納米凝膠的研究進(jìn)展

1、納米凝膠的研究進(jìn)展摘要：納米凝膠是由親水性或兩親性高分子鏈組成的三維網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，它能顯著的溶脹于水但是不溶解于水，由于水和凝膠網(wǎng)絡(luò)的親和性，水可能以鍵合水、束縛水和自由水等形式存在于高分子網(wǎng)絡(luò)中而失去流動(dòng)性，因此納米凝膠能夠保持一定的形狀。它們可以作為一種藥物載體，而且也可以通過(guò)鹽鍵，氫鍵或者疏水作用自發(fā)的結(jié)合一些生物活性分子。高分子電解質(zhì)的納米凝膠可以穩(wěn)定地結(jié)合帶相反電荷的小分子藥物和生物大分子，比如寡或多聚核苷酸（siDNA，DNA）和蛋白質(zhì)。目前的研究表明納米凝膠在生物醫(yī)藥方面有很廣闊的應(yīng)用前景。關(guān)鍵詞：納米凝膠 藥物載體前言納米凝膠通常指的是由物理或者化學(xué)交聯(lián)的聚合物網(wǎng)絡(luò)組成的水凝膠顆粒

2、，它是一種納米尺度的水分散體。按形成的化學(xué)鍵，凝膠分為兩種：一種是化學(xué)凝膠（聚合物凝膠），這種凝膠是由交聯(lián)的共價(jià)鍵而形成的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，比如PEG-cl-PEI。另一種是物理凝膠，是由非共價(jià)鍵形成的三維網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，比如甘露糖類(lèi)，右旋糖酐等。按溶劑分，則一般分為有機(jī)凝膠和水凝膠。納米凝膠可以很好的作為藥物運(yùn)輸載體是因?yàn)樗鼈冇泻芨叩呢?fù)載能力，高的穩(wěn)定性，更重要的是相對(duì)于普通的藥物納米載體，它們對(duì)環(huán)境敏感，比如離子強(qiáng)度，pH和溫度。至從2002年第一篇關(guān)于納米凝膠的合成與應(yīng)用的綜述發(fā)表后，這類(lèi)新穎的納米結(jié)構(gòu)材料在藥物，大分子和顯影劑運(yùn)輸方面受到人們?cè)絹?lái)越大的關(guān)注。這篇綜述簡(jiǎn)單介紹了納米凝膠的合成與應(yīng)用

3、，尤其是藥劑學(xué)方面的應(yīng)用。沒(méi)有負(fù)載的納米凝膠含有大量的水而處于一種溶脹的狀態(tài)。納米凝膠可以通過(guò)生物活性因子與其多聚鏈基質(zhì)之間的靜電作用，范德華力或者疏水作用自發(fā)的負(fù)載這些因子。因此，納米凝膠塌陷而形成穩(wěn)定的納米粒子，生物活性因子負(fù)載其中?？梢栽谄浣Y(jié)構(gòu)中加入分散的親水性聚合物比如聚乙二醇來(lái)阻止納米凝膠的聚集。在負(fù)載藥物的納米凝膠絡(luò)合物塌陷的過(guò)程中，這類(lèi)聚合物可以暴露在其表面并形成一個(gè)親水的保護(hù)層從而阻止了相分離。納米凝膠表面的官能團(tuán)可以進(jìn)一步的用各種不同的靶向基團(tuán)修飾以達(dá)到靶向輸送特定部位的目的。研究表明納米凝膠可以將其負(fù)載送到細(xì)胞里面并穿過(guò)生物膜。這種納米凝膠有很好的穩(wěn)定性并且可以保護(hù)生物活性

4、因子不被細(xì)胞內(nèi)代謝系統(tǒng)降解。納米凝膠在全身性藥物輸送及提高口服和腦部位的生物利用度方面表現(xiàn)出很大的潛能。1 納米凝膠的制備目前報(bào)道的制備納米凝膠的方法有以下幾種：（1）聚合物之間的物理自組裝；（2）均相或微小非均相環(huán)境下的單體聚合；（3）形成了的聚合物交聯(lián)；（4）模板輔助。下面詳細(xì)介紹這幾種方法。許多研究團(tuán)隊(duì)用聚合物之間的物理自組裝制備了各種不同的納米凝膠。這種方法通常包括控制親水性聚合物之間通過(guò)疏水作用或者靜電作用或者氫鍵導(dǎo)致的聚集。這種制備納米凝膠的方法在溫和條件和水介質(zhì)中進(jìn)行。親水性聚合物相互作用將生物大分子包裹其中，并且對(duì)于制備負(fù)載蛋白質(zhì)的納米凝膠非常有用。比如Akiyoshi等人通過(guò)

