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1、2021/6/71磺胺嘧啶鈉在家兔體內(nèi)的磺胺嘧啶鈉在家兔體內(nèi)的藥物代謝動力學(xué)藥物代謝動力學(xué)2021/6/72【實(shí)驗(yàn)?zāi)康摹俊緦?shí)驗(yàn)?zāi)康摹繙y定磺胺嘧啶鈉測定磺胺嘧啶鈉(SD-NA)(SD-NA)單次快速單次快速靜脈注靜脈注射后在家兔體內(nèi)不同時間的血藥濃度,并求算動力射后在家兔體內(nèi)不同時間的血藥濃度,并求算動力學(xué)參數(shù)。學(xué)參數(shù)?!緦?shí)驗(yàn)原理】【實(shí)驗(yàn)原理】 SD-NA+NaNOSD-NA+NaNO2 2 重氮鹽重氮鹽+ +麝香草酚麝香草酚 偶氮化合物偶氮化合物 注意:注意:加亞硝酸鈉和加麝香草酚的順序不要顛倒!加亞硝酸鈉和加麝香草酚的順序不要顛倒!【實(shí)驗(yàn)器材】【實(shí)驗(yàn)器材】磺胺嘧啶鈉注射液,三氯醋酸,麝香草磺
2、胺嘧啶鈉注射液,三氯醋酸,麝香草酚之氫氧化鈉溶液,亞硝酸鈉溶液酚之氫氧化鈉溶液,亞硝酸鈉溶液, , 試管架,普通試管架,普通干燥試管,小漏斗,干燥試管,小漏斗,10ml10ml、5ml5ml、1ml1ml注射器,注射器,10ml10ml、5ml5ml移液管,濾紙,三棱針,移液管,濾紙,三棱針,721721分光光度計。分光光度計。【實(shí)驗(yàn)動物】【實(shí)驗(yàn)動物】家兔家兔 2 23kg3kgNaOH三氯醋酸三氯醋酸( (橙紅色橙紅色) )2021/6/73【實(shí)驗(yàn)方法】【實(shí)驗(yàn)方法】1.1.標(biāo)記試管標(biāo)記試管: :取取10ml10ml試管試管1818支,分為支,分為3 3排,每排排,每排6 6只,分別標(biāo)記只,分
3、別標(biāo)記0 05 5號。號。2.2.加三氯醋酸:在第加三氯醋酸:在第1 1排的試管各加排的試管各加7.8ml7.8ml。3.3.固定動物固定動物: :家兔稱重,裝入兔盒,固定其頭部。被毛,家兔稱重,裝入兔盒,固定其頭部。被毛,一側(cè)給藥,一側(cè)給藥,一側(cè)取血。一側(cè)取血。4.4.給藥前取血給藥前取血: : 0.2ml 0.2ml,取血前用,取血前用枸櫞酸鈉枸櫞酸鈉潤洗注射器!使三棱針潤洗注射器!使三棱針垂直于耳緣靜脈刺破血管,血液自然流出,用垂直于耳緣靜脈刺破血管,血液自然流出,用1ml1ml注射器注射器吸取血吸取血液液0.2ml0.2ml;注入加有;注入加有三氯醋酸三氯醋酸的第的第1 1排排0 0號
4、試管,充分搖勻,靜置。號試管,充分搖勻,靜置。5.5.給藥給藥: SD-NA : SD-NA 2ml/kg2ml/kg(0.4g/kg0.4g/kg),耳緣靜脈,單次快速),耳緣靜脈,單次快速, ,計時。計時。6.6.給藥后取血給藥后取血: : 藥后藥后5min5min、10min10min、15min15min、30min30min、45min45min,同同4 4法法取血。取血。7.7.過濾:待過濾:待0 05 5號試管液體分層后,分別過濾到對應(yīng)編號的第號試管液體分層后,分別過濾到對應(yīng)編號的第2 2排排試管。試管。2021/6/74【實(shí)驗(yàn)方法】【實(shí)驗(yàn)方法】8.8.顯色:取濾液顯色:取濾液4
