微生物與發(fā)酵工程專題復習

1、微生物與發(fā)酵工程專題復習重慶49中 張運安來源：2009 年上半年試題與研究 一、知識梳理 1.微生物的類群（1）細菌結(jié)構(gòu)與特征細胞壁：與植物細胞壁的成分不同，植物細胞的細胞壁由纖維素和果膠組成，而細菌的細胞壁由蛋白質(zhì)和糖類組成，起保護細胞和維持細胞形狀等功能。細胞質(zhì)：含有核糖體和質(zhì)粒，沒有由膜構(gòu)成的細胞器。質(zhì)粒上含有控制抗藥性、固氮、抗生素生成等基因。擬核：由一個大型的環(huán)狀DNA組成，控制細菌的主要性狀。芽孢：一些細菌在細胞內(nèi)形成的對不良環(huán)境具有較強抗性的休眠體。細菌的運動：有鞭毛的細菌通過鞭毛的擺動可以在水中運動。細菌的增殖：主要通過二分裂進行增殖。菌落：單個或少數(shù)細菌在固體培養(yǎng)基上大量繁

2、殖時形成的一個肉眼可見的、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)的子細胞群體。菌落的特征是菌種鑒定的重要依據(jù)。（2）病毒的結(jié)構(gòu)和增殖結(jié)構(gòu)：主要由核酸和衣殼兩部分組成，有的病毒還有囊膜。病毒的核酸只有一種：DNA或RNA，核酸中貯存著病毒的全部遺傳信息，控制著病毒的一切性狀。衣殼具有保護核酸，決定病毒抗原特異性等功能。增殖：吸附注入核酸合成核酸和蛋白質(zhì)裝配釋放。2微生物的營養(yǎng)（1）微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)微生物生命過程中需要的營養(yǎng)物質(zhì)有碳源、氮源、生長因子、無機鹽、水等。營養(yǎng)物質(zhì)定義作用主要來源碳源凡能提供所需碳元素的物質(zhì)構(gòu)成生物體的細胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物，有些是異養(yǎng)微生物的能源物質(zhì)CO2、NaHCO3、糖類、脂肪酸、石

3、油、花生粉餅等氮源凡能提供所需氮元素的物質(zhì)合成蛋白質(zhì)、核酸以及含氮的代謝產(chǎn)物N2、NH3、銨鹽、硝酸鹽、尿素、牛肉膏、蛋白胨生長因子生長必不可少的微量有機物酶和核酸的組成成分維生素、氨基酸、堿基等（2）培養(yǎng)基的配制原則目的要明確：要根據(jù)所培養(yǎng)的微生物的種類、培養(yǎng)的目的等選擇原料，如果是異養(yǎng)微生物，則培養(yǎng)基中必須含有有機物。營養(yǎng)要協(xié)調(diào)：必須注意各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例。濃度過高不利于微生物生長；碳源、氮源的比例非常重要，當CN為41時，菌體繁殖快，代謝產(chǎn)物少，當CN為31時，菌體繁殖慢，代謝產(chǎn)物多。pH要適宜：真菌的最適pH為5.06.0；細菌的最適pH為6.57.5；放線菌的最適pH為7.58

4、.5。在微生物的生長代謝過程中，由于物質(zhì)的消耗和代謝產(chǎn)物的積累，環(huán)境中的pH會發(fā)生改變，所以一般在培養(yǎng)基中要加入緩沖物質(zhì)。（3）培養(yǎng)基的種類按照物理性質(zhì)分種類是否加凝固劑用途固體培養(yǎng)基是分離、計數(shù)半固體培養(yǎng)基是觀察運動、鑒定菌種液體培養(yǎng)基否工業(yè)生產(chǎn)按照化學成分分種類化學成分用途合成培養(yǎng)基化學成分明確分類、鑒定天然培養(yǎng)基天然物質(zhì)，化學成分不明確工業(yè)生產(chǎn)按照培養(yǎng)基的用途分種類制法原理用途選擇培養(yǎng)基加入某種化學物質(zhì)促進需要微生物生長，抑制不需要微生物的生長分離菌種鑒別培養(yǎng)基加入指示劑或化學藥品依據(jù)微生物的代謝特點鑒定菌種3微生物的代謝（1）初級代謝產(chǎn)物與次級代謝產(chǎn)物的比較產(chǎn)物名稱產(chǎn)生時間作用分布種的

