小麥粉中曲酸的測定

1、附件 3小麥粉中曲酸的測定BJS 2020031 范圍本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了小麥粉中曲酸的高效液相色譜測定方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于小麥粉中曲酸的測定。2 原理用純水提取試樣中曲酸， 采用配有二極管陣列檢測器或紫外檢測器的高效液相色譜儀檢測，外標(biāo)法定量。3 試劑和材料除另有規(guī)定，本方法所用試劑均為分析純，水為 GB/T 6682 規(guī)定的一級水。3.1 試劑3.1.1 甲醇（ CH3OH ）：色譜純。3.1.2 磷酸二氫鉀（ KH 2PO4）。3.1.3 磷酸（ H3PO4）。3.2 試劑配制磷酸二氫鉀溶液（ 0.02 mol/L ，pH 3.7）：稱取 2.722 g 磷酸二氫鉀（ 3.1.2），加水溶解并定容

2、至1000 mL,加入磷酸（3.1.3）調(diào)節(jié)pH在3.7 ± 0.之間，經(jīng)水相微孔濾膜（0.45呵）過濾后備用。3.3 標(biāo)準(zhǔn)品曲酸標(biāo)準(zhǔn)品英文名稱、CAS號、分子式、相對分子質(zhì)量、結(jié)構(gòu)式見附錄A，純度99%3.4 標(biāo)準(zhǔn)溶液配制341標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（1000 mg/L）:準(zhǔn)確稱取曲酸標(biāo)準(zhǔn)品100 mg （精確至0.0001 g），加水溶解并轉(zhuǎn)移至100 mL容量瓶中，定容至刻度，搖勻，制成濃度為1000 mg/L標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，4C避光保存，有效期 3 個(gè)月。3.4.2標(biāo)準(zhǔn)使用液（10.0 mg/L ）：準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（3.4.1） 1.0 mL于100 mL容量瓶中， 用水稀釋至刻度，搖勻

3、，制成濃度為10.0 mg/L的標(biāo)準(zhǔn)使用液，4C避光保存，有效期3個(gè)月。3.4.3 標(biāo)準(zhǔn)系列工作溶液： 準(zhǔn)確吸取標(biāo)準(zhǔn)使用液 （ 3.4.2）適量，用水配制成質(zhì)量濃度為0.1 mg/L 、0.2 mg/L、0.5 mg/L、1.0 mg/L、5.0 mg/L，或依儀器響應(yīng)和實(shí)際情況配制適當(dāng)濃度的標(biāo)準(zhǔn)系 列工作溶液。4 儀器與設(shè)備4.1 液相色譜儀：配有二極管陣列檢測器或紫外檢測器。4.2 分析天平：感量分別為 0.01 g 和 0.0001 g。4.3 pH 計(jì)：精度 0.01。4.4 超聲波水浴。4.5離心機(jī)：轉(zhuǎn)速 > 8000 r/min5 分析步驟5.1 試樣提取稱取1 g （精確至

4、0.01 g）試樣于50 mL 離心管中，加入20 mL 水，超聲提取 20 min，8000 r/min離心10 min。上清液轉(zhuǎn)移至25 mL 容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，過水相微孔濾膜（0.45呵），取續(xù)濾液，待測。5.2儀器參考條件5.2.1色譜柱：Ci8柱，4.6 mm X 250 mm 5 陶 或同等性能的色譜柱。522流動(dòng)相：甲醇 C磷酸二氫鉀溶液(0.02 mol/L , pH 3.7) = 8:925.2.3 流速：1.0 mL/min5.2.4檢測波長：273 nm5.2.5 柱溫：30 °C5.2.6進(jìn)樣量：10譏5.3標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作將曲酸標(biāo)準(zhǔn)系列工作液注入

5、高效液相色譜儀中，測定組分的峰面積。以相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)工作液的濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。5.4試樣溶液的測定將試樣溶液注入高效液相色譜儀中，得到相應(yīng)的峰面積。試樣中目標(biāo)化合物色譜峰的保留時(shí)間與相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)色譜峰的保留時(shí)間相比較，變化范圍應(yīng)在土2.5%之內(nèi)。根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到待測試樣溶液中組分的濃度。6空白試驗(yàn)除不加試樣外，均按試樣同法處理。應(yīng)確認(rèn)不含有干擾待測組分的物質(zhì)。7結(jié)果計(jì)算試樣中曲酸的含量按式(1)計(jì)算:c V 1000 m 1000式中:X試樣中曲酸的含量，mg/kg ;c試樣溶液中曲酸的濃度，mg/L ;V試樣定容體積，mL ;m 試樣質(zhì)量， g；1000 單位換算。計(jì)算結(jié)果

6、以重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的算術(shù)平均值表示。曲酸含量mg/kg時(shí)，計(jì)算結(jié)果保留三位有效數(shù)字；曲酸含量v 1 mg/kg時(shí)計(jì)算結(jié)果保留兩位有效數(shù)字。8 精密度在重復(fù)性條件下獲得的兩次獨(dú)立測定結(jié)果的絕對差值不得超過算術(shù)平均值的10%。9 檢出限和定量限取樣量為1 g,定容體積為25mL時(shí)，定量限為2.5 mg/kg，檢出限為1.0 mg/kg。附錄A曲酸相關(guān)信息表A.1曲酸名稱、CAS號、分子式、分子量、結(jié)構(gòu)式名稱CAS號分子式分子量結(jié)構(gòu)式曲酸Kojic acid501-30-4C6H 6。4142.11HOTH附錄B標(biāo)準(zhǔn)色譜圖8.007.00 -6.00 -5.00 -4.00 -Am 3.00 -2.00 -1.00 -0.00 -1.000.001.002.003.004.006.007.008.009.00分鐘圖B.1曲酸標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖（濃度： 1.0 mg/L）本方法負(fù)責(zé)起草單位：中國食品藥品檢定研究院