中科院1999年攻讀碩士學位研究生入學試題

1、中科院1999年攻讀碩士學位研究生入學試題生物化學與分子生物學生物類考研專業(yè)課資料 2009-01-27 14:59:12 閱讀198 評論0 字號：大中小 一、是非題：20題，共20分。答“是”寫“+”，答案“非”寫“一”，寫在題后的 中。1、單克隆和多克隆抗體的差異在于制備方式的不同。2、氣體分子，如NO，是可以作為信號分子在生物體內(nèi)行使功能的。3、二硫鍵和蛋白質(zhì)的三級結(jié)構(gòu)密切有關(guān)，因此沒有二硫鍵的蛋白質(zhì)就只有一級和二級結(jié)構(gòu)。4、所有信號肽的位置均在新生肽的N端。5、對于可逆性抑制劑的抑制作用，抑制50%時的抑制劑濃度等于其抑制解離常數(shù)Ki。6、在酶的催化反應中，HIS殘基的咪唑基既可以起

2、堿催化作用，也可以起酸催化作用。7、蛋白激酶對蛋白質(zhì)磷酸化的部位除了Ser、Thr、和Tyr外，還有His、Cys、Asp等。8、維生素B1的化學名稱為硫胺素，它的磷酸酯為脫羧輔酶。9、線粒體內(nèi)膜與外膜的結(jié)構(gòu)完全不同，它們是完全分開互不接觸的兩種膜。10、細胞色素氧化酶與細胞色素b-c1復合物的三維空間結(jié)構(gòu)已得到闡明。11、氧化磷酸化也是可逆的。12、嗜鹽菌視紫紅蛋白與視網(wǎng)膜視紫紅蛋白不同，前者經(jīng)光照后導致跨膜質(zhì)子梯度，后者經(jīng)光照后導致跨膜鈉離子流動。13、端粒酶telomerase是一種反轉(zhuǎn)錄酶。14、轉(zhuǎn)錄不需要引物，而反轉(zhuǎn)錄必須有引物。15、DNA復制時，前導鏈合成方向是53，后隨鏈則是3

3、5生成。16、人基因組的堿基對數(shù)目為2.9×109，是自然界最大的。17、細胞器DNA的復制并不限于S期，可在細胞周期的各期中進行。18、基因轉(zhuǎn)錄的終止信號應位于被轉(zhuǎn)錄的序列以外的下游區(qū)。19、真核生物細胞核內(nèi)不均一RNA(hnRNA)分子量雖然不均一，但其半衰期長，比胞質(zhì)成熟mRNA更為穩(wěn)定。20、DNA復制是在起始階段進行控制的，一旦復制開始，它即進行下去，直到整個復制子完成復制。二、選擇題：25題，每題一分，共25分。1、生長調(diào)節(jié)素omtomedin是 A胰島素 B生長激素 C胰島素樣生長激素和 D表皮生長因子2、生物體內(nèi)氨的轉(zhuǎn)運主要通過 A尿素循環(huán) B谷氨酰胺 C尿酸3、識別

4、信號肽的是一種信號識別顆粒，它是 A糖蛋白 B信號肽 C脂蛋白 D核蛋白4、微管蛋白的異二聚體上的結(jié)合位點是 AGTP BATP CcAMP DADP 5、基因剔除knock out的方法主要是用來闡述 A基因的結(jié)構(gòu) B基因的調(diào)控 C基因的表達 D基因的功能6、胰凝乳蛋白酶的活性中心中構(gòu)成一個電荷中繼網(wǎng)的三個氨基酸殘基是AHis，Arg，Glu BSer，Lys，Asp CSer，His，Asp DSer，Arg，Glu7、MWC模型和KNF模型的一個區(qū)別是AMWC模型可以解釋正協(xié)同性，而KNF模型不能 BMWC模型可以解釋負協(xié)同性，而KNF模型不能CMWC模型不能解釋正協(xié)同性，而KNF模型能

