ISO11137輻照滅菌劑量確認(rèn)中文版

1、第二部分：滅菌劑量的確定目錄：(1) 引言(3)1. 范圍(4)2. 引用標(biāo)準(zhǔn)(4)3. 縮寫、術(shù)語和定義(4)3.1 縮寫(4)3.2 術(shù)語(5)4確定和保持劑量設(shè)定，劑量認(rèn)證以及滅菌劑量審核中的產(chǎn)品族(6)4.1 總則(6)4.2 產(chǎn)品族的定義(6)代表產(chǎn)品族實施驗證劑量試驗和滅菌劑量審核所指定的產(chǎn)品(7) 產(chǎn)品族的保持(8)4.5 滅菌劑量的確定和滅菌劑量審核失敗對產(chǎn)品族的影響(8)5 確定和驗證滅菌劑量的產(chǎn)品的選擇及試驗(8)5.1 產(chǎn)品特性(8)5.2 樣品份額(9)5.3 取樣方式(10)5.4 微生物試驗(10)5.5 輻照(10)6 劑量確定方法(10)7 方法1：利用生物負(fù)載

2、信息進行劑量設(shè)定(11)7.1 原理(11) 使用方法1對平均生物負(fù)載1.0的多個生產(chǎn)批次的產(chǎn)品的程序(12)7.3 使用方法1對平均生物負(fù)載1.0的單一生產(chǎn)批次的產(chǎn)品的程序(16)7.4 使用方法1對平均生物負(fù)載在0.10.9之間的單一或多個生產(chǎn)批次的產(chǎn)品的程序 (17)8 方法2：用增量劑量實驗中得到的部分陽性信息確定外推因子的劑量設(shè)定(18)8.1 原理(18)8.2 方法2A的程序(18)8.3 方法2B的程序(21)9. VDmax方法以25kGy或15kGy作為滅菌劑量的證明(23)9.1 原理(23)對多個生產(chǎn)批次使用VDmax25方法的程序(24)9.3 對單一生產(chǎn)批次使用VD

3、max25方法的程序(27)9.4 對多個生產(chǎn)批次使用VDmax15方法的程序(29)9.5 對單一生產(chǎn)批次使用VDmax15方法的程序(31)10 滅菌劑量的審核(32)10.1 目的和頻率(32)10.2 使用方法1或方法2進行滅菌劑量設(shè)定的審核程序(32)10.3 使用VDmax方法證明滅菌劑量的審核程序(35)11 實例(38)11.1 方法1舉例(38)11.2 方法2舉例(40)11.3 方法3舉例(46) 使用方法1進行滅菌劑量設(shè)定的審核的實例，審核的結(jié)果有必要增加滅菌劑量 (47)11.5 使用方法2A進行滅菌劑量設(shè)定的審核的實例，審核的結(jié)果有必要增加滅菌劑量(48)11.6

4、使用方法VDmax25證明滅菌劑量的審核的實例(49)醫(yī)療衛(wèi)生產(chǎn)品滅菌-輻射第二部分：確定滅菌劑量1. 范圍ISO11137本部分列出了為滿足特定滅菌要求的最小劑量的確定方法以及證明使用25kGy或15kGy作為滅菌劑量達(dá)到10-6滅菌保證水平的方法，同時指明了為確保滅菌劑量持續(xù)有效地劑量審核的方法。2. 引用標(biāo)準(zhǔn)以下涉及的文件是本文件應(yīng)用中必不可少的。對于有日期參考的，僅引用的版本有效，對無日期參考的，參考文件的最新版本（包括任何修訂本）有效。ISO11137-1:2006ISO11737-1ISO11737-2ISO134853. 縮寫、術(shù)語和定義本文件中，在ISO11137-1給出及以下

5、的術(shù)語和定義適用。縮寫核算出最小的從中位ffp到FFP劑量。CD*按方法2驗證劑量試驗輻照100個單元產(chǎn)品進行無菌試驗所獲得的陽性數(shù)。d*從指定的產(chǎn)品批次中取樣的單元產(chǎn)品進行增量劑量試驗得到的劑量。D*要求達(dá)到10-2SAL的初始估計劑量。D* 要求達(dá)到10-2SAL的最終估計劑量，用于滅菌劑量的計算中。DD*由方法2驗證劑量試驗得到的劑量。DS產(chǎn)品輻照DD*劑量后估計的微生物的10值。D值或10值在自然狀態(tài)下殺滅90的試驗微生物所需的劑量或時間。注：本文件中，10值僅指輻照劑量。ffp 從指定的產(chǎn)品批次中選取得單元產(chǎn)品進行增量劑量試驗，其中20個試樣至少一個為陰性的最小劑量。FFP20個樣本

6、的無菌試驗中只有一個為陽性的估計劑量，由中位ffp劑量減去A計算得到。FNP用于計算DS中對試驗樣本達(dá)到10-2SAL的估計劑量。VDmax15對一特定的生物負(fù)載的最大驗證劑量，與指定15kGy作為滅菌劑量達(dá)到10-6的滅菌保證水平一致。VDmax25對一特定的生物負(fù)載的最大驗證劑量，與指定25kGy作為滅菌劑量達(dá)到10-6的滅菌保證水平一致。術(shù)語批在特征和質(zhì)量上期望相同，并在某一確定制造周期中生產(chǎn)出來的一定數(shù)量的產(chǎn)品。生物負(fù)載產(chǎn)品或無菌隔離系統(tǒng)上活微生物的數(shù)量。假陽性試驗結(jié)果的渾濁被解釋為試驗樣本長菌，然而長菌是由外來微生物的污染所致或渾濁是由于樣本和試驗用培養(yǎng)基相互影響的結(jié)果。陽性份數(shù)以無