5、膽固醇修飾的淀粉之間的疏水作用制備了負(fù)載胰島素的納米凝膠（如圖1a）【1】。這種納米凝膠在一個(gè)窄的膽固醇糖比例（1:40-1:100） 圖1 水性介質(zhì)中物理自組裝形成納米凝膠下形成，其粒徑為20-30nm，每個(gè)納米粒包含5個(gè)胰島素分子。自組裝納米凝膠的粒徑通過(guò)選擇合適濃度的聚合物和環(huán)境參數(shù)，比如pH值，離子強(qiáng)度和溫度來(lái)控制。Yu等人制備了溫度誘導(dǎo)凝膠化的蛋白質(zhì)納米凝膠，其組成是帶相反電荷的蛋白質(zhì)，比如卵清蛋白和溶菌酶或卵轉(zhuǎn)鐵蛋白【2】。同樣地，可以制備組成為殼多糖和卵清蛋白的pH和溫度誘導(dǎo)的納米凝膠?！?】Gref和他的同伴研究了不同粒徑的自組裝納米凝膠，其為十二烷基修飾的右旋糖酐和-環(huán)糊精在

6、水性介質(zhì)中相互作用形成（如圖1b）?！?】他們通過(guò)一個(gè)大的濃度范圍的此兩種聚合物相互作用制備了粒徑在120-150nm的凝膠。制得的納米凝膠很穩(wěn)定，而且發(fā)現(xiàn)通過(guò)冷凍干燥可以獲得長(zhǎng)時(shí)間的保存。不同膠態(tài)環(huán)境下的化學(xué)合成為改造納米凝膠的結(jié)構(gòu)和性質(zhì)提供了一個(gè)手段。有一些研究報(bào)道用反向油包水微乳作為介質(zhì)來(lái)聚合單體形成凝膠，加入雙官能團(tuán)的單體作為交聯(lián)劑以保證得到穩(wěn)定地膠狀納米網(wǎng)絡(luò)（圖2a）。Speiser等人首先共聚合成反向微膠粒?！?】Levashow和他的同伴發(fā)展了Speiser的方法，他們用丙烯酰胺和N,N-亞甲基雙丙烯酰胺共聚物制成納米凝膠來(lái)共價(jià)固定酶。圖2 在膠態(tài)環(huán)境下共聚合成納米凝膠不穩(wěn)定鍵通

7、常在聚合過(guò)程中被引入到納米凝膠中，當(dāng)破壞它們后藥物便釋放出來(lái)。Frechet等人在反向微乳中通過(guò)自由基聚合合成可降解的丙烯酰胺納米凝膠，其中還包含了對(duì)酸敏感的乙縮醛交聯(lián)劑，此凝膠被用來(lái)負(fù)載蛋白質(zhì)，抗體和DNA?！?】乙縮醛基團(tuán)在pH=7環(huán)境下很穩(wěn)定（t1/2=24 h），但是在酸性胞內(nèi)體pH值環(huán)境下馬上就被水解導(dǎo)致納米凝膠降解從而釋放出負(fù)載（t1/2=5min）【7】【8】。Matyjaszewski研究團(tuán)隊(duì)在反向微乳中用原子轉(zhuǎn)移基團(tuán)聚合法（ATRP）以水溶性的聚合物合成穩(wěn)定地交聯(lián)納米凝膠。【9】他們用一種含二硫化物的交聯(lián)劑來(lái)合成可生物降解的納米凝膠。二硫基在胞外基質(zhì)中很穩(wěn)定，但是進(jìn)入細(xì)胞后由