5、 DMWC模型不能解釋負協(xié)同性，而KNF能8、琥珀酸脫氫酶所需要的輔酶基是 ACoA BFAD CNAD+ DNADP+9、對于一個遵守米氏方程的酶，當活性到達最大反應速度的99%時，底物濃度是其Km值的倍數(shù)為A10 B100 C90 D99 10、一個酶有多種底物，判斷其底物專一性強弱應依據(jù)參數(shù) AKcat BKm CKcat/Km11、NO的生成主要來自 A組氨酸 B賴氨酸 C精氨酸 D谷氨酸胺12、哺乳動物細胞質(zhì)膜的標志酶是 A鈉鉀ATP酶 B細胞色素氧化酶 CH+-ATP D谷氨酸胺13、輔酶Q是一種化合物，它含 A硫胺素 B異咯嗪結(jié)構(gòu) C異戊二烯單位的醌類 D鐵、硫14、典型哺乳動物

6、細胞內(nèi)外的Na+，K+離子濃度A細胞內(nèi)Na+，K+均比細胞外高 B細胞內(nèi)Na+，K+均比細胞外低C細胞內(nèi)K+比細胞外高，Na+比細胞外低 D細胞內(nèi)Na+比細胞外高，K+比細胞外低15、當線粒體呼吸處于狀態(tài)4時，內(nèi)膜兩側(cè)的pH差可以到達A0.1PH單位 B1PH單位 C1.5PH單位 D>2PH單位 16、端粒酶telomerase是一種蛋白質(zhì)-RNA復合物，其中RNA起A催化作用 B延伸作用 C引物作用 D模板左右17、新生多肽鏈的信號肽與以下哪種物質(zhì)識別，從而引導肽鏈進入內(nèi)質(zhì)網(wǎng)A核糖體 B核糖體亞基 C信號肽酶 D信號肽識別顆粒SRP18、真核生物mRNA帽子結(jié)構(gòu)中，m7G與多核苷酸鏈

7、通過三個磷酸基連接，其方式是A2-5 B3-5 C3-3 D5-5 19、與核酸中嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)上的原子來源都有關(guān)的氨基酸是A丙氨酸 B天冬氨酸 C亮氨酸 D甲硫氨酸 20、大腸桿菌mRNA上起始密碼子上有的SD序列可與某種RNA的3端配對，然后啟動多肽鏈生成，這種RNA是 AtRNA BSnRNA C16srRNA D23srRNA 21、染色質(zhì)DNA的堿基可被甲基化，DNA甲基化的作用是A關(guān)閉某些基因 B活化某些基因 C可關(guān)閉某些基因，同時可以活化另一些基因 D與基因表達的調(diào)節(jié)無關(guān)22、遍在蛋白ubiquitin廣泛分布于各類細胞，它與蛋白質(zhì)結(jié)合后，造成A蛋白質(zhì)更加穩(wěn)定 B蛋白質(zhì)有效轉(zhuǎn)運

8、C蛋白質(zhì)迅速降解 D蛋白質(zhì)固定在細胞膜上23、DNA損傷的光修復作用是一種高度專一的修復方式，它只作用于紫外線引起的A嘧啶二聚體 B嘌呤二聚體 C嘧啶-嘌呤二聚體24、噬菌體侵入寄主細胞后，決定它進入裂解循環(huán)的基因產(chǎn)物是 AN BQ CCro DCI25、環(huán)狀的線粒體DNA進行復制的方法采用 A多起點雙向 B滾環(huán) CD-環(huán) D單起點雙向三、填空題；12題，共25分，一空一分。1、糖蛋白中糖苷鏈主要有兩類，即_和_。2、氨基酸氨基中的一個H原子可以被烴基取代，稱為烴基化反應，反應生成_或簡稱_，此反應可被用來鑒定多肽或蛋白質(zhì)的_末端氨基酸。3、酶與配基結(jié)合實驗的Scatchard作圖表現(xiàn)為一種罩