7、菌試驗樣本的陽性數(shù)作分子，以樣本數(shù)作分母的商。 增量劑量一系列用于數(shù)個單元產(chǎn)品或其組分的劑量，在劑量設(shè)定方法中它用于建立和證實滅菌劑量。3.2.6 陰性無菌試驗無菌試驗樣本經(jīng)培養(yǎng)后不能查到微生物生長。3.2.7 包裝體系無菌隔離系統(tǒng)的組成和防護的包裝。3.2.8 陽性無菌試驗無菌試驗樣本經(jīng)培養(yǎng)后能查到微生物生長。3.2.9 取樣份額（SIP）某一醫(yī)療衛(wèi)生產(chǎn)品用來做測試所選擇的部分。3.2.10 無菌隔離系統(tǒng)用于阻擋微生物的進入和使用時允許無菌形式的產(chǎn)品進入的最小包裝。3.2.11 無菌保證水平（SAL）滅菌后單元產(chǎn)品上存在活微生物的概率。注：術(shù)語滅菌保證水平采用數(shù)量級表示，一般為10-6或10

8、-3。當(dāng)為保證無菌提供一數(shù)量級時，S為10-6比S為10-3級別低但提供了更高的無菌保證。3.2.12 滅菌劑量審核為證明某一確定的滅菌劑量的適宜性而采取的活動。3.2.13 驗證劑量 用于確定滅菌劑量，對預(yù)計s10-2估計的輻照劑量。4 確定和保持劑量設(shè)定，劑量認(rèn)證以及滅菌劑量審核中的產(chǎn)品族4.1 總則選擇滅菌劑量和實施滅菌劑量審核都是加工確定（見ISO11137-1:2006 第8條款）和維持加工有效性（見ISO11137-1:2006 第12條款）部分的活動。在這些活動中產(chǎn)品可以組成族，產(chǎn)品族的定義可主要依據(jù)產(chǎn)品上（生物負(fù)載）微生物數(shù)量和類型。微生物類型用來指示其對輻照的抗性。，在建立這

9、些產(chǎn)品族時不考慮例如密度和產(chǎn)品在其包裝體系中的布局，因為它們不是影響生物負(fù)載的因素。使用產(chǎn)品族來確定滅菌劑量和滅菌劑量審核，重要的是知道其中的風(fēng)險例如降低在制造過程察覺由于不明顯變化影響滅菌有效性的能力。此外，使用單一產(chǎn)品來代表整個產(chǎn)品族可能察覺不到發(fā)生在產(chǎn)品族中其它組份的變化。應(yīng)評估關(guān)于降低察覺產(chǎn)品族中其它組份變化的風(fēng)險，且應(yīng)設(shè)計維持產(chǎn)品族的方法并在加工前實施應(yīng)用。注：有關(guān)風(fēng)險管理的指引見ISO149714.2 產(chǎn)品族的定義建立一個產(chǎn)品族的標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)形成文件，應(yīng)根據(jù)這些標(biāo)準(zhǔn)評估產(chǎn)品，并考慮產(chǎn)品族各組分之間可能的類似之處?？紤]的事項應(yīng)包括對生物負(fù)載有影響的所有與產(chǎn)品相關(guān)的變化，包括但不限于：a)

10、原料的特性和來源，包括其影響，原料可能來自不止一個地方。b) 部件c) 產(chǎn)品的設(shè)計及大小d) 生產(chǎn)過程e) 生產(chǎn)設(shè)備f) 生產(chǎn)環(huán)境g) 生產(chǎn)場所評估和考查因素的結(jié)果應(yīng)形成文件（見ISO11137-1:2006 條款）。如果證明與產(chǎn)品有關(guān)的變化是相似的并在控制下，產(chǎn)品應(yīng)被包括在一個產(chǎn)品族內(nèi)。 要將產(chǎn)品歸入一個產(chǎn)品族內(nèi)，應(yīng)證明其生物負(fù)載由相似數(shù)量和類型的微生物組成。將不同地方生產(chǎn)的產(chǎn)品歸入一個產(chǎn)品族應(yīng)有合理的說明和記錄（見ISO11137-1:2006 條款）。應(yīng)考慮對生物負(fù)載有影響的：a) 場所地理和（或）氣候的不同b)生產(chǎn)過程和環(huán)境控制方面的任何差別c)原料和加工輔助物（如水）的來源代表產(chǎn)品族

