維生素C生產(chǎn)現(xiàn)狀及應(yīng)用研究2 (1)

1、維生素C生產(chǎn)現(xiàn)狀及應(yīng)用研究1 引言 維生素C(簡(jiǎn)寫(xiě)為VC)，又名L2抗壞血酸，化學(xué)名稱為L(zhǎng)232氧代蘇乙糖醛酸內(nèi)酯，CA登記號(hào)為50-81-7，分子式為 C6H8O6。VC是1種重要的維生素類藥物，可用于預(yù)防、治療疾病，還可作為強(qiáng)化劑和抗氧化劑大量用于食品行業(yè)中。近些年，VC在飼料方面的應(yīng)用發(fā)展也很迅速。此外，VC在化學(xué)工業(yè)中可用作聚合物的促進(jìn)劑及調(diào)節(jié)劑。隨著人們對(duì)VC研究的深入和對(duì)其新用途的開(kāi)發(fā)，VC的需求量將會(huì)與日俱增。2 應(yīng)用情況2.1 醫(yī)療上的應(yīng)用 Vc是人體不能合成的維生素 ,也是人類生存不可缺少的營(yíng)養(yǎng)要素之一。Vc的作用較復(fù)雜，它參與人體內(nèi)的氧化還原過(guò)程，參與氨基酸的代謝、神經(jīng)遞質(zhì)

2、合成和細(xì)胞間質(zhì)膠原蛋白的合成。它能增加組織中的環(huán)磷腺昔、環(huán)磷鳥(niǎo)昔的含量，增強(qiáng)機(jī)體的抗病能力和解毒功能，改善肝功能。Vc還具有降血脂、加速血液凝固、抗組胺和阻止致癌物質(zhì)亞硝胺生成的作用。臨床上Vc用途很多，可防治壞血病、細(xì)菌感染性疾病、病毒感染性疾病、動(dòng)脈粥樣硬化治療高血壓、克山病心源性體克、肝臟疾病、膽絞痛、貧血、特發(fā)性血小板減少性紫癱、過(guò)敏性疾病和膠原病、銀屑病、氟骨癥、膚氨酸尿石癥、剝脫性角質(zhì)松解癥、色素沉著、黃褐斑能促進(jìn)骨折愈合、傷口愈合、防治癌癥，還可用于甲亢、精神病、糖尿病等的輔助治療。目前Vc已被收入美、英、法、德、日等多國(guó)藥典和歐洲、國(guó)際藥典，中國(guó)藥典1995年版也收載了Vc原料

3、藥和片劑，泡騰片、顆粒劑、注射液等四種制劑。2.2 食品中的用途最近，一些科學(xué)家提出了“世紀(jì)營(yíng)養(yǎng)新概念”，過(guò)去人們的膳食以預(yù)防營(yíng)養(yǎng)不足為目標(biāo)，而現(xiàn)在則應(yīng)以預(yù)防疾病、強(qiáng)身建體為出發(fā)點(diǎn)。美國(guó)保羅拉勒斯教授說(shuō)：由于外界因素，諸如輻射、吸煙、空氣污染、過(guò)度勞累、微生物感染等原因，人體內(nèi)部產(chǎn)生的“自由基”越來(lái)越多，這就需要富含抗氧化作用和含自由基消除劑的食品來(lái)阻止、抑制或結(jié)合那些致病因子，削弱自由基對(duì)人體的危害。具體作法是補(bǔ)充更多Vc及Ve等維生素。在西方國(guó)家中，Vc大量添加在各種食品和飲料中，用量很大。如用于食品保鮮、貯藏、健康食品添加劑，人體營(yíng)養(yǎng)劑，桔子汁、果凍、果醬的維生素強(qiáng)化劑及油脂的抗氧化等等

4、。美國(guó)1995年消費(fèi)的Vc中,食品和飲料行業(yè)占35% ,達(dá)到6000噸 。1992年日本Vc消費(fèi)量的用在食品和飲料行業(yè)中，英國(guó)等國(guó)對(duì)飲料、罐頭、面粉、面包、葡萄酒、飲料、牛奶制品等產(chǎn)品中添加Vc的量都作了詳細(xì)規(guī)定。3生產(chǎn)工藝進(jìn)展3.1 萊氏法萊氏法是1933年德國(guó)化學(xué)家 Reichstein等發(fā)明的最早應(yīng)用于工業(yè)生產(chǎn)VC的方法。該法以葡萄糖為原料，經(jīng)催化加氫制取D-山梨醇，然后用醋酸菌發(fā)酵生成L -山梨糖，再經(jīng)酮化和化學(xué)氧化，水解后得到2-酮基-L-古洛糖酸( 2- KLG) , 再經(jīng)鹽酸酸化得到VC。萊氏法生產(chǎn)的VC產(chǎn)品質(zhì)量好、收率高。由于生產(chǎn)原料廉價(jià)易得,中間產(chǎn)物的化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定，至今仍是許

5、多國(guó)外VC生產(chǎn)商, 如 Roche公司、 BASF / Takeda公司和 E. Merck公司等廠商采用的主要工藝方法。但是萊氏法也存在不少缺陷, 諸如生產(chǎn)工序多、勞動(dòng)強(qiáng)度較大，使用大量有毒、易燃化學(xué)藥品，容易造成環(huán)境污染等。為此,自 20世紀(jì)60年代起, 各國(guó)學(xué)者一直致力于萊氏法的改進(jìn)。 萊氏法化學(xué)合成工藝萊氏法合成工藝線路3.2 二步發(fā)酵法 70年代初，我國(guó)首先研究出兩步發(fā)酵法，其先進(jìn)性得到世界公認(rèn)，它是以生物氧化過(guò)程代替萊氏路線的部分化學(xué)合成過(guò)程，進(jìn)而合成維生素C。3.2.1 發(fā)酵 二步發(fā)酵法的生物轉(zhuǎn)化過(guò)程如下: 其中，D-山梨醇轉(zhuǎn)化為L(zhǎng) -山梨糖是由黑醋酸菌完成的，該工藝在萊氏法中就