5、特異性舉例初級代謝產(chǎn)物生長過程自身生長和繁殖所必需細胞內(nèi)無氨基酸、核苷酸、多糖、脂類、維生素等次級代謝產(chǎn)物生長后期對自身無明顯生理作用細胞內(nèi)或外有激素、色素、毒素、抗生素等（2）酶合成調(diào)節(jié)和酶活性調(diào)節(jié)的區(qū)別和聯(lián)系區(qū)別：從調(diào)節(jié)對象看，酶合成調(diào)節(jié)是通過酶種類和數(shù)量變化控制代謝速率，而酶活性調(diào)節(jié)是對已存在的酶的活性進行控制，它不涉及酶量的變化。從調(diào)節(jié)效果看，酶合成調(diào)節(jié)間接而緩慢，酶活性調(diào)節(jié)直接而迅速。從調(diào)節(jié)機制看，酶合成調(diào)節(jié)是基因水平的調(diào)節(jié)，它調(diào)節(jié)、控制酶合成；酶活性調(diào)節(jié)是代謝調(diào)節(jié)，它調(diào)節(jié)酶活性。聯(lián)系：在細胞內(nèi)，兩種調(diào)節(jié)方式同時存在，密切配合，高效、準確地控制代謝的正常進行。（3）微生物代謝的人工控

6、制人工控制的目的：最大限度地積累對人類有用的代謝產(chǎn)物。人工控制的措施：A.控制微生物的遺傳特性：誘變處理，選擇符合生產(chǎn)要求的菌種。B.控制發(fā)酵條件：a.控制溶氧量：厭氧微生物控制氧的供應，對需氧微生物保證氧的供應，以通氣量和攪拌速度控制溶氧；b.控制pH：加酸，加堿或加緩沖液；c.控制溫度：注意降溫，將溫度控制在所培養(yǎng)微生物的最適溫度。4微生物的生長（1）微生物群體的生長規(guī)律將少量的某種微生物接種到固定容積的液體培養(yǎng)基中，在適宜的條件下培養(yǎng)，然后定期取樣，測定培養(yǎng)基中細菌種群的生長情況，如果以時間作橫坐標，以細菌數(shù)目的對數(shù)作縱坐標，便可以得到反映細菌生長規(guī)律的曲線。生長時期特點形成原因菌體特征

7、生產(chǎn)應用與控制調(diào)整期不立即繁殖對新環(huán)境的適應代謝活躍，體積增長較快通過菌種、接種量、培養(yǎng)基等縮短調(diào)整期對數(shù)期繁殖速度快，以等比數(shù)列的形式增加生存條件適宜個體形態(tài)和生理特性穩(wěn)定獲取菌種，作為科研材料穩(wěn)定期繁殖速度與死亡速度相等，活菌數(shù)量最大，代謝產(chǎn)物積累最多生存條件惡化（pH變化，代謝產(chǎn)物積累，營養(yǎng)物質(zhì)消耗）開始出現(xiàn)芽孢通過添加新培養(yǎng)基，放出舊培養(yǎng)基，從而延長穩(wěn)定期衰亡期死亡率大大增加生存條件惡化出現(xiàn)多種形態(tài)（2）影響微生物生長的環(huán)境因素溫度：低溫時反應速度降低，高溫使蛋白質(zhì)和核酸的結(jié)構(gòu)發(fā)生不可逆破壞，一般最適溫度為2537。pH：影響酶的活性和膜的穩(wěn)定性而使新陳代謝受阻。最適pH：細菌6.57