8、于谷胱甘肽的存在導(dǎo)致其裂解。這樣同樣有利于納米凝膠在細(xì)胞內(nèi)負(fù)載的釋放。聚合反應(yīng)合成納米凝膠的方法同樣可以在水包油微乳或者水性懸液中進(jìn)行（如圖2b）。而且，此類(lèi)聚合反應(yīng)可以由水性單體在均質(zhì)水溶液中開(kāi)始，最后形成一個(gè)慢慢長(zhǎng)大的多聚膠狀懸浮液。例如，Peppas等人以PEG修飾的聚甲基丙烯酸為原料利用紫外誘導(dǎo)的溶液沉淀聚合方法合成了一中懸浮的納米凝膠?！?0】除了這些聚合方法外，已經(jīng)形成的聚合物鏈之間的共價(jià)交聯(lián)為產(chǎn)生空隙很大的納米凝膠提供了很好的方法?！?1】這種交圖3用交聯(lián)聚合物鏈的技術(shù)合成納米凝膠聯(lián)方法在制備不同功能載藥納米凝膠方面得到廣泛的應(yīng)用。特別指出的是此種方法第一次被用來(lái)制備運(yùn)輸多核苷酸

9、的交聯(lián)納米凝膠。利用此方法，雙倍活性的PEG在水包油微乳環(huán)境中被結(jié)合在分支的PEI上，接著在真空下蒸發(fā)掉溶劑，最后納米凝膠在水性溶液中成熟形成。（如圖3a）。同聚合反應(yīng)的情況一樣，這種納米凝膠聚合物之間的交聯(lián)連接同樣可以打開(kāi)。例如，一種生物可降解的用二硫化物交聯(lián)的分段PEI被用來(lái)制備載多核苷酸的離子型納米凝膠，大大減少了毒性?！?2,13】在另外研究中，在水溶液中PEI被交聯(lián)在雙活性普流尼克三嵌段共聚物（PEG-b-PPG-b-PEG；如圖3b；PPG=聚丙烯乙二醇）組成的微膠粒上。【14】這樣就得到一個(gè)疏水的PPO核，外面包裹交聯(lián)著一個(gè)PEI和PEO的殼（PEG-cl-PEI）。Bronic

10、h等人【40】發(fā)明了一種可以控制納米凝膠中聚合物鏈空間分布的技術(shù)。其中關(guān)鍵步驟是用一個(gè)帶相反電荷的縮合劑來(lái)交聯(lián)雙親性的嵌段共聚物以初步得到高聚電解質(zhì)微粒。然后在核中發(fā)生離子鍵的化學(xué)交聯(lián)，縮合劑被移走從而得到最終的凝膠（如圖3c）。最終得到的納米凝膠由PEG-b-聚甲基丙烯酸（PEG-b-PMA）組成，包括一個(gè)親水的PEG殼和一個(gè)交聯(lián)的親水PMA離子核，它可以在水中溶脹及結(jié)合親水的藥物。【16】用同樣的技術(shù)可以用PEG修飾的聚丙烯酸（PEG-g-PAA）制得核殼型的納米凝膠?！?5】圖4 光復(fù)刻技術(shù)合成納米凝膠最后，DeSimone和他的團(tuán)隊(duì)發(fā)展了一種新型的合成納米凝膠的方法，此方法可以將幾十納

11、米的聚合物顆粒制成幾個(gè)納米。此方法用的是一種模板光復(fù)刻技術(shù)（particle replication in Nonwetting templates PRINT）。具體過(guò)程見(jiàn)圖4。這種方法可以對(duì)顆粒的大小，形狀，組成和表面功能進(jìn)行絕對(duì)的控制，同時(shí)可以負(fù)載微小的物質(zhì)，包括藥物和生物大分子。例如，用此種方法制得了一系列200nm左右的PEG化的納米凝膠顆粒?！?7】2 化學(xué)修飾當(dāng)注射進(jìn)入人體后，納米載體可以將藥物輸送到病患部位。有很多因素阻止藥物的傳送：（1）納米載體與血清蛋白的作用，導(dǎo)致粘附；（2）網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞或腎小球的清除作用；（3）器官內(nèi)非特異性聚集。為了降低與血清蛋白的相互作用，延長(zhǎng)藥物的

