分選型流式細(xì)胞儀

1、BDBD公司生物科學(xué)部公司生物科學(xué)部 BD公司簡介n BD是由是由Maxwell W.Becton和和Fairleigh S. Dickinson于于1897年在紐約創(chuàng)立的，總部設(shè)在新澤西州。年在紐約創(chuàng)立的，總部設(shè)在新澤西州。n 經(jīng)過經(jīng)過100多年的發(fā)展，多年的發(fā)展，BD已成為世界上最大的醫(yī)療技術(shù)已成為世界上最大的醫(yī)療技術(shù)及醫(yī)療設(shè)備公司之一，它以領(lǐng)先的技術(shù)、卓越的產(chǎn)品質(zhì)及醫(yī)療設(shè)備公司之一，它以領(lǐng)先的技術(shù)、卓越的產(chǎn)品質(zhì)量和誠實(shí)可信的服務(wù)贏得了全球用戶及合作伙伴的廣泛量和誠實(shí)可信的服務(wù)贏得了全球用戶及合作伙伴的廣泛贊譽(yù)。贊譽(yù)。n BD一直是全球最專業(yè)、產(chǎn)品線最全的流式細(xì)胞儀生產(chǎn)商一直是全球最專業(yè)、

2、產(chǎn)品線最全的流式細(xì)胞儀生產(chǎn)商和流式技術(shù)領(lǐng)導(dǎo)者。全球市場占有率達(dá)到和流式技術(shù)領(lǐng)導(dǎo)者。全球市場占有率達(dá)到80，中國市，中國市場占有率達(dá)到場占有率達(dá)到85%。 BDBD公司流式細(xì)胞儀公司流式細(xì)胞儀FACSCaliburLSRIIFACSCantoIIInfluxFACSAriaIIAccuri C6LSRFortessaFACSVerseFACSJazzBD FACSAriaIIBD FACSAriaII分選型流式細(xì)胞儀分選型流式細(xì)胞儀 20082008年最新產(chǎn)品年最新產(chǎn)品 集多種專利技術(shù)和完美設(shè)計(jì)集多種專利技術(shù)和完美設(shè)計(jì)n 流式細(xì)胞術(shù)流式細(xì)胞術(shù)(Flow Cytometry,簡稱簡稱FCM)是一種

3、快速、準(zhǔn)是一種快速、準(zhǔn)確、客觀的同時(shí)檢測直線流動(dòng)狀態(tài)中單個(gè)顆粒多項(xiàng)物理確、客觀的同時(shí)檢測直線流動(dòng)狀態(tài)中單個(gè)顆粒多項(xiàng)物理及生物學(xué)特性，加以分析定量的技術(shù)，并可以對(duì)特定群及生物學(xué)特性，加以分析定量的技術(shù)，并可以對(duì)特定群體加以分選。體加以分選。n 研究對(duì)象為生物顆粒，如各種細(xì)胞、染色體、微生物及研究對(duì)象為生物顆粒，如各種細(xì)胞、染色體、微生物及人工合成微球等。人工合成微球等。n 流式細(xì)胞儀流式細(xì)胞儀(Flow Cytometer)集激光技術(shù)、電子物理技集激光技術(shù)、電子物理技術(shù)、光電測量技術(shù)、電子計(jì)算機(jī)技術(shù)、細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、光電測量技術(shù)、電子計(jì)算機(jī)技術(shù)、細(xì)胞熒光化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為一體的一種新型

4、高科技儀器。術(shù)、單克隆抗體技術(shù)為一體的一種新型高科技儀器。 基本概念基本概念 液流系統(tǒng)液流系統(tǒng) 光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng) 電子系統(tǒng)電子系統(tǒng) 數(shù)據(jù)儲(chǔ)存與分析系統(tǒng)數(shù)據(jù)儲(chǔ)存與分析系統(tǒng) 分選系統(tǒng)分選系統(tǒng)流式細(xì)胞儀組成流式細(xì)胞儀組成Fluidics CartCytometer液流系統(tǒng)液流系統(tǒng)AIR PRESSUREBULKINJECTIONSheath TankAIR PRESSUREASPIRATEDWASTE(VACUUM)ASPIRATEDWASTE(DEGAS)SHEATHFILTER0” 9”R1Sheath RegulatorR2Sample RegulatorV17V20V5V6液流系統(tǒng)液流系統(tǒng)樣

