藥物分析 藥物的鑒別試驗

1、12藥物分析 主講：南昌大學藥學系 黃惠明 3一、概述一、概述二、二、鑒別試驗的項目鑒別試驗的項目三、鑒別方法三、鑒別方法四、鑒別試驗條件四、鑒別試驗條件五、鑒別試驗的靈敏度五、鑒別試驗的靈敏度 第二章第二章 藥物的鑒別試驗藥物的鑒別試驗4Identification:根據(jù)藥物的分子根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用化學、物理結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)，采用化學、物理化學或生物學方法來判斷藥物的真化學或生物學方法來判斷藥物的真?zhèn)?。偽?1. 取樣取樣2. 鑒別鑒別3. 檢查檢查4. 含量測定含量測定5. 檢驗報告檢驗報告工工 作作 程程 序序 藥品檢驗工作的藥品檢驗工作的基本基本內(nèi)容內(nèi)容6鑒鑒 別別 是根

2、據(jù)藥物的是根據(jù)藥物的分子結(jié)構(gòu)分子結(jié)構(gòu)、理理化性質(zhì)化性質(zhì)，采用化學、物理化，采用化學、物理化學或生物學方法來學或生物學方法來判斷藥物判斷藥物的真?zhèn)蔚恼鎮(zhèn)? .鑒別方法要求鑒別方法要求: 專屬性強、專屬性強、 再現(xiàn)性好、靈敏度高、簡便快再現(xiàn)性好、靈敏度高、簡便快速速7鑒鑒 別別 中國藥典中國藥典鑒別項下規(guī)定的試驗方法鑒別項下規(guī)定的試驗方法, ,僅反僅反應(yīng)藥品某些物理、化學或生物學應(yīng)藥品某些物理、化學或生物學等性質(zhì)的等性質(zhì)的特征特征，不完全不完全代表對該代表對該藥品藥品化學結(jié)構(gòu)化學結(jié)構(gòu)的的確認確認8 用來證實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其用來證實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所標示的藥物，而不是

3、對未知物進行定性分析，所標示的藥物，而不是對未知物進行定性分析，因為這些鑒別試驗雖有一定的專屬性，但不具備因為這些鑒別試驗雖有一定的專屬性，但不具備進行未知物確證的條件，故不能鑒別未知物進行未知物確證的條件，故不能鑒別未知物91. 已知物的確證試驗,不是鑒定未知物的組成和結(jié)構(gòu)，僅用于證實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所標示的藥物標示的藥物，而非對未知物的鑒別。 2.鑒別試驗是個別分析不是系統(tǒng)分析(采用靈敏度高專屬性強的方法,試驗項目少)3.選用藥物的化學鑒別反應(yīng),光譜特征,色譜行為,物理常數(shù)等不同方法鑒別同一個供試品4.鑒別制劑注意消除輔料的干擾10 鑒別試

4、驗鑒別試驗 鑒別試驗項目鑒別試驗項目 鑒別方法鑒別方法 鑒別試驗條件鑒別試驗條件鑒鑒 別別11鑒別實驗項目鑒別實驗項目鑒鑒 別別（一）性狀（一）性狀（二）一般鑒別試驗（二）一般鑒別試驗（三）專屬鑒別試驗（三）專屬鑒別試驗12性狀性狀包括顏色、臭味等應(yīng)包括顏色、臭味等應(yīng)有的有的外觀外觀以及以及溶解度溶解度和和物理常數(shù)物理常數(shù). . 是質(zhì)量重要表征之一是質(zhì)量重要表征之一, ,在一在一定程度上反映藥品的純度及療效定程度上反映藥品的純度及療效. .13 1外觀 指藥物外表感觀和色澤，包括聚集狀態(tài)、晶型、色澤以及臭味等性質(zhì)。 如如中國藥典中國藥典對二巰基丁二鈉的描述為對二巰基丁二鈉的描述為“本品為本品為

5、白色至微黃色的粉末；有類似蒜的特臭白色至微黃色的粉末；有類似蒜的特臭”。 2溶解度 溶解度是藥物的一種物理性質(zhì)，在一定程度上反映了藥品的純度。 如磺胺嘧啶如磺胺嘧啶“在乙醇或丙酮中微溶，在水中幾乎在乙醇或丙酮中微溶，在水中幾乎不溶；在氫氧化鈉試液中易溶，在稀鹽酸中溶解不溶；在氫氧化鈉試液中易溶，在稀鹽酸中溶解”。 鑒別實驗項目鑒別實驗項目14溶劑體積(1g/ml)極易溶解10000溶解度尼莫地平 在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶在丙酮、三氯甲烷或乙酸乙酯中易溶，在乙醇中溶解，在乙醚中微溶，在水中幾乎不溶。解，在乙醚中微溶，在水中幾乎不溶。中國藥典中國藥典15 3 3物理常數(shù)物理常數(shù)

6、 物理常數(shù)：評價藥品質(zhì)量的重要指標物理常數(shù)：評價藥品質(zhì)量的重要指標 藥物鑒別藥物鑒別，藥品的，藥品的純雜程度。純雜程度。 中國藥典中國藥典收載的物理常數(shù)包括：收載的物理常數(shù)包括： 相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)。系數(shù)。 。鑒別實驗項目鑒別實驗項目16 (1) 熔點熔點： 由固體熔化成液體的溫度由固體熔化成液體的溫度 熔融同時分解的溫度熔融同時分解的溫度 在熔化時在熔化時初熔初熔至至全熔全熔的一段溫的一段溫度度。 鑒別實驗項目鑒別實驗項目172）法定測定方法：）法

7、定測定方法：毛細管測定法，分三法：毛細管測定法，分三法：第一法：測定易粉碎的固體藥品第一法：測定易粉碎的固體藥品 第二法：測定不易粉碎的固體藥品第二法：測定不易粉碎的固體藥品 第三法：測定凡士林或其他類似物第三法：測定凡士林或其他類似物質(zhì)質(zhì) 18初熔初熔全熔全熔19 3）影響熔點測定的主要因素）影響熔點測定的主要因素a. 傳溫液傳溫液 mp.在在80以下的，用水以下的，用水 mp.在在80以上的，用硅油或液體以上的，用硅油或液體 石蠟石蠟 b. 毛細管毛細管 中性硬質(zhì)玻璃管，長：中性硬質(zhì)玻璃管，長： 9cm 內(nèi)徑：內(nèi)徑：0.91.1mm 壁厚：壁厚：0.100.15mm c. 升溫速度升溫速度

8、 11.5 /min 熔融同時分解熔融同時分解 2.5 3 /min d. 溫度計溫度計 0.5刻度，且經(jīng)校正刻度，且經(jīng)校正20（2）比旋度比旋度： 在一定波長與溫度下，偏振光透過長在一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm1dm且每且每1ml1ml中含有旋光性物質(zhì)中含有旋光性物質(zhì)1g1g的溶液時測得的旋光度稱的溶液時測得的旋光度稱為比旋度。為比旋度。 反映手性藥物特性及其純度的主要指標反映手性藥物特性及其純度的主要指標 用途：鑒別藥品用途：鑒別藥品 純度檢查純度檢查 含量測定含量測定21鑒別實驗項目鑒別實驗項目 例1: 溴化新斯的明項下所述：“本品的熔點為171176，熔融時同時分解”。 例2：

