分光光度法測(cè)定藏藥鬼箭錦雞兒中總黃酮的含量

1、分光光度法測(cè)定藏藥鬼箭錦雞兒中總黃酮的含量         【摘要】 目的建立藏藥鬼箭錦雞兒中總黃酮的含量測(cè)定方法。方法采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以總黃酮含量為考察指標(biāo)，研究藏錦雞兒總黃酮的最佳提取方法；并利用分光光度法，以蘆丁為對(duì)照品，對(duì)藏錦雞兒原藥材中的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果該藥材紅色木質(zhì)部心材中總黃酮的含量為        【摘要】  目的建立藏藥鬼箭錦雞兒中總黃酮的含量測(cè)定方法。方法采用正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，以總黃酮含量為考察指標(biāo)，

2、研究藏錦雞兒總黃酮的最佳提取方法；并利用分光光度法，以蘆丁為對(duì)照品，對(duì)藏錦雞兒原藥材中的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果該藥材紅色木質(zhì)部心材中總黃酮的含量為13.56%。 結(jié)論該工藝合理，黃酮有效成分提取率高。該方法測(cè)定樣品結(jié)果準(zhǔn)確可靠、快速、重復(fù)性好。 【關(guān)鍵詞】  藏藥 鬼箭錦雞兒 總黃酮 分光光度法Abstract：ObjectiveTo  set  up  the  quantitative  method  for  determining  the  total flavonoid 

3、; in  Tibetan herb Caragana jubata (Pall) Poir. Methods With the total flavonoid content of a kind of Tibetan herb Caragana(pall) poir as an observed target, a optimum extracting method was obtained by the orthogonal experiment design, and the flavonoids in the roots and caudices of Caragana ju

4、bata (pall) poir were analyzed qualitatively.  ResultsIn this paper, the content of total flavonoids was 13.56% by spectrophotometic method with rutin as standard sample.  ConclusionThe optimum preparation procedure is reliable with higher extraction ratio of the active components.This

5、0; method  is  reliable, accurate, quick  and  reproducible.Key words：Tibetan patent ;    Caragana jubata(Pall) Poir;   Total flavonoid;  Spectrophotometry    藏錦雞兒學(xué)名鬼箭錦雞兒Caragana jubata (Pall) Poir，藏名“作毛興”，為豆科錦雞兒屬植物，是葉型較小的中生、中旱生、旱生和沙生灌

6、木。生長(zhǎng)在海拔3 0004 700 m的陰坡、半陰坡地帶13。藏醫(yī)用其根莖及其干燥紅色木質(zhì)部心材入藥，其味澀、性涼。具有活血散瘀、涼血、降壓、生肌止痛的功能，可用于防治多血癥、血熱癥、高血壓病和心血管等方面的疾病4。鬼箭錦雞兒中含有黃酮類(lèi)、皂苷、生物堿、鞣質(zhì)、揮發(fā)油和糖類(lèi)等化學(xué)成分5。本文采用正交實(shí)驗(yàn)法研究了鬼箭錦雞兒中總黃酮的最佳提取條件，同時(shí)對(duì)其總黃酮含量進(jìn)行了測(cè)定68。1  儀器、試劑及樣品采集1.1   儀器與試劑722型可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；分析天平；蘆丁(中國(guó)藥品生物品檢定所) ；乙醇等試劑均為分析純；常用玻璃儀器等。1.2

7、60; 樣品采集鬼箭錦雞兒采自海拔4 000 m以上的青藏高原地區(qū)（青海省藏藥研究所多杰研究員鑒定），去掉外皮，取紅色木質(zhì)心材，切斷，陰干，粉碎后過(guò)40目篩作為實(shí)驗(yàn)藥材。2  方法與結(jié)果2.1   對(duì)照品蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液的制備精密稱(chēng)取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)樣品0.025 0 g，75%乙醇溶解并定容至100ml容量瓶中稀釋到刻度。2.2   最大吸收波長(zhǎng)的確定取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液4ml采用NaNO2-Al(NO3)3-NaOH顯色, 在470560nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)測(cè)定溶液的吸光度。測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。由此可見(jiàn)，在510nm處有最大吸收值,所以, 可以選擇510nm作為檢測(cè)波

8、長(zhǎng)。2.3   正交實(shí)驗(yàn)2.3.1   正交實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案選擇乙醇濃度(A)，回流時(shí)間(B)，藥材重量與乙醇體積比(C) 為實(shí)驗(yàn)3個(gè)考察因素，每個(gè)因素取3個(gè)水平(見(jiàn)表2)，應(yīng)用L9(34)表安排實(shí)驗(yàn)，以鬼箭錦雞兒中總黃酮的含量為評(píng)價(jià)指標(biāo)，研究其最佳提取條件。表1  不同波長(zhǎng)下蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液對(duì)應(yīng)的吸光度（略）表2  總黃酮提取條件因素水平（略）2.3.2   正交實(shí)驗(yàn)結(jié)果正交實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)及計(jì)算分析見(jiàn)表3。直觀分析表明，影響鬼箭錦雞兒總黃酮提取率的主要因素依次為：乙醇濃度物料比回流時(shí)間，其中乙醇濃度對(duì)總黃酮的提取率有顯著影響，

9、最佳提取條件為A2B1C2。2.4   藏錦雞兒藥材中黃酮提取方法的確定準(zhǔn)確稱(chēng)取已粉碎過(guò)篩后的藏錦雞兒紅色木質(zhì)心材10 g于燒瓶中，加入100 ml石油醚回流40 min進(jìn)行脫脂，棄去濾液，再加入100 ml 75%的乙醇，回流提取30 min， 3次，棄去濾渣，合并濾液后進(jìn)行蒸餾濃縮，用75%乙醇定容至250 ml量瓶中，得總黃酮提取物，用于含量的測(cè)定。2.5   實(shí)驗(yàn)測(cè)定條件的選擇2.5.1   氫氧化鈉溶液用量的選擇精密吸取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)溶液2 ml各4份，分別置于25ml容量瓶中，各加5%亞硝酸鈉溶液1.0 ml，再加10%硝酸鋁1.0 ml， 然后分別加入10%氫氧化鈉5，10，15，20 ml，再用75%乙醇溶液稀釋至刻度，分別在510 nm處測(cè)定其吸光度（見(jiàn)表4）。經(jīng)實(shí)驗(yàn)考察結(jié)果，選擇測(cè)定時(shí)加入10% NaOH 10 ml時(shí)為最佳。2.