降脂排毒片對主要研究結(jié)果的總結(jié)及評價(jià)

1、中藥注冊分類8 申報(bào)資料4對主要研究結(jié)果的總結(jié)及評價(jià) (降脂排毒片)課題名稱 降脂排毒片研究單位 xxxx制藥有限公司申報(bào)單位 xxxx制藥有限公司聯(lián) 系 人 xxxx聯(lián)系方式 Tel: Fax:對主要研究結(jié)果的總結(jié)及評價(jià)一、生產(chǎn)工藝的研究資料 (一)藥材的分揀去雜質(zhì)及質(zhì)量驗(yàn)收 處方各藥味，經(jīng)分揀去雜質(zhì)，按中國藥典20xx年版一部有關(guān)規(guī)定檢驗(yàn)，符合規(guī)定者備用。(二)配料與摻混符合規(guī)定的藥材根據(jù)生產(chǎn)批量大小，按處方稱量配伍，將不同提取方法的藥材分別摻混，分開放置。 (三)提取工藝選擇試驗(yàn) 處方藥材總量為1850g，提取藥材共1850g。根據(jù)藥味所含成分的理化性質(zhì)，大黃、決明子、何首烏、澤瀉擬采用

2、65%乙醇提取，其余梔子、柴胡、莪術(shù)、山楂、茵陳加水煎煮，以正交試驗(yàn)法作工藝考核。1. 大黃、決明子、何首烏、澤瀉的提取工藝考察取大黃、決明子、何首烏、澤瀉適當(dāng)破碎，取處方量，制備工藝正交試驗(yàn)用樣品。正交樣品藥材重800g。其中大黃100g、決明子300g、何首烏200g、澤瀉200g.表1、因素水平表 L9（34）正交表頭水平因 素加65%乙醇量A（倍） 提取時(shí)間 B（小時(shí)） 提取次數(shù)C（次） 1 2 3 10 2 3 8 3 2 6 4 1 表2、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表試驗(yàn)號因 素 A加65%乙醇量（倍） B（小時(shí)） C（次） 123456789 10 2 3 10 3 2 10 4 1 8 2

3、2 8 3 1 8 4 3 6 2 1 6 3 3 6 4 2 取正交試驗(yàn)樣品800g，依表2設(shè)計(jì)提取次數(shù)，回流時(shí)間，加65%乙醇量，分別提取，放冷，濾過,合并濾液，混勻，各取總量的十分之一上清液濃縮,稠膏干燥至恒重,以干膏量和2,3,5,4-四羥基二苯乙烯-2-O-D-葡萄糖苷含量的乘積作為評價(jià)指標(biāo)。表3、正交試驗(yàn)結(jié)果分析表試驗(yàn)號因 素評價(jià)指標(biāo)A溶劑量（倍）B提取時(shí)間（小時(shí)） C提取次數(shù)（次）干膏量（g）葡萄糖苷含量(mg/g)葡萄糖苷總量(mg)1102316.410.12165.972103213.910.86150.953104111.412.27139.88482212.79.71

4、123.32583110.510.80113.40684317.28.69149.4776219.59.2387.69863315.58.26128.03964212.88.55109.44K1456.80 376.98 443.47 K2386.19 392.38 383.71 K3325.16 398.79 340.97 k1152.27 125.66 147.82 k2128.73 130.79 127.90 k3108.39 132.93 113.66 R43.88 7.2734.16由極差結(jié)果分析得出，其中因素A(加65%乙醇量)為顯著因素，其次為C(提取次數(shù))，而B(提取時(shí)間)影響

5、最小，即A > C >B。最優(yōu)條件為A1B3C1；由于提取時(shí)間對提取結(jié)果影響最小，綜合考慮實(shí)際生產(chǎn)因素，確定提取工藝為加65%乙醇10倍量提取三次，第一次4小時(shí)，第二次3小時(shí)、第三次2小時(shí)。正交結(jié)果驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)取兩份樣品按處方量配伍，制得驗(yàn)證樣品藥材，每份重800g。取兩份驗(yàn)證樣品800g，分別置10000ml燒瓶中，加65%乙醇8000ml，第一次提取4小時(shí)，第二次提取3小時(shí)，第三次提取2小時(shí)，濾過，混勻，取十分之一上清液濃縮，稠膏干燥至恒重，評價(jià)。 結(jié)果：驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性及穩(wěn)定性均好。說明正交選定的工藝可以在生產(chǎn)中采用。2. 梔子、柴胡、莪術(shù)、山楂、茵陳的提取工藝考察取梔子、柴胡