9、 如維生素C的比旋度測定：“取本品，精密稱定，加水溶解并定量稀釋使成每1ml中約含0.10g的溶液，依法測定，比旋度為+20.5至+21.5”。 22 （3）吸收系數(shù)吸收系數(shù)： 在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物在給定的波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度稱為吸質(zhì)在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度稱為吸收系數(shù)收系數(shù)。 表示方法表示方法： 摩爾吸收系數(shù)摩爾吸收系數(shù) 百分吸收系數(shù)百分吸收系數(shù) 用用 途：途： 檢查純度檢查純度 測定制劑含量測定制劑含量鑒別實驗項目鑒別實驗項目%1cm1E23例1：鑒別是（ ）。A.判斷藥物的純度 B.判斷已知藥物的真?zhèn)蜟.判斷藥

10、物的均一性D.判斷藥物的有效性E.確證未知藥物24例2：溶質(zhì)1g（mL）能在溶劑1000mL中不能完全溶解（ ）。A.極易溶解B.幾乎不溶或不溶C.微溶D.溶解E.略溶25例3：中國藥典收載的熔點測定方法有幾種？測定易粉碎固體藥品的熔點應(yīng)采用哪一法（ ）。A.2種，第一法B.4種，第二法C.3種，第一法D.4種，第一法E.3種，第二法26例4：中國藥典規(guī)定，熔點測定所用溫度計（）。A.有分浸型溫度計B.必須具有0.5刻度的溫度計C.必須進行校正D.若為普通型溫度計，必須進行校正E.采用分浸型、具有0.5刻度的溫度計，并預(yù)先用熔點測定用對照品校正27例5：藥品檢驗工作程序（ ）。A.性狀、檢查、

11、含量測定、檢驗報告B.鑒別、檢查、含量測定、原始記錄C.取樣、檢驗（性狀、鑒別、檢查、含量測定）、記錄與報告D.取樣、鑒別、檢查、含量測定E.性狀、鑒別、含量測定、報告28例5：藥物的性狀項下包括（ ）。A.外觀B.臭C.溶解性D.味E.劑型29例6：我國藥典對“熔點”測定規(guī)定如下（ ）。A.記錄初熔時溫度B.“初熔”系指出現(xiàn)明顯液滴時溫度C.“全熔”系指供試品全部液化時的溫度D.重復(fù)測定三次，取平均值E.被測樣品需研細干燥30 例7：mp（ ）。A.百分吸收系數(shù)B.比旋度C.折光率D.熔點E.沸點31 依據(jù)某一類藥物的依據(jù)某一類藥物的化學結(jié)構(gòu)化學結(jié)構(gòu)或或理化理化性質(zhì)性質(zhì)的特征，通過化學反應(yīng)來

12、鑒別藥的特征，通過化學反應(yīng)來鑒別藥物的真?zhèn)挝锏恼鎮(zhèn)舞b別實驗項目鑒別實驗項目一般鑒別試驗一般鑒別試驗32無機藥物無機藥物: : 根據(jù)陰、陽離子根據(jù)陰、陽離子（鈉鹽、鈣鹽、（鈉鹽、鈣鹽、硫酸鹽、氯化物）硫酸鹽、氯化物）的特殊反應(yīng)的特殊反應(yīng), ,并以藥典附并以藥典附錄項下的一般鑒別試驗為依據(jù)；錄項下的一般鑒別試驗為依據(jù)；有機藥物有機藥物: : 多采用典型的官能團反應(yīng)多采用典型的官能團反應(yīng)（芳香第一胺、水楊酸鹽）芳香第一胺、水楊酸鹽）. .鑒別實驗項目鑒別實驗項目一般一般鑒別試驗鑒別試驗33只能證實是某一類藥物，而不能證實是哪一種藥物。例如:鈉鹽的焰色試驗,不能辨認是氯化鈉、苯鉀酸鈉或者是其它某一種鈉

13、鹽藥物.只適用于確認單一單一的化學藥物，對多種藥物的混合物或有干擾物存在時，不適用。 鑒別實驗項目鑒別實驗項目一般一般鑒別試驗鑒別試驗34無機酸鹽無機酸鹽有機酸鹽有機酸鹽無機金屬鹽類無機金屬鹽類有機氟化物類有機氟化物類芳香第一胺類芳香第一胺類托烷生物堿類托烷生物堿類丙二酰脲類丙二酰脲類中中 國國 藥藥 典典351.有機氟化物有機氟化物無機氟化物無機氟化物 茜素氟藍茜素氟藍 硝酸亞鈰硝酸亞鈰pH 4.3藍紫色藍紫色絡(luò)合物絡(luò)合物36 1 有機氟化物有機氟化物 （地塞米松、依諾沙星、氧氟沙星、醋酸曲安奈德、醋酸氟輕松、醋地塞米松、依諾沙星、氧氟沙星、醋酸曲安奈德、醋酸氟輕松、醋酸氟輕可的松酸氟輕可的

14、松） 取供試品約取供試品約7mg7mg，照氧瓶燃燒法進行有，照氧瓶燃燒法進行有機破壞，用水機破壞，用水20ml20ml與與0.01mol/L0.01mol/L氫氧化鈉溶氫氧化鈉溶液液6.5ml6.5ml為吸收液，待燃燒完全后，充分振為吸收液，待燃燒完全后，充分振 搖，取吸收液搖，取吸收液2ml2ml，加茜素氟藍試液，加茜素氟藍試液 0.5ml0.5ml，再加再加12%12%醋酸鈉的稀醋酸溶液醋酸鈉的稀醋酸溶液0.2 ml0.2 ml，用水，用水稀釋至稀釋至4ml4ml，加硝酸亞鈰試液，加硝酸亞鈰試液0.5ml0.5ml，即顯，即顯藍紫色，同時做藍紫色，同時做空白對照空白對照試驗。試驗。 一般鑒

15、別實驗鑒別方法鑒別方法37 NaFHFOFCNaOH2藍紫色配合物硝酸亞鈰茜素氟藍溶液點燃 1、有機氟化物、有機氟化物38F+OOOOCH2NCH2COOHCH2COOH+Ce3+pH4.3OOOOCH2NCH2COOCH2COOCeFOHH藍紫色39 儀器與材料儀器與材料燃燒瓶為燃燒瓶為500、1000或或2000ml無色、磨口、厚壁、無色、磨口、厚壁、硬質(zhì)玻璃錐型瓶；瓶塞硬質(zhì)玻璃錐型瓶；瓶塞空空心，底部熔封鉑絲一根，心，底部熔封鉑絲一根，下端呈螺旋狀或網(wǎng)狀下端呈螺旋狀或網(wǎng)狀40 本法特點是簡便、快速、破壞完本法特點是簡便、快速、破壞完全，尤其適用于微量樣品的分析全，尤其適用于微量樣品的分析

