生脈散對實驗性高脂血癥大鼠血液流變學(xué)及抗氧化作用的實驗研究

1、!1478!󰀁󰀁生脈散對實驗性高脂血癥大鼠血液流變學(xué)及抗氧化作用的實驗研究廖澤云,姜錦林,劉󰀁紅2(1.湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院,湖北恩施445000;2.湖北民族學(xué)院醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院,湖北恩施445000)摘󰀁要:目的:觀察古方生脈散口服液對實驗性高脂血癥大鼠的血液流變學(xué)及抗氧化作用的影響。方法:將Wistar大鼠45只隨機分為對照組、高脂血癥模型組(以下簡稱模型組)和生脈散組,喂飼法建立高脂血癥大鼠模型,灌胃給藥4周,測定每組大鼠血脂成分、血液流變指標(biāo)和氧自由基的變化。結(jié)果:與對照組比較,模型組大鼠血中膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)

2、、低密度脂蛋白(LDL-C)升高,脂質(zhì)過氧化物(MDA)含量增加、超氧化物歧化酶(SOD)及谷光甘肽過氧化物酶(GSH-PX)活性明顯降低,血液流變學(xué)異常;與模型組比較,生脈散組大鼠血漿中TC、TG值明顯降低,高密度脂蛋白(HDL-C)升高,MDA含量減少,SOD及GSH-PX活性增強,血液黏度、紅細胞和血小板聚集能力明顯降低。結(jié)論:古方生脈散口服液能夠調(diào)節(jié)高脂血癥大鼠血脂代謝、改善血流狀態(tài)、清除氧自由基,對高脂血癥和心血管系統(tǒng)疾病有一定的治療作用。關(guān)鍵詞:生脈散;血液流變;氧自由基;高脂血癥中圖分類號:R285.5󰀁󰀁文獻標(biāo)識碼:B󰀁ϗ

3、041;文章編號:1000-1719(2007)10-1478-02EffectsofTraditionalSHENGMAISANonSerumLipidandBloodRheology&OxygenFreeRadicalofHyperlipidemiaModelRatsLIAOZe󰀁yun1,JIANGJin󰀁lin2,LIUHong1(1.MedicalSchoolofHubeiInstituteforNationalities,Enshi445000,Hubei,China;2.TheAffiliatedHospitalofMedicalSchoo

4、lofHubeiInstituteforNationalities,Enshi445000,Hubei,China)󰀁󰀁Abstract:Objective:TostudythepreventiveandhealtheffectsofSHENGMAISANonhyperlipidemia.Methods:45Wistarratsweredividedintothreegroups:controlgroup,modelgroupandShengmaisangroup.Wistarratswerefedrespectivelywithstandarddiet,15w

5、eekslater,tomeasureserumlipid,bloodrheologyandoxygenfreeradicalinrats.Result:Attheendofexper󰀁menti,theserumTC,TGandLDL-Clevelsofmodelgroupswerehigherthanthecontrolgroups,thequalityofMDAwerehigh󰀁er,theactivityofSODandGSH-PXwerelower,bloodrheologyweresignificantlychanged.theserumTCandT

6、GlevelsofSHENGMAISANgroupweresignificantlylowerthanthemodelgroup,HDL-Cwashigher,thequalityofMDAwerelower,theactivitiesofSODandGSH-PXwerehigher,bloodviscosity,theabilityofRBCandplateletaggregationweresignificantlylower.Conclusion:SHENGMAISANcanregulatehyperlipidemiaratsserumlipidandlipoprotein,improv

7、ehermorrheology,cleanoxy󰀁genfreeradica,ltherewerepreventiveandhealtheffectsofTraditionalSHENGMAISANonhyperlipidemiaandcardiovasculardisease.󰀁󰀁Keywords:SHENGMAISAN;bloodrheology;oxygenfreeradica;lhyperlipidemia󰀁󰀁古方󰀂生脈散 乃中醫(yī)名方,功能主治:益氣生津、養(yǎng)心補肺,臨床上常用于治療氣陰兩虛患