5、.5ml4.5ml放入第放入第3 3排的試管,依次加排的試管,依次加亞硝酸鈉亞硝酸鈉0.5ml0.5ml,搖勻后加入搖勻后加入麝香草酚之氫氧化鈉麝香草酚之氫氧化鈉1ml1ml,搖勻后顯橙紅色。,搖勻后顯橙紅色。9.9.比色:用蒸餾水調(diào)零,于比色:用蒸餾水調(diào)零,于525nm525nm處檢測處檢測0 05 5號管的光密度。號管的光密度。1 15 5號管的實(shí)際號管的實(shí)際ODOD值為:值為:1 15 5號號ODOD值減去值減去0 0號管號管ODOD值值。10.10.查查標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線讀出各管的血藥濃度。橫坐標(biāo)為讀出各管的血藥濃度。橫坐標(biāo)為1 15 5號管的實(shí)際號管的實(shí)際ODOD值,縱坐標(biāo)為各管的血藥
6、濃度。值,縱坐標(biāo)為各管的血藥濃度。11.11.計算,由計算,由t t、C C用統(tǒng)計學(xué)方法算出用統(tǒng)計學(xué)方法算出a a、b b、r r值,代入方程值,代入方程lgC=a+btlgC=a+bt,求算藥動學(xué)參數(shù)。,求算藥動學(xué)參數(shù)。2021/6/75 lgCt= lgC0 + -ket/2.303由由lgC對對t做直線回歸,得方程做直線回歸,得方程: lgC= a + bt a=lgC0 b= =-ke/2.303 r相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù)K=-2.303b C0 =10a (g/L) t1/2=0.693/K(min) Vd=X0/C0(L) CL=VdK(L/min) AUC=C0 /K(g.min/L)
7、2021/6/76【實(shí)驗(yàn)結(jié)果】1.繪制表格繪制表格表表1 SD-NA藥動學(xué)參數(shù)測定結(jié)果藥動學(xué)參數(shù)測定結(jié)果給藥前給藥前5min5min10min10min15min15min30min30min45min45min OD(值值)血藥濃度血藥濃度對數(shù)濃度對數(shù)濃度2.繪制曲線:繪制曲線: 以時間為橫坐標(biāo),以時間為橫坐標(biāo),濃度濃度/對數(shù)濃度對數(shù)濃度為縱坐標(biāo),繪制為縱坐標(biāo),繪制SD-NA的藥時曲線,確定的藥時曲線,確定其其藥物代謝動力學(xué)類型藥物代謝動力學(xué)類型。3.寫出方程寫出方程 以以lgC對對t做直線回歸,得方程做直線回歸,得方程: lgC=a+bt ,r=?4.計算藥動學(xué)參數(shù)計算藥動學(xué)參數(shù) 2021
8、/6/77【討論】【討論】【結(jié)論】【結(jié)論】【注意事項(xiàng)】【注意事項(xiàng)】 1.1.防止污染防止污染! ! 2. 2.取血量及各種試劑的量要準(zhǔn)確!取血量及各種試劑的量要準(zhǔn)確! 3.3.試管中加入血液及試劑要立即搖勻!試管中加入血液及試劑要立即搖勻!2021/6/78家兔捉持、稱重、固定家兔捉持、稱重、固定 給藥前采血給藥前采血0.2ml(枸櫞酸鈉潤洗注射器)(枸櫞酸鈉潤洗注射器)另一側(cè)單次快速另一側(cè)單次快速ivSD-Na2ml/kg給藥后給藥后5、10、15、30、45min采血采血0.2ml取上清取上清過濾過濾至第二排試管至第二排試管比色比色:(525nm)蒸餾水調(diào)零蒸餾水調(diào)零第一排試管加入三氯醋酸第一排試管加入三氯醋酸7.8ml+血樣血樣0.2ml,混勻,靜置分層,混勻,靜置分層顯色:顯色:至第
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