12、循環(huán)時(shí)間，納米載體的表面經(jīng)常會(huì)修飾上惰性的親水的多聚鏈，像PEG?！?8】例如，載藥的PEG-cl-PEI納米凝膠是一個(gè)核殼型的結(jié)構(gòu)，表面被PEG鏈包裹著?！?9】在乳液聚合法過(guò)程中同樣可以在聚甲基丙烯酸酯納米凝膠周?chē)由螾EG?！?0】納米凝膠的表面修飾上一些生物特異性的靶標(biāo)基團(tuán)，可以增加納米凝膠在生物體內(nèi)的特異性輸送。例如，上面介紹了生物素化的PEG-cl-PEI納米凝膠，它們可以通過(guò)生物素化的配體（轉(zhuǎn)鐵蛋白或胰島素）來(lái)結(jié)合抗生物素蛋白?！?1】納米凝膠同樣可以接上一種腫瘤靶向蛋白，人轉(zhuǎn)鐵蛋白（hTf）?！?2】納米凝膠可以結(jié)合大量轉(zhuǎn)鐵蛋白并將其暴露在表面，這樣有利于其在細(xì)胞內(nèi)與轉(zhuǎn)鐵蛋白受

13、體作用。另外，通過(guò)一個(gè)雙功能的PEG連接體可以將肽配體連接到納米凝膠上。【12】例如，一個(gè)末端有半胱氨酸的多肽可以連接到一個(gè)馬來(lái)酰亞胺-PEG-N-hydroxysuccinimide連接體上。然后此產(chǎn)物可以與PEI上的氨基反應(yīng)，從而得到一個(gè)既定要求多肽密度修飾的納米凝膠。總之，納米凝膠表面可以被修飾上各種不同的靶向基團(tuán)。開(kāi)始的證據(jù)表明這些方法可以用來(lái)將納米凝膠輸送到特異選擇的細(xì)胞內(nèi)受體上。3 溶脹：納米凝膠最重要的性質(zhì)納米凝膠是軟性納米材料。納米凝膠在水溶液中的溶脹由以下因素控制：（1）納米凝膠自身的結(jié)構(gòu)（聚合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)，交聯(lián)的程度，電解質(zhì)凝膠的電荷密度等）；（2）環(huán)境參數(shù)，比如pH值，離

14、子強(qiáng)度，溫度（如圖5）。眾所周知，滲透壓和聚合物彈性力學(xué)之間的平衡決定了凝膠顆粒的物理尺寸?！?3】弱的聚電解質(zhì)凝膠的離子化取決于pH值?？傮w電荷和抗平衡離子數(shù)量的減少會(huì)導(dǎo)致凝膠的收縮（滲透壓的減少），直到聚合物鏈已占空間限制其進(jìn)一步收縮。例如，當(dāng)PMA上的羧基質(zhì)子化導(dǎo)致pH值從9降到5時(shí)，交聯(lián)的PEG-b-PMA納米凝膠會(huì)收縮?！?6】同樣，PEI氨基去質(zhì)子化后pH從8.5升到10，導(dǎo)致了PEG-cl-PEI納米凝膠的收縮。圖5 Factors affecting nanogel swelling離子強(qiáng)度同樣也決定了聚電解質(zhì)納米凝膠的溶脹。例如，在高的離子強(qiáng)度時(shí)，離子型的PAETMAC納米凝

15、膠的溶脹只受交聯(lián)劑的濃度影響，但是當(dāng)離子強(qiáng)度很低時(shí)，交聯(lián)劑和電荷強(qiáng)度同樣都會(huì)影響其溶脹。一般的規(guī)律是當(dāng)交聯(lián)數(shù)量增加時(shí)，交聯(lián)了的凝膠的交聯(lián)比率會(huì)降低?！?6】在特定情況下，溶劑與聚合物鏈之間的作用是受溫度影響的，它可以導(dǎo)致凝膠的溶脹或坍塌。例如，因?yàn)樵谄樟髂峥司酆衔镏蠵PG鏈具有低溶液臨界溫度，因此此納米凝膠是溫度響應(yīng)性的。N-異丙基丙烯酰胺納米凝膠（NIPAAm）同樣具有溫度響應(yīng)性?！?4,25】這個(gè)特性可以用來(lái)設(shè)計(jì)環(huán)境響應(yīng)性藥物載體。最近有人設(shè)計(jì)出一個(gè)葡萄糖響應(yīng)性的NIPAAm納米凝膠，此凝膠的溶脹性能受到葡萄糖濃度的影響?！?6】高分散性的納米凝膠一個(gè)突出優(yōu)點(diǎn)是他們常常對(duì)環(huán)境條件的變化可以

