜，來源方便，便于回收。第五章 沉淀法（答案）一.填空1.固相析出法主要包括鹽析法，有機(jī)溶劑沉淀法，等電點(diǎn)沉淀法，結(jié)晶法及其它多種沉淀方法等。2.按照一般的習(xí)慣，析出物為晶體時稱為結(jié)晶法，析出物為無定形固體則稱為沉淀

24、法。3.影響鹽析的因素有：無機(jī)鹽的種類、溶質(zhì)（蛋白質(zhì)等）種類的影響、蛋白質(zhì)濃度的影響、溫度的影響、pH的影響4. 結(jié)晶包括三個過程：(1) 形成過飽和溶液；(2) 晶核形成 ；(3) 晶體生長。5. 影晶體大小的主要因素，歸納起來與過飽和度、溫度、攪拌速度、晶種等直接有關(guān)。6. 晶體的質(zhì)量主要是指晶體的大小、形狀和純度等3個方面二選擇1、 在一定的pH和溫度下改變離子強(qiáng)度（鹽濃度）進(jìn)行鹽析，稱作 ( A )AKS鹽析法 B鹽析法 C重復(fù)鹽析法 D分部鹽析法2、當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時，蛋白質(zhì)溶解度 （ C ）A增大 B. 減小 C. 先增大，后減小 D. 先減小，后增大3、鹽析法與有機(jī)溶

25、劑沉淀法比較，其優(yōu)點(diǎn)是 （ B ）A.分辨率高 B.變性作用小 C.雜質(zhì)易除 D.沉淀易分離4、當(dāng)向蛋白質(zhì)純?nèi)芤褐屑尤胫行喳}時，蛋白質(zhì)溶解度 （ C ）A增大 B. 減小 C. 先增大，后減小 D. 先減小，后增大5、鹽析常數(shù)Ks是生物大分子的特征常數(shù)，它與下列哪種因素關(guān)系密切。 （ B ）A鹽濃度 B. 鹽種類 C. 溶質(zhì)濃度 D介質(zhì)pH6、 將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體-配基復(fù)合物，該復(fù)合物可選擇性地與蛋白質(zhì)結(jié)合，在一定條件下沉淀出來，此方法稱為 （ A）A親和沉淀 B聚合物沉淀 C金屬離子沉淀 D鹽析沉淀7、 將四環(huán)素粗品溶于pH2的水中，用氨水調(diào)pH4.54.6，2830保溫，即

26、有四環(huán)素沉淀結(jié)晶析出 。此沉淀方法稱為 （B ）A有機(jī)溶劑結(jié)晶法 B等電點(diǎn)法 C透析結(jié)晶法 D鹽析結(jié)晶法8、影響體大小的主要因素與下列哪些因素?zé)o關(guān) ( D )A過飽和度 B溫度 C攪拌速度 D飽和度9、下列沉淀試劑不屬于表面活性劑的是 （ D）ACTAB BCPC CSDS DPEG三 名詞解釋：1. 鹽析法：是利用各種生物分子在濃鹽溶液中溶解度的差異，通過向溶液中引入一定數(shù)量的中性鹽，使目的物或雜蛋白以沉淀析出，達(dá)到純化目的的方法。2. Ks鹽析：在一定的pH和溫度下改變離子強(qiáng)度（鹽濃度）進(jìn)行鹽析，稱作Ks鹽析法。Ks鹽析法多用于提取液的前期分離工作。3鹽析：在一定離子強(qiáng)度下僅改變pH和溫度

27、進(jìn)行鹽析，稱作鹽析法。在分離的后期階段，為了求得較好的分辨率，或者為了達(dá)到結(jié)晶的目的，有時應(yīng)用鹽析法。鹽析法由于溶質(zhì)溶解度變化緩慢且變化幅度小，沉淀分辨率比KS鹽析法好。4親和沉淀: 利用親和反應(yīng)原理，將配基與可溶性的載體偶聯(lián)后形成載體-配基復(fù)合物（親和沉淀劑），該復(fù)合物可選擇性地與蛋白質(zhì)結(jié)合，在一定條件下沉淀出來。四 問答1.什么是鹽析作用？鹽析的原理是什么？答：鹽析作用：向蛋白質(zhì)溶液中逐漸加入中性鹽，在高鹽濃度時，蛋白質(zhì)溶解度隨之減小，發(fā)生了鹽析作用。產(chǎn)生鹽析作用的一個原因是由于鹽離子與蛋白質(zhì)表面具相反電性的離子基團(tuán)結(jié)合，形成離子對，因此鹽離子部分中和了蛋白質(zhì)的電性，使蛋白質(zhì)分子之間電排斥