5、品流速的選擇樣品流速的選擇 低流速：一般用于分辨率較高的分析，如低流速：一般用于分辨率較高的分析，如DNA分析分析高流速：一般用于定性分析，如免疫分型。采集速度快，影響高流速：一般用于定性分析，如免疫分型。采集速度快，影響分型。分型。光學(xué)系統(tǒng)光學(xué)系統(tǒng)FreqFluorescenceFSC detectorSSC and Fluorescence detector(PMT3, PMT4 etc.)光信號(hào)光信號(hào)11前向角散射光信號(hào)前向角散射光信號(hào)側(cè)向角散射光信號(hào)側(cè)向角散射光信號(hào)熒光信號(hào)熒光信號(hào)LONG (700nm)550 Long Pass (650LP)650 Short Pass (600S

6、P)SHORT (500nm)Pass Through Filters600/100 Band Pass (600/100)Transmitted 550 nm550 - 650 nm (60050)Wavelengths Blocked650 nm550 nm650 nmShort PassLong PassBand PassLONG (700nm)550 Long Pass (650LP)650 Short Pass (600SP)SHORT (500nm)Dichroic FiltersTransmitted 550 nmDiflected 90650 nm550 nmFluorochr

7、omes Overview123電子系統(tǒng)電子系統(tǒng)光電轉(zhuǎn)換器：將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào)光電轉(zhuǎn)換器：將光信號(hào)轉(zhuǎn)換成電信號(hào) 光電二極管光電二極管 光電倍增管（光電倍增管（PMT）放大器兩種放大方式：放大器兩種放大方式： 線性放大（線性放大（lin） 對(duì)數(shù)放大（對(duì)數(shù)放大（log）線性放大：按光強(qiáng)度的線性關(guān)系輸出信號(hào)。用于線性放大：按光強(qiáng)度的線性關(guān)系輸出信號(hào)。用于FSC，SSC， 細(xì)胞周期檢測，細(xì)胞周期檢測，SP細(xì)胞檢測及分選等。細(xì)胞檢測及分選等。對(duì)數(shù)放大：按光強(qiáng)度的對(duì)數(shù)關(guān)系輸出信號(hào)。用于大多數(shù)對(duì)數(shù)放大：按光強(qiáng)度的對(duì)數(shù)關(guān)系輸出信號(hào)。用于大多數(shù)熒光染色實(shí)驗(yàn)。熒光染色實(shí)驗(yàn)。時(shí)間( 秒)電壓脈沖面積脈沖高度脈沖寬

8、度0電脈沖信號(hào)類型：電脈沖信號(hào)類型： 高度信號(hào)高度信號(hào)H 寬度信號(hào)寬度信號(hào)W 面積信號(hào)面積信號(hào)A細(xì)胞周期中粘聯(lián)體區(qū)分細(xì)胞周期中粘聯(lián)體區(qū)分AreaHeightThreshold閾值閾值用于屏蔽噪音信號(hào)和碎片信號(hào)，只有高于等于閥值道數(shù)的用于屏蔽噪音信號(hào)和碎片信號(hào)，只有高于等于閥值道數(shù)的信號(hào)才會(huì)被送入計(jì)算機(jī)進(jìn)行處理。信號(hào)才會(huì)被送入計(jì)算機(jī)進(jìn)行處理。模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器模擬數(shù)字轉(zhuǎn)換器FL2時(shí)間時(shí)間時(shí)間時(shí)間FSCFL1SSC時(shí)間FL3FL1SSCFSCFL2 時(shí)間FL4數(shù)據(jù)儲(chǔ)存與分析系統(tǒng)數(shù)據(jù)儲(chǔ)存與分析系統(tǒng)數(shù)據(jù)儲(chǔ)存數(shù)據(jù)儲(chǔ)存39,27139,271Event 1Event 2Event 3FSCSSC FITCPE