6、、莪術(shù)、山楂、茵陳藥材適當(dāng)破碎，按處方量配伍，制備工藝正交試驗(yàn)用樣品。正交樣品藥材重1050g。其中山楂300g、茵陳300g、梔子100g 、 莪術(shù)200g、 柴胡150g。表4、因素水平表 L9（34）正交表頭水平因 素加水量A（倍） 煎煮時(shí)間 B（小時(shí)） 煎煮次數(shù)C（次） 1 2 3 10 1 3 8 2 2 6 3 1 表5、正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)表試驗(yàn)號因 素 A（倍） B（小時(shí)） C（次） 123456789 10 1 3 10 2 2 10 3 1 8 1 2 8 2 1 8 3 3 6 1 1 6 2 3 6 3 2 取正交試驗(yàn)樣品1050g，依表2設(shè)計(jì)煎煮次數(shù)，煎煮時(shí)間，加水量，分別煎

7、煮，放冷，濾過,合并煎液，混勻，濃縮,稠膏干燥至恒重,以干膏中梔子苷的總量為評價(jià)指標(biāo)。表6、正交試驗(yàn)結(jié)果分析表試驗(yàn)號因 素評價(jià)指標(biāo)A溶劑量（倍）B提取時(shí)間（小時(shí)） C提取次數(shù)（次）干膏量（g）梔子苷含量(mg/g)梔子苷總量(mg)11013183.9156.5127.2142.2118.1172.1106.2166.0143.48.328.829.427.978.478.387.547.757.391530.051380.331198.221133.331000.311442.20800.751286.501059.732102231031481258216833761186239632K1

8、4108.60 3464.13 4258.75 K23575.84 3667.14 3573.39 K33146.98 3700.15 2999.28 k11369.53 1154.71 1419.58 k21191.95 1222.38 1191.13 k31048.99 1233.38 999.76 R320.54 78.67419.82 由極差結(jié)果分析得出，其中因素C(提取次數(shù))為顯著因素，其次為A(加水量)，而B(煎煮時(shí)間)影響最小，即C >A >B。最優(yōu)條件為C1A1B3；由于B3 和B2相差不大，綜合考慮實(shí)際生產(chǎn)因素，確定提取工藝為加水10倍量煎煮三次，第一次煎煮3小時(shí)

9、，第二次、第三次煎煮2小時(shí)。 正交結(jié)果驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)。取兩份樣品按處方量配伍，制得驗(yàn)證樣品藥材山楂300g、茵陳300g、梔子100g 、莪術(shù)200g 、柴胡150g。每份重1050g。取兩份驗(yàn)證樣品1050g，分別置夾層鍋中，第一次加水10500ml，煎煮3小時(shí)，第二、三次加水10500ml，各煎煮2小時(shí)，流水冷卻，濾過，混勻，濃縮，稠膏干燥至恒重，評價(jià)。 結(jié)果：驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性及穩(wěn)定性均好。說明正交選定的工藝可以在生產(chǎn)中采用。（五）成型工藝條件的選定1. 制粒工藝選擇 分別用5%PVP、10%淀粉漿作粘合劑；水、50%乙醇作潤濕劑，制粒，由于本品粘性較大，結(jié)果用50%乙醇作潤濕劑，14目篩網(wǎng)制

10、粒，12目篩網(wǎng)整粒能獲得適宜的顆粒。2. 壓片 由于本品的顆粒流動(dòng)性較差，外加0.5%硬脂酸鎂作助流劑，混勻，選用直徑為11mm的淺凹沖頭，理論片重定為0.40g，壓片，成型性好，硬度適中，脆碎度0.2%，符合包衣條件。稱重，得基片2.91Kg。3. 包衣與糖衣片相比，薄膜衣片有明顯的優(yōu)勢：成膜性好、衣層堅(jiān)硬穩(wěn)定、色澤亮麗、光潔細(xì)膩、防潮防濕、崩解時(shí)限短、增重少、生產(chǎn)成本低、操作時(shí)間短、勞動(dòng)效率高，無粉塵飛揚(yáng)，有利于勞動(dòng)保護(hù)等優(yōu)點(diǎn)，特別是薄膜衣片不含糖，糖尿病患者也可使用。故降脂排毒片定為薄膜衣片。高效包衣操作方法及技術(shù)參數(shù)：包衣液配制篩去素片中的細(xì)粉及殘片將素片置高效包衣機(jī)內(nèi)，開啟主電機(jī)，轉(zhuǎn)