16、41 2 2有機酸鹽有機酸鹽（1 1）水楊酸）水楊酸1 1）鑒別）鑒別方法一方法一：取供試品的稀溶液，加三：取供試品的稀溶液，加三氯化鐵試液氯化鐵試液1 1滴，即顯紫堇色。滴，即顯紫堇色。2 2）反應(yīng)原理：本品在）反應(yīng)原理：本品在中性中性或或弱酸弱酸性條件下，性條件下，與三氯化鐵試液生成配位化合物，在中與三氯化鐵試液生成配位化合物，在中性時呈紅色，弱酸性時呈紫色。性時呈紅色，弱酸性時呈紫色。 一般鑒別實驗422.水楊酸鹽水楊酸鹽鑒別方法二鑒別方法二FeCl3反應(yīng)反應(yīng)OHCOOH6+ FeCl312HClO-COO-2Fe3Fe+弱酸性中性加稀加稀HClHCl，即析出白色沉淀；分離，沉淀溶于，即

17、析出白色沉淀；分離，沉淀溶于醋酸銨溶液。醋酸銨溶液。43（2 2）酒石酸鹽酒石酸鹽1）鑒別方法鑒別方法：取供試品的中性溶液，置取供試品的中性溶液，置潔凈的試管中，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，潔凈的試管中，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在試管內(nèi)置水浴中加熱，銀即游離并附在試管內(nèi)壁成壁成銀鏡。一般鑒別實驗一般鑒別實驗44 2 2） 反應(yīng)原理：其反應(yīng)式為：反應(yīng)原理：其反應(yīng)式為： HOCHCOOH + 2Ag(NH3)2OH HOCHCOOH HOCCOONH4 2Ag + + 2NH3 + 2H2O HOCCOONH445 3 芳香第一胺類（1）鑒別方法：取供試品約：取供試品約50mg5

18、0mg，加稀鹽，加稀鹽酸酸1ml1ml，必要時緩緩煮沸使溶，放冷，加，必要時緩緩煮沸使溶，放冷，加亞亞硝酸鈉硝酸鈉溶液（溶液（0.1mol/L0.1mol/L）數(shù)滴，滴加）數(shù)滴，滴加堿性堿性-萘酚萘酚試液數(shù)滴，視供試品不同，生成試液數(shù)滴，視供試品不同，生成橙黃色橙黃色到猩紅色沉淀到猩紅色沉淀。 （2）反應(yīng)原理：重氮化-偶合反應(yīng)一般鑒別實驗46NHOOH(紅色）NaOHN_ClNHClNaNO2，+NH2NRRR 47 中國藥典2005版二部芳香第一胺反應(yīng)鑒別的藥物 對乙酰氨基酚 鹽酸普魯卡因 艾司唑侖 硝西泮 奧沙西泮 磺胺嘧啶48 4 4 托烷生物堿類托烷生物堿類 （硫酸阿托品、氫溴酸山莨菪

19、堿、氫溴酸東莨菪堿）（硫酸阿托品、氫溴酸山莨菪堿、氫溴酸東莨菪堿） （1）鑒別方法：取供試品約）鑒別方法：取供試品約10mg10mg，加發(fā)煙硝，加發(fā)煙硝酸酸5 5滴，置水浴上蒸干，即得黃色的殘渣，放滴，置水浴上蒸干，即得黃色的殘渣，放冷，加乙醇冷，加乙醇2-32-3滴，加固體氫氧化鉀一小顆，滴，加固體氫氧化鉀一小顆，即顯深紫色。即顯深紫色。 （2 2）反應(yīng)原理：托烷生物堿類均具有莨）反應(yīng)原理：托烷生物堿類均具有莨菪酸結(jié)構(gòu)，有菪酸結(jié)構(gòu)，有VitaliVitali反應(yīng)，顯反應(yīng)，顯紫色紫色。后馬托品。后馬托品具莨菪醇結(jié)構(gòu)而不具莨菪酸結(jié)構(gòu)，無此反應(yīng)。具莨菪醇結(jié)構(gòu)而不具莨菪酸結(jié)構(gòu)，無此反應(yīng)。一般鑒別實驗

20、49莨菪酸莨菪酸三硝基衍生物三硝基衍生物醌式化合物醌式化合物硝基化反應(yīng)硝基化反應(yīng)莨菪醇莨菪醇50 5 5無機金屬鹽無機金屬鹽（1 1）NaNa、K K、CaCa的焰色反應(yīng)的焰色反應(yīng) 1 1）鑒別方法：取鉑絲，用鹽酸濕潤后，）鑒別方法：取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯各離子的特征顏色。即顯各離子的特征顏色。 NaNa+ + 鮮黃色鮮黃色 K K+ + 紫色紫色 CaCa2+2+ 磚紅色磚紅色一般鑒別實驗512）測定原理：）測定原理： 火焰光譜的譜線不同火焰光譜的譜線不同Na 589.0nm、589.6nm，顯黃色。K 766.49nm

21、、769.90nm，由于人眼 在此波長附近敏感度較差，顯紫色。Ca 622nm、554nm、442.67nm與 602nm， 622nm的譜線最強，磚紅色。一般鑒別實驗52 （2 2）銨鹽）銨鹽 鑒別方法：鑒別方法： 供試品供試品+NaOH NH3a.發(fā)生氨臭；發(fā)生氨臭；b.b.遇濕潤的紅色石蕊試紙遇濕潤的紅色石蕊試紙 藍藍c.c.硝酸亞汞硝酸亞汞試液濕潤的濾紙試液濕潤的濾紙 黑黑一般鑒別實驗53NH4+OHNH3+H2ONH43+2Hg (NO3)2+H2OOHgHgNH2 .NO3+2Hg+3 NH4NO3254 6 6 無機酸根無機酸根 （1 1）氯化物）氯化物 鑒別一：鑒別一：硝酸銀反

22、應(yīng)：硝酸銀反應(yīng)： Cl- + AgNO3 AgCl NH3H2O 沉淀溶解 +HNO3 沉淀生成 如供試品為生物堿或其他有機堿的鹽酸鹽，須如供試品為生物堿或其他有機堿的鹽酸鹽，須先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，先加氨試液使成堿性，將析出的沉淀濾過除去，取濾液進行試驗。取濾液進行試驗。 一般鑒別實驗55 鑒別二 取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳取供試品少量，置試管中，加等量的二氧化錳, ,混勻混勻, ,加硫酸濕潤加硫酸濕潤, ,緩緩加熱緩緩加熱, ,即發(fā)生氯氣即發(fā)生氯氣. . Cl2 + KI-淀粉試紙 藍色一般鑒別實驗一般鑒別實驗56 （2）硫酸鹽 鑒別一：鑒別一： SO42