9、List-Mode Data8967530,621PE-AFITC-ATimePE-AFITC-AMay be exported as FCS fileFITC/PE雙染樣本雙染樣本數(shù)據(jù)顯示數(shù)據(jù)顯示 直方圖（直方圖（Histogram） 二維點(diǎn)圖（二維點(diǎn)圖（Dot Plot） 等高線圖（等高線圖（Contour Plot） 密度圖（密度圖（Density） 三維圖（三維圖（3D Plot）等）等 直方圖：顯示單一參數(shù)（橫坐標(biāo)）與通道細(xì)胞個(gè)數(shù)（縱坐標(biāo)）直方圖：顯示單一參數(shù)（橫坐標(biāo)）與通道細(xì)胞個(gè)數(shù)（縱坐標(biāo)）。一條豎線代表一個(gè)細(xì)胞信號(hào)，多豎線累加形成峰圖，一個(gè)峰。一條豎線代表一個(gè)細(xì)胞信號(hào)，多豎線累加

10、形成峰圖，一個(gè)峰即一類細(xì)胞。即一類細(xì)胞。 二維點(diǎn)圖：一個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞信號(hào)。二維點(diǎn)圖：一個(gè)點(diǎn)代表一個(gè)細(xì)胞信號(hào)。 等高線圖：可顯示數(shù)據(jù)信號(hào)的疏密程度。等高線圖：可顯示數(shù)據(jù)信號(hào)的疏密程度。 密度圖：可顯示信號(hào)分布的疏密程度。密度圖：可顯示信號(hào)分布的疏密程度。 三維圖（三維圖（3D Plot）等）等Aria II的噴嘴位于檢測點(diǎn)的噴嘴位于檢測點(diǎn)的下方，因此更換噴嘴后的下方，因此更換噴嘴后無需重新調(diào)整激光光路無需重新調(diào)整激光光路1 1檢測檢測2 2充電充電3 3偏轉(zhuǎn)偏轉(zhuǎn)4 4收集收集分選系統(tǒng)分選系統(tǒng)分析結(jié)果精準(zhǔn)：需要高靈敏度和分辨率分析結(jié)果精準(zhǔn)：需要高靈敏度和分辨率-石英杯流動(dòng)池石英杯流動(dòng)池分選細(xì)胞純

11、度：需要對(duì)目標(biāo)細(xì)胞的準(zhǔn)確定位分選細(xì)胞純度：需要對(duì)目標(biāo)細(xì)胞的準(zhǔn)確定位-Accudrop和和Sweetspot技技術(shù)術(shù)分選速度：保證純度前提下高度分選分選速度：保證純度前提下高度分選-分選速度分選速度70 ,000個(gè)細(xì)胞個(gè)細(xì)胞/秒秒分選后活性：需要整個(gè)系統(tǒng)各環(huán)節(jié)對(duì)細(xì)胞的保護(hù)分選后活性：需要整個(gè)系統(tǒng)各環(huán)節(jié)對(duì)細(xì)胞的保護(hù)-石英杯流動(dòng)池，自動(dòng)無石英杯流動(dòng)池，自動(dòng)無菌管路清洗，溫控菌管路清洗，溫控儀器性能狀態(tài)穩(wěn)定性：質(zhì)控程序的監(jiān)控和調(diào)整儀器性能狀態(tài)穩(wěn)定性：質(zhì)控程序的監(jiān)控和調(diào)整-CS&T儀器質(zhì)控程序及儀儀器質(zhì)控程序及儀器狀態(tài)監(jiān)控器狀態(tài)監(jiān)控流式細(xì)胞儀分選要素流式細(xì)胞儀分選要素高靈敏度高靈敏度-弱表達(dá)樣本