11、速控制在1-3轉(zhuǎn)/分，開啟熱風(fēng)，片芯預(yù)熱至40-45攝氏度。開啟噴液系統(tǒng)，調(diào)整好噴槍高度，包衣液流量，霧化壓力，在噴霧過程中片床的溫度保持在3540(此時(shí)鍋速為35轉(zhuǎn)/分)。待片面包勻一層衣后，調(diào)節(jié)鍋轉(zhuǎn)速為69轉(zhuǎn)/分，繼續(xù)操作，直至將包衣液噴完、吹干。包衣結(jié)束后，將包好的薄膜衣片置涼片室干燥。包衣材料采用xxxx藥用輔料有限公司生產(chǎn)的胃溶型薄膜包衣粉（批準(zhǔn)文號為xxxx藥準(zhǔn)字F20xxxx），按常規(guī)高效包衣工藝操作，可以得到理想的成品。由以上試驗(yàn)可總結(jié)本品制法為：以上九味藥材，大黃、決明子、何首烏、澤瀉用10倍量65%乙醇提取三次，第一次4小時(shí)，第二次3小時(shí)，第三次2小時(shí)，合并提取液，靜置，濾

12、過，濾液濃縮成稠膏1.301.40(60)，干燥，粉碎，過篩（五號篩），備用。梔子、柴胡、莪術(shù)、山楂、茵陳加10倍量水煎煮三次，第一次3小時(shí)，第二、三次各2小時(shí)，合并煎液，濃縮成稠膏，干燥，粉碎，過篩（五號篩），與上述細(xì)粉、適量輔料混勻，制粒，壓片，包薄膜衣，即得。(六)經(jīng)三批中試生產(chǎn)考核工藝穩(wěn)定性取處方十倍量藥材，在中試設(shè)備上試驗(yàn)，考核工藝穩(wěn)定性，三批數(shù)據(jù)表明，工藝穩(wěn)定，具可重復(fù)性和再現(xiàn)性。二、質(zhì)量研究的試驗(yàn)資料降脂排毒膠囊收載于國家藥品監(jiān)督管理局國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編（中成藥地方標(biāo)準(zhǔn)上升國家標(biāo)準(zhǔn)部分 內(nèi)科 心系分冊）, 降脂排毒片是根據(jù)降脂排毒膠囊改變劑型的中藥8類新藥（減免臨床研究），現(xiàn)將質(zhì)

13、量標(biāo)準(zhǔn)起草說明報(bào)告如下：【名稱】 降脂排毒片【處方】 與原劑型標(biāo)準(zhǔn)一致?！局品ā?除成型工藝外，與原劑型標(biāo)準(zhǔn)一致。【性狀】 以三批中試產(chǎn)品的實(shí)際性狀描述。 【鑒別】（1）為本品中大黃，何首烏，決明子的薄層鑒別。原標(biāo)準(zhǔn)以大黃對照藥材為對照作鑒別；因本品中何首烏，決明子中也含大黃素等蒽醌類物質(zhì)，故原標(biāo)準(zhǔn)缺大黃陰性對照樣品有干擾，采用修訂后標(biāo)準(zhǔn)，以大黃素對照品為對照，對大黃，何首烏，決明子進(jìn)行鑒別，撤消原標(biāo)準(zhǔn)大黃，何首烏薄層鑒別，經(jīng)與大黃素對照品，缺大黃，何首烏，決明子陰性對照樣品對照，斑點(diǎn)顯色清晰，Rf值適宜，專屬性強(qiáng)。予以采用。（2）為本品中山楂的薄層鑒別，經(jīng)與熊果酸對照品、缺山楂陰性對照樣品對