9、形曲線，說明酶與配基結(jié)合具有_。4、TPCK是通過對_殘基的烷化而專一的對_酶進行親和標記。5、維生素D原和膽固醇的化學結(jié)構(gòu)中都具有_的結(jié)構(gòu)。6、磷酸化酶激酶是一種依賴_的蛋白激酶。7、線粒體氧化磷酸化呼吸控制的定量表達是_。8、與G蛋白偶聯(lián)的質(zhì)膜受體均有_的結(jié)構(gòu)。9、線粒體內(nèi)膜胞漿側(cè)的膜電位比基質(zhì)側(cè)_。10、在反密碼子與密碼子的相互作用中，反密碼子IGA可是別的密碼子有_、_、_。11、參與DNA損傷切除修復的酶主要有_、_、_、_。12、轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子的結(jié)合DNA功能域的結(jié)構(gòu)有鋅指，_、_、_等。四、問答題：5題，共30分。1、一個蛋白質(zhì)的氨基酸序列顯示，其內(nèi)部不同序列位置存在兩個甲硫氨酸殘

10、基，試問：用什么試劑，可把此蛋白質(zhì)裂解成片段？如果裂解的片段分子量均在10000以上，且差距較大，可用何種方法別離？用什么簡單方法，可以測定這些片斷的分子量？如何證明它們都是從一個蛋白質(zhì)分子裂解下來的片段？如何證明它們在該蛋白質(zhì)內(nèi)的排列次序？2、簡述PH對酶反應的影響及其原因。3、試述物質(zhì)跨膜的被動運送，促使擴散和主動運送的基本特點。4、舉出兩種蛋白質(zhì)序列與其基因序列存在的不對應關(guān)系及其可能原因。5、用生物技術(shù)能實現(xiàn)從雞蛋中別離人的干擾素么？為什么？中科院1999年攻讀碩士學位研究生入學試題答案一、判斷題1、- 制備方式不同，其根本的區(qū)別是反應性質(zhì)不同?？疾禳c：單克隆抗體的概念。2、+ 考察點

11、：信號及信號轉(zhuǎn)導。相關(guān)內(nèi)容：信號轉(zhuǎn)導的分類。3、- 考察點：蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)層次。相關(guān)內(nèi)容：結(jié)構(gòu)域，單體蛋白有幾個獨立的肽段以SS連接的小分子蛋白。4、- 考察點：信號肽學說，相關(guān)內(nèi)容：蛋白質(zhì)修飾及轉(zhuǎn)運。5、- 考察點：可逆抑制競爭性抑制、非競爭性抑制。相關(guān)內(nèi)容：抑制反應的米氏方程、特點。6、+ 考察點：酶催化的高效性。教材內(nèi)容：His殘基的咪唑基，其解離常數(shù)為6，在中性條件下一般以酸性形式存在，另一半以堿性形式存在。即咪唑基即可作為質(zhì)子供體，又可作為質(zhì)子受體在催化中發(fā)揮作用。因此咪唑基是一個最有效最活潑的一個催化功能基團；相關(guān)內(nèi)容：酶催化的特點。7、+ 考察點：磷酸化的部位。要有-OH基團。相關(guān)

12、內(nèi)容：磷酸化的概念。8、+ 考察點：維生素B1。教材內(nèi)容：維生素B1，又稱為硫胺素，廣泛分布在植物中，特別是種子外皮和胚芽與ATP作用轉(zhuǎn)變?yōu)榻沽姿崃虬匪豑PP，是催化丙酮酸和-酮戊二酸脫羧的輔酶。相關(guān)內(nèi)容：維生素B1的結(jié)構(gòu)。9、- 考察點：線粒體的膜結(jié)構(gòu)。教材內(nèi)容：細胞色素氧化酶與細胞色素的作用、結(jié)構(gòu)。10、- 考察點：生物化學研究進展。相關(guān)內(nèi)容：細胞色素氧化酶與細胞色素的作用、結(jié)構(gòu)。11、- 12、+ 考察點：視紫紅蛋白。相關(guān)內(nèi)容：質(zhì)子勢能。13、+ 考察點：端粒酶的性質(zhì)。教材內(nèi)容：每條染色體末端進化形成了DNA序列及能夠識別和結(jié)合端粒序列的蛋白質(zhì)，這一種核糖核蛋白由RNA和蛋白質(zhì)組成，稱為