28、作用減弱而能相互靠攏，聚集起來。鹽析作用的另一個原因是由于中性鹽的親水性比蛋白質(zhì)大，鹽離子在水中發(fā)生水化而使蛋白質(zhì)脫去了水化膜，暴露出疏水區(qū)域，由于疏水區(qū)域的相互作用，使其沉淀。2.如何選擇鹽析所用中性鹽？（1）鹽析作用要強(qiáng)。一般來說多價陰離子的鹽析作用強(qiáng)，有時多價陽離子反而使鹽析作用降低。（2）鹽析用鹽要有足夠大的溶解度，且溶解度受溫度影響應(yīng)盡可能小。這樣便于獲得高濃度鹽溶液，有利于操作，尤其是在較低溫度下的操作，不致造成鹽結(jié)晶析出，影響鹽析效果。（3）鹽析用鹽在生物學(xué)上是惰性的，不致影響蛋白質(zhì)等生物分子的活性，最好不引入給分離或測定帶來麻煩的雜質(zhì)。（4）來源豐富、經(jīng)濟(jì)。3.有機(jī)溶劑沉淀的原

29、理是什么？答：親水性有機(jī)溶劑加入溶液后降低了介質(zhì)的介電常數(shù)，使溶質(zhì)分子之間的靜電引力增加，聚集形成沉淀；水溶性有機(jī)溶劑本身的水合作用降低了自由水的濃度，壓縮了親水溶質(zhì)分子表面原有水化層的厚度，降低了它的親水性，導(dǎo)致脫水凝集。4.有機(jī)溶劑沉淀影響沉淀效果的因素有那些？答： （1）有機(jī)溶劑種類及用量（2）pH的影響（3）溫度無機(jī)鹽的含量（4）某些金屬離子的助沉淀作用(5)樣品濃度第六章 吸附分離法（答案）一、填空1、吸附劑按其化學(xué)結(jié)構(gòu)可分為兩大類：一類是有機(jī)吸附劑，如 活性炭 、 淀粉 、大孔吸附樹脂 等；另一類是無機(jī)吸附劑，如白陶土、 氧化鋁 、 硅膠 、 硅藻土 等。2、常用的吸附劑有 活性炭

30、 、 硅膠 和 白陶土 等。3、大孔網(wǎng)狀聚合物吸附劑是在樹脂聚合時加入 惰性 致孔劑，待網(wǎng)格骨架固化和鏈結(jié)構(gòu)單元形成后，用溶劑萃取或蒸餾水洗將致孔劑去掉，形成不受外界環(huán)境條件影響的 孔隙 ，其孔徑遠(yuǎn)大于24nm，可達(dá) 100nm ，故稱“大孔”。4、大孔網(wǎng)狀聚合物吸附劑按骨架的極性強(qiáng)弱，可分為非極性、中等極性、極性和強(qiáng)極性吸附劑四類。二、選擇題1、用大網(wǎng)格高聚物吸附劑吸附的弱酸性物質(zhì)，一般用下列哪種溶液洗脫 （ D ）A.水 B.高鹽 C.低pH D. 高pH2、“類似物容易吸附類似物”的原則,一般極性吸附劑適宜于從何種溶劑中吸附極性物質(zhì) （ B ）A.極性溶劑 B.非極性溶劑 C.水 D.溶

31、劑3、“類似物容易吸附類似物”的原則, 一般非極性吸附劑適宜于從下列何種溶劑中吸附非極性物質(zhì)。 （ A ）A.極性溶劑 B.非極性溶劑 C.三氯甲烷 D.溶劑4、下列屬于無機(jī)吸附劑的是： （A） A.白陶土 B.活性炭 C.淀粉 D.纖維素 5、活性炭在下列哪種溶劑中吸附能力最強(qiáng)？ （A） A.水 B.甲醇 C.乙醇 D.三氯甲烷 6、 關(guān)于大孔樹脂洗脫條件的說法，錯誤的是： （A） A .最常用的是以高級醇、酮或其水溶液解吸。 B. 對弱酸性物質(zhì)可用堿來解吸。 C. 對弱堿性物質(zhì)可用酸來解吸。D.如吸附系在高濃度鹽類溶液中進(jìn)行時，則常常僅用水洗就能解吸下來。三、名詞解釋1、 吸附法(adso