23、- + BaCl2 BaSO4 沉淀在 HCl或 HNO3中不溶解。 鑒別二：鑒別二： 取供試品溶液，加取供試品溶液，加醋酸鉛醋酸鉛試液，即生成白色沉試液，即生成白色沉淀；分離，沉淀在淀；分離，沉淀在醋酸銨醋酸銨試液或試液或氫氧化鈉氫氧化鈉試液試液中溶解中溶解。一般鑒別實驗57 （3）硝酸鹽 鑒別一：取供試品溶液，加等量硫酸，混合冷卻沿壁管加FeSO4試液,使成兩液層，界面顯棕色 鑒別二： 取供試品溶液，加硫酸和銅絲，加熱即生成紅棕色蒸汽。一般鑒別實驗58（三）專屬鑒別試驗（三）專屬鑒別試驗 證實某一種藥物的依據(jù)證實某一種藥物的依據(jù) 它根據(jù)每一種藥物化學結(jié)構(gòu)的差異它根據(jù)每一種藥物化學結(jié)構(gòu)的差異

24、及其引起的物理化學性質(zhì)不同及其引起的物理化學性質(zhì)不同, ,選用某選用某些些靈敏的定性靈敏的定性反應(yīng)反應(yīng), ,來鑒別藥物真?zhèn)蝸龛b別藥物真?zhèn)? .鑒別實驗項目鑒別實驗項目59 一般鑒別試驗一般鑒別試驗, , 區(qū)別不同區(qū)別不同類別類別的藥物。的藥物。 專屬鑒別試驗專屬鑒別試驗，區(qū)別各個藥物，區(qū)別各個藥物單體單體，達，達到最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康?。到最終確證藥物真?zhèn)蔚哪康摹?0如：母核相同，如：母核相同， 取代基不同取代基不同一般鑒別試驗一般鑒別試驗?zāi)骋荒骋活愵愃幬锼幬飳勹b別實驗專屬鑒別實驗此類藥物中的此類藥物中的某一某一種種藥物藥物61HNNHOOC2H5OC2H5苯巴比妥司可巴比妥鈉巴比妥HNNO

25、OONaCH2CHCH2C3H7HNNHOOC2H5O62例1：重氮化反應(yīng)要求在強酸性介質(zhì)中進行，這是因為（ ）。A.防止亞硝酸揮發(fā)B.可加速反應(yīng)的進行C.重氮化合物在酸性溶液中較穩(wěn)定D.可使反應(yīng)平穩(wěn)進行E.可防止生成偶氮氨基化合物63例2：影響重氮化反應(yīng)的因素有（ ）。A.藥物的脂溶性B.加入的酸量C.催化劑D.反應(yīng)溫度E.滴定方式64例3：重量分析法分為（ ）。A.萃取法B.揮發(fā)法C.酸性沉淀法D.提取沉淀法E.沉淀法65 四四 鑒別方法鑒別方法 化學法化學法光譜鑒別法光譜鑒別法色譜鑒別法色譜鑒別法 生物學法生物學法要求：專屬性強、再現(xiàn)性好、靈敏度高、操作簡便快速要求：專屬性強、再現(xiàn)性好、

26、靈敏度高、操作簡便快速66四、鑒別方法四、鑒別方法（一）化學鑒別法（一）化學鑒別法 三氯化鐵呈色反應(yīng)三氯化鐵呈色反應(yīng)(Ar-OH, Ar-OCOCH3) 異羥戊酸鐵反應(yīng)異羥戊酸鐵反應(yīng)(Ar-COOH;-COOR) 1. 顯色反應(yīng)鑒別法顯色反應(yīng)鑒別法 茚三酮呈色反應(yīng)茚三酮呈色反應(yīng)(脂肪氨基脂肪氨基,氨基酸）氨基酸） 重氮化重氮化-偶合呈色反應(yīng)偶合呈色反應(yīng)(Ar-NH2;-NHCOR) 氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng)氧化還原顯色反應(yīng)及其它顏色反應(yīng) 67 與金屬離子的沉淀反應(yīng)與金屬離子的沉淀反應(yīng) 2. 沉淀生成鑒別法沉淀生成鑒別法 與硫氰化鉻銨的沉淀反應(yīng)與硫氰化鉻銨的沉淀反應(yīng) 其它沉淀反應(yīng)其它沉淀反

27、應(yīng)(如生物堿沉淀劑）如生物堿沉淀劑） 68 藥物本身在可見光下發(fā)射熒光藥物本身在可見光下發(fā)射熒光 藥物溶液加硫酸后在可見光下發(fā)射熒光藥物溶液加硫酸后在可見光下發(fā)射熒光 3. 熒光反應(yīng)鑒別法熒光反應(yīng)鑒別法 藥物與溴反應(yīng)后，在可見光下發(fā)出熒光藥物與溴反應(yīng)后，在可見光下發(fā)出熒光 藥物與間苯二酚溴反應(yīng)后，發(fā)射出熒光藥物與間苯二酚溴反應(yīng)后，發(fā)射出熒光 藥物其它反應(yīng)后，發(fā)射出熒光藥物其它反應(yīng)后，發(fā)射出熒光 制備衍生物：制備衍生物： 藥物試劑藥物試劑 具有熒光的衍生物具有熒光的衍生物69 1. 胺類、酰脲類、酰胺類藥物經(jīng)強堿處胺類、酰脲類、酰胺類藥物經(jīng)強堿處 理生成理生成氨氣氨氣 ( NH3 ；NH(C2H

28、5)2) 2.含硫藥物經(jīng)強酸處理后，加熱，生成含硫藥物經(jīng)強酸處理后，加熱，生成 4. 氣體生成反應(yīng)鑒別法氣體生成反應(yīng)鑒別法 硫化氫硫化氫氣氣體體(H2S+Pb2+ PbS +2H+) 3.含碘有機藥物，加熱。生成紫色含碘有機藥物，加熱。生成紫色碘碘蒸蒸 汽汽 4.含醋酸酯和乙酰胺類藥物酸水解后，含醋酸酯和乙酰胺類藥物酸水解后， 加乙醇可產(chǎn)生加乙醇可產(chǎn)生乙酸乙酯乙酸乙酯705. 制備衍生物測定熔點法制備衍生物測定熔點法 藥物試劑藥物試劑 新化合物有一定新化合物有一定mp; 藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。藥物酸化或堿化生成游離酸或堿。 操作繁瑣費時間，應(yīng)用較少。操作繁瑣費時間，應(yīng)用較少。71化學鑒

