馬齒莧有效成分的提取及定量分析

1、馬齒莧有效成分的提取及定量分析         09-09-06 15:28:00     編輯：studa20                     作者：周春麗， 蘇虎， 王德解， 李玉萍【摘要】  目的提取馬齒莧中多糖、生物堿、多不飽和脂肪酸和黃酮有效成分及定量

2、，為研制治療糖尿病的功能性食品提供依據(jù)。方法分別采用不同有機(jī)溶劑提取方法提取有效成分。結(jié)果幾種有效物質(zhì)的含量由大到小依次為多糖、生物堿、黃酮、多不飽和脂肪酸。結(jié)論南昌地區(qū)馬齒莧中含有以上4種有效成分且生物堿含量比其他地區(qū)稍高。 【關(guān)鍵詞】  馬齒莧 有效成分 提取Abstract：ObjectiveTo extract and determine the contents active ingredients from polysaccharide, alkaloids, flavonoid material and polyunsaturated fatty acid of Por

3、tulace oleracea L. MethodsThe active ingredients were extracted in different organ solvent respectively. ResultsThe result showed that several active ingredients content existed in Rortulace olercaeal. The content order was subsequently polysaccharide, alkaloids, flavoinvid material, and polyunsatur

4、ated fatty acid. ConclusionThe result shows that four active ingredients really exist in Portulace oleracea L. in Nanchang and alkaloids in Nanchang are higher than the ones in other area.Key words：Portulace oleracea L.;  Active ingredients;   Extraction    馬齒莧Portulaca

5、 oleracea L.屬馬齒莧科(Portulacaceae)，一年生肉質(zhì)草本植物，是我國古老的菜藥兼用植物，在我國大部分地區(qū)均有分布，又名長命菜、五行草、瓜子菜、麻繩菜、五色莧、馬食菜等。馬齒莧以其豐富的營養(yǎng)、獨(dú)特的藥理作用以及菜藥兼用特性，早已被民間廣泛應(yīng)用于治療熱毒血痢、癰腫、疔瘡、蛇蟲咬傷和便血等疾病1，2，日益受到廣泛的研究?，F(xiàn)代科學(xué)研究也表明，馬齒莧含有大量維生素、礦物質(zhì)、不飽和脂肪酸、微量元素和豐富的檸檬酸、蘋果酸、氨基酸、去甲腎上腺素、多巴胺、強(qiáng)心苷、蒽醌類、香豆素、黃酮、生物堿等多種活性成分35，具有降血脂、降血糖、抗衰老、消炎抑菌、增強(qiáng)免疫等多種保健功能和疾病治療作用57

6、，被國家衛(wèi)生部認(rèn)定為藥食同源的保健功能食品之一，具有廣闊的開發(fā)前景。本實(shí)驗(yàn)對馬齒莧有效成分進(jìn)行提取和定量分析，以期為治療糖尿病的功能性食品的研制提供依據(jù)。1  器材與方法1.1  儀器與試劑LAMBDA 35 型紫外分光光度計(jì)，Heraeus 烘箱，Philips Comfort粉碎機(jī)，SORVALL Evolution RC型離心機(jī)，磁力攪拌器（SI VORTEX），通風(fēng)櫥，安捷倫6820型氣相色譜、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(RE-52AA)。    石油醚，氫氧化鉀，無水乙醇，尿素，10%硫酸，氨水，無水乙醇，氯仿均為國產(chǎn)分析純。1.2  材料

7、馬齒莧采自江西南昌一帶，將其于烘箱中在60烘干至恒重，粉碎，密封備用。1.3  步驟1.3.1  馬齒莧多糖的提取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：蒽酮硫酸法測定糖含量，標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：Y=0.584 3X+0.010 3(R2=0.997 1)。馬齒莧多糖的提取和測定8：準(zhǔn)確稱取馬齒莧粉末100 g，按照1:30(W:V)加入蒸餾水，水煎煮3次（1.5，1.0，0.5 h），過濾，合并3次提取液，濃縮提取液，冷卻后4 000 r/min離心15 min，取上清，以無水乙醇調(diào)制終濃度為75%，4靜置過夜，沉淀物再分別以無水乙醇、丙酮、乙醚回流洗滌，得灰白色粗多糖粉末，以適量蒸餾水溶解粉末