8、者,有大補元氣、固脫復(fù)脈的功效。主要由人參、麥冬、五味子組成,其有效成分為人參皂苷、麥冬皂苷、麥冬黃酮、五味子素等,有多種藥理作用。有研究表明,生脈散可以改變動物血脂成分及脂蛋白組分,影響血液流變學(xué)指標(biāo),并且有一定的抗氧化能力1-3。本實驗通過高脂血癥大鼠動物模型,觀察了生脈散口服液對脂質(zhì)水平異常的動物個體在調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、抗脂質(zhì)過氧化損傷及血液流變等方面的影響。1󰀁材料與方法1.1󰀁主要試劑和儀器󰀁TC、TG試劑盒由美國波音特提供;HDL-C試劑盒由上海波亞提供;MDA、SOD及收稿日期:2007-05-24基金項目:湖北省衛(wèi)生廳資助項目(JXI

9、B120)作者簡介:廖澤云(1965-),男(土家族),湖北恩施人,副教授,碩士,主要從事中藥藥理基礎(chǔ)研究。GSH-PX試劑盒均由南京建成生物工程研究所提供;二磷酸腺苷(ADP)系Sigma公司產(chǎn)品;AEROSET09D05-01全自動生化分析儀(美國),756型紫外分光光度計(上海分析儀器總廠),TL-16G型高速冷凍離心機(上海實驗儀器廠生產(chǎn)),全自動血液流變快速分析儀(重慶大學(xué)維多生物工程研究所產(chǎn)品)。1.2󰀁藥品󰀁生脈散由黨參、麥冬、五味子組成,所有藥物均來自湖北民族學(xué)院附屬醫(yī)院中藥房,并由醫(yī)學(xué)中藥制劑室按傳統(tǒng)方法煎制成含生藥2g/mL的水煎液備用。1.

10、3󰀁實驗動物󰀁Wistar大鼠45只,雄性,離乳2周齡,體重3040g,由湖北省實驗動物中心提供。1.4󰀁大鼠高脂血癥模型3󰀁平衡喂養(yǎng)1周后隨機分為對照組、模型組、生脈散組。對照組喂以標(biāo)準飼料(由湖北省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物飼養(yǎng)中心提供),模型組、生脈散組均喂以在標(biāo)準飼料中添加1.5%膽固醇、10%豬油、5%蛋黃和0.5%膽酸鈉的高脂飼料,其中對照組、模型組飲用自來水,生脈散組飲用20%生脈󰀁󰀁!1479!LDL-C的影響󰀁15周飼養(yǎng)后,與對照組比較,模型組大鼠TC、TG和LDL-C明顯

11、升高(P<0.01);與模型組比較,生脈散組大鼠TC、TG、LDL-C的水平明顯降低(P<0.05),HDL-C明顯升高(P<0.01)。見表2。表2生脈散對高脂血癥模型大鼠TGTCHDL-C及LDL-C的影響(mmol/L,x󰀂s,n=15)組別正常組模型組生脈散組TC4.530.186.100.56*5.050.30TG0.910.13*1.320.26散水,實驗室溫度為(202)#。按上述要求持續(xù)喂養(yǎng)15周后,取血進行檢測并鏡下尸檢觀察主動脈粥樣變化。1.5󰀁測定指標(biāo)和方法󰀁(1)血脂:TC采用膽固醇脂酶比色法測定,TG采

12、用脂肪酶比色法測定,HDL-C采用PEG6000沉淀法測定,LDL-C則由公式法推出(LDL-C=TC-HDL-C-14/5TG)。(2)氧自由基:采用硫代巴比妥酸顯色法檢測MDA含量,黃嘌呤氧化酶法測定SOD,二硫代二硝基苯甲酸法測定GSH-PX。(3)血液流變學(xué)指標(biāo)檢測:取紅細胞聚集指數(shù)(EAI),紅細胞變行指數(shù)(ERI),纖維蛋白原(FIB),全血黏度(󰀁b)取高切值200s-1、低切值3s-1,血漿黏度(󰀁p),在血液高速離心后高切變率下檢測值做統(tǒng)計學(xué)處理。血小板聚集功能(PAG)采用枸椽酸鈉抗凝血劑取富含血小板血漿(PRP)和貧血血漿(PPP),以AD

13、P為誘聚劑按比濁法測定。1.6󰀁數(shù)據(jù)分析󰀁實驗數(shù)據(jù)采用SPSSFORWINDOWS10.0軟件進行t檢驗統(tǒng)計處理。2實驗結(jié)果2.1󰀁生脈散對模型大鼠體重的影響󰀁15周飼養(yǎng)后,動物體重的變化主要表現(xiàn)在第10周以后,組間差異比較具有統(tǒng)計學(xué)意義。模型組和生脈散組大鼠體重與對照組比較均明顯升高(P<0.01),而生脈散組大鼠體重又明顯低于模型組且組間差異顯著(P<0.01),見表1。表1󰀁生脈散對模型大鼠體重的影響(󰀂xs,n=15)組別正常組模型組生脈散組1周(g)3934144339周(g)

