胃康靈膠囊的質(zhì)量控制研究

1、胃康靈膠囊的質(zhì)量控制研究    【關(guān)鍵詞】  甘草酸；,芍藥苷；,高效液相色譜法；,胃康靈膠囊摘要：目的建立胃康靈膠囊中甘草芍藥苷的含量測定方法。方法色譜柱為ShimPack VPODS C18(150 mm×4.6 mm,5 m)；流動相為乙腈0.1%磷酸溶液，梯度洗脫；檢測波長為235 nm；柱溫40；流速1 ml/min。結(jié)果甘草酸和芍藥苷分別在0.15 1.50 g（r=0.999 9 n=5）范圍內(nèi)呈線性。甘草酸和芍藥苷平均加樣回收率分別為99.7%（RSD=2.67%）和99.4%（RSD=2.43%）。結(jié)論該法簡便、快速

2、、可靠、可用于控制制劑質(zhì)量。 關(guān)鍵詞：甘草酸；  芍藥苷；  高效液相色譜法；  胃康靈膠囊Study on the Quality Control of Weikangling CapsulesAbstract：ObjectiveTo develop a method for determining the content of glycyrrhizic acid and paeoniflorin in Weikangling Capsules by RPHPLC.MethodsThe chromatographic method was carried on

3、a ShimPack VPODS C18column(150 mm×4.6 mm,5 m).Acetonitrilewater (containing 0.1% Phosphoric acid) was used as the mobile phase with gradient elution .The detection wavelength was at 235 nm.The flow rate was 1.0 ml/min . Column temperature was 40.ResultsA good linearity was found at the concentr

4、ation range of 0.151.50 g for glycyrrhizc acid and 0.111.08 g for paeoniflorn.The average recovery were 99.7%,99.4% and the relative standard deviation was 2.67%,2.43%,respectively .ConclusionThe method is simple, rapid, reliable and can be used for the drug control.Key words：Glycyrrhizc acid ; 

5、; Paeoniflorin;  HPLC;  Weikangling Capsules    胃康靈膠囊主要由白芍、甘草、白及、延胡索、三七等8味中藥組成的復(fù)方制劑，具有柔肝和胃，散淤止血，緩急止痛，去腐生新的功效。臨床上用于肝胃不和、淤血阻絡(luò)所致的胃脘疼痛、連及兩脅、噯氣、泛酸；急、慢性胃炎，胃、十二指腸潰瘍等治療。在2005年版中國藥典中，胃康靈膠囊僅以芍藥苷的含量作為制劑質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)，未對其它成分的含量進(jìn)行控制1，具有一定的局限性，不能全面反應(yīng)制劑質(zhì)量。甘草是胃康靈膠囊中的主藥之一，其中主要的化學(xué)成分甘草酸具有抗?jié)?、抗炎和鹽皮質(zhì)激素樣

6、作用2，因此應(yīng)該對胃康靈膠囊中甘草酸的含量加以控制。本文首次建立了一個色譜條件下同時測定胃康靈膠囊中甘草酸和芍藥苷含量的方法，為該藥品標(biāo)準(zhǔn)的進(jìn)一步研究，提供一個簡便、快捷、靈敏度好，準(zhǔn)確的參考方法。1  儀器與試藥十萬分之一電子分析天平（AUW220，SHIMADZU）；高效液相色譜儀（LCAvp泵，SPD10Avp紫外檢測器，CTO10ASvp柱溫箱，SHIMADZU）；KQ5200型超聲波清洗器（上海必能信超聲有限公司）；甘草酸單銨鹽對鹽對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：7319001）；芍藥苷對照品（中國藥品生物制品檢定所，批號：110731200407）；胃康靈膠囊（市售

7、）；乙腈（色譜純）；水為純凈水；其它試劑均為分析純。2  方法與結(jié)果2.1  色譜條件色譜柱：ShimPack VPODS C18（150 mm×4.6 mm,5 m）；流動相：乙腈-0.1%磷酸溶液，梯度洗脫（見表1）；檢測波長：235 nm；靈敏度：0.01 AUFS；流速：1.0 ml/min；柱溫：40；進(jìn)樣量10 l。表1  流動相的梯度洗脫(略)2.2  對照品溶液的制備精密稱取甘草酸單銨鹽對照品7.42 mg（相當(dāng)于甘草酸7.27 mg），芍藥苷5.42 mg，置100 ml的量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，作為對照品溶液。2.3&#

8、160; 供試品溶液的制備取本品10粒，傾出其內(nèi)容物，研細(xì)，取約0.3 g，精密稱定，置具塞錐形瓶內(nèi)，精密加入稀乙醇25 ml，密塞，稱定重量，超聲處理（功率300 W）30 min，放冷，再稱定重量，用稀乙醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，0.45 m微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。2.4  陰性對照溶液的制備按處方組成，分別取除甘草或白芍之外的其他藥材，按供試品溶液制備項下的方法，制成陰性溶液，按上述色譜條件進(jìn)行檢測。結(jié)果在對照品出峰位置未見其它雜質(zhì)干擾峰（見圖1），說明處方中其他成分對甘草酸、芍藥苷的測定無干擾。2.5  線性范圍的考察精密吸取對照品溶液依次進(jìn)樣2.0