8、，置4冰箱備用。1.3.2  馬齒莧多不飽和脂肪酸的提取亞麻酸甲酯標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：利用安捷倫6820型氣相色譜制作標(biāo)準(zhǔn)曲線，采取標(biāo)準(zhǔn)品內(nèi)標(biāo)法。氣相色譜條件：前進(jìn)樣口溫度220，前檢測器溫度300，后檢測器溫度275，柱溫150保持時(shí)間1 min，以15/min升溫至200，以2/min升溫至250，保持5 min。載氣（N2）20ml/min，輔助氣（H2）30 ml/min，空氣（助燃?xì)猓?50 ml/min，進(jìn)樣量1l。標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：Y=2 196.9X+1 305.4(R2=0.981 6)。    馬齒莧不飽和脂肪酸的提取和測定9，10：稱取馬齒

9、莧干粉100 g，按14的體積比例加入400 ml石油醚，室溫?cái)嚢? h，4 000 r/min，4離心15 min，取上清液，揮發(fā)盡石油醚，得黏稠狀褐色油狀物，稱重，稱取1/4倍于油狀物的KOH，以380（W/V）的比例溶于無水乙醇中。加至油狀物中，攪拌，皂化反應(yīng)45 min。再在4反應(yīng)60 min。過濾，得透明溶液，濃縮回收乙醇，使乙醇含量不大于50%。加入等體積的蒸餾水，用濃鹽酸調(diào)至出現(xiàn)分層（pH 2.0左右）為止，取上層油相。70水浴制備含有一定比例（20%）尿素的乙醇溶液。按2.4倍濾液體積的比例加入油相中，70水浴攪拌使溶液呈均勻的透明相。置4冰箱放置6h，過濾或離心除去包合物，濃

10、縮回收乙醇。加入4倍于油狀物的蒸餾水稀釋，用1/3倍體積的氯仿萃取3次，揮發(fā)氯仿，得濃縮的多不飽和脂肪酸。1.3.3  馬齒莧生物堿的提取11稱取100 g馬齒莧粉末，加500 ml無水乙醇，40攪拌1 h。過濾，收集濾液，濾渣中加300 ml的無水乙醇，40攪拌1.5 h。過濾，收集濾液，濾渣中加300 ml的無水乙醇，40攪拌30 min。過濾，收集濾液，合并以上3次濾液。置旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中揮發(fā)盡乙醇，出現(xiàn)黑色浸膏。在浸膏中加50 ml 10%的硫酸溶解，過濾。用氨水調(diào)pH至10.0，加入10ml 飽和NaCl（36 g NaCl / 100 g）水溶液。用1/5倍體積于原溶液的氯仿

11、萃取5次，置通風(fēng)廚中將氯仿?lián)]發(fā)盡，10%乙醇溶解。1.3.4  馬齒莧黃酮的提取黃酮標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作12：標(biāo)準(zhǔn)曲線方程：Y=0.632 7X0.000 5(R2=0.998 2)。馬齒莧黃酮的提?。喝√崛《嗖伙柡椭舅岷蟮臍?jiān)s100 g，加75%乙醇400 ml，常攪拌1.5 h。4 000 r/min，室溫離心15 min。減壓濃縮至125 ml（1.25倍于殘?jiān)牧浚┖?，用去離子水稀釋6倍。按1/50（W/V）的比例加入NaCl，靜置2 d，會(huì)有絮狀殘?jiān)龀?。過濾，取上清液，揮發(fā)乙醇。用乙醚萃取后，在通風(fēng)廚中揮發(fā)盡乙醚，將出現(xiàn)黃色結(jié)晶。結(jié)晶用水加熱溶解，-20保存?zhèn)溆谩?.3.5  馬齒莧總提取物的提取稱取馬齒莧粉末20 g按150（w/v）的比例分