32、rption method)：指利用吸附作用，將樣品中的生物活性物質(zhì)或雜質(zhì)吸附于適當(dāng)?shù)奈絼┥?，利用吸附劑對活性物質(zhì)和雜質(zhì)間吸附能力的差異，使目的物和其它物質(zhì)分離，達(dá)到濃縮和提純目的的方法。2、 大網(wǎng)格高聚物吸附劑（macroreticular adsorbent）：在合成樹脂時，加入一種惰性組分，它不參與聚合反應(yīng)，但能和單體互溶，稱為致孔劑。待網(wǎng)絡(luò)骨架固化和鏈結(jié)構(gòu)單元形成后，用溶劑萃取或水洗蒸餾的方法將致孔劑去掉，就留下了不受外界條件影響的永久孔隙，其孔徑遠(yuǎn)大于24nm，可達(dá)到100nm甚至1000nm以上，故稱“大孔”。與大孔網(wǎng)狀離子交換樹脂相比，它不含離子交換樹脂的功能團(tuán)，僅保留了多孔的

33、骨架，其性質(zhì)與活性炭、硅膠等吸附劑相似，稱為大孔網(wǎng)狀聚合物吸附劑。四、問答題1、簡述吸附法的定義和特點(diǎn)。吸附法(adsorption method)指利用吸附作用，將樣品中的生物活性物質(zhì)或雜質(zhì)吸附于適當(dāng)?shù)奈絼┥?，利用吸附劑對活性物質(zhì)和雜質(zhì)間吸附能力的差異，使目的物和其它物質(zhì)分離，達(dá)到濃縮和提純目的的方法。吸附法具有下列特點(diǎn)： (1)設(shè)備簡單、操作簡便、價廉、安全。 (2)少用或不用有機(jī)溶劑，吸附與洗脫過程中pH變化小，較少引起生物活性物質(zhì)的變性失活。(3)天然吸附劑(特別是無機(jī)吸附劑)的吸附性能和吸附條件較難控制，吸附選擇性差，收率不高，難以連續(xù)操作。2、影響吸附的因素有哪些？ 吸附劑的特性

34、： 吸附現(xiàn)象在界面發(fā)生，因此吸附劑比表面積愈大，吸附量愈多。通過活化的方法也可增加吸附劑的吸附容量。另外還要求吸附劑的機(jī)械強(qiáng)度好，吸附速度快 吸附物的性質(zhì)：能使表面張力降低的物質(zhì)，易為表面所吸附；一般極性吸附劑易吸附極性物質(zhì)，非極性吸附劑易吸附非極性物質(zhì)；溶質(zhì)從較易溶解的溶劑中被吸附時，吸附量較少；對于同系列物質(zhì)，吸附量的變化是有規(guī)則的；吸附物若能與溶劑形成氫鍵，則吸附物極易溶于溶劑之中。 吸附條件：溫度：吸附熱越大，溫度對吸附的影響越大。PH值：溶液的pH值溶液pH值可控制吸附劑或吸附物解離情況，進(jìn)而影響吸附量，對蛋白質(zhì)或酶類等兩性物質(zhì)，一般在等電點(diǎn)附近吸附量最大。鹽濃度：溶劑的影響：單溶劑

35、與混合溶劑對吸附作用有不同的影響。 吸附物濃度與吸附劑用量一般情況下吸附物濃度大時，吸附量也大。第七章 凝膠層析（答案）一、填空題1、凝膠層析的分離原理有平衡排除理論、擴(kuò)散分離理論、流動分離理論。這三種分離原理是互相補(bǔ)充的，在通常情況下平衡排除理論起主導(dǎo)作用；擴(kuò)散分離理論的作用隨流速增加而加強(qiáng)；只有在流速很高時流動分離理論才起作用。2、瓊脂糖凝膠的一個特征是分離的分子量范圍非常大，其分離范圍隨著凝膠濃度上升而 下降 ，顆粒強(qiáng)度隨濃度上升而 提高 。3、凝膠粒度的大小對分離效果有直接的影響。一般來說，細(xì)粒凝膠柱流速低，洗脫峰窄，分辨率 高 ，多用于 精制分離 等。粗粒凝膠柱流速高，洗脫峰平坦，分