29、別法化學鑒別法化學鑒別法必須反應(yīng)迅速、現(xiàn)象明顯化學鑒別法必須反應(yīng)迅速、現(xiàn)象明顯 類型：類型：(1)(1)呈色反應(yīng)鑒別法呈色反應(yīng)鑒別法 (2)(2)沉淀生成反應(yīng)鑒別法沉淀生成反應(yīng)鑒別法 (3)(3)熒光反應(yīng)鑒別法熒光反應(yīng)鑒別法 ( (4)4)氣體生成鑒別法氣體生成鑒別法 （5 5）使試劑褪色鑒別法）使試劑褪色鑒別法72(1)(1)呈色反應(yīng)鑒別法呈色反應(yīng)鑒別法 三氯化鐵呈色反應(yīng)三氯化鐵呈色反應(yīng)HOOCH3N對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚 異羥肟酸鐵反應(yīng)異羥肟酸鐵反應(yīng)OOOCH3CH3CH3氯貝丁酯氯貝丁酯 Cl化學鑒別法化學鑒別法73(1)(1)呈色反應(yīng)鑒別法呈色反應(yīng)鑒別法 茚三酮呈色反應(yīng)茚三酮呈色反應(yīng)

30、 重氮化重氮化- -偶合呈色反應(yīng)偶合呈色反應(yīng)OHOHNH2左旋多巴左旋多巴 HOOCH3N對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚化學鑒別法化學鑒別法74(2)(2)沉淀生成鑒別法沉淀生成鑒別法 與重金屬離子沉淀反應(yīng)與重金屬離子沉淀反應(yīng) 還原基團的銀鏡反應(yīng)還原基團的銀鏡反應(yīng) 異煙肼異煙肼化學鑒別法化學鑒別法二銀鹽白色可溶性一銀鹽取代的巴比妥類藥物，3323AgNO CONa AgNO5575 (3)(3)熒光反應(yīng)鑒別法熒光反應(yīng)鑒別法 藥物本身在可見光下發(fā)射熒光藥物本身在可見光下發(fā)射熒光 藥物溶液藥物溶液+ +硫酸硫酸 藥物溶液藥物溶液+ +溴溴 藥物溶液藥物溶液+ +間苯二酚間苯二酚化學鑒別法化學鑒別法76(

31、4)(4)氣體生成反應(yīng)鑒別法氣體生成反應(yīng)鑒別法化學鑒別法化學鑒別法大多數(shù)伯胺（銨）類藥物、酰尿類以及某大多數(shù)伯胺（銨）類藥物、酰尿類以及某 些酰胺類藥物些酰胺類藥物, ,可經(jīng)強堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣可經(jīng)強堿處理后加熱產(chǎn)生氨氣. . 化學結(jié)構(gòu)含硫藥物化學結(jié)構(gòu)含硫藥物, ,可經(jīng)強酸處理后加熱可經(jīng)強酸處理后加熱 產(chǎn)生硫化氫氣體產(chǎn)生硫化氫氣體. .HNNNHNSH2N7H2O硫鳥嘌呤硫鳥嘌呤 巴比妥類藥物巴比妥類藥物77(4)(4)氣體生成反應(yīng)鑒別法氣體生成反應(yīng)鑒別法化學鑒別法化學鑒別法含碘有機藥物含碘有機藥物 經(jīng)直火加熱可經(jīng)直火加熱可 生成紫色碘蒸氣生成紫色碘蒸氣. .OOHHOHNNOI碘苷碘苷含醋

32、酸酯和乙酰胺含醋酸酯和乙酰胺醋酸酯類藥物經(jīng)硫酸醋酸酯類藥物經(jīng)硫酸水解后水解后, ,加乙醇可產(chǎn)加乙醇可產(chǎn)生醋酸乙酯的香味生醋酸乙酯的香味. .HOOCH3N對乙酰氨基酚對乙酰氨基酚78 （二）光譜鑒別法（二）光譜鑒別法1.紫外光譜鑒別法紫外光譜鑒別法原理：原理：有機藥物具有能吸收紫外可見光的基團，則顯示特有機藥物具有能吸收紫外可見光的基團，則顯示特 征的吸收光譜，不同結(jié)構(gòu)的物質(zhì)可產(chǎn)生不同的紫外征的吸收光譜，不同結(jié)構(gòu)的物質(zhì)可產(chǎn)生不同的紫外 可見吸收光譜可見吸收光譜缺點：缺點：光譜較簡單，曲線性狀變化不大，專屬性小于光譜較簡單，曲線性狀變化不大，專屬性小于IR方法：方法： (1)- (5)特點：特點

33、：具有一定的專屬性，儀器普及率高，操作簡單，應(yīng)具有一定的專屬性，儀器普及率高，操作簡單，應(yīng) 用范圍廣用范圍廣 79v 對照品對照法；對照品對照法；v 規(guī)定吸收波長法；規(guī)定吸收波長法；v 規(guī)定吸收波長和相應(yīng)的吸收度法；規(guī)定吸收波長和相應(yīng)的吸收度法；v 規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法；規(guī)定吸收波長和吸收系數(shù)法；v 規(guī)定吸收波長和吸收度比值法。規(guī)定吸收波長和吸收度比值法。 1、紫外光譜鑒別常用的方法：、紫外光譜鑒別常用的方法：801.1.紫外光譜鑒別法紫外光譜鑒別法( (Ultraviolet spectrophotometry) )美法侖 測定測定maxmax，或同時測定，或同時測定minmin； 測定

34、一定濃度的供試液在測定一定濃度的供試液在maxmax處的處的A A 規(guī)定規(guī)定和和E E 規(guī)定規(guī)定 和和A A1 1/A/A2 2 經(jīng)化學處理后，測定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸經(jīng)化學處理后，測定其反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性。收光譜特性。1281紫外紫外- -可見分光光度法可見分光光度法 546 546 種種紅外分光光度法紅外分光光度法 593593 種種高效液相色譜法高效液相色譜法 484484 種種薄層色譜法薄層色譜法 199199 種種氣相色譜法氣相色譜法 3 3 種種821 1 紫外光譜鑒別法紫外光譜鑒別法測定測定maxmax，或同時測定，或同時測定minmin乙胺嘧啶乙胺嘧啶 供試品在供試品在0.1mo

35、l/L0.1mol/L鹽酸介質(zhì)鹽酸介質(zhì)中的紫外吸收在中的紫外吸收在272nm272nm處為峰處為峰,216nm,216nm處處為谷為谷. .光譜鑒別法光譜鑒別法83測定一定濃度的供試液在測定一定濃度的供試液在maxmax處的處的A A 鹽酸布比卡因濃度鹽酸布比卡因濃度0.4mg/ml0.4mg/ml溶液溶液, ,在在263nm、271nm波長處有最大吸收波長處有最大吸收. .其吸其吸光度分別為光度分別為0.53-0.580.53-0.58與與0.43-0.480.43-0.48光譜鑒別法光譜鑒別法84 規(guī)定規(guī)定和和E E 光譜鑒別法光譜鑒別法 經(jīng)化學處理后經(jīng)化學處理后, ,測定其反應(yīng)產(chǎn)物測定其

