酶工程制藥 打印

1、項(xiàng)目一 酵母細(xì)胞的固定化制備與應(yīng)用實(shí)訓(xùn)過程² 實(shí)驗(yàn)方法：海藻酸鈉作載體包埋酵母細(xì)胞。一、 實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備器材：燒杯、量筒、錐形瓶、玻璃棒、電子天平、水浴鍋、艾式發(fā)酵管。藥品：葡萄糖、海藻酸鈉、無水氯化鈣、干酵母。艾艾式發(fā)酵管 （二）制備固定化酵母細(xì)胞1、酵母細(xì)胞的活化： 過程 稱取1g干酵母，放入50ml的小燒杯中，加入蒸餾水10ml。用玻璃棒攪拌，使酵母細(xì)胞混合經(jīng)1h活化的酵母10ml蒸餾水均勻，成糊狀，放置1h左右，使其活化。2、配置物質(zhì)的量濃度為0.05mol/L的CaCl2溶液： 過程 稱取無水CaCl2 0.83g，放入200ml的燒杯中，加入150ml的蒸餾水，使其充分溶解，待

2、用。氯化鈣溶液0.83 CaCl2固體 3、配制海藻酸鈉溶液： 過程稱取0.7g海藻酸鈉，放入50ml小燒杯中，加入10ml水，用水浴鍋加熱，邊加熱邊攪拌，將海藻酸鈉調(diào)成糊狀，直至完全溶化，用蒸餾水定容至10ml。0.7g海藻酸鈉水浴加熱成糊狀4、海藻酸鈉溶液和酵母細(xì)胞混合 過程將溶化好的海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入以活化的酵母細(xì)胞，進(jìn)行充分?jǐn)嚢?，再轉(zhuǎn)移至注射器中。充分?jǐn)嚢?（5）固定化酵母細(xì)胞 過程打珠浸泡30min準(zhǔn)備清洗以恒定的速度緩慢的將注射器中的溶液滴加到配制好的CaCl2溶液中，將形成的凝膠珠在CaCl2溶液中浸泡30min左右。（三）用固定化酵母細(xì)胞發(fā)酵1、過程檢測凝膠珠的質(zhì)量清洗，除去富余電解質(zhì)將固定化酵母細(xì)胞（凝膠珠）用蒸餾水沖洗23次，洗去凝膠珠表面多余的電解質(zhì)溶液，剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時間，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。檢驗(yàn)?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格，可以使用下列方法。一是用鑷子夾起一個凝膠珠放在實(shí)驗(yàn)桌上用手?jǐn)D壓，如果凝膠珠不容易破裂，沒有液體流出，就表明凝膠珠的制作成功。二是在實(shí)驗(yàn)桌上用力摔打凝膠珠，如果凝膠珠很容易彈起，也能表明制備的凝膠珠是成功的。厭氧發(fā)酵裝置-觀察現(xiàn)象將150ml質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10的葡萄糖溶液轉(zhuǎn)移至200ml的錐形瓶中，再加入固定好的酵母細(xì)胞，置于25°C下發(fā)酵24h。葡萄糖溶液-發(fā)酵 實(shí)驗(yàn)結(jié)果