16、做出很快的響應(yīng)，這樣有利于生物活性因子在藥物應(yīng)用上的結(jié)合和釋放?！?7】在特定情況下，納米凝膠負(fù)載藥物后可以導(dǎo)致其體積減少。一個(gè)原因是藥物通過(guò)離子鍵，疏水作用或者氫鍵與凝膠鏈發(fā)生作用，從而導(dǎo)致了凝膠的收縮或者坍塌。納米凝膠的溶脹和坍塌時(shí)其負(fù)載藥物和釋放藥物的優(yōu)勢(shì)。4 納米凝膠藥物負(fù)載和釋放生物制劑可以通過(guò)以下作用與納米凝膠結(jié)合：（1）物理包埋，（2）共價(jià)結(jié)合，（3）受控的自組裝。膽固醇修飾的淀粉納米凝膠負(fù)載胰島素【1】和巰基化合物修飾的透明質(zhì)酸納米凝膠都是通過(guò)物理包埋作用?！?8】而且，疏水分子可以在納米凝膠的疏水區(qū)得到增溶。例如，地諾前列酮可以在膽固醇修飾的淀粉納米凝膠中得到增溶。【29】值

17、得注意的是，在大多數(shù)情況下只由疏水相互作用產(chǎn)生的負(fù)載會(huì)導(dǎo)致相對(duì)低的負(fù)載能力。生物制劑利用共價(jià)鍵結(jié)合在納米凝膠上的一個(gè)實(shí)例是在PEG-b-PMA上負(fù)載順鉑?！?0,31】這種納米凝膠有一個(gè)交聯(lián)的多聚陰離子（PMA）的核和一個(gè)中性的多聚物（PEG）殼。在水溶液中，順鉑和凝膠核中的羧基反應(yīng)導(dǎo)致坍塌。帶相反電荷的高聚電解質(zhì)納米凝膠的受控自組裝可以對(duì)生物制劑有更高的負(fù)載。在水溶液中，很多高聚電解質(zhì)的納米凝膠與帶相反電荷的表面活性劑，人造電解質(zhì)，聚核苷酸和蛋白質(zhì)作用?！?4,35,32,33】弱交聯(lián)高聚電解質(zhì)納米凝膠的一個(gè)最重要特點(diǎn)是他們與帶相反電荷生物大分子的結(jié)合能力。在凝膠里的生物大分子的順應(yīng)性受到排

18、斥體積和交聯(lián)密度的阻礙。但是，如果生物大分子和聚合物網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)帶有相反的電荷，它們就可以很有效地相互作用以形成一個(gè)聚合電解質(zhì)絡(luò)合物。當(dāng)聚電解質(zhì)鏈滲入納米凝膠時(shí)，這個(gè)過(guò)程就好像帶相反電荷的聚離子之間的正面反應(yīng)，導(dǎo)致其從凝膠表面進(jìn)入核心。【36】因此，即使是腫大的聚電解質(zhì)網(wǎng)狀系統(tǒng)也能很有效地負(fù)載生物大分子（如圖6）?！?7】圖6 交聯(lián)的聚合物納米凝膠負(fù)載和釋放生物大分子生物活性因子可以通過(guò)以下方式從納米凝膠里面釋放出來(lái)：（1）簡(jiǎn)單擴(kuò)散，（2）納米凝膠的降解，（3）pH值的變化，（4）環(huán)境中存在抗平衡離子位移，（5）外部能量的誘導(dǎo)（如圖7）。圖7 藥物從納米凝膠中釋放綜上所述，納米凝膠可以形成一中親水

19、分散的藥物載體，并且有很好的性能來(lái)包裹小的生物活性劑和生物大分子。此類(lèi)藥物載體系統(tǒng)的優(yōu)勢(shì)是它們可能很容易的制得，高的負(fù)載能力以及穩(wěn)定性高。溶脹和收縮是納米凝膠獨(dú)一無(wú)二的性質(zhì)，可以為藥物的負(fù)載和釋放提供很多好處。納米凝膠網(wǎng)絡(luò)系統(tǒng)對(duì)環(huán)境變化具有響應(yīng)性，可以承受快速的體積變化，可以通過(guò)刺激來(lái)控制生物活性化合物的釋放。另外，納米凝膠可以通過(guò)化學(xué)修飾達(dá)到靶向輸送和釋放藥物的目的。因此，納米凝膠作為藥物載體具有廣闊的應(yīng)用前景參考文獻(xiàn)1 K. Akiyoshi, S. Kobayashi, S. Shichibe, D. Mix, M. Baudys,S. W. Kim, J. Sunamoto, J. C