13、端粒酶。具有逆轉(zhuǎn)錄酶的性質(zhì)，其中RNA是富含G序列的模板，因此可以彎過來作為引物復制5末端。14、+ 考察點：轉(zhuǎn)錄與反轉(zhuǎn)錄。教材內(nèi)容：反轉(zhuǎn)錄酶催化的DNA合成反應要求有模板和引物，以四種脫氧核苷三磷酸作為底物，此外，還需要適當?shù)年栯x子Mg2+、Mn2+和復原劑以保護酶蛋白中的巰基DNA鏈的延長方向為53。RNA聚合酶需要以四種核苷三磷酸作為底物，并需要適當?shù)腄NA作為模板，Mg2+能促進聚合反應，RNA鏈的延長方向為53，反應是可逆的，但焦磷酸的水解可推動反應趨向聚合。相關(guān)內(nèi)容：DNA的復制過程。15、- 考察點：前導鏈與滯后鏈。教材內(nèi)容：以復制叉向前移動的方向為標準，一條模板鏈是3 5走向，

14、在其上DNA能以53方向連續(xù)合成，稱前導鏈。另一條模板鏈是53走向，在其上DNA合成也是以53方向，但與復制叉移動的方向正好相反，所以，隨著復制叉移動形成許多不連續(xù)的片段，最后連成一條完整的DNA鏈，稱滯后鏈。相關(guān)內(nèi)容：岡崎片段的概念及其大小變化。16、- 考查點：基因組的概念。教材內(nèi)容：哺乳動物包括人類的C值均為109數(shù)量級人為2.9×109，人們很難置信兩棲類動物的基因組的功能比哺乳動物更復雜。相關(guān)內(nèi)容：C值概念與C值矛盾。17、+ 考察點：細胞器的增殖。18、- 考察點：轉(zhuǎn)錄的終止。教材內(nèi)容：在轉(zhuǎn)錄過程中，RNA聚合酶沿著模板鏈向前移動，它只能感受正在轉(zhuǎn)錄的序列，而不能感受到未

15、轉(zhuǎn)錄的序列，即終止信號應位于已經(jīng)轉(zhuǎn)錄的序列中。所有原核生物的終止子在終止之前有一個回文結(jié)構(gòu)，其產(chǎn)生的RNA可形成莖環(huán)構(gòu)成發(fā)卡結(jié)構(gòu)，該結(jié)構(gòu)可使聚合酶減慢移動或暫時停止RNA的合成。相關(guān)內(nèi)容：轉(zhuǎn)錄全過程與轉(zhuǎn)錄因子。19、- 考察點：hnRNA的概念，特性。教材內(nèi)容：真核生物mRNA的原初轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物是分子量極大的前體，在核內(nèi)加工過程中形成分子大小不等的中間物稱hnRNA。hnRNA的堿基組成與總的DNA的組成類似，因此，又稱為類似DNA的RNAD-RNA，它們在核內(nèi)迅速合成又迅速降解，其半衰期短，比胞質(zhì)成熟mRNA更不穩(wěn)定。不同細胞類型的hnRNA半衰期不同，一般在幾分鐘至1小時左右，而胞質(zhì)成熟mRN

16、A的半衰期一般在1-10小時，神經(jīng)細胞的mRNA的半衰期最長，可達數(shù)年。相關(guān)內(nèi)容：真核mRNA前體hnRNA的加工。20、+ 考察點：DNA復制的調(diào)控。教材內(nèi)容：基因組能獨立進行復制的單位稱復制子replicon，每個復制子都含控制復制起始的起點origin，可能還會有終止復制的終點termionus。復制是在起始階段進行調(diào)控的，一旦開始，它即繼續(xù)下去，直至整個復制子完成復制。相關(guān)內(nèi)容：轉(zhuǎn)錄、翻譯的調(diào)控。二、選擇題1、C ；2、B 考察點：氨的轉(zhuǎn)運、尿素循環(huán)。教材內(nèi)容：谷氨酰胺是中性的無毒物質(zhì)，容易透過細胞膜。是氨的主要轉(zhuǎn)運形式。3、D考察點：信號肽引導的蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運。教材內(nèi)容：信號識別顆粒SR