8、.5，真菌5.06.0，放線菌7.58.5。氧氣：影響微生物的呼吸。嚴格厭氧型微生物在短時間的有氧也會造成生長停滯或死亡；兼性厭氧型在有氧時進行有氧呼吸，在無氧時進行無氧呼吸。5谷氨酸發(fā)酵的分析（1）菌種選育谷氨酸棒狀桿菌、黃色短桿菌通過誘變育種得到生產(chǎn)用的菌種。（2）培養(yǎng)基的配制培養(yǎng)基的種類：天然培養(yǎng)基，液體培養(yǎng)基。培養(yǎng)基的成分：碳源：豆餅或馬鈴薯水解液、玉米漿等；氮源：豆餅水解液、尿素；生長因子：生物素；無機鹽：K2HPO4、K2O、MgSO4。（3）滅菌培養(yǎng)基和發(fā)酵罐都必須嚴格滅菌（4）擴大培養(yǎng)與接種目的是增大菌種量，縮短調(diào)整期，培養(yǎng)基中的CN=41。（5）發(fā)酵過程不斷通入無菌空氣。攪拌

9、，既能加速氧的溶解，又能使菌種與培養(yǎng)液充分接觸，提高原料的利用率。連續(xù)培養(yǎng)時CN=31。嚴格控制溫度、pH等。當pH呈酸性時，會產(chǎn)生乙酰谷氨酰胺；當溶氧不足時，會生成乳酸或琥珀酸。（6）分離提純采用蒸餾、萃取、離子交換等方法提取谷氨酸。 二、疑難點撥1微生物類群的比較形體微小，結(jié)構(gòu)簡單，通常要用光學顯微鏡和電子顯微鏡才能看清楚的生物統(tǒng)稱為微生物。包括病毒、原核生物界、真菌界、原生生物界等。分類形態(tài)結(jié)構(gòu)生活方式舉例病毒無細胞結(jié)構(gòu)主要由核酸和蛋白質(zhì)衣殼組成寄生植物病毒、動物病毒、噬菌體原核生物界單細胞原核細胞結(jié)構(gòu)寄生、腐生、自養(yǎng)細菌、藍藻、放線菌真菌界單細胞或多細胞真核細胞結(jié)構(gòu)寄生、腐生酵母菌、霉

10、菌原生生物界單細胞真核細胞結(jié)構(gòu)寄生、異養(yǎng)、自養(yǎng)衣藻、變形蟲2微生物與動植物營養(yǎng)的比較營養(yǎng)物質(zhì)是指維持機體生命活動，保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。不同生物所需要的營養(yǎng)物質(zhì)有所差異，具體如下：人和動物的營養(yǎng)物質(zhì)包括：水、無機鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素等六大類。植物的營養(yǎng)物質(zhì)包括：礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)包括：水、無機鹽、碳源、氮源、生長因子等五類。微生物所需的無機鹽與植物所需的礦質(zhì)元素有差別。比如NH4+，在微生物是氮源，在植物是礦質(zhì)元素；CO32-對植物是礦質(zhì)元素，對異養(yǎng)型微生物是無機鹽，對自養(yǎng)型微生物可以是碳源。人和動物所需的無機鹽中沒有氮，他們所需要的氮主要來自蛋白

11、質(zhì)等。維生素是人需要的微量有機物，生長因子是微生物需要的微量有機物。維生素在人體內(nèi)是維持新陳代謝和某些生理功能的必不可少的物質(zhì)，大多是酶的組成部分。生長因子在微生物中也是酶的組成成分，如氨基酸和生物素；有些還是核酸的重要組成部分，如堿基。其具體區(qū)分如下表所示：生物類型營養(yǎng)要素動物（異養(yǎng)）微生物綠色植物（自養(yǎng)）異養(yǎng)自養(yǎng)碳源糖類、脂肪糖、醇、有機酸等CO2、碳酸鹽等CO2、碳酸鹽氮源蛋白質(zhì)或其降解物蛋白質(zhì)或其降解物、有機氮化物無機氮化物、氮無機氮化物，如NO3-、NH4+等能源糖類、脂肪糖、醇、有機酸等氧化無機物或利用太陽光能利用太陽光能生長因子維生素部分需要維生素等生長因子不需要不需要無機元素無