36、反應(yīng)產(chǎn)物的吸收光譜特性的吸收光譜特性. .85規(guī)定規(guī)定和和A1/AA1/A2 2 兩性霉素在兩性霉素在362nm、381nm、405nm波波長處有最大吸收長處有最大吸收. .規(guī)定規(guī)定362nm與與381nm處吸收度比值不大于處吸收度比值不大于0.6、 381nm與與405nm波長比值不大于波長比值不大于0.9.光譜鑒別法光譜鑒別法86 在在200 200 400nm 400nm 波長范圍內(nèi)掃描波長范圍內(nèi)掃描兩溶液兩溶液, ,要求在相同的波長處有要求在相同的波長處有最最大吸收大吸收、最小吸收最小吸收和相同的和相同的吸收吸收系數(shù)系數(shù)，或，或吸收比吸收比在規(guī)定的范圍內(nèi)在規(guī)定的范圍內(nèi). .UPS(29

37、)UPS(29)與對照品比較與對照品比較, ,對比吸收光譜對比吸收光譜 的一致性的一致性光譜鑒別法光譜鑒別法87鑒別鑒別VB12注射液注射液 : :361nm,550nm =3.153.45 88鑒別鑒別VK1 : :243nm,249nm,261nm,270nm :228nm,246nm,254nm,266nm =0.700.7589 2 2 紅外光譜法紅外光譜法特點：專屬性強，應(yīng)用廣（固體、液體、 氣體）用途：原料藥 同類藥（其他方法不易區(qū)分的 ） 磺胺類、甾體激素類、半合成抗生素光譜鑒別法光譜鑒別法90 2 2 紅外光譜法紅外光譜法Ch.PCh.P（20052005） 采用標準圖譜對照法

38、采用標準圖譜對照法BP BP （20052005） 采用標準圖譜對照法采用標準圖譜對照法USP USP （2929） 采用對照品法采用對照品法JP JP （1515） 采用規(guī)定條件下測定一定波采用規(guī)定條件下測定一定波 數(shù)處的特征吸收峰數(shù)處的特征吸收峰光譜鑒別法光譜鑒別法91 壓片法：取供試品壓片法：取供試品1mg，置瑪瑙研缽中，置瑪瑙研缽中，加入干燥的溴化鉀或氯化鉀細粉約加入干燥的溴化鉀或氯化鉀細粉約200mg，充分研磨混勻，再抽真空壓，充分研磨混勻，再抽真空壓片。片。 片子越薄越透明越好，應(yīng)絕對無水。片子越薄越透明越好，應(yīng)絕對無水。92n糊法：以兩個溴化鉀片把藥物制成的糊糊法：以兩個溴化鉀片

39、把藥物制成的糊狀物夾于其中。狀物夾于其中。n膜法：測定液態(tài)樣品，與糊法測定方法膜法：測定液態(tài)樣品，與糊法測定方法類似。類似。n溶液法：將供試品制成溶液法：將供試品制成1%10%濃度的濃度的溶液在液體池來測定。溶液在液體池來測定。93 圖譜的要求：分辨率為圖譜的要求：分辨率為2cm1條件下繪制，條件下繪制，基線一般控制在基線一般控制在90%透光率以上，供試品透光率以上，供試品取樣量一般控制在使其最強吸收峰在取樣量一般控制在使其最強吸收峰在10%透光率以下。透光率以下。94特征區(qū)指紋區(qū)95 3 3 近紅外光譜法近紅外光譜法 測定物質(zhì)在近紅外譜區(qū)7502500nm的特征光譜，用化學計量的方法提取信息

40、進行定性、定量分析。 特點：快速、準確、對樣品無破壞光譜鑒別法光譜鑒別法963.3.近紅外光譜法近紅外光譜法(Near-(Near-Infrared spectrophotometry) )97 4 4 原子吸收法原子吸收法 利用原子蒸汽可以吸收由該元素作為空心陰極燈發(fā)出的特征譜線，供試液溶液在特征譜線處的最大吸收和特征譜線強度減弱程度進行定性、定量分析。光譜鑒別法光譜鑒別法98 5 5 核磁共振法核磁共振法 測定供試品指定基團上質(zhì)子峰的化學位移和偶合常數(shù)進行藥物的鑒別光譜鑒別法光譜鑒別法99 結(jié)晶物質(zhì)的鑒別 比較 供試品 已知物質(zhì)的X射線粉末衍射圖 依據(jù)： 各衍射線的衍射角（2） 相對強度

41、面間距X X射線粉末衍射法射線粉末衍射法100色譜譜鑒別法色譜譜鑒別法 適用于復(fù)雜環(huán)境下藥物有效成分及雜質(zhì)鑒適用于復(fù)雜環(huán)境下藥物有效成分及雜質(zhì)鑒別別, ,具有分離、分析同時進行的特點具有分離、分析同時進行的特點. .高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)供試品和對照品供試品和對照品色譜峰保留時間一致色譜峰保留時間一致. .氣相色譜法氣相色譜法 (GC)(GC)同同HPLCHPLC要求要求薄層掃描法薄層掃描法(TLC)對照品比較法，對照品比較法， 供試供試品斑點與對照品的品斑點與對照品的Rf值及斑點的顏色應(yīng)一致值及斑點的顏色應(yīng)一致.色譜法（色譜法（ HPLC GC TLC MS)HPLC GC

42、 TLC MS)1011.薄層色譜法（薄層色譜法（ TLC)102色譜譜鑒別法色譜譜鑒別法 同濃度對照品在同一塊薄層板比較同濃度對照品在同一塊薄層板比較 供試品與對照品等體積混合在同一塊薄層供試品與對照品等體積混合在同一塊薄層板比較板比較 供試品與和其化學結(jié)構(gòu)相似對照品比較供試品與和其化學結(jié)構(gòu)相似對照品比較 將將下兩溶液等體積混合點樣、比較下兩溶液等體積混合點樣、比較1.1.薄層色譜法（薄層色譜法（ TLC)TLC)103（三）色譜鑒別法（三）色譜鑒別法 1、薄層薄層色譜鑒別法色譜鑒別法 瑞士瑞士CAMAG SCANNER 3 CAMAG SCANNER 3 薄層掃描儀薄層掃描儀島津島津CS-

43、9000CS-9000雙波長薄層掃描儀雙波長薄層掃描儀104色譜譜鑒別法色譜譜鑒別法高效液相色譜法高效液相色譜法(HPLC)供試品和對照品供試品和對照品色譜峰保留時間一致色譜峰保留時間一致. .內(nèi)標法時內(nèi)標法時, ,藥物峰保留藥物峰保留時間與內(nèi)標峰保留時間比值一致時間與內(nèi)標峰保留時間比值一致氣相色譜法氣相色譜法 (GC)(GC)同同HPLCHPLC要求要求2.2.高效液相色譜法（高效液相色譜法（ HPLC)HPLC)105GC和和HPLC鑒別法鑒別法1062、高效液相高效液相色譜鑒別法色譜鑒別法 氣相氣相色譜鑒別法色譜鑒別法107色譜譜鑒別法色譜譜鑒別法 在高真空狀態(tài)下將被測物質(zhì)離子化在高真空