11、實施驗證劑量試驗和滅菌劑量審核所指定的產(chǎn)品代表產(chǎn)品族的產(chǎn)品.1 產(chǎn)品中或產(chǎn)品上微生物的數(shù)量和類型應(yīng)被用來作為選擇產(chǎn)品代表產(chǎn)品族的依據(jù)。.2產(chǎn)品族的代表應(yīng)為：a)其主要產(chǎn)品（見），或b)相同產(chǎn)品（見），或c)模擬產(chǎn)品（見）.3 采取正式的、形成文件的評估來決定4.3.1.2中所列的三種可能代表產(chǎn)品的適宜性，在這個評估中，應(yīng)考慮以下內(nèi)容：a)組成生物負(fù)載的微生物類型b)微生物的生長的環(huán)境c)產(chǎn)品的尺寸d)部件的數(shù)量e)產(chǎn)品的聯(lián)合體f) 生產(chǎn)中的自動化程度g) 生產(chǎn)環(huán)境主要產(chǎn)品如果評估（見.3）顯示產(chǎn)品族中一個成員表現(xiàn)的抗性比這個產(chǎn)品族中其它的成員更大時，則這個產(chǎn)品可以認(rèn)定為主要產(chǎn)品。在有些情況下，

12、一個產(chǎn)品族中可能有幾個產(chǎn)品，其中每個產(chǎn)品都可以被認(rèn)定為這個產(chǎn)品族。 同等產(chǎn)品 如評估（見.3）表明一組產(chǎn)品各成員要求的滅菌劑量相同，則這組產(chǎn)品可以認(rèn)定為同等的。代表產(chǎn)品族的同等產(chǎn)品應(yīng)a）隨機選擇或 b）根據(jù)包括產(chǎn)品族中不同成員的計劃的列表。在選擇同等產(chǎn)品代表產(chǎn)品族時應(yīng)考慮制造產(chǎn)量及產(chǎn)品的有效性。模擬產(chǎn)品如一模擬產(chǎn)品比產(chǎn)品族中各成員表現(xiàn)出的對輻照過程的抗性同等或更大，則這個模擬產(chǎn)品可以代表該產(chǎn)品族。模擬產(chǎn)品使用與真實產(chǎn)品相同的方式和材料包裝。注：模擬產(chǎn)品不作為臨床使用；它是專門為確定和維持滅菌劑量而制作的。模擬產(chǎn)品可以是：a) 在材料和大小上與真實產(chǎn)品類似，并經(jīng)過相似的制造過程；例如，經(jīng)過整個加

13、工過程的一塊用于植入的材料。b) 產(chǎn)品族中產(chǎn)品部件的組合物，在使用中不是典型的組分；例如，一件多重過濾器的管座，夾子及活塞都是產(chǎn)品族中其它產(chǎn)品的部件。模擬產(chǎn)品應(yīng)和真實產(chǎn)品以相同的方式和相同的材料包裝。4.4 產(chǎn)品族的保持 周期性評審應(yīng)以一特定的頻率來實施評審來保證所有的產(chǎn)品族和用來代表每個產(chǎn)品族的產(chǎn)品保持有效。選派有資格的人員負(fù)責(zé)對可能影響到產(chǎn)品族各成員之間關(guān)系的產(chǎn)品或過程的評審。這樣的評審至少每年一次。評審的輸出應(yīng)按ISO11137-1:2006 第條款記錄。產(chǎn)品或生產(chǎn)過程的更改產(chǎn)品的更改：如原材料（材料和來源）、部件或產(chǎn)品設(shè)計（包括大小）和（或）生產(chǎn)過程的更改，如設(shè)備、環(huán)境或地點，應(yīng)通過正

14、式的形成文件的更改控制體系進行評估。這種更改可能改變產(chǎn)品族確定的依據(jù)或?qū)Υ懋a(chǎn)品族的產(chǎn)品的選擇依據(jù)。對重大的改變可建立一個新的產(chǎn)品族或選擇不同的代表產(chǎn)品。 記錄產(chǎn)品族的記錄應(yīng)保留（見ISO11137-1:2006 第條款）滅菌劑量的確定或產(chǎn)品族滅菌劑量審核失敗的結(jié)果 如果發(fā)生滅菌劑量確定或產(chǎn)品族滅菌劑量審核失敗的情況，產(chǎn)品族中所有的成員應(yīng)被認(rèn)為是受到影響的，應(yīng)對產(chǎn)品族中所有的產(chǎn)品采取后續(xù)措施。5確定和驗證滅菌劑量的產(chǎn)品的選擇及試驗5.1 產(chǎn)品的特性用于滅菌的產(chǎn)品可以由以下組成：a)包裝體系中一個獨立的醫(yī)療保健產(chǎn)品b) 在包裝體系中的一套部件，使用時用來組成醫(yī)療保健產(chǎn)品，以及組合產(chǎn)品要求使用的配

15、件。c) 包裝體系中一定數(shù)量的同一醫(yī)療保健產(chǎn)品d)由多種程序相關(guān)的醫(yī)療保健產(chǎn)品組成的一套產(chǎn)品用于實施劑量設(shè)定和劑量證明的單元產(chǎn)品應(yīng)按表1選擇。如果產(chǎn)品對其某一部分有滅菌的要求，滅菌劑量的確定應(yīng)僅針對該部分。例如：如果產(chǎn)品有標(biāo)識僅流動通道要求滅菌，滅菌劑量的確定可以依據(jù)對流動通道進行無菌試驗得到的生物負(fù)載決定。表1-用于確定和驗證滅菌劑量的單元產(chǎn)品的特性產(chǎn)品類型用于確定生物負(fù)載或增加劑量試驗的產(chǎn)品原理包裝體系中一個獨立的醫(yī)療保健產(chǎn)品獨立的醫(yī)療保健產(chǎn)品每個醫(yī)療保健產(chǎn)品是單獨的在臨床實踐中使用的在包裝體系中的一套部件產(chǎn)品組成的所有部件這些部件組成一件產(chǎn)品而在臨床實踐中使用包裝體系中一定數(shù)量的同一醫(yī)療