20、ontrolled Release 1998, 54, 313320.2 S. Yu, P. Yao, M. Jiang, G. Zhang, Biopolymers 2006, 83, 148158.3 S. Yu, J. Hu, X. Pan, P. Yao, M. Jiang, Langmuir 2006, 22, 27542759.4 S. Daoud-Mahammed, P. Couvreur, R. Gref, Int. J. Pharm.2007, 332, 185191.5 P. Speiser in Reverse Micelles (Eds.: P. L. Luisi, B

21、. E. Straub)Plenum, New York, 1984, pp. 339346.6 N. Murthy, M. Xu, S. Schuck, J. Kunisawa, N. Shastri, J. M.Frechet, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 2003, 100, 49955000.7 S. L. Goh, N. Murthy,M. Xu, J. M. Fr_chet, Bioconjugate Chem.2004, 15, 467474.8 Y. J. Kwon, S. M. Standley, S. L. Goh, J. M. Frechet,

22、J.Controlled Release 2005, 105, 199212.9 J. K. Oh, C. Tang, H. Gao, N. V. Tsarevsky, K. Matyjaszewski, J.Am. Chem. Soc. 2006, 128, 55785584.10 C. Donini, D. N. Robinson, P. Colombo, F. Giordano, N. A.Peppas, Int. J. Pharm. 2002, 245, 8391.11 W. E. Hennink, C. F. van Nostrum, Adv. Drug Delivery Rev.2

23、002, 54, 1336.12 S. V. Vinogradov, E. Kohli, A. Zeman, A. V. Kabanov, Polym.Prepr. Am. Chem. Soc. Div. Polym. Chem. 2006, 47, 2728.13 E. Kohli, H. Y. Han, A. D. Zeman, S. V. Vinogradov, J.Controlled Release 2007, 121, 1927.14 S. V. Vinogradov, E. Kohli, A. D. Zeman, Pharm. Res. 2006, 23,920 930.15 T

24、. K. Bronich, P. A. Keifer, L. S. Shlyakhtenko, A. V. Kabanov,J. Am. Chem. Soc. 2005, 127, 82368237.16 S. Bontha, A. V. Kabanov, T. K. Bronich, J. Controlled Release2006, 114, 163174.17 S. E. Gratton, P. D. Pohlhaus, J. Lee, J. Guo, M. J. Cho, J. M.DeSimone, J. Controlled Release 2007, 121, 10 18.18

25、 G. E. Francis, C. Delgado, D. Fisher, F. Malik, A. K. Agrawal, J.Drug Targeting 1996, 3, 321340.19 S. V. Vinogradov, A. D. Zeman, E. V. Batrakova, A. V. Kabanov,J. Controlled Release 2005, 107, 143157.20 H. Hayashi, M. Iijima, K. Kataoka, Y. Nagasaki, Macromolecules2004, 37, 53895396.21 S. V. Vinog

26、radov, E. V. Batrakova, A. V. Kabanov, BioconjugateChem. 2004, 15, 5060.22 S. V. Vinogradov, A. V. Kabanov, Polym. Prepr. Am. Chem.Soc. Div.Polym. Chem. 2004, 228, 296.23 J. Ricka, T. Tanaka, Macromolecules 1984, 17, 29162921.24 Y. Shin, J. Liu, J. H. Chang, G. J. Exarhos, Chem. Commun.2002, 1718 1719.25 I. Varga, I. Szalai, R. Meszaros, T. Gilanyi, J. Phys. Chem. B2006, 110, 2029720301.26 Y. Zhang, Y. Guan, S. Zhou, Biomacromolecules 2007, 8, 38423847.27 G. M. Eichenbaum, P. F. Kiser, S. A. Simon, D. Needham,Macromolecules 1998, 31, 50845093.28 H. Lee, H. Mok, S. Lee, Y. K. Oh,