12、檢測弱表達(dá)樣本檢測Dim staining PE population visibleDim staining高靈敏度高靈敏度稀有樣本檢測稀有樣本檢測待測細(xì)胞細(xì)胞群的比例待測細(xì)胞細(xì)胞群的比例并不總是這么高并不總是這么高有時(shí)，很低有時(shí)，很低十萬分之一十萬分之一此時(shí)，靈敏度和分辨率至關(guān)重要此時(shí)，靈敏度和分辨率至關(guān)重要傳統(tǒng)透射光路傳統(tǒng)透射光路采用長通采用長通/短通濾光片短通濾光片光信號(hào)經(jīng)過一次透射，信號(hào)損失光信號(hào)經(jīng)過一次透射，信號(hào)損失15-20%多色分析時(shí)，熒光檢測靈敏度降低多色分析時(shí)，熒光檢測靈敏度降低八角形八角形/三角形接收裝置三角形接收裝置-BD專利專利采用全反射雙色光鏡采用全反射雙色光鏡光信

13、號(hào)經(jīng)過一次反射，信號(hào)損失僅光信號(hào)經(jīng)過一次反射，信號(hào)損失僅5%保證多色分析時(shí)的熒光檢測靈敏度保證多色分析時(shí)的熒光檢測靈敏度光電倍增管帶通濾光片長通雙色反光鏡細(xì)胞通過激光束的流速變慢，激光細(xì)胞通過激光束的流速變慢，激光照射時(shí)間更長，提高了激光激發(fā)效照射時(shí)間更長，提高了激光激發(fā)效率率流動(dòng)池被光膠耦合在熒光接收物鏡流動(dòng)池被光膠耦合在熒光接收物鏡上，提高了熒光收集效率，保證多上，提高了熒光收集效率，保證多色應(yīng)用中最佳的靈敏度和分辨率色應(yīng)用中最佳的靈敏度和分辨率固定光路，無需每日調(diào)節(jié)，機(jī)器隨固定光路，無需每日調(diào)節(jié)，機(jī)器隨開隨用，減少人為可變性，提高實(shí)開隨用，減少人為可變性，提高實(shí)驗(yàn)重復(fù)性驗(yàn)重復(fù)性石英杯流動(dòng)

14、池石英杯流動(dòng)池 開機(jī)光路無需調(diào)整開機(jī)光路無需調(diào)整 一鍵式操作一鍵式操作 無需操作者的豐富經(jīng)驗(yàn)無需操作者的豐富經(jīng)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性好實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性好實(shí)測檢測靈敏度：實(shí)測檢測靈敏度：FITC: 10 MESF PE:10 MESF實(shí)測分辨率：實(shí)測分辨率：CV=1.6% 二極管激光器，安裝在分選模塊裝置左側(cè)二極管激光器，安裝在分選模塊裝置左側(cè) 可以提供側(cè)液流圖像的照相機(jī)可以提供側(cè)液流圖像的照相機(jī) 用于觀察用于觀察BD AccudropTM 微球熒光的發(fā)射光濾光片微球熒光的發(fā)射光濾光片Accudrop微球是一種熒光微球，被位于偏轉(zhuǎn)板微球是一種熒光微球，被位于偏轉(zhuǎn)板下方的紅激光激發(fā)后，發(fā)射光可以