16、保健產(chǎn)品包裝體系取出的單一醫(yī)療保健產(chǎn)品每個醫(yī)療保健產(chǎn)品是單獨的在臨床實踐中使用的一套程序相關(guān)的醫(yī)療保健產(chǎn)品組成一套的每種類型的醫(yī)療保健產(chǎn)品每個醫(yī)療保健產(chǎn)品是單獨的在臨床實踐中使用的注1: 對注2：對d）所描述的產(chǎn)品使用的產(chǎn)品族見第4條款指引劑量設(shè)定中，根據(jù)醫(yī)療保健產(chǎn)品要求的最高滅菌劑量進行滅菌劑量的選擇。5.2 取樣份額（SIP） 對于平均生物負(fù)載1.0的產(chǎn)品，只要可行，整個產(chǎn)品應(yīng)按表1用來進行實驗。如果不可行，應(yīng)用一選擇的產(chǎn)品份額（取樣份額）來代替。該SIP應(yīng)是單元產(chǎn)品在試驗中可能操作的最大部分，并且其尺寸在試驗中可以操作。 對平均生物負(fù)載0.9, 整個產(chǎn)品（SIP=1）應(yīng)按表1用來進行實驗

17、。 如果生物負(fù)載是平均的分布在單元產(chǎn)品中，這種SIP可以取自單元產(chǎn)品的任何一個部分。如果生物負(fù)載不是平均分布的，這種SIP應(yīng)由隨機選擇的能適當(dāng)?shù)拇懋a(chǎn)品制造的各種材料的產(chǎn)品部分組成。如果知道生物負(fù)載，SIP應(yīng)從產(chǎn)品中認(rèn)為是對輻照過程有最大抗力的部分選擇。P值可按被檢單元產(chǎn)品的長度，質(zhì)量，體積和表面積計算（例子見表2）表2 計算p的實例SIP計算的基礎(chǔ)產(chǎn)品長度管道（直徑一致）質(zhì)量藥粉輔料移植物（不可吸收的）體積流體表面積移植物（不可吸收的）管道（可變直徑）準(zhǔn)備和包裝一個SIP必須選擇令生物負(fù)載變動最小的條件下。SIP的準(zhǔn)備應(yīng)在受控的環(huán)境條件下,只要可行，其包裝材料和條件應(yīng)和成品相同。應(yīng)證實所選擇

18、SIP的充分性。SIP的生物負(fù)載必須是，對20個未輻照樣本的分別進行無菌試驗結(jié)果至少17個為陽性（即85%陽性）。如果達(dá)不到這個指標(biāo)，應(yīng)使用更大的SIP。如果使用整個產(chǎn)品進行試驗，20個樣品的無菌試驗結(jié)果至少17個陽性的指標(biāo)不適用。5.3 取樣方法 用于滅菌劑量確定和審核的產(chǎn)品必須是能代表日常加工的程序和條件生產(chǎn)的產(chǎn)品。一般情況下，用來確定生物負(fù)載或進行無菌試驗的每個單元產(chǎn)品應(yīng)取自獨立的包裝體系。 在選擇產(chǎn)品樣品和確定生物負(fù)載之間所花費的時間會影響到最終加工步驟的完成到產(chǎn)品滅菌之間的時間周期。單元產(chǎn)品可以取自加工過程中的次品，它們與產(chǎn)品的留樣在相同的加工和條件下生產(chǎn)。5.4 微生物試驗 生物負(fù)

19、載的確定和無菌試驗應(yīng)按ISO11737-1和ISO11737-2要求操作。當(dāng)使用單一的培養(yǎng)基進行無菌試驗時，一般推薦使用大豆酪蛋白肉湯，在30±2培養(yǎng)14天。如果有理由證明這種培養(yǎng)基和溫度不支持微生物的生長，應(yīng)使用其它適合的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。見Herring et al,197412,Favero,197110;NHB,19687所舉例子。只要可行，產(chǎn)品應(yīng)以其原始的形式和包裝進行輻照。然而，為減少無菌試驗假陽性發(fā)生的可能性，樣品可能在輻照前拆開并重新包裝。如果輻照前的處理改變了生物負(fù)載的數(shù)量和其對輻照的響應(yīng)（例如：操作可改變微生物周圍的化學(xué)環(huán)境，最典型的是氧壓力），則是不可接受的。重

20、新包裝單元產(chǎn)品的材料，輻照時應(yīng)能耐受所實施的輻照劑量和其后的處理，以減少污染的可能性。應(yīng)對經(jīng)過包裝過程的產(chǎn)品進行生物負(fù)載確定。注：通常，最好是在產(chǎn)品從其包裝體系內(nèi)取出后進行生物負(fù)載確定，以便避免其包裝體系對確定生物負(fù)載的影響。5.5 輻照 應(yīng)使用符合ISO11137-1要求IQ、OQ和PQ的輻照器對用于確定和驗證滅菌劑量的產(chǎn)品進行輻照。為了實施驗證劑量和增量劑量試驗，必須進行足夠的劑量場測試來確定產(chǎn)品所接受的最高和最低劑量。 劑量測量和輻照源的使用應(yīng)符合ISO11137-1要求。注：見ISO11137-3部分對于輻照滅菌劑量測定方面的指引。6 劑量確定方法6.1 如果按ISO11137-1：2