12、機鹽無機鹽無機鹽無機鹽水分水水水水相同點細胞中的化學成分基本相同，均由C、H、O、N、P、S及其他元素組成，且C、H、O、N占細胞干中的90%以上3學習微生物代謝應注意的問題（1）組成酶與誘導酶的存在和合成所需條件：組成酶是細胞內(nèi)一直存在的，其合成只受遺傳物質(zhì)的控制；誘導酶是在一定條件下誘導產(chǎn)生的，其合成既受遺傳物質(zhì)控制，又需誘導物誘導，產(chǎn)生后隨環(huán)境條件改變，可消失。（2）調(diào)節(jié)酶活性的物質(zhì)：調(diào)節(jié)酶活性的物質(zhì)是酶所催化的反應產(chǎn)物，可以是酶的直接催化產(chǎn)物，如谷氨酸對谷氨酸脫氫酶活性的調(diào)節(jié)；也可以是間接產(chǎn)物，如蘇氨酸和賴氨酸對天冬氨酸激酶活性的調(diào)節(jié)。對一種酶活性的調(diào)節(jié)可以是一種產(chǎn)物，也可以是兩種產(chǎn)物

13、共同起作用。酶活性的調(diào)節(jié)既包括組成酶，也包括誘導酶。4理解微生物的生長應注意的問題（1）微生物生長規(guī)律是研究群體而非個體，條件是恒定容積，液體培養(yǎng)基，接種少量、同種細菌，適宜條件下培養(yǎng)。（2）生長曲線橫坐標代表時間，縱坐標代表細菌數(shù)目的對數(shù)。（3）影響調(diào)整期時間長短的因素：繁殖速度快的菌種一般較短；接種菌種來自對數(shù)期的短，甚至沒有調(diào)整期；接種到同樣組成的培養(yǎng)基比接種到組成不同的培養(yǎng)基中時間要短；接種量增大可縮短甚至消除調(diào)整期。（4）連續(xù)培養(yǎng)提高設(shè)備利用率，縮短培養(yǎng)周期，但可延長穩(wěn)定期，提高產(chǎn)量。連續(xù)培養(yǎng)使菌體快速增長，及時排除部分有害代謝產(chǎn)物，但不是將代謝產(chǎn)物釋放到培養(yǎng)基中。（5）分批培養(yǎng)：將

14、微生物置于一恒定容積的培養(yǎng)基中，且培養(yǎng)基一次加入，不再更換。與連續(xù)培養(yǎng)比較，分批培養(yǎng)設(shè)備利用率降低，培養(yǎng)周期長。5影響發(fā)酵過程的因素（1）溫度：溫度對微生物的影響是多方面的。首先，溫度影響酶的活性。在最適溫度范圍內(nèi)，隨著溫度的升高，菌體生長和代謝加快，發(fā)酵反應速率加快；當超過最適溫度范圍以后，隨溫度的升高，酶很快失活，菌體衰老，發(fā)酵周期縮短，產(chǎn)量降低。溫度也能影響生物合成的途徑，此外，溫度還影響發(fā)酵液的物理性質(zhì)以及菌種對營養(yǎng)物質(zhì)的分解吸收等。因此，要保證正常的發(fā)酵過程，就需要維持最適溫度。但菌體生長和產(chǎn)物合成所需的最適溫度不一定相同，通常必須通過實驗確定不同菌種各發(fā)酵階段的最適溫度，采取分段控

15、制。（2）pH：pH能影響酶的活性以及細胞膜的通透性，從而影響微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的吸收和代謝物的分泌。此外，pH還會影響培養(yǎng)基中營養(yǎng)物質(zhì)的分解等。在發(fā)酵過程中，隨著菌體對營養(yǎng)物質(zhì)的利用和代謝產(chǎn)物的積累，發(fā)酵液的pH必然會發(fā)生變化，如尿素被分解時發(fā)酵液的NH4+濃度會上升，pH隨之上升。在工業(yè)生產(chǎn)上，常采用在發(fā)酵液中添加pH的緩沖系統(tǒng)或通過中間補加氨水、尿素、碳酸銨來控制pH。（3）溶解氧：氧的供應對需氧發(fā)酵來說是一個關(guān)鍵因素。好氧型微生物對氧的需要量很大，但在發(fā)酵過程中菌種只能利用發(fā)酵液中的溶解氧，因此，必須向發(fā)酵液中連續(xù)補充大量的氧，并要不斷地進行攪拌，以提高氧在發(fā)酵液中的溶解度。（4）泡沫：