9、，8.0， 12.0， 16.0， 20.0 l，按上述色譜條件測定，以對照品峰面積值為縱坐標(biāo)，對照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。甘草酸回歸方程和相關(guān)系數(shù)為：Y=27 630X+13 269， r=0.999 9（n=5），甘草酸和芍藥苷分別在0.151.50 g，0.111.08 g范圍內(nèi)，其絕對進(jìn)樣量X（g）與峰面積Y之間呈良好的線性關(guān)系。2.6  精密度實驗精密吸收甘草酸、芍藥苷對照品溶液重復(fù)進(jìn)樣6次，測定苷草酸、芍藥苷峰面積，RSD分別為0.76%， 0.23%，表明儀器精密度良好。1.芍藥苷       

10、; 2.甘草酸A.對照品（controls,230 nm）  B.對照品（controls,250 nm）C.對照品（controls,235 nm）  D.樣品（sample,235 nm）E.缺甘草的陰性對照（excipents,235 nm）F.缺芍藥的陰性對照（excipents,235 nm） 圖1  對照品與樣品色譜圖(略)2.7  穩(wěn)定性實驗取同一供試品溶液，分別于0，2，4，8，12 h進(jìn)樣測定，甘草酸、芍藥苷峰面積RSD分別為1.27%，0.61%，表明供試品溶液在12 h內(nèi)穩(wěn)定。2.8  重現(xiàn)性實驗取同一批號（060204）

11、樣品6份，按供試品溶液制備方法制備，并按上述色譜條件測定，測得甘草酸含量為1.7 mg/粒，RSD為1.43%，芍藥苷含量為2.1 mg/粒，RSD為1.54%。2.9  加樣回收率實驗取已知含量樣品（甘草酸含量1.7 mg/粒、芍藥苷含量2.1 mg/粒）粉末約0.15 g，定量加入甘草酸和芍藥苷對照品適量，依“2.3”項下的方法操作，制備所需溶液測定，結(jié)果見表2。表2  回收率實驗結(jié)果(略)2.10  樣品含量測定分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)樣，記錄各色譜峰的峰面積，每個樣品重復(fù)2次，峰面積取平均值，按外標(biāo)法計算含量。含量測定結(jié)果見表

12、3。表3  樣品中甘草酸、芍藥苷含量測定結(jié)果(略)*為每粒中含量3  討論3.1  樣品提取溶劑的考察在參考有關(guān)文獻(xiàn)的基礎(chǔ)上，對胃康靈膠囊的提取溶劑進(jìn)行了考察。取同一批號樣品分別精密加入25 ml的正丁醇3、50%甲醇4、稀乙醇5，6、純甲醇、無水乙醇7，比較5種不同溶劑的提取效果。結(jié)果稀乙醇可較好去除干擾雜質(zhì)，且提取完全，易回收。故選擇稀乙醇作為樣品提取溶劑。3.2  檢測波長的選擇文獻(xiàn)報道檢測波長芍藥苷為230 nm，甘草酸為250 nm。本試驗曾分別在230，250 nm波長處測定兩種對照品的含量，芍藥苷在250 nm處的相對吸收值小于0.5，對靈

13、敏度影響較大，甘草酸在230 nm處的相對吸收值為0.7，對靈敏度有一定影響，但不妨礙含量測定。經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)在235 nm處，甘草酸吸收值有所增加（相對吸收值為0.8），芍藥苷吸收值減少不明顯（相對吸收值為0.9），而且在該波長處測定，可減少雜質(zhì)影響，因此確定235 nm為其檢測波長。3.3  流動相的選擇我們對流動相進(jìn)行了反復(fù)摸索，結(jié)果表明，流動相用甲醇/水系統(tǒng)對甘草酸的分離效果較差，不能達(dá)到基線分離。采用乙腈/水系統(tǒng)可以初步分離，但分離度和峰形達(dá)不到要求。最終在流動相系統(tǒng)中添加0.1%磷酸溶液，能夠?qū)⒋郎y物與雜質(zhì)完全分離，并取得較好的峰形和較高的理論塔板數(shù)，效果滿意。為了保證各指標(biāo)

14、成分與其他成分有良好分離且又能夠在盡可能短的時間內(nèi)完成分析，我們采用了梯度洗脫，并優(yōu)化了洗脫條件，從而既縮短分析時間，又保證了良好的分離。有關(guān)中成藥中甘草酸和芍藥苷含量測定的方法，文獻(xiàn)較多，但都是在兩個波長下分別測定兩者含量的，操作較繁瑣，而在同一流動相系統(tǒng)下同一檢測波長處同時測定中成藥中甘草酸和芍藥苷含量的研究，目前還尚未見報道。本文首次建立了在一個色譜條件下同時測定胃康靈膠囊中的兩個活性成分的方法，使制劑的質(zhì)量控制更加系統(tǒng)全面，并且操作簡捷，省事，便于廣泛推廣。參考文獻(xiàn)：1  國家藥典委員會.中國藥典，部S.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：518.2  肖培根.新編中藥志M.北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2002：259.3  楊江千，陳  理，孫靖霞.RP-HPLC測定強(qiáng)肝膠囊中芍藥苷及甘草酸的含量J.中成藥，2001，23（2）：90.4  周  欣，楊文業(yè). 高效液相色譜法測定丹梔逍遙丸中梔子苷、芍藥苷、丹皮酚和甘草酸含量J.藥物分析雜志，2005