21、006第8.a）（產(chǎn)品特定的滅菌劑量）條款要求進行滅菌劑量確定，應(yīng)按以下方法之一設(shè)定：a) 方法1對單一和多個生產(chǎn)批次b）方法2A（見8.2）c）方法2B（見8.3）或d) 為達(dá)到特定的滅菌要求同以上），）或）提供相等保證的方法。如果按ISO11137-1：2006第 b）條款要求進行滅菌劑量確定，應(yīng)按以下方法之一證明：a) 對于平均生物負(fù)載在0.11000（包括）范圍的產(chǎn)品1)VDmax25方法（見9.2或9.3）2) 方法（見第條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量25kGy。3）方法2 （見第8條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量25kGy?；?）為獲得最大s為10-6同以上1），2）

22、或3）提供了相等保證的方法。b) 對于平均生物負(fù)載在0.11.5（包括）范圍的產(chǎn)品：1） VDmax15方法（見9.4或9.5）2）方法（見第條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量15kGy。3）方法2 （見第8條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量15kGy?；?）為獲得最大s為10-6同以上1），2）或3）提供了相等保證的方法。1） VDmax25方法（見9.2或9.3）2）VDmax15方法（見9.4或9.5）3）方法2 （見第8條款），為獲得為10-6所采用滅菌劑量15kGy?；?）為獲得最大s為10-6同以上1），2）或3）提供了相等保證的方法。7 方法1： 利用生物負(fù)載信息進行劑量

23、設(shè)定7.1 原理該滅菌劑量的設(shè)定方法是由實驗驗證表明，產(chǎn)品的微生物群對輻照的響應(yīng)比有標(biāo)準(zhǔn)抗力的微生物群更大些。對SDR已經(jīng)做出了合理的選擇。SDR以D10值和所有群體發(fā)生的概率值（見表3）的形式來表示微生物抗力。并用計算機對達(dá)到10-2，10-3，10-4，10-5，以及10-6SAL值所需的各個劑量按生物負(fù)載水平增加得到的SDR進行計算。表5和表6 列出了對給定平均生物負(fù)載計算出的劑量值。表3-方法1中使用的微生物抗力分布（Whitby and Gelda，197920）D10(kGy)概率（%）在實踐中用平均生物負(fù)載作為確定值。達(dá)到s為10-2所需的劑量可以從表5或表6中讀出。該劑量稱作驗

24、證劑量，它代表能使具有標(biāo)準(zhǔn)抗力分布的微生物群減少到s為10-2水平的劑量。然后用100個單元產(chǎn)品暴露于所選定的驗證劑量，每一個單元產(chǎn)品單獨進行無菌檢驗。若100個樣本的試驗出現(xiàn)的陽性數(shù)不超過2個，再回到表5或表6中查生物負(fù)載水平下獲得各種要求的SAL的滅菌劑量。允許2個陽性的原理是根據(jù)假設(shè)符合泊松分布的一定數(shù)量的陽性發(fā)生概率在1個左右。根據(jù)泊松分布，發(fā)生0，1和2個陽性的概率是0.92，見表4。表4-10-2SAL下檢測100個樣本期望出現(xiàn)陽性的概率陽性數(shù)012345678概率（%） 總則應(yīng)用方法1，須按以下六個步驟執(zhí)行。注： 步驟1：選擇SAL和取得單元產(chǎn)品樣本.1 記錄產(chǎn)品預(yù)計使用的s。.

25、2 在三個獨立的生產(chǎn)批次中每批選擇至少10個單元產(chǎn)品，根據(jù)5.1，5.2和5.3要求。 步驟2： 確定平均生物負(fù)載.1 決定在確定生物負(fù)載中是否應(yīng)用校正因數(shù)。注：.2確定每個選擇的單元產(chǎn)品的生物負(fù)載并計算：a) 三個批次樣本每批的平均生物負(fù)載（批次平均）b)所有選擇的單元產(chǎn)品的平均生物負(fù)載（總體平均負(fù)載）注：.3 將三批產(chǎn)品的平均生物負(fù)載進行比較，確定是否有一個批次的平均值比總體平均生物負(fù)載大兩倍或兩倍以上。 步驟3：獲得驗證劑量從表5獲得s為10-2的劑量可以用以下數(shù)據(jù)之一a) 若一批或更多批次的平均生物負(fù)載總體平均生物負(fù)載*2，則用最高批次值；或b) 若每個批次的平均生物負(fù)載<2*總

26、體平均生物負(fù)載，則使用總體平均生物負(fù)載。指定該劑量為驗證劑量。如果使用單元產(chǎn)品的一部分（SIP）來進行無菌試驗，則該SIP的平均生物負(fù)載應(yīng)用來確定驗證劑量。如果平均生物負(fù)載在表5中沒有給出，則用比計算出的生物負(fù)載大些的，最接近的平均生物負(fù)載。7.2.5步驟4：實施驗證劑量試驗.1 從單一的產(chǎn)品批次中選擇100個單元產(chǎn)品。 步驟4的100個單元產(chǎn)品可以從步驟2確定生物負(fù)載的其中一個批次中選擇，或從能代表正常生產(chǎn)條件下制造的第四批產(chǎn)品中選擇。在選擇所用的批次時應(yīng)考慮該產(chǎn)品支持微生物生長的能力。.2 用驗證劑量對單元產(chǎn)品進行輻照?？刂苿┝?，如果單元產(chǎn)品接受的最大劑量超過驗證劑量的10%，并使用方法一