16、在發(fā)酵過程中，通氣攪拌、微生物的代謝過程及培養(yǎng)基中某些成分的分解等，都有可能產(chǎn)生泡沫。發(fā)酵過程中產(chǎn)生一定數(shù)量的泡沫是正?，F(xiàn)象，但過多的持久性泡沫對發(fā)酵是不利的，因為泡沫會占據(jù)發(fā)酵罐的容積，影響通氣和攪拌的正常進行，甚至導致代謝異常，因而必須消除泡沫。（5）營養(yǎng)物質(zhì)的濃度：發(fā)酵液中各種營養(yǎng)物質(zhì)的濃度，特別是碳氮比、無機鹽和維生素的濃度會直接影響菌體的生長和代謝產(chǎn)物的積累。如在發(fā)酵中，NH4+濃度的變化會影響代謝途徑。 三、考例點評 例1（2008年全國理綜卷-3）下列關(guān)于細菌的敘述，錯誤的是（ ）A.硝化細菌能以NH3作為氮源和能源物質(zhì)B.某些細菌可以利用光能固定CO2合成有機物C.生長因子是某

17、些細菌生長過程中需要額外補充的營養(yǎng)物質(zhì)D.含伊紅和美藍試劑的培養(yǎng)基不能用來鑒別牛奶中的大腸桿菌 解析：常用的伊紅美藍乳糖培養(yǎng)基，可用來鑒別飲用水和乳制品中是否存在大腸桿菌等細菌。如果有大腸桿菌，菌落被染成深紫色，從菌落表面的反射光中還可以看到金屬光澤。 參考答案：D 例2.（2008年全國理綜卷-4）下列關(guān)于病毒的敘述，正確的是（ ）A.煙草花葉病毒可以不依賴宿主細胞而增殖B.流感病毒的核酸位于衣殼外面的囊膜上C.腸道病毒可在經(jīng)高溫滅菌的培養(yǎng)基上生長增殖D.人類免疫缺陷病毒感染可導致獲得性免疫缺陷綜合征 解析：病毒是專性細胞內(nèi)寄生的生物，只能在細胞內(nèi)進行生長增殖，病毒的核酸位于衣殼內(nèi)，囊膜具有

18、保護和寄主細胞膜上受體融合而侵入的作用。獲得性免疫缺陷綜合征（AIDS）即艾滋病的病原體就是人類免疫缺陷病毒（HIV）。 參考答案：D 例3（2008年廣東理基卷-39）取少量酵母菌液放入血球計數(shù)板直接記數(shù)，測得的數(shù)目是（ ）A活細胞數(shù) B死細胞數(shù) C菌落數(shù) D細胞總數(shù) 解析：血球計數(shù)板直接記數(shù)時測得的是觀察到的所有細胞數(shù)，包括死細胞和活細胞，因此是細胞總數(shù)。 參考答案：D 例4.（2008年江蘇生物卷-19）圖甲是果醋發(fā)酵裝置。發(fā)酵初期不通氣，溶液中有氣泡產(chǎn)生；中期可以聞到酒香；后期擱醋酸菌，適當升高溫度并通氣，酒香逐漸變成醋香。圖乙中能表示整個發(fā)酵過程培養(yǎng)液pH變化的曲線是（ ）A B C

19、 D 解析：初期因為培養(yǎng)液中有氧氣，微生物進行有氧呼吸，產(chǎn)物是CO2和水；中期可以聞到酒香，說明進行酒精發(fā)酵，產(chǎn)物是酒精和CO2，因此，前期和中期的產(chǎn)物的溶液的影響都不大。后期擱醋酸菌，產(chǎn)物為醋酸，醋酸的酸性較強，使溶液的pH迅速下降。 參考答案：B 例5.（2008年廣東生物卷-38）苯酚是工業(yè)生產(chǎn)排放的有毒污染物質(zhì)，自然界中存在著降解苯酚的微生物。某工廠產(chǎn)生的廢水中含有苯酚，為了降解廢水中的苯酚，研究人員從土壤中篩選獲得了只能降解利用苯酚的細菌菌株，篩選的主要步驟如圖所示，為土壤樣品，請回答下列問題： （1）中培養(yǎng)菌株的選擇培養(yǎng)基中應加 作為碳源，中不同濃度碳源的培養(yǎng)基 （A.影響；B.不