36、辨率 低 ，多用于脫鹽等。4、在作分級分離時，為了提高分辨率，多采用比樣品體積大 25 倍以上的柱體積， 25 以上的柱比，較 大 吸液量、較 細(xì) 粒的凝膠固定相。5、溶質(zhì)通過色譜柱時造成的峰加寬效應(yīng)包括 分子擴(kuò)散 、渦流擴(kuò)散 、 流動相中傳質(zhì)阻力 、 固定相中傳質(zhì)阻力。6、葡聚糖凝膠的孔徑大小取決于 交聯(lián)度 ，其越小，凝膠孔徑 越 大 ；而瓊脂糖凝膠的孔徑卻依賴于 瓊脂糖濃度 。二、選擇題1、凝膠層析中，有時溶質(zhì)的Kd>1，其原因是 （ B ）A.凝膠排斥 B.凝膠吸附 C.柱床過長 D.流速過低2、凝膠層析中，有時小分子溶質(zhì)的Kd<1，其原因是 （ A）A.水合作用 B.凝膠吸

37、附 C.柱床過長 D.流速過低3、在凝膠層析中樣品各組分最先淋出的是 （ B）A.分子量最大的 B.體積最大的 C.分子量最小的 D.體積最小的4、為了進(jìn)一步檢查凝膠柱的質(zhì)量，通常用一種大分子的有色物質(zhì)溶液過柱，常見的檢查物質(zhì)為藍(lán)色葡聚糖，下面不屬于它的作用的是 （C）A.觀察柱床有無溝流 B.觀察色帶是否平整C.測量流速 D.測量層析柱的外水體積5、在選用凝膠層析柱時，為了提高分辨率，宜選用的層析柱是 （A）A.粗且長的 B.粗且短的 C.細(xì)且長的 D.細(xì)且短的三、名詞解釋1、全排阻： 當(dāng)具有一定分子量分布的高聚物溶液從柱中通過時，較大的分子完全不能進(jìn)入顆粒內(nèi)部，只能從顆粒間隙流過，稱“全排

38、阻”。其流經(jīng)體積最小，等于外水體積V0。2、類分離：將分子量極為懸殊的兩類物質(zhì)分開，如蛋白質(zhì)與鹽類，稱作類分離或組分離.選擇凝膠時，應(yīng)使樣品中大分子組的分子量大于其排阻限，而小分子組的分子量小于滲入限。大分子的分配系數(shù)Kd=0，小分子的Kd=1。3、分級分離：將分子量相差不大的大分子物質(zhì)加以分離，如分離血清球蛋白與白蛋白，分級分離應(yīng)盡量使待分離各物質(zhì)的Kd值相差大些，并使分子量分布不在凝膠分離范圍的一側(cè)。4、柱比：層析柱的長度與直徑的比值一般稱作“柱比”。5、操作壓：凝膠層析柱由于進(jìn)出口之間液位壓力差形成的對凝膠顆粒的壓力稱作“操作壓”。6、全滲入：被分離組分的分子量小于該種凝膠的滲入限，其分

39、子可以自由進(jìn)出凝膠顆粒，這叫做“全滲入”。 其流經(jīng)體積最大，等于外水體積與內(nèi)水體積之和，V0 Vi。7、分離度Rs：式中 Ve1、Ve2對應(yīng)于兩個峰的淋出體積；W1、W2和1、2兩個峰寬度和標(biāo)準(zhǔn)偏差。四、問答題1、試述公式Ve=V0+KdVi 各字母的物理意義。答：公式Ve=V0+KdVi中Ve代表被分離組分的流經(jīng)體積，V0代表外水體積，Vi代表內(nèi)水體積。Kd稱作“排阻系數(shù)” 或“分配系數(shù)”， 它反映了物質(zhì)分子進(jìn)入凝膠顆粒的程度。對一定種類規(guī)格的凝膠，物質(zhì)的Kd值為該物質(zhì)的特征常數(shù)。排阻系數(shù)：當(dāng)Kd=1時，洗脫體積Ve=V0+Vi，為全滲入。當(dāng)Kd=0時，洗脫體積Ve=V0，為全排阻。0Kd1