17、P是一種核糖核酸蛋白復合體，它能識別正在合成并將通過內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的蛋白質(zhì)的自由核糖體，它與這類核糖體的信號肽結(jié)合后，肽鏈合成暫時終止，SRP對于正在合成的其它蛋白質(zhì)無影響。4、A 考察點：微管蛋白的成分、結(jié)構(gòu)。教材內(nèi)容：-微管蛋白和-微管蛋白形成的微管蛋白異二聚體，是微管裝配的基本單位，微管蛋白異二聚體含有GTP的兩個結(jié)合位點，二價陽離子亦能結(jié)合于微管蛋白二聚體上。5、D 考察點：基因剔除的概念。相關(guān)內(nèi)容：基因的研究方法分類。6、C 考察點：胰凝乳蛋白酶的結(jié)構(gòu)。教材內(nèi)容：胰凝乳蛋白酶chymoriypsin是研究的最早最徹底的一個酶，它的活性中心由Ser105His57Asp102組成，分子量為2

18、5000。7、D 考察點：別構(gòu)酶調(diào)節(jié)酶活性的機理。教材內(nèi)容：序變模型KNF模型主張酶分子中的亞基結(jié)合小分子物質(zhì)底物或調(diào)節(jié)物后，亞基的構(gòu)象逐個變化。因此，亞基有各種可能的構(gòu)象狀態(tài)。當?shù)孜锘蛘{(diào)節(jié)物濃度上升，升到可與其中一個亞基牢固的結(jié)合時，這時，剩下的亞基就會改變構(gòu)象，形成一個有活性的四聚體，給出S型動力學曲線。在序變模型中，既有正調(diào)節(jié)物分子的作用，又有負調(diào)節(jié)物分子的作用，第二種分子與酶的結(jié)合可能比第一種分子與酶的結(jié)合更緊密些。這取決于第一種分子結(jié)合所引起的形變。齊變模型MWC模型主張別構(gòu)酶有所得亞基或者全部是堅固緊密的，不利于結(jié)合底物的“T”狀態(tài)，或者全部是松散的，利于結(jié)合底物的“R”狀態(tài)。這

19、兩種狀態(tài)間的轉(zhuǎn)變對于每個亞基都是同步的，齊步發(fā)生的，“T”狀態(tài)中的亞基的排列是對稱的，變成“R”狀態(tài)后，蛋白亞基的排列仍是對稱的。正調(diào)節(jié)物如底物與負調(diào)節(jié)物的濃度比例決定別構(gòu)酶究竟處于何種狀態(tài)。當無小分子調(diào)節(jié)物存在時，平衡趨向于“T”狀態(tài)；當有少量底物時，平衡即向“R”狀態(tài)，當構(gòu)象轉(zhuǎn)變?yōu)椤癛”狀態(tài)后，又進一步增加了對底物的親和性，給出了S型動力學曲線。目前認為，齊變模型不適用于負協(xié)調(diào)效應。8、B 考察點：TCA循環(huán)。教材內(nèi)容：琥珀酸脫氫酶是TCA循環(huán)中唯一結(jié)合在線粒體內(nèi)膜上并直接與呼吸鏈聯(lián)系的酶。此酶為含鐵的黃素蛋白酶，除含F(xiàn)AD輔基外，還含有酸不穩(wěn)定的硫原子和非血紅素鐵，也稱鐵硫蛋白。9、D