20、影響）細菌的數(shù)量，如果要測定中活細菌數(shù)量，常采用 法。（2）為對照，微生物在中不生長、在中生長，與培養(yǎng)基的主要區(qū)別在于 ；使用 法可以在上獲得單菌落。采用固體平板培養(yǎng)細菌時為什么進行倒置培養(yǎng)？ 。（3）如何比較不同菌株降解苯酚能力的大小？ 。（4）實驗過程中如何防止其它微生物的污染？ 。 解析：本題考查考生對微生物的分離、培養(yǎng)、數(shù)量測定、無菌操作等基本技術(shù)的掌握和應用所學知識解決實際問題的能力。要篩選出只能利用苯酚作為碳源的微生物，則在選擇培養(yǎng)基中只加苯酚而不加其他碳源；培養(yǎng)基中碳源和氮院的比例及濃度都將影響細菌的數(shù)量；要測定培養(yǎng)液中活細菌的數(shù)量，一般采用稀釋涂布平板法觀察菌落的數(shù)量；根據(jù)實驗

21、目的，對照組與實驗組的區(qū)別在于有無苯酚作為碳源；要獲得單菌落，一般是在固體培養(yǎng)基上采用稀釋涂布平板法或平板劃線法，為防止冷凝后形成的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基，一般采用固體平板培養(yǎng)細菌時要倒置培養(yǎng)。要比較不同菌株降解苯酚能力的大小，可將等量的不同不同菌株分別接種到含苯酚相同的培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時間后再檢測苯酚的分解情況，即可分辨出不同菌株降解苯酚能力的大小了。為防止實驗過程中被其它微生物的污染，從制備培養(yǎng)基到接種與培養(yǎng)等全部實驗過程要無菌操作。 參考答案：（1）苯酚 A.影響 平板菌落計數(shù)(活菌計數(shù)或菌落計數(shù))。 （2）含除苯酚外的其它碳源，以苯酚為唯一碳源 平板分離(稀釋涂布平板或平板劃線

22、分離) 避免培養(yǎng)過程產(chǎn)生的水分影響微生物的生長 （3）用同樣苯酚濃度的培養(yǎng)液培養(yǎng)不同菌株，一定時間后，測定培養(yǎng)液中苯酚含量。 （4）培養(yǎng)基滅菌，接種環(huán)境滅菌，接種過程無菌操作。 例6.（2008年江蘇生物卷-31）為研究酵母菌種群密度的動態(tài)變化，某同學按下表所列條件進行了A、B、C和D共4組實驗，用1000mL錐形瓶作為培養(yǎng)器皿，棉塞封口，在25下靜置培養(yǎng)，其他實驗條件均相同，定時用血球計數(shù)板計數(shù)。根據(jù)實驗結(jié)果給出的酵母菌種群密度變化曲線圖如下，請分析回答以下問題。（1）圖中曲線和分別是 組、 組和 組的結(jié)果。（2）B組和A組的實驗結(jié)果不同的原因是B組 （3）D組和B組的實驗結(jié)果不同的原因是D

23、組 （4）在整個實驗過程中，直接從靜置的培養(yǎng)瓶中取培養(yǎng)原液計數(shù)的做法是錯誤的，正確的方法是 和 。（5）實驗結(jié)束后，用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數(shù)板的做法是錯誤的，正確的方法是 。 解析：培養(yǎng)液中物質(zhì)的濃度過大，會造成細胞滲透失水而抑制酵母菌的生長繁殖，因此，、是A或B，、為C或D。培養(yǎng)液體積越小，則瓶內(nèi)氧氣越多，酵母菌進行有氧呼吸，生長繁殖快，達到最大數(shù)量的時間短，故是B，是A，是D，是C。B組和A組的濃度一樣，只有體積不同，故實驗結(jié)果的差異是由體積造成的，培養(yǎng)液較多，與空氣接觸面積較小，故供氧較少；D組和B組的體積相同而濃度不同，實驗結(jié)果不同只能是由濃度不同造成的，葡萄糖濃度較低，故營養(yǎng)物質(zhì)