27、來確定滅菌劑量，則驗證劑量試驗必須重做。如果單元產(chǎn)品的最高和最低劑量的算術(shù)平均值小于驗證劑量的90%，則驗證劑量試驗可重做。如果這個平均劑量小于驗證劑量的90%，并且無菌試驗的結(jié)果是可接受的（見7.2.6.1），驗證劑量試驗可以不重做。.3 依據(jù)ISO11737-2（見5.4.1）分別對輻照后的單元產(chǎn)品進行無菌試驗，記錄陽性樣本數(shù)。 步驟5：結(jié)論說明.1 如果100個樣本的無菌試驗不超過兩個陽性樣本，則驗證可以接受。.2 如果無菌試驗的結(jié)果超過兩個陽性，則驗證不可接受。如果這種結(jié)果能歸因于生物負(fù)載測定不正確，生物負(fù)載測定中不適合的修正因子，無菌檢驗不正確或驗證劑量的實施不正確，則可以根據(jù)糾正措

28、施執(zhí)行重做驗證劑量試驗。如果這種結(jié)果不能解釋為采取糾正措施的理由，則這種劑量設(shè)定的方法無效，應(yīng)使用另外一種替代的確定滅菌劑量的方法。（見第6條款） 步驟6：確定滅菌劑量.1 如果使用整個產(chǎn)品進行試驗并且通過驗證，從表5中得到最接近生物負(fù)載的單元產(chǎn)品的滅菌劑量，該生物負(fù)載比計算的生物負(fù)載相等或更大，并讀出達(dá)到指定SAL所需的劑量。.2 如果使用SIP的 p1.0進行試驗并且通過驗證，則整個產(chǎn)品的平均生物負(fù)載可以用SIP的平均生物負(fù)載除以p值來計算。從表5中得到最接近生物負(fù)載的單元產(chǎn)品的滅菌劑量，該生物負(fù)載比計算的整個產(chǎn)品的平均生物負(fù)載相等或更大，并讀出達(dá)到指定SAL所需的劑量。表5-已知標(biāo)準(zhǔn)抗力

29、分布的平均生物負(fù)載1.0達(dá)到給定的SAL所需的輻照劑量（kGy）平均生物負(fù)載滅菌保證水平（s）平均生物負(fù)載滅菌保證水平（s）10-210-310-410-510-610-210-310-410-510-6120130140150160170180190200220240260280300325350375400104251145012475135001452515550165751760018650197002075022800248502690028950301000321050341100361150381200401250421300441350461400481450501500551

30、55060160065165070170075175080180085185090190095195010020001102100續(xù)上表5220040000230042000240044000250046000260048000270050000280054000290058000300062000320066000340070000360075000380080000400085000420090000440095000460010000048001100005000120000530013000056001400005900150000620016000065001700006800180

31、00071001900007400200000770022000080002400008500260000900028000095003000001000032000010500340000110003800001150040000012000420000130004400001400046000015000480000160005000001700054000018000580000190006200002000066000021000700000220007500002300080000024000850000250009000002600095000027000100000028000注

32、1：表中出現(xiàn)的高生物負(fù)載水平并不暗示其就是正常。注2：所列的數(shù)據(jù)用于方法1劑量設(shè)定的步驟3，4和6。 290003000032000340003600023.238000 原理本方法是根據(jù)方法1改編，僅用于對單一加工批次確定滅菌劑量。這是一種根據(jù)試驗證明其生物負(fù)載的輻照抗力低于或等同于擁有標(biāo)準(zhǔn)抗力分布（SDR）的微生物群抗力的確定滅菌劑量的方法。 總則在應(yīng)用方法1的本改編版時，必須遵從以下6個步驟： 步驟1：選擇SAL和取得單元產(chǎn)品樣本.1記錄產(chǎn)品預(yù)計使用的s。.2根據(jù)5.1，5.2和5.3要求，在單一的生產(chǎn)批次中選擇至少10個單元產(chǎn)品。 7.3.4 步驟2： 確定平均生物負(fù)載7.1 決定在確

33、定生物負(fù)載中是否應(yīng)用修正因素。注：ISO11737-1所描述的確定生物負(fù)載的方法中引用了校正因數(shù)，從生物負(fù)載有效的計數(shù)中得到。使用方法1進行劑量設(shè)定可以使用這個有效的計數(shù)而不引用校正因數(shù)。當(dāng)不使用校正因數(shù)時生物負(fù)載可能被低估。但提供不正確的生物負(fù)載校正因數(shù)可能增加驗證劑量試驗失敗的風(fēng)險。7.2確定每個選擇的單元產(chǎn)品的生物負(fù)載并計算所有選擇的單元產(chǎn)品的平均生物負(fù)載（總體平均負(fù)載）注：生物負(fù)載一般由單獨的單元產(chǎn)品確定，但是當(dāng)生物負(fù)載較低（例如<10）,可能需要合并10個單元產(chǎn)品來確定批次的平均生物負(fù)載。這個規(guī)則不適用于SIP，SIP不可被合并，當(dāng)然可以選擇更大的SIP。7. 步驟3：獲得驗證