14、22111*25213*24212HDL-C1.070.091.120.171.390.17LDL-C0.790.15*1.830.300.930.141.520.27󰀁󰀁注:與對照組比較,*P<0.01;與模型組比較,P<0.05,P<0.01。2.3󰀁生脈散對模型大鼠SODMDA及GSH-PX的影響󰀁經(jīng)過15周喂養(yǎng)后,與對照組比較,模型組MDA含量顯著升高,SOD、GSH-PX活性明顯降低(P<0.01);與模型組比較,生脈散組MDA含量明顯減少,SOD、GSH-PX活力明顯增強(P<0.05)。

15、見表3。表3󰀁生脈散對模型大鼠SODMDA及GSH-PX的影響(n=15,x󰀂s)組別正常組模型組生脈散組MDA(nmol/mL)4.780.436.460.69*5.510.48SOD(Nu/mL)325.9041.36*204.8033.68GSH-PX(U/mL)71.3016.2962.6611.78*68.1011.91267.7032.01󰀁󰀁注:與對照組比較,*P<0.01;與模型組比較,P<0.05,P<0.01。11周(g)24113*26914*2481115(g)30913*34416319

16、14󰀁󰀁注:與對照組比較,*P<0.01;與模型組比較,P<0.01。2.2󰀁生脈散對高脂血癥模型大鼠TGTCHDL-C及組別正常組模型組生脈散組󰀁b(map!s)H󰀁bb5.530.436.981.16*11.081.38*14.281.832.4󰀁生脈散對高脂血癥模型大鼠血液流變學(xué)的影響󰀁模型組大鼠的全血黏度、血漿黏度、PAG、EAI、纖維蛋白原升高,ERI降低,與對照組比較組間差異顯著;與模型組動物組比較,生脈散組均能不同程度恢復(fù)血液流變學(xué)的各項指標(biāo),且生脈散組和對

17、照組組間比較沒有顯著差異性。見表4。PAG(%)FIB(g/L)3.810.56*4.670.89表4󰀁生脈散對模型大鼠血液流變學(xué)的影響(x󰀂s,n=15)󰀁p(mpa!s)1.870.492.760.52*2.120.34ERI0.760.150.530.21*0.680.15EAI4.190.22*5.060.6535.935.6451.337.53*42.274.475.820.5611.422.074.070.584.350.36󰀁󰀁注:與對照組比較,*P<0.01;與模型組比較,P<0.01,

18、P<0.05。3󰀁討󰀁論對高脂血癥動物模型組各項指標(biāo)的測定表明,血TC、TG和LDL-C水平顯著高于對照組,鏡下觀動脈粥樣化(AS)形成,說明動物模型的建立成功,用含高膽固醇高脂飼料飼養(yǎng)動物,已經(jīng)造成了大鼠心血管系統(tǒng)組織細胞的損傷或代謝紊亂。生脈散組結(jié)果顯示,藥物降低高脂飲食動物TC、TG及LDL-C,而使HDL-C升高。由于TC、TG的升高是形成高脂血癥的重要5-6因素,血脂升高、血液流速緩慢,可引起血管內(nèi)皮細胞損傷和灶狀脫落,血管壁通透性升高,血漿脂蛋白得以進入內(nèi)膜,引起巨噬細胞的清除反應(yīng)和血管平滑肌細胞(SMC)增生,導(dǎo)致AS形成,血流循環(huán)不暢,供血供養(yǎng)不足,直接造成心血管系統(tǒng)損傷7。實驗結(jié)果顯示,高脂血癥模型組的血清和心肌組織中MDA明顯升高,SOD、GSH-PX明顯降低,這說明氧自由基在高脂血癥中直接參與了對心血管系統(tǒng)損傷,生脈散能明顯抑制因高脂血癥導(dǎo)致的脂質(zhì)過氧化,減少MDA含量,增強SOD和GSH-PX活力,表現(xiàn)出強抗氧化能力。血液流變學(xué)異常導(dǎo)致正常血液循環(huán)紊亂,使血管內(nèi)皮細胞與血液有形成分之間的相互作用方式發(fā)生了改變,尤其是在血液高黏度狀態(tài)下,血小板、白細胞的,胞