44、狀態(tài)下將被測物質(zhì)離子化, ,按質(zhì)子按質(zhì)子的質(zhì)荷比的質(zhì)荷比(m/z(m/z) )大小分離進行定性和定量分析大小分離進行定性和定量分析3.3.質(zhì)譜法（質(zhì)譜法（MS)MS)1083.質(zhì)譜鑒別法質(zhì)譜鑒別法 (Mass Spectrometry)9-HO-LPT #1664 RT: 9.39 AV: 1 NL: 5.18E6T: + c sid=-10.00 Q3MS 50.00-500.0050100150200250300350400450500m/z0102030405060708090100Relative Abundance427.17428.18432.18102.02274.21318.2

45、359.94302.22415.1768.96129.93362.28433.21246.16218.16144.95473.23109 生物鑒別法生物鑒別法 特點：利用微生物或?qū)嶒瀯游锢梦⑸锘驅(qū)嶒瀯游?進行鑒別進行鑒別 用途：抗生素抗生素 生化藥物生化藥物生物鑒別法生物鑒別法110鑒鑒 別別 方方 法法化學鑒別法化學鑒別法光譜鑒別法光譜鑒別法生物學法生物學法 色譜鑒別法色譜鑒別法 HPLC、GC鑒別法鑒別法 薄層色譜鑒別法薄層色譜鑒別法 紙色譜鑒別法紙色譜鑒別法 呈色反應(yīng)鑒別法呈色反應(yīng)鑒別法 沉淀生成反應(yīng)鑒別法沉淀生成反應(yīng)鑒別法 氣體生成反應(yīng)鑒別法氣體生成反應(yīng)鑒別法 使試劑褪色鑒別法使試

46、劑褪色鑒別法熒光反應(yīng)鑒別法熒光反應(yīng)鑒別法 紫外光譜鑒別法紫外光譜鑒別法 紅外光譜鑒別法紅外光譜鑒別法 111 化學法和儀器法相結(jié)合化學法和儀器法相結(jié)合, ,每種藥每種藥 品一般選用品一般選用2 2 4 4種方法進行鑒種方法進行鑒 別試驗別試驗, ,相互取長補短相互取長補短. . 方法要有一定的專屬性、靈敏方法要有一定的專屬性、靈敏 性、且便于推廣性、且便于推廣. . 盡可能采用藥典中收載的方法盡可能采用藥典中收載的方法. .鑒別法小結(jié)鑒別法小結(jié)112（2）在維生素C的分子中具有烯二醇的結(jié)構(gòu)，這個結(jié)構(gòu)具有很強的還原性,可以和一些氧化劑作用.ml10(0.2g)水樣品)Ag(TSAgNOml53黑

47、色OCO HHC H2O HOO HO H例1.維生素C的鑒別：維生素C分子中具有2個手性C原子,所以具有旋光性,可以通過測定旋光度來進行鑒別.（1） 藥典中規(guī)定：維生素C的比旋度應(yīng)為+20.5+21.5鑒別法小結(jié)鑒別法小結(jié)113 硫酸阿米卡星的薄層色譜法鑒別試驗：硫酸阿米卡星的薄層色譜法鑒別試驗： “取本品與硫酸阿米卡星標準品適量，分別加水制成每1ml中約含10mg的溶液。照薄層色譜法試驗，吸取上述兩種溶液各10ul，分別點于同一硅膠H薄層板上，以氯仿-甲醇-濃氨溶液-水（1：4：2：1）為展開劑，展開后，晾干，噴以0.2%茚三酮的水飽和正丁醇溶液，在100加熱10min。供試品溶液與標準品

48、溶液所顯主斑點的顏色與位置應(yīng)相同”。 114例1：熒光分光光度（ ）。A.組分的遷移距離與展開劑的遷移距離之比B.測量物質(zhì)的質(zhì)量與溫度C.檢測器與光源成90角D.測量樣品與參比物之間的溫差隨溫度的變化E.橫坐標以-1表示，縱坐標以T%表示115例2：BeerLambert定律A=lgT=ELC中，A.T.E.L分別代表（ ）。A.A吸收度T光源E吸收系數(shù)L液層厚度（cm）B.A吸收度T透光率E吸光度L液層厚度（cm）C.A吸收度T溫度E吸收系數(shù)L液層厚度（cm）D.A吸收度T透光率E吸收系數(shù)L液層厚度（cm）E.A吸收度T透光率E吸收系數(shù)L液層厚度（mm）116例3：紫外測定中的空白對照試驗（

49、）。A.將溶劑盛裝在與樣品池相同的參比池內(nèi)，調(diào)節(jié)儀器，使透光率為100%，然后測定樣品池的吸收度B.將溶劑盛裝在石英吸收池內(nèi)，以空氣為空白，測定其吸收度C.將溶劑盛裝在玻璃吸收池內(nèi)，以空吸收池為空白，測定其吸收度D.將溶劑盛裝在玻璃吸收池內(nèi)，以水為空白，測定其吸收度E.將溶劑裝在吸收池內(nèi)，以水為空白，測定其吸收度，然后從樣品吸收中減去此值117例4：用于官能團鑒別（ ）。A.紫外線分光光度法B.紅外線分光光度法C.直接電位法D.X-衍射光譜E.熒光光譜118例5：高效液相色譜儀常用的檢測器是（ ）。A.紫外檢測器B.紅外檢測器C.熱導檢測器D.電子捕獲檢測器E.光焰離子化檢測器119例6：發(fā)射

50、光譜（ ）。A.紫外線分光光度法B.紅外線分光光度法C.直接電位法D.X-衍射光譜E.熒光光譜120例7：TCL 法鑒別藥物（ ）。A.比較供試品與對照品的死時間B.比較供試品與對照品的保留時間的比值C.比較供試品與對照品的斑點大小D.比較供試品與對照品的比移值E.比較供試品與對照品的斑點顏色121例8：紅外光譜法主要用于藥物的（ ）。A.鑒別、檢查、含量測定B.雜質(zhì)檢查和含量測定C.晶型鑒別D.鑒別、無效晶型檢查E.制劑的鑒別、區(qū)別和檢查122例9：紫外光區(qū)（ ）。A.200400nmB.400760nmC.4000400D.4000400-1E.100nm123例10：紫外法用作定性鑒別時

51、，常用的特征參數(shù)有（ ）。A.max，a，肩峰B.max，min，A1/A2，E1% 1cmC.末端吸收，E1% 1cmD.max/min，末端吸收E.max，min，A124例11：紫外法用于藥物的雜質(zhì)檢查是（ ）。A.利用約物與雜質(zhì)的等吸收點進行檢測的B.彩計算分光光度法求得雜質(zhì)限量C.利用藥物與雜質(zhì)的吸收光譜的差異，選擇合適波長進行檢測D.測定某一波長處雜質(zhì)的百分吸收系數(shù)E.測定雜質(zhì)的一對或幾對波長處的紫外吸收度比 125 溶液的濃度溶液的濃度 溶液的溫度溶液的溫度 溶液的酸堿度溶液的酸堿度 試驗時間試驗時間鑒別實驗條件鑒別實驗條件 干擾成分的存在干擾成分的存在1261、IR和和HPLC