34、劑量從表5使用平均生物負(fù)載獲得s為10-2的劑量，指定該劑量為驗證劑量。如果使用單元產(chǎn)品的一部分（SIP）來進行無菌試驗，則該SIP的平均生物負(fù)載應(yīng)用來確定驗證劑量。如果平均生物負(fù)載在表5中沒有給出，則用比計算出的生物負(fù)載大些的，最接近的平均生物負(fù)載。 步驟4：實施驗證劑量試驗.1 從單一的產(chǎn)品批次中選擇100個單元產(chǎn)品。.2 用驗證劑量對單元產(chǎn)品進行輻照?？刂苿┝?，如果單元產(chǎn)品接受的最大劑量超過驗證劑量的10%，并使用方法一來確定滅菌劑量，則驗證劑量試驗必須重做。如果單元產(chǎn)品的最高和最低劑量的算術(shù)平均值小于驗證劑量的90%，則驗證劑量試驗可重做。如果這個平均劑量小于驗證劑量的90%，并且無菌

35、試驗的結(jié)果是可接受的（見7.3.7.1），驗證劑量試驗可以不重做。.3 依據(jù)ISO11737-2（見5.4.1）分別對輻照后的單元產(chǎn)品進行無菌試驗，記錄陽性樣本數(shù)。 步驟5：結(jié)論說明.1 如果100個樣本的無菌試驗不超過兩個陽性樣本，則驗證可以接受。7.2 如果無菌試驗的結(jié)果超過兩個陽性，則驗證不可接受。如果這種結(jié)果能歸因于生物負(fù)載測定不正確，生物負(fù)載測定中不適合的修正因子，無菌檢驗不正確或驗證劑量的實施不正確，則可以根據(jù)糾正措施執(zhí)行重做驗證劑量試驗。如果這種結(jié)果不能解釋為采取糾正措施的理由，則這種劑量設(shè)定的方法無效，應(yīng)使用另外一種替代的確定滅菌劑量的方法。（見第6條款）確定滅菌劑量.1 如果

36、使用整個產(chǎn)品進行試驗并且通過驗證，從表5中得到最接近生物負(fù)載的單元產(chǎn)品的滅菌劑量，該生物負(fù)載比計算的生物負(fù)載相等或更大，并讀出達(dá)到指定SAL所需的劑量。.2 如果使用SIP的 p1.0進行試驗并且通過驗證，則整個產(chǎn)品的平均生物負(fù)載可以用SIP的平均生物負(fù)載除以p值來計算。從表5中得到最接近生物負(fù)載的單元產(chǎn)品的滅菌劑量，該生物負(fù)載比計算的整個產(chǎn)品的平均生物負(fù)載相等或更大，并讀出達(dá)到指定SAL所需的劑量。使用方法1對單一或多個生產(chǎn)批次的平均生物負(fù)載在0.10.9之間的產(chǎn)品的程序 對于平均生物負(fù)載在0.10.9范圍的產(chǎn)品，以上給出的多個（見7.2）或單一（見7.3）批次使用方法1確定劑量的程序應(yīng)遵從

37、，除非：A）.根據(jù)表1要求整個產(chǎn)品必須用來試驗（也可見）B）.修正因素應(yīng)在確定生物負(fù)載中使用；C）.輸入表6以獲得滅菌保證水平為10-2的劑量（驗證劑量）和給定的s所需的滅菌劑量。注2：所列的值為方法1劑量設(shè)定步驟3，4和6中使用。表6-已知標(biāo)準(zhǔn)抗力分布的平均生物負(fù)載在0.10.9范圍達(dá)到給定的SAL所需的輻照劑量（kGy）平均生物負(fù)載滅菌保證水平 s平均生物負(fù)載滅菌保證水平 s10-210-310-410-510-610-210-310-410-510-60/注：對于平均生物負(fù)載>0.9而<1.0范圍的，在表5中查生物負(fù)載為1.0。8 方法2：用增量劑量實驗中得到的部分陽性信息確

38、定外推因子的劑量設(shè)定8.1 原理方法2中，可以得到關(guān)于產(chǎn)品上微生物對輻照抗力的信息。本方法使用暴露于一系列增量劑量的產(chǎn)品樣本無菌試驗的結(jié)果，估計在100個單元產(chǎn)品中期望得到一個有菌的劑量（即10-2SAL）。暴露于這一劑量后殘存的微生物應(yīng)有比原始生物負(fù)載更均勻的D10值。從增量劑量實驗估測出的一個D10值，用這個估測值外推到低于10-2SAL以確定滅菌劑量。計算滅菌劑量的有效性通常取決于超過期望達(dá)到SAL為10-2的劑量進行外推的有效性。在對采用計算機模擬物品上微生物滅活的試驗的深入研究中，建立起了對已測定微生物群的抗力分布外推的有效性。以上略述的原理的詳盡的細(xì)節(jié)，包括計算機模擬的結(jié)果，見Da