40、時，洗脫體積Ve=Vo+KdVi，為部分滲入。2、利用凝膠層析如何測定蛋白質(zhì)的分子量？ 答：當(dāng)具有一定分子量分布的高聚物溶液從柱中通過時，較小的分子在柱中停留時間比大分子停留的時間要長，于是樣品各組分即按分子大小順序而分開，最先淋出的是最大的分子（2分）。對于一個特定體系（凝膠柱），待測定物質(zhì)的洗脫體積與分子量的關(guān)系符合公式Ve=-KlogM +C先以3個以上（最好更多些）的已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白過柱，測取各自的Ve值。以Ve作縱坐標(biāo)，logM作橫坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線（2分）。在同一測定系統(tǒng)中測取未知物質(zhì)的Ve值便可由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得分子量（2分）。3、凝膠層析的應(yīng)用主要有哪些？并說明其原理。當(dāng)具有一定

41、分子量分布的高聚物溶液從柱中通過時，較小的分子在柱中停留時間比大分子停留的時間要長，于是樣品各組分即按分子大小順序而分開，最先淋出的是最大的分子（2分）。應(yīng)用：一、脫鹽：脫鹽用的凝膠多為大粒度的，高交聯(lián)度的凝膠。此時溶液中蛋白質(zhì)等大分子的Kd=0，鹽類的Kd=1。由于交聯(lián)度大，凝膠顆粒的強(qiáng)度較好，加之凝膠粒度大，柱層操作比較便利，流速也高。二、分子量測定：對于一個特定體系（凝膠柱），待測定物質(zhì)的洗脫體積與分子量的關(guān)系符合公式Ve=-KlogM+C先以3個以上（最好更多些）的已知分子量的標(biāo)準(zhǔn)蛋白過柱，測取各自的Ve值。以Ve作縱坐標(biāo)，logM作橫坐標(biāo)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。在同一測定系統(tǒng)中測取未知物質(zhì)的V

42、e值便可由標(biāo)準(zhǔn)曲線求得分子量。三、分離純化：根據(jù)分子量不同流出先后順序不同，收集單一洗脫峰的物質(zhì)，得以純化。第八章 離子交換法（答案）一、填空題1、離子交換劑由 惰性的不溶性載體 、 功能基團(tuán) 和 平衡離子 組成。 平衡離子帶 正電荷 為陽離子交換樹脂，平衡離子帶 負(fù)電荷 稱陰離子交換樹脂。2、常見的離子交換劑有離子交換樹脂，離子交換纖維素，葡聚糖凝膠離子交換劑等。3、離子交換樹脂的基本要求有 有盡可能大的交換容量 、 有良好的交換選擇性 、化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、 化學(xué)動力學(xué)性能好 和 物理性能好 。4、影響離子交換選擇性的因素主要有 離子價與離子水合半徑 、 離子價與離子濃度 、交換環(huán)境 、 樹脂結(jié)

43、構(gòu) 、 偶極離子排斥 等。5、請寫出下列離子交換劑的名稱和類型：CM-C的名稱是羧甲基纖維素，屬于弱酸型陽離子交換纖維素; DEAE-C的名稱是二乙基氨基乙基纖維素，屬于強(qiáng)堿型陰離子交換纖維素;。6、色譜聚焦（chromatofocusing）是一種高分辨的新型的蛋白質(zhì)純化技術(shù)。它是根據(jù)蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)，結(jié)合離子交換技術(shù)的大容量色譜，能分離幾百毫克蛋白質(zhì)樣品，洗脫峰被聚焦效應(yīng)濃縮，分辨率很高，操作簡單。7、寫出下列離子交換劑類型：732 強(qiáng)酸型陽離子交換樹脂 ，724 弱酸型陽離子交換樹脂 ，717 強(qiáng)堿型陰離子交換樹脂 ，CM-C 陽離子交換纖維素 ,DEAE-C 陰離子交換纖維素 ，PBE9