15、透過側(cè)液流監(jiān)下方的紅激光激發(fā)后，發(fā)射光可以透過側(cè)液流監(jiān)視器前方的濾光片，用于測量視器前方的濾光片，用于測量drop delay。該系。該系統(tǒng)由統(tǒng)由下列部分構(gòu)成：下列部分構(gòu)成：Interrogation pointDrop delayBreakoffNozzle+Cells injected+-LaserDrop delay定義：定義：Drop delay即液滴延遲時(shí)即液滴延遲時(shí)間間，指細(xì)胞通過檢測區(qū)到液滴分離，指細(xì)胞通過檢測區(qū)到液滴分離的間隔時(shí)間的間隔時(shí)間 意義：意義： Drop delay如果能夠被準(zhǔn)如果能夠被準(zhǔn)確確定，就可以保證包裹細(xì)胞的液滴確確定，就可以保證包裹細(xì)胞的液滴表面不會(huì)充上相反

16、的電荷，表面不會(huì)充上相反的電荷，從而實(shí)現(xiàn)從而實(shí)現(xiàn)最高的分選純度及細(xì)胞得率最高的分選純度及細(xì)胞得率耗時(shí)：耗時(shí)：0.5到到1.5小時(shí)小時(shí)輔助材料：熒光微球、熒光顯微鏡、輔助材料：熒光微球、熒光顯微鏡、 玻片、計(jì)算器玻片、計(jì)算器傳統(tǒng)液滴延遲時(shí)間確定傳統(tǒng)液滴延遲時(shí)間確定BD 獨(dú)有專利獨(dú)有專利 Accudrop 技術(shù)：技術(shù)： Accudrop微球是一種熒光微球，被微球是一種熒光微球，被位于偏轉(zhuǎn)板下方的紅激光激發(fā)后，發(fā)射光可以透過側(cè)液流監(jiān)視器前位于偏轉(zhuǎn)板下方的紅激光激發(fā)后，發(fā)射光可以透過側(cè)液流監(jiān)視器前方的濾光片，用于測量方的濾光片，用于測量drop delay。預(yù)先分選預(yù)先分選Accudrop熒光微球熒光

17、微球自動(dòng)準(zhǔn)確設(shè)置最佳液滴延遲時(shí)間自動(dòng)準(zhǔn)確設(shè)置最佳液滴延遲時(shí)間無需手動(dòng)調(diào)節(jié)，減少人為誤差無需手動(dòng)調(diào)節(jié)，減少人為誤差保證實(shí)驗(yàn)的分選純度和得率保證實(shí)驗(yàn)的分選純度和得率Sweet Spot自動(dòng)監(jiān)控自動(dòng)監(jiān)控功能功能 液滴斷點(diǎn)監(jiān)測窗口液滴斷點(diǎn)監(jiān)測窗口 自動(dòng)調(diào)節(jié)振幅，維持?jǐn)帱c(diǎn)穩(wěn)定自動(dòng)調(diào)節(jié)振幅，維持?jǐn)帱c(diǎn)穩(wěn)定 維持維持最佳液滴延遲狀態(tài)最佳液滴延遲狀態(tài) 儀器阻塞報(bào)警，保護(hù)分選樣本不受污染儀器阻塞報(bào)警，保護(hù)分選樣本不受污染，實(shí)現(xiàn)分選時(shí)無人看管，實(shí)現(xiàn)分選時(shí)無人看管分選模式分選模式 Yield Mask：如果目標(biāo)顆粒位于該設(shè)定范圍內(nèi)，則含有目標(biāo)顆粒的液滴和相鄰的液滴都被分選。 Purity Mask：如果非目標(biāo)顆粒位于

18、該設(shè)定范圍內(nèi)，則與其相鄰的含有目標(biāo)顆粒的液滴將不被分選。 Phase Mask：如果目標(biāo)顆粒位于該設(shè)定范圍內(nèi)，則含有目標(biāo)顆粒的液滴將不被分選。AccudropPlate sortingEnrichment2-Way sorting4-Way sorting影響分選細(xì)胞的活性的因素：影響分選細(xì)胞的活性的因素： 細(xì)胞本身細(xì)胞本身 激光功率激光功率 液路系統(tǒng)（噴嘴）液路系統(tǒng)（噴嘴） 分選系統(tǒng)的潔凈程度及溫度控制分選系統(tǒng)的潔凈程度及溫度控制石英杯激發(fā)保證了用小功率激石英杯激發(fā)保證了用小功率激光的效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于大功率空氣光的效率遠(yuǎn)遠(yuǎn)大于大功率空氣激發(fā)的效率，光毒性小，很好激發(fā)的效率，光毒性小，很好的保證細(xì)