20、考察點：米氏方程的應用。教材內(nèi)容：V=VmaxS/(Km+S)推出：V/Vmax=S/(Km+S)，可以推知：S=99Km，相關(guān)內(nèi)容：米氏方程的推導過程。10、B 考察點：Km 的應用。教材內(nèi)容：同一酶有幾種底物就有幾個Km 值。Km 值大笑表示酶和底物的親和力強弱，Km值笑表示酶和底物的親和力強，其中Km值最小的底物一般稱為該酶的最適底物或天然底物。11、C 考察點：氨基的轉(zhuǎn)化。教材內(nèi)容：NO的前體是精氨酸arginine，Arg，在NO合成酶NO systhase作用下，Arg水解成瓜氨酸，釋放NO，瓜氨酸在通過精氨酸代琥珀酸重新合成Arg。12、A 考察點：物質(zhì)的過膜轉(zhuǎn)運。相關(guān)內(nèi)容：物質(zhì)

21、的跨膜轉(zhuǎn)運的分類及特點。13、C 考察點：輔酶Q的結(jié)構(gòu)。相關(guān)內(nèi)容：輔酶Q是電子傳遞鏈中唯一的非蛋白組分，含有異戊二烯單位的醌單位。相關(guān)內(nèi)容：輔酶Q的功能，電子傳遞鏈的組分。14、C 考察點：Na+，K+ATP酶。教材內(nèi)容：Na+，K+ATP酶為分子Kdde四聚體22，其亞基約為95KD，是跨膜蛋白，在胞質(zhì)側(cè)有ATP酶活性位點，胞外側(cè)只有K+和專一抑制劑烏本苷的結(jié)合位點，亞基約為45KD的糖蛋白，Na+，K+ATP酶將Na+泵出，將K+泵入細胞內(nèi)，每水解1ATP向膜外泵出3Na+，向胞內(nèi)泵入2K+。相關(guān)內(nèi)容：細胞的跨膜電位。15、D 考察點：線粒體與氧化磷酸化。相關(guān)內(nèi)容：懸浮的線粒體既無可氧化的

22、底物又無ADP時為狀態(tài)I，氧氣利用極低。加入ADP后變?yōu)闋顟B(tài)，有短暫的呼吸刺激。加ADP后又加底物為狀態(tài)，ADP被耗盡，變?yōu)闋顟B(tài)。氧氣耗盡，線粒體無呼吸可言，為狀態(tài)。16、D 考察點：端粒酶的結(jié)構(gòu)、功能。17、D 考察點：信號肽假說。18、D 考察點：真核生物mRNA帽子的結(jié)構(gòu)。教材內(nèi)容：真核生物mRNA 5末端有一個特殊的帽子結(jié)構(gòu)，其組成為：5m7G5PPP5N1mP。相關(guān)內(nèi)容：真核生物mRNA帽子結(jié)構(gòu)的功能。19、B 考察點：嘌呤環(huán)和嘧啶環(huán)的碳架結(jié)構(gòu)。20、C 考察點：翻譯起始。教材內(nèi)容：對起始密碼子附近的核苷酸序列進行分析后，發(fā)現(xiàn)在距離起始密碼子上游5端約10bp處有一段富含嘌呤的序列S

23、-D序列，它與16SrRNA的3端核苷酸序列形成堿基互補，正是由于S-D序列與16SrRNA的3端核苷酸序列的這種相互作用，使得核糖體能區(qū)別起始信號AUG與編碼肽鏈中的Met密碼子AUG，正確的定位于mRNA上起始信號的位置。21、C 考察點：DNA甲基化對基因表達的影響。教材內(nèi)容：DNA甲基化的作用有：影響DNA與蛋白質(zhì)的相互作用與識別；改變DNA的構(gòu)象，如形成ZDNA等。22、C 考察點：遍在蛋白的功能。教材內(nèi)容：真核細胞的胞質(zhì)基質(zhì)中，有意復雜機制識別蛋白N端的不穩(wěn)定氨基酸信號，并準確的將它降解。泛素是其中之一，它是76氨基酸的小分子蛋白，有多種功能。23、A 考察點：光修復作用。教材內(nèi)容