44、4 陰離子交換劑 。8、在采用多緩沖陰離子交換劑作固定相的離子交換聚焦色譜過程中，當(dāng)柱中某位點(diǎn)之pH值下降到蛋白質(zhì)組分 PI(等電點(diǎn)) 值以下時，它因帶 正 電荷而 下移 ，如果柱中有兩種蛋白組分，pI值較 大（高） 者會超過另一組分，移動至柱下部pH較 高 的位點(diǎn)進(jìn)行 聚焦（交換） 。9、影響離子交換選擇性的因素有 離子水合半徑 、 離子價與離子濃度 、交換環(huán)境 、 樹脂結(jié)構(gòu) 、 偶極離子排斥 。二、選擇題1、用鈉型陽離子交換樹脂處理氨基酸時，吸附量很低，這是因?yàn)?（C）A. 偶極排斥 B.離子競爭 C. 解離低 D. 其它2、在酸性條件下用下列哪種樹脂吸附氨基酸有較大的交換容量 （ C ）

45、A.羥型陰 B.氯型陰 C.氫型陽 D.鈉型陽3、在尼柯爾斯基方程式中，K值為離子交換常數(shù)， K1說明樹脂對交換離子吸引力（ ）。A. 小于平衡離子 B.大于平衡離子 C. 等于平衡離子 D. 其它三、名詞解釋1、蛇籠樹脂：由丙烯酸或甲基丙烯酸在季胺型陰離子交換樹脂（如Dowex）中聚合而成的一類樹脂稱蛇籠樹脂。它是一種兩性樹脂，它適宜于從有機(jī)物質(zhì)（如甘油）水溶液中吸附鹽類，再生時用水洗，就可將吸著的離子洗下來。2、尼柯爾斯基方程式：即其中m1、m2及C1、C2分別代表樹脂上和溶液中的兩種離子的濃度。K值的大小取決于樹脂和交換離子的性質(zhì)，以及交換條件。K1時說明離子A1比離子A2對樹脂有較大的

46、吸引力；反之，K1時樹脂對A2的吸引力大于A1。3、偶極離子排斥作用：許多生化物質(zhì)都是兩性物質(zhì)。其中有些是偶極離子。因?yàn)樗鼈兗词箖綦姾蔀榱銜r，正電中心和負(fù)電中心并不重疊，遂成偶極。偶極離子在離子交換過程中的行為是很特殊的?，F(xiàn)以氨基酸的離子交換為例。式中由于使用了鈉型樹脂，被吸附氨基酸的羧基所帶的負(fù)電荷與樹脂磺酸基之負(fù)電荷產(chǎn)生排斥力。這就是所謂偶極離子的排斥作用。因此使樹脂對氨基酸的吸附量大大降低。四、問答題1、簡述離子交換纖維素的特點(diǎn)有哪些？答：離子交換纖維素的特點(diǎn)是：離子交換纖維素為開放的長鏈骨架，大分子物質(zhì)能自由地在其中擴(kuò)散和交換，親水性強(qiáng)，表面積大，吸易附大分子；交換基團(tuán)稀疏，對大分子的

47、實(shí)際交換容量大；吸附力弱，交換和洗脫條件緩和，不易引起變性；分辨力強(qiáng)，能分離復(fù)雜的生物大分子混合物。2、請以CM-C為例說明離子交換纖維素分離純化蛋白質(zhì)時的洗脫方法有哪些？并說出各種方法的洗脫原理。答：無論是升高環(huán)境的pH還是降低pH或是增加離子強(qiáng)度都能將被吸附物質(zhì)洗脫下來?，F(xiàn)以羧甲基纖維素為例加以說明，圖中H2N-P表示蛋白質(zhì)，C表示纖維素。（1）、升高環(huán)境的pH，使蛋白質(zhì)在此pH下失去電荷，從而喪失與CM-C結(jié)合力而被洗脫下來。（2）、降低環(huán)境的pH，使CM-C在此pH下不解離，從而不能吸附蛋白質(zhì)而被洗脫下來。（3）、用高濃度的同性離子根據(jù)質(zhì)量作用定律將目的物離子取代下來。3、請以DEAE