19、胞活性。的保證細(xì)胞活性。穩(wěn)定而零剪切力液流系統(tǒng)設(shè)計(jì)最大程度的保穩(wěn)定而零剪切力液流系統(tǒng)設(shè)計(jì)最大程度的保證了細(xì)胞的活性，同時(shí)專利的噴嘴設(shè)計(jì)，進(jìn)證了細(xì)胞的活性，同時(shí)專利的噴嘴設(shè)計(jì)，進(jìn)一步保證了細(xì)胞活性。一步保證了細(xì)胞活性。既有樣本溫控系統(tǒng)也有收集倉溫控既有樣本溫控系統(tǒng)也有收集倉溫控Aria 自動(dòng)無菌消毒清洗自動(dòng)無菌消毒清洗軟件向?qū)逑醋詣?dòng)執(zhí)行軟件向?qū)逑醋詣?dòng)執(zhí)行無菌分選結(jié)果保證，文獻(xiàn)支持無菌分選結(jié)果保證，文獻(xiàn)支持 全自動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)化的無菌清洗流程，密閉式的上全自動(dòng)標(biāo)準(zhǔn)化的無菌清洗流程，密閉式的上樣和分選收集倉，執(zhí)行一次可以保證整個(gè)管樣和分選收集倉，執(zhí)行一次可以保證整個(gè)管路系統(tǒng)在以后連續(xù)路系統(tǒng)在以后連續(xù)4天

20、內(nèi)菌量為天內(nèi)菌量為0的最佳效果。的最佳效果。采用一管采用一管CS&T微球，方便檢測微球，方便檢測微球染料可以被任意激光激發(fā)，涵蓋常微球染料可以被任意激光激發(fā)，涵蓋常用染料熒光波譜用染料熒光波譜自動(dòng)調(diào)整自動(dòng)調(diào)整PMT報(bào)告儀器性能參數(shù)：報(bào)告儀器性能參數(shù)：Qr，Br，CV，跟，跟蹤儀器狀態(tài)蹤儀器狀態(tài)自動(dòng)調(diào)整激光延遲和面積因子自動(dòng)調(diào)整激光延遲和面積因子BD公司專利技術(shù)公司專利技術(shù)Cytometer Setup & Tracking SystemCS&T儀器質(zhì)控程序及儀器狀態(tài)監(jiān)控儀器質(zhì)控程序及儀器狀態(tài)監(jiān)控流式細(xì)胞術(shù)操作流程流式細(xì)胞術(shù)操作流程 樣品制備樣品制備 流式染色、檢測流式染

21、色、檢測 數(shù)據(jù)分析數(shù)據(jù)分析細(xì)胞懸液的制備細(xì)胞懸液的制備 單細(xì)胞懸液（天然，機(jī)械研磨單細(xì)胞懸液（天然，機(jī)械研磨/ /消化）消化） 5 510105 51 110106 6cells/mlcells/ml，約，約0.50.51ml1ml，300300目篩網(wǎng)過濾目篩網(wǎng)過濾 陰性對(duì)照：陰性對(duì)照：自發(fā)熒光自發(fā)熒光，即不經(jīng)熒光染色細(xì)胞內(nèi)部熒光分子經(jīng)光照發(fā)出的，即不經(jīng)熒光染色細(xì)胞內(nèi)部熒光分子經(jīng)光照發(fā)出的熒光。自發(fā)熒光信號(hào)為噪聲信號(hào)。熒光。自發(fā)熒光信號(hào)為噪聲信號(hào)。 同型對(duì)照：同型對(duì)照：自發(fā)熒光非特異熒光自發(fā)熒光非特異熒光，使用與一抗相同種屬來源、相同亞，使用與一抗相同種屬來源、相同亞型、相同劑量的免疫球蛋白，