24、：可見光激活了細胞內(nèi)的光裂合酶，使之與嘧啶二聚體結(jié)合，并將其分開，恢復為兩個單獨的嘧啶堿基。相關(guān)內(nèi)容：DNA損傷的修復。24、C 理由：噬菌體50個基因，其中決定噬菌體溶原與裂解的調(diào)節(jié)基因有6個：N、Q、Cro、c、c、c，其中Cro蛋白的功能是抑制溶原性阻遏蛋白c的生成，從而使噬菌體進入裂解循環(huán)。25、C 考察點：細胞器復制。相關(guān)內(nèi)容：D環(huán)復制的特點。三、填空題1、與Ser、Thr、Hyl的-OH連接的O-糖苷鏈、與Asn、Lys、Arg遠端氨基連接的N-糖苷鏈。2、二硝基苯基氨基酸、DNB氨基酸、氨基。3、正協(xié)同性。4、組氨酸、胰凝乳蛋白酶。5、環(huán)戊烷多氫菲。6、鈣離子。7、呼吸控制率。8

25、、7次跨膜。9、高。10、UCA UCC UCU。11、特異的核酸內(nèi)切酶 核酸外切酶 DNA聚合酶 DNA連接酶。12、螺旋-轉(zhuǎn)角-螺旋 螺旋-環(huán)-螺旋 亮氨酸拉鏈四、問答題1、考察點：蛋白質(zhì)的性質(zhì)、蛋白質(zhì)分析。題中的肽段降解得三段肽段。溴化氰cyanogen bromide它只斷裂Met殘基的羧端肽鍵。也可以選用糜蛋白酶或嗜熱菌蛋白酶，但其專一性不如溴化氰。可以用沉降速度法、凝膠過濾法、SDS-PAGE等將它們分開。用沉降速度法、凝膠過濾法加一個分子量標準，就可以測定片段的分子量。將酶切蛋白肽段與蛋白一起做凝膠電泳，計算肽段的分子量之和。與蛋白的分子量相等，就可以說明這些肽段就來自于該蛋白質(zhì)

26、。分別測定片段、蛋白質(zhì)的末端殘基，經(jīng)過比較，就可以依次確定肽段的排列順序。2、考察點：PH對酶活力的影響。大部分酶的活力受其環(huán)境PH的影響。在一定PH下，酶反應有最大速度，高于或低于這個PH，反應速度下降。通常稱此PH為酶反應的最適PHoptimum PH。它因底物種類、濃度、緩沖液的成分不同而不同具體的講，PH酶活力的影響主要在以下幾個方面：過酸、過堿會影響酶蛋白的構(gòu)象，甚至使酶失活PH改變不劇烈時，酶雖然不變性但活力受影響。原因是PH影響底物分子、影響酶分子的解離狀態(tài)及它們的結(jié)合狀態(tài)PH影響分子中另一些基團的解離，它們的離子化狀態(tài)與酶的專一性及酶分子的活性中心有關(guān)。3、考察點：物質(zhì)的跨膜運輸。三種物質(zhì)的跨膜運輸?shù)奶攸c有：被動運輸 物質(zhì)從高濃度的一側(cè)到底濃度的一側(cè)。物質(zhì)的運輸速度既依賴于膜兩側(cè)的運輸物質(zhì)的濃度差，由于被運輸物質(zhì)的分子量大小、電荷、在脂雙層中的溶解度等有關(guān)。促進擴散順濃度梯度擴散，有專一蛋白的結(jié)合。有飽和效應，對濃度差、在脂雙層中的溶解度等的依賴均不如被動運輸那么強烈。主動運輸 逆濃度梯度，由膜蛋白參與的耗能過程。特點有：有運輸物質(zhì)的專一性；運輸?shù)乃俣扔凶畲笾?；運輸過程有嚴格的方向性；被選擇性的抑制劑如烏本苷專一抑制；整個運輸過程需要提高大量的能量。