實驗九-土壤微生物的分離與計數(shù)

1、1精選課件2精選課件一、實驗?zāi)康囊?、實驗?zāi)康?1、學(xué)習(xí)利用平板分離法從土壤分離微生物的基、學(xué)習(xí)利用平板分離法從土壤分離微生物的基 本操作。本操作。2、掌握微生物平板計數(shù)的方法。、掌握微生物平板計數(shù)的方法。3精選課件二、實驗原理二、實驗原理 稀釋到適量濃度稀釋到適量濃度 傾注或涂布平板傾注或涂布平板 培養(yǎng)培養(yǎng) 菌落計數(shù)菌落計數(shù) 4精選課件樣品充分混勻；樣品充分混勻；同一稀釋度三個以上重復(fù)，同一稀釋度三個以上重復(fù)，取平均值；取平均值；每個平板上的菌落數(shù)目合適，每個平板上的菌落數(shù)目合適，便于準(zhǔn)確計數(shù)。便于準(zhǔn)確計數(shù)。5精選課件一般用菌落形成單位（一般用菌落形成單位（colony forming uni

2、ts， CFU）來表示）來表示原樣品中的細(xì)胞數(shù)。原樣品中的細(xì)胞數(shù)。6精選課件7精選課件1、倒平板、倒平板2、土壤菌懸液的制備、土壤菌懸液的制備 四、實驗方法四、實驗方法 10g土樣土樣 + 90ml無菌水無菌水 振蕩振蕩20min3、梯度稀釋、梯度稀釋 取取1ml土壤菌懸液土壤菌懸液移入含移入含9ml無菌水的試管中，吹吸均勻，無菌水的試管中，吹吸均勻，為稀釋為稀釋10倍的樣品，依次進(jìn)行梯度稀釋倍的樣品，依次進(jìn)行梯度稀釋10-110-68精選課件4、涂布：取、涂布：取0.1ml適當(dāng)濃度的稀釋液涂布于相應(yīng)平板，每個適當(dāng)濃度的稀釋液涂布于相應(yīng)平板，每個 稀釋度做稀釋度做3個平行，個平行，靜置靜置10

3、分鐘。分鐘。9精選課件5、培養(yǎng)、培養(yǎng) 將細(xì)菌、真菌、放線菌培養(yǎng)基倒置于將細(xì)菌、真菌、放線菌培養(yǎng)基倒置于30培養(yǎng)箱中培養(yǎng)箱中培養(yǎng)培養(yǎng)3-5d。6、計數(shù)、計數(shù)7、挑菌（純化）挑菌（純化） 將培養(yǎng)后長出的單菌落數(shù)量、形態(tài)、培養(yǎng)特征進(jìn)行將培養(yǎng)后長出的單菌落數(shù)量、形態(tài)、培養(yǎng)特征進(jìn)行觀察，分別挑取單菌落于相應(yīng)平板上劃線、分離，觀察，分別挑取單菌落于相應(yīng)平板上劃線、分離， 培養(yǎng)，培養(yǎng)，檢查菌落是否一致、單純（也可以用顯微鏡涂片染色鏡檢查菌落是否一致、單純（也可以用顯微鏡涂片染色鏡檢是否是單一的微生物），如有雜菌需進(jìn)一步純化、分檢是否是單一的微生物），如有雜菌需進(jìn)一步純化、分離。離。每毫升菌落形成單位同一稀釋度的三次重復(fù)平均