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1、瘦肉精的危害及其分析方法吳體良 030880391. 前言 瘦肉精學(xué)名鹽酸克侖特羅,化學(xué)式為o-(叔丁氨基)甲基-4-氨基-3,5-二氯苯甲醇鹽酸鹽,又名鹽酸雙氯醇胺 .本來(lái)用于治療人的哮喘病,有松弛支氣管平滑肌的作用,白色粉末,無(wú)臭,味弱,后發(fā)現(xiàn)其能提高豬的瘦肉率,而被應(yīng)用于飼料中.瘦肉精的危害 鹽酸克倫特羅是 一種p:-腎上腺素受體激動(dòng)劑,對(duì)心臟有刺激作 用,會(huì)產(chǎn)生心悸 心慌,對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)也有刺激作用,產(chǎn) 生惡心、嘔吐、還有肌肉不由自主的顫抖。有研究表 明,如果長(zhǎng)期食用的話,還會(huì)導(dǎo)致染色體畸變的可 能,會(huì)誘發(fā)惡性腫瘤。主要實(shí)驗(yàn)方法 氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法 液相色譜法 氣相色譜法 樣品的提取 取
2、切碎后生物組織樣品約100g,放入組織搗碎機(jī)勻漿5min,取10.020.0g勻漿液,加入30ml鹽酸,超聲提取15min,并不時(shí)攪拌。后以4000轉(zhuǎn)/min離心10min,取上清液倒入150ml分液漏斗;對(duì)下層沉積組織再重復(fù)提取一次。合并上清提取液,滴加氫氧化鈉溶液調(diào)PH至12。加入15ml氯仿,輕輕振搖萃取,靜止放置5min分層,放出下層氯仿,過(guò)置有3040g無(wú)水硫酸鈉的漏斗收集。并再分別以10ml的氯仿重復(fù)萃取兩次,收集合并萃取液,后以20ml氯仿洗滌無(wú)水硫酸鈉合并收集液。用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器于55水浴上蒸發(fā)至約1ml,氮?dú)獯蹈?。以甲醇定容?.0ml即為試液,取1.0l進(jìn)行色譜分析。 儀器與試
3、劑 Agilent6890氣相色譜儀,附氮磷檢測(cè)器(NPD),HP6890化學(xué)工作站,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器,離心機(jī),超聲清洗器,組織搗碎機(jī)。 鹽酸0.5mol/L 氫氧化鈉400g/L 氯仿、甲醇、無(wú)水硫酸鈉,均為分析純。 鹽酸克侖特羅標(biāo)準(zhǔn),購(gòu)于SIGMA公司,用甲醇配成100g/ml的儲(chǔ)備液。色譜條件 HP-1701石英毛細(xì)管柱(25m0.20mm0.20m);載氣為高純N2,柱壓為140KPa,柱溫為初溫170,0.5min后以25/min上升至240保持7min,進(jìn)樣口270,不分流,吹掃時(shí)間0.5min,100ml/min;檢測(cè)器溫度290,尾吹氣為8ml/min 樣品凈化 在氣質(zhì)譜聯(lián)用和液相色譜的不少分析方法中,均提到了在色譜分析前,須過(guò)固相萃取柱或氧化鋁柱凈化,以排除干擾峰。本實(shí)驗(yàn)對(duì)鹽酸提取液調(diào)堿后用氯仿萃取,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮,氮?dú)獯蹈?,最后用甲醇溶解定容,直接進(jìn)樣分析。萃取溶劑的選擇 在堿性條件下,克侖特羅溶于有機(jī)溶劑而微溶于水。將提取液用氫氧化鈉調(diào)堿后,有用乙酸乙酯作為萃取劑,但乙酸乙酯振搖后乳化嚴(yán)重,有機(jī)層浮于提取液上,分離較為麻煩。再對(duì)氯仿、二氯甲烷兩種有機(jī)萃取劑進(jìn)行分析比較,發(fā)現(xiàn)二氯甲烷乳化也較為嚴(yán)重,沉淀分層困難
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