22、用于消除由于抗體非特異性結(jié)合產(chǎn)生的背型、相同劑量的免疫球蛋白，用于消除由于抗體非特異性結(jié)合產(chǎn)生的背景染色景染色 實(shí)驗(yàn)樣本：實(shí)驗(yàn)樣本：自發(fā)熒光特異熒光非特異熒光自發(fā)熒光特異熒光非特異熒光 補(bǔ)償對(duì)照：補(bǔ)償對(duì)照：雙色或多色分析中，熒光素發(fā)射光譜重疊時(shí)，雙色或多色分析中，熒光素發(fā)射光譜重疊時(shí)，使用單種熒光使用單種熒光素標(biāo)記的單克隆抗體和其余熒光素對(duì)應(yīng)的同型對(duì)照抗體分別進(jìn)行染色，素標(biāo)記的單克隆抗體和其余熒光素對(duì)應(yīng)的同型對(duì)照抗體分別進(jìn)行染色，糾正熒光素發(fā)射光譜重疊，即從一個(gè)被檢測的熒光信號(hào)中去除任何其他糾正熒光素發(fā)射光譜重疊，即從一個(gè)被檢測的熒光信號(hào)中去除任何其他的干擾熒光信號(hào)的干擾熒光信號(hào)設(shè)置對(duì)照及染色

23、設(shè)置對(duì)照及染色 用同型對(duì)照或陰用同型對(duì)照或陰性對(duì)照管調(diào)節(jié)電性對(duì)照管調(diào)節(jié)電壓使陰性群位于壓使陰性群位于“左下角左下角” 用單陽性管依次用單陽性管依次調(diào)節(jié)相鄰熒光之調(diào)節(jié)相鄰熒光之間補(bǔ)償，如間補(bǔ)償，如 FL1-%FL2， FL2-%FL1 染色體分選染色體分選 單克隆細(xì)胞分選單克隆細(xì)胞分選 腫瘤干細(xì)胞分選腫瘤干細(xì)胞分選 轉(zhuǎn)染細(xì)胞分選轉(zhuǎn)染細(xì)胞分選 免疫或免疫相關(guān)細(xì)胞分選免疫或免疫相關(guān)細(xì)胞分選 細(xì)胞生理學(xué)研究細(xì)胞生理學(xué)研究 細(xì)胞膜表面標(biāo)記細(xì)胞膜表面標(biāo)記 細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)標(biāo)記 細(xì)胞周期分析細(xì)胞周期分析 凋亡分析凋亡分析 流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)的應(yīng)用細(xì)胞生理學(xué)研究細(xì)胞生理學(xué)研究 細(xì)胞相對(duì)大小和顆粒性分析細(xì)胞相對(duì)大小和顆粒性分析細(xì)胞生理學(xué)研究細(xì)胞生理學(xué)研究 細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞內(nèi)PHPH值檢測值檢測細(xì)胞生理學(xué)研究細(xì)胞生理學(xué)研究 CaCa2+2+流動(dòng)性檢測：流動(dòng)性檢測：CaCa2+2+是非常重要的細(xì)胞內(nèi)離子，在細(xì)是非常重要的細(xì)胞內(nèi)離子，在細(xì)胞膜到細(xì)胞漿的信號(hào)傳導(dǎo)中起重要的作用。細(xì)胞受到刺胞膜到細(xì)胞漿的信號(hào)傳導(dǎo)中起重要的作用。細(xì)胞受到刺激后，胞內(nèi)激后，胞內(nèi)CaCa2+2+濃度會(huì)發(fā)生改變。濃度會(huì)發(fā)生改變。 最常用的染料：最常用的染料：Indo-1,Fluo-3,Fura redIndo-1,F