48、-C為例說明離子交換纖維素分離純化蛋白質(zhì)時的洗脫方法有哪些？并說出各種方法的洗脫原理。答：無論是升高環(huán)境的pH還是降低pH或是增加離子強(qiáng)度都能將被吸附物質(zhì)洗脫下來。（1）、升高環(huán)境的pH，使DEAE-C在此pH下不解離，從而不能吸附蛋白質(zhì)而被洗脫下來。（2）、降低環(huán)境的pH，使蛋白質(zhì)在此pH下失去電荷，從而喪失與DEAE-C結(jié)合力而被洗脫下來。（3）、用高濃度的同性離子根據(jù)質(zhì)量作用定律將目的物離子取代下來。4、由下圖，利用給出的兩種離子交換劑（E1，E2）分離3種蛋白質(zhì)（P1、P2、P3），用箭頭流程圖表示(并指出E1，E2的類型)。 E1為陰離子交換劑E2為陽離子交換劑5、下圖為離子交換法應(yīng)

49、用實(shí)例，請?zhí)顚懮a(chǎn)工藝流程中的空格（可選因素：陰離子交換樹脂，陽離子交換樹脂， 0.05mol/L氨水，0.1mol/L氨水，2mol/L氨水）。簡述從“濾液”開始，以后步驟的分離原理？答：陽離子交換樹脂， 0.05mol/L氨水，0.1mol/L氨水，2mol/L氨水濾液調(diào)節(jié)到pH2.5時，氨基酸帶正電荷，因此選用陽離子交換樹脂，之后根據(jù)氨基酸等電點(diǎn)的不同，依次用0.05mol/L氨水，0.1mol/L氨水，2mol/L氨水洗脫。酸性氨基酸等電點(diǎn)低，因此用0.05mol/L氨水就可洗脫下來，而堿性氨基酸等電點(diǎn)高，因此需用2mol/L氨水才能將之洗脫下來。第九章 親和純化技術(shù)（答案）一、填空題

50、1、親和層析洗脫方法有非專一性洗脫 ， 特殊洗脫， 專一性洗脫。2、親和力大小除由親和對本身的 解離常數(shù) 決定外，還受許多因素的影響，其中包括親和吸附劑 微環(huán)境 、 載體空間位阻 、 載體孔徑 、 配基和配體的濃度 、 配基結(jié)構(gòu) 等。3、親和層析中常用作分離酶的配基有 酶抑制劑 ， 輔酶 ， 底物 和 底物結(jié)構(gòu)類似物 。4、親和層析中非專一性吸附有離子效應(yīng)、疏水基團(tuán)、復(fù)合親和力。5、親和過濾指的是將 親和層析 和 膜過濾技術(shù) 結(jié)合運(yùn)用，它包括 親和錯流過濾 和 親和膜分離 兩大方法。二、選擇題1、下面關(guān)于親和層析載體的說法錯誤的是 （ B ）A.載體必須能充分功能化。B.載體必須有較好的理化穩(wěn)

51、定性和生物親和性，盡量減少非專一性吸附。C.載體必須具有高度的水不溶性和親水性。D.理想的親和層析載體外觀上應(yīng)為大小均勻的剛性小球。2、制備親和柱時，應(yīng)首先選用的配基是 （ A ）A.大分子的 B.小分子的 C.中等大小的 D.不確定3、親和層析的洗脫過程中，在流動相中加入配基的洗脫方法稱作 （ C ）A. 陰性洗脫 B. 劇烈洗脫 C. 競爭洗脫 D. 非競爭洗脫4、親和層析的洗脫過程中，在流動相中減去配基的洗脫方法稱作 （ D ）A. 陰性洗脫 B. 劇烈洗脫 C. 正洗脫 D. 負(fù)洗脫三、名詞解釋1、親和反膠團(tuán)萃?。ˋffinity-based resersed micellar extraction）：是指在反膠團(tuán)相中除通常的表面活性劑（如AOT）以外，添加另一種親水頭部為目標(biāo)分子的親和配基的助表面活性劑，通過親和配基與目標(biāo)分子的親和結(jié)合作用，促進(jìn)目標(biāo)產(chǎn)物在反膠團(tuán)相的分配，提高目標(biāo)產(chǎn)物的分配系數(shù)和反