14、照，斑點(diǎn)顯色清晰，Rf值適宜，專屬性強(qiáng)。予以采用。與原劑型標(biāo)準(zhǔn)一致。（3）原標(biāo)準(zhǔn)收載了本品中梔子的薄層鑒別，因含量測定是測定本品中梔子苷含量，撤消原標(biāo)準(zhǔn)中梔子的薄層鑒別項(xiàng)。 【檢查】 依照中國藥典20xx年版一部附錄(D)的有關(guān)規(guī)定對三批中試產(chǎn)品檢查，均符合藥典有關(guān)規(guī)定。重金屬 三批中試產(chǎn)品重金屬均低于百萬分之五，暫不設(shè)定重金屬檢查項(xiàng)。砷鹽檢查 三批中試產(chǎn)品重金屬均低于百萬分之二，暫不設(shè)定砷鹽檢查項(xiàng)。【微生物檢查】依中國藥典20xx年版一部附錄的有關(guān)規(guī)定對三批中試產(chǎn)品檢查，均符合藥典有關(guān)規(guī)定?！竞繙y定】 梔子的含量測定原標(biāo)準(zhǔn)收載了本品梔子中梔子苷的含量測定方法，經(jīng)驗(yàn)證，原方法樣品制備合理，且

15、峰形對稱，分離度好，陰性無干擾，故采用原標(biāo)準(zhǔn)收載的方法作為含量測定方法。標(biāo)準(zhǔn)曲線 取梔子苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含200g的溶液，以此對照品溶液為母液，分別配制成150g/ml、100g/ml、25g/ml、10g/ml的對照品溶液。分別精密吸取上述各對照品溶液20l,注入液相色譜儀,測定,計(jì)算，即得。回歸曲線為Y(峰面積)= 11.83X(濃度)+20.41 r=0.9998線性范圍為10200g/ml,標(biāo)準(zhǔn)曲線近似過圓點(diǎn),采用外標(biāo)一點(diǎn)法定量。供試品溶液制備方法的選擇1.取重量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，

16、超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。2.取重量差異項(xiàng)下的本品，研細(xì)，取0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，加熱回流2小時(shí)，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得。經(jīng)試驗(yàn)方法與方法比較，結(jié)果基本相同，且方法簡單，故采用此方法制備供試品。精密度 同一樣品連續(xù)進(jìn)樣測定5次，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.9%,小于3.0%。穩(wěn)定性 同一樣品,制備后在0分鐘、30分鐘、1小時(shí)、6小時(shí)、12小時(shí)后

17、分別測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.4%，小于5.0%,樣品放置12小時(shí)內(nèi)穩(wěn)定。重現(xiàn)性 同一樣品，取5份，各0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45分鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。分別精密吸取上述供試品溶液各20l，注入液相色譜儀，測定，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.12%，小于1.4%。加樣回收率 取已知含量的樣品5份，各約 0.4g，精密稱定，置具塞錐形瓶中，精密加入200g/ml的對照品溶液5ml，揮干，再精密加入甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理45分

18、鐘，放冷，再稱定重量，用甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過，精密吸取續(xù)濾液5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，微孔濾膜濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液。取上述供試品溶液各20l,注入液相色譜儀，測定,平均回收率為99.3%。樣品測定 對三批中試產(chǎn)品，采用原標(biāo)準(zhǔn)的含量測定方法測定，其結(jié)果如下： 三批中試樣品梔子苷的含量測定數(shù)據(jù)表批 號含量（mg/片）xx0111xx0112xx01131.481.431.55原劑型標(biāo)準(zhǔn)降脂排毒膠囊每粒裝0.5g，規(guī)定每粒含梔子以梔子苷（C17H24O10）計(jì)，不得少于50g，含量太低，不符合生產(chǎn)實(shí)際。新標(biāo)準(zhǔn)降脂排毒片基片每片重0.4g，根據(jù)三批中試含量測定數(shù)據(jù),考慮藥材來源及生產(chǎn)過程中的損耗，確定含梔子以梔子苷（C17H24O10）計(jì)，不得少于1.0mg?！竟δ苤髦巍?清熱排毒，化瘀降脂。用于濁瘀互阻，高血脂癥。與原劑型標(biāo)準(zhǔn)一致。 【用法用量】 口服，一次2片，一日12次，用于減肥清火時(shí)，可每日服用3次，每次2片。與原劑型標(biāo)準(zhǔn)服用量所相當(dāng)?shù)脑幉牧恳恢??！咀⒁馐马?xiàng)】 脾虛便溏者慎服。與原劑型標(biāo)準(zhǔn)一致。【規(guī)格】 基片每片重