24、供應較少；因為酵母菌在培養(yǎng)液中分布并不均勻，故需搖勻培養(yǎng)液后再取樣，由于后期酵母菌的數(shù)量多，可能造成堆積而無法計數(shù)，應進行稀釋后再取樣計數(shù)；由于用試管刷蘸洗滌劑擦洗血球計數(shù)板可能會使血細胞黏固在血球計數(shù)板的小室內(nèi)，造成下次無法使用，正確的方法是浸泡和沖洗。 參考答案：（1）B A D （2）培養(yǎng)液較多，與空氣接觸面積較小，故供氧較少 （3）葡萄糖濃度較低，故營養(yǎng)物質(zhì)供應較少 （4）搖勻培養(yǎng)液后再取樣 培養(yǎng)液后期的樣液稀釋后再計數(shù) （5）浸泡和沖洗 四、跟蹤訓練 1.微生物培養(yǎng)過程中，肉眼鑒別金黃色葡萄球菌和枯草桿菌的重要依據(jù)是（ ）A細菌的大小、形狀、顏色 B有無鞭毛C菌落的大小、形狀、顏色

25、D培養(yǎng)基的不同 2.酵母菌培養(yǎng)液常含有一定濃度的葡萄糖，但當葡萄糖濃度過高時，反而抑制微生物的生長，原因是（ ）A碳源供應太充足 B葡萄糖不是酵母菌的原料C改變了酵母菌培養(yǎng)的pH D細胞會發(fā)生質(zhì)壁分離 3.與調(diào)整期長短有關(guān)的因素中，最全的一組是（ ）用與菌種相同的培養(yǎng)基 營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基 穩(wěn)定期獲得的菌種 對數(shù)期獲得的菌種 接種時間提前 接種量加大 接種量減小 接種種類加大A. B. C. D. 4.據(jù)報道，一些日本人平日并沒有飲用任何酒精飲料，卻經(jīng)常呈醉酒狀態(tài)，后經(jīng)抗生素治療，很快恢復了健康。經(jīng)查這些人腸道里含有大量的（ ）A乳酸菌 B酵母菌 C大腸桿菌 D硝化細菌 5.家庭制作泡菜并無刻意

26、的滅菌環(huán)節(jié)，在發(fā)酵過程中，乳酸菌產(chǎn)生的乳酸可以抑制其它微生物的生長。當環(huán)境中的乳酸積累到一定濃度時，又會抑制乳酸菌自身的增殖。下面對這些現(xiàn)象的描述不正確的是（ ）A在乳酸菌的調(diào)整期和對數(shù)期，種內(nèi)關(guān)系主要表現(xiàn)為互助B進入乳酸菌增長的穩(wěn)定期，由于次級代謝產(chǎn)物的積累，種內(nèi)斗爭趨于激烈C密閉的發(fā)酵環(huán)境使乳酸菌在調(diào)整期和對數(shù)期的種間斗爭中占據(jù)優(yōu)勢D進入穩(wěn)定期，泡菜壇內(nèi)各種生物的抵抗力穩(wěn)定性維持在較高的水平 6.大腸桿菌是遺傳學上明星試驗材料之一，常在生物技術(shù)上用做“工程菌”。我國科學家早在1992年即成功得到能產(chǎn)生乙肝疫苗的轉(zhuǎn)基因大腸桿菌，在一定的培養(yǎng)基上通過發(fā)酵工藝批量生產(chǎn)乙肝疫苗。下圖是大腸桿菌群體的生長曲線。請分析回答：（1）大腸桿菌的生殖方式是 ，其同化作用類型是 。在大規(guī)模生產(chǎn)中，需要將選育的