52、的廣泛使用。的廣泛使用。2、制劑中廣泛使用制劑中廣泛使用IR。3、鑒別條目簡練，鑒別條目簡練，2條一個藥物。條一個藥物。127 溫度對試驗結(jié)果有顯著影響者，除另有規(guī)定外，應(yīng)以（ E）。A.1030為準B.1530為準C.2030為準D.20-5為準E.25-2為準128 空白試驗空白試驗：在與供試品鑒別試驗完全在與供試品鑒別試驗完全相同的條件下，除不加供試品外，相同的條件下，除不加供試品外，其它試劑均同樣加入而進行的試驗。其它試劑均同樣加入而進行的試驗。 為了消除為了消除試劑試劑和和器皿器皿可能帶來的影可能帶來的影響，應(yīng)同時進行空白試驗（響，應(yīng)同時進行空白試驗（blank blank test

53、test）以供對照。）以供對照。鑒別試驗靈敏度鑒別試驗靈敏度129用已知溶液代替試液同樣進行的試驗。用已知溶液代替試液同樣進行的試驗。對照試驗用于檢查試劑是否變質(zhì)失效，對照試驗用于檢查試劑是否變質(zhì)失效，或反應(yīng)條件是否控制正常?；蚍磻?yīng)條件是否控制正常。130 空白試驗（ B ）。A.流體藥藥物的物理性質(zhì)B.不加供試品的情況下，按樣品測定方法，同法操作C.用對照品代替樣品同法操作D.用作藥物的鑒別，也可反映藥物的純度E.可用于藥物的鑒別、檢查和含量測定131一一)反應(yīng)的靈敏度（反應(yīng)的靈敏度（sensitivity）在一定條件下可以檢出的某官能團或離子的最小在一定條件下可以檢出的某官能團或離子的最小

54、重量及最低濃度。重量及最低濃度。 最低檢出量（最低檢出量（minimum detectable quantity） 最低檢出濃度（最低檢出濃度（minimum detectable concentration） 實際分析方法驗證中常用檢測限表示實際分析方法驗證中常用檢測限表示(limit of detection,LOD):樣品中被測物能被檢出的最低濃度和樣品中被測物能被檢出的最低濃度和量。量。132應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定的條件下，能夠應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定的條件下，能夠觀測出的供試品的最小量，其單位通常用觀測出的供試品的最小量，其單位通常用微克（微克（g）表示）表示。又稱檢出限量，以又稱檢出限量

55、，以m表示表示 133應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定條件下，能夠觀應(yīng)用某一反應(yīng)，在一定條件下，能夠觀測出供試品的最低濃度，通常以測出供試品的最低濃度，通常以1G（或（或1V）表示，其中）表示，其中G（V）表示含有）表示含有1g重某重某供試品的溶液的供試品的溶液的g（ml）數(shù)。）數(shù)。最低檢出濃度又稱界限濃度。最低檢出濃度又稱界限濃度。 134若鑒定某離子時是用若鑒定某離子時是用Vml樣品溶液，因為樣品溶液，因為溶液是很稀的水溶液，所以溶液是很稀的水溶液，所以Vml可認為就是可認為就是Vg，或，或V106g，而最低檢出量為，而最低檢出量為mg，則：則：1：G=m:V106 或GVm610 135以以K2Cr

56、O4檢出檢出Pb2+時，將時，將Pb2+溶液稀釋至溶液稀釋至Pb2=與水的重量比為與水的重量比為1：200000。取。取0.03ml這這種溶液加入種溶液加入K2CrO4溶液，還能勉強看到黃色渾濁。溶液，還能勉強看到黃色渾濁。溶液再稀或取量少于溶液再稀或取量少于0.03ml時就檢查不出時就檢查不出Pb2+.則15. 02000001003. 01066GVmg 136例如：用不同試劑檢出例如：用不同試劑檢出Cu2+時，取時，取0.05ml Cu2+溶液試驗，各反應(yīng)的靈敏度為：溶液試驗，各反應(yīng)的靈敏度為：試劑 反應(yīng)產(chǎn)物及其顏色 最低檢出量g 最低檢出濃度 HCl HCuCl3 綠色 1 1:50,

57、000 NH3 Cu(NH3)4Cl2 藍色 0.2 1:250,000 K4Fe(CN)6 K2Cu3Fe(CN)62紅褐色 0.02 1:2,500,000 137在與供試品鑒別試驗完全相同的條件在與供試品鑒別試驗完全相同的條件下，除不加供試品外，其它試劑同樣加下，除不加供試品外，其它試劑同樣加入進行的試驗。入進行的試驗。 138五、鑒別試驗的靈敏度五、鑒別試驗的靈敏度（一）反應(yīng)靈敏度和空白試驗（一）反應(yīng)靈敏度和空白試驗 在一定的條件下，能在在一定的條件下，能在盡可能稀盡可能稀的溶液中觀測出的溶液中觀測出盡可能少盡可能少量量的供試品，反應(yīng)對這一要求所能滿足的程度，即稱為的供試品，反應(yīng)對這一

58、要求所能滿足的程度，即稱為反應(yīng)的反應(yīng)的靈敏度靈敏度（sensitivity）。它以兩個相互有關(guān)的量，即）。它以兩個相互有關(guān)的量，即最低檢出量最低檢出量（minimum detectable quantity ）（又稱檢出限量）和）（又稱檢出限量）和最低檢最低檢出濃度出濃度（minimum detectable concentration ）（又稱界限濃度）（又稱界限濃度）來表示。來表示。 所謂所謂空白試驗空白試驗，就是，就是在供試品鑒別試驗完全相同的條件下，在供試品鑒別試驗完全相同的條件下，除不加供試品外，其他試劑均同樣加入而進行的試驗除不加供試品外，其他試劑均同樣加入而進行的試驗。（二）提高反應(yīng)靈敏度的方法（二）提高反應(yīng)靈敏度的方法 1、加入與水互不相溶的有機溶劑提取濃集、加入與水互不相溶的有機溶劑提取濃集 2、改進觀測方法、改進觀測方法139用已知溶液代替試液同樣進行的試驗。用已知溶液代替試液同樣進行的試驗。對照試驗用于檢查試劑是否變質(zhì)失效，對照試驗用于檢查試劑是否變質(zhì)失效，或反應(yīng)條件是否控制正常?；蚍磻?yīng)條件是否控制正常。140 分析方法驗證的指標有（ABCE ）。A.精密度B.準確度C.檢測限D(zhuǎn).敏感度E.定量限141 用于評價藥物含量測定方法的指標有（ BCDE ）。A.定量限B.精密度C.準確度D.選擇性E.線性