39、vis，Strawderman和Whitby,19849。下文描述了兩種程序，方法2A和方法2B。方法2A是通常采用的一種方法，然而方法2B是針對生物負(fù)載一向很低的產(chǎn)品。使用方法2B必須符合的條件在.1條款中有說明。方法2不使用確定生物負(fù)載來確定滅菌劑量，無論如何，作為產(chǎn)品常規(guī)監(jiān)控的一部分有要求確定生物負(fù)載。方法2A和方法2B中計算A，DSAL以及滅菌劑量的方法不是相同的。因此，有必要注意使用合適的公式。劑量計算必須最好報告一位小數(shù)。滅菌劑量可以四舍五入（使用標(biāo)準(zhǔn)舍入程序）到一位小數(shù)。注1: 在以下的程序和實例中，小寫字體表示為取自單一批次產(chǎn)品得到的結(jié)果。大寫字體表示取自所有三個批次產(chǎn)品得到的

40、結(jié)果。注2：方法2B要求使用整個產(chǎn)品（SIP=1.0），然而使用方法2A，可以使用整個產(chǎn)品或者產(chǎn)品的一部分（SIP1.0）。8.2 方法2A程序 總則使用方法2A，應(yīng)遵從以下5個步驟。注：實例見 步驟1：選擇SAL和取得單元產(chǎn)品樣本.1記錄產(chǎn)品預(yù)計使用的s。.2根據(jù)5.1，5.2和5.3要求，在三個獨立的生產(chǎn)批次中各選擇至少280個單元產(chǎn)品。 用來驗證SIP1.0的充分性可能需要更多的產(chǎn)品。 步驟2：實施增量劑量試驗.1 總則 從2kGy開始，以標(biāo)準(zhǔn)增量為2kGy對三個批次中每批20個單元產(chǎn)品進行輻照，至少輻照9個劑量系列。確定每個增量劑量，每個標(biāo)準(zhǔn)增量劑量的最高劑量用來隨后判斷首次陽性劑量（

41、ffp）和d*。這些劑量可變化到標(biāo)增量劑量的1.0kGy或10%，取較大值。如果對于一給定的增量劑量實施的最高和最低劑量的算術(shù)平均值小于最低限度，則對這個增量劑量可以輻照20個更多的單元產(chǎn)品。.1.2 根據(jù)ISO11737-2（見5.4.1條款）分別對每個輻照后的單元產(chǎn)品進行無菌試驗，記錄無菌試驗的陽性數(shù)。.1.3 從該試驗中獲得以下值：A）A和首次陽性劑量（FFP）（見.2）B）D*C) CD*批次（見.4）8.2.3.2 A 和 FFP.2.1 從三個批次每批增量劑量系列確定20個試樣中至少一個是陰性的最低劑量，指定這些劑量為ffp并找出三個批次的中位ffp。如果有2或3批次表現(xiàn)出相同的f

42、fp值，選擇批次中提供更高或最高陽性數(shù)的劑量作為中位ffp。.2.2 從表7中獲得中位ffp在無菌試驗的不同陽性數(shù)時所對應(yīng)的A值。表7 中位ffp在不同無菌試樣的陽性數(shù)時所對應(yīng)的A值（方法2A）中位ffp時的無菌試樣陽性數(shù)A kGy 中位ffp時的無菌試樣陽性數(shù)A kGy 14613512411310291807這里n為無菌試驗的陰性樣本數(shù)注：見公式（1）來計算A（公式1）log10(loge20)-log10loge(20/n) log10(loge20)-log10loge(20/19)A=（2kGy）.2.3 從式（2）中計算FFPFFP = 中位ffp A (2) .3 D*.3.1

43、對三個生產(chǎn)批次中的每一批，按以下之一確定d*a) 找出所有試樣中陰性的兩個連續(xù)劑量的最低劑量，在隨后的增量劑量系列的任何試驗中陽性不得多于一個，或b）找出20個試樣中發(fā)生一個陽性的最低劑量，緊接之前的不超過1，等于1，其后所有試樣均為陰性的增量劑量。.3.2 如果三個生產(chǎn)批次每個都不符合本標(biāo)準(zhǔn)8.2.3.）或b），則增量劑量試驗無效。在這種情況下，在調(diào)查試驗的方法和執(zhí)行糾正措施之后可以重新進行增量劑量試驗。.3.3 按以下指定D*，a）如果最高批次d*比中位d*高出值小于5kGy，則中位批次d*就成為D*，或b）如果最高批次d*比中位d*高出值大于等于5kGy，則最高批次d*就成為D*。.4

44、CD*批次確定d*等于D*的批次并將其標(biāo)示為CD*批次，如果一個以上批次d*等于D*，則可以隨機選擇其中之一作為CD*。從CD*批次中保留單元產(chǎn)品在方法2A步驟3中使用。從三個批次中取出保留的產(chǎn)品的存儲條件應(yīng)阻止微生物生長。可能的話，可以選擇第四個批次作為CD*。 步驟3：實施驗證劑量試驗從CD*批次中選擇100個單元產(chǎn)品以D*劑量進行輻照。確定劑量并指定單元產(chǎn)品接受的最高劑量為DD*。DD*可以變化到D*的+1.0kGy或+10%，取其中較大值。如果單元產(chǎn)品接受的最高和最低劑量的算術(shù)平均值小于D*的90%，則可以對取自CD*批次的另外100個單元產(chǎn)品進行重新輻照。如果單元產(chǎn)品接受的最高和最低劑量的算術(shù)平均值小于D*的90%，但無菌試驗的結(jié)果是可以接受，則驗證劑量試驗可以不必重做。.2根據(jù)ISO11737-2（見5