6、已使用，由于工藝成熟且生物轉(zhuǎn)化率高(98%以上)，因此在二步發(fā)酵法中得以延用。3.2.2 提取工藝 二步發(fā)酵法兩次發(fā)酵以后，發(fā)酵液中僅含8%左右的2-KLG，而殘留菌絲體、蛋白質(zhì)、多糖或懸浮微粒等雜質(zhì)的含量卻很高。這給2-KLG的分離提純帶來(lái)了很大困難，致使后處理費(fèi)用占總成本的比例較大。目前， V工業(yè)生產(chǎn)中常用的2-KLG的分離提純方法有加熱沉淀法、化學(xué)凝聚法和超濾法。加熱沉淀法 加熱沉淀法是2- KLG分離提純的傳統(tǒng)工藝，分離手段較為落后。此工藝通用氫型樹(shù)脂，調(diào) pH至蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)后加熱除蛋白。采用此工藝會(huì)造成有效成分在高溫下降解損失，且發(fā)酵液直接通過(guò)樹(shù)脂柱，造成樹(shù)脂表面污染，降低樹(shù)脂的交

7、換容量和收率。兩次通過(guò)樹(shù)脂柱帶進(jìn)了大量水分，也增大了濃縮耗能?；瘜W(xué)凝聚法 化學(xué)凝聚法是通過(guò)加入化學(xué)絮凝劑來(lái)除去蛋白質(zhì)、菌體、色素等雜質(zhì)，避免了加熱沉淀時(shí)有效成分的損失。季光輝等采用化學(xué)凝聚法對(duì)VC發(fā)酵液進(jìn)行預(yù)處理，使2-KLG的濾液質(zhì)量提高，提取前步收率提高5.2%，VC總收率提高2.5%以上。以殼聚糖為主凝劑，聚丙烯酰胺為助凝劑，通過(guò)化學(xué)凝聚法除蛋白工藝。提取收率由原來(lái)的76%提高到82%，古龍酸優(yōu)級(jí)品率由原來(lái)的35%提高到60%, 成本比原來(lái)降低20%。 但是化學(xué)凝聚法也存在許多不足，比如在處理后的發(fā)酵液離心后所得的上清液中任然存在一定量的蛋白，如果發(fā)酵液染菌則處理效果更不明顯，上清液渾濁

8、，嚴(yán)重影響了產(chǎn)品的品質(zhì)和收率。此外，化學(xué)凝聚法在操作過(guò)程中也會(huì)對(duì)環(huán)境造成污染。超濾法 超濾是一種新興的膜處理技術(shù)，此法具有操作方便、節(jié)能、不造成新的環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)，因此在2- KLG的分離提純中的應(yīng)用日益廣泛。此法與加熱沉淀法不同的是，可在常溫下操作，可減少有效成分的損失；在用膜除蛋白的過(guò)程中，無(wú)任何新的化學(xué)物質(zhì)加入，可減少對(duì)樹(shù)脂的污染和損耗，降低酸堿用量，減少三廢排放。與化學(xué)凝聚法不同的是，在處理染菌的發(fā)酵液時(shí)仍可達(dá)到較好的處理效果。我國(guó)的東北制藥廠1995年從丹麥引進(jìn)目前全國(guó)最大膜面積的平板超濾裝置后， 2 -KLG的分離提純成本比原先的化學(xué)凝聚法節(jié)約了600萬(wàn)元，其收率和生產(chǎn)的自動(dòng)化、連

9、續(xù)化程度也明顯提高。隨著新型膜材料技術(shù)的開(kāi)發(fā)，如陶瓷膜、不銹鋼膜等的應(yīng)用，超濾法的應(yīng)用效果會(huì)有進(jìn)一步的提高。同時(shí),國(guó)內(nèi)外正在探索反滲透、納濾等后序處理新工藝的應(yīng)用, 以完善工藝聯(lián)結(jié)。3.2.3 轉(zhuǎn)化工藝無(wú)論是萊氏法還是二步發(fā)酵法制得的2- KLG，目前在生產(chǎn)上都是通過(guò)化學(xué)反應(yīng)過(guò)程轉(zhuǎn)化為VC。根據(jù)所選試劑的不同，二步發(fā)酵法可分為酸轉(zhuǎn)化法和堿轉(zhuǎn)化法。酸轉(zhuǎn)化法VC化學(xué)轉(zhuǎn)化生產(chǎn)，自萊氏法建立以來(lái)就采用濃鹽酸催化2- KLG，一步制得 VC。國(guó)外有關(guān)學(xué)者對(duì)此法進(jìn)行了許多研究。印度 Ahmedbad Textile工業(yè)研究協(xié)會(huì)研究表明，在以飽和氯代烴(如CHCl3 )、芳烴(如苯、甲苯)為溶劑, 由 2-

10、 KLG與濃鹽酸在 60 75下反應(yīng) 4 6h, 可制得純度為90 % 的粗VC。美國(guó)學(xué)者YOD ICE 等于1985年報(bào)道了2-KLG與濃鹽酸在表面活性劑 Me(CH2)5N +Me3Cl的甲苯溶液中反應(yīng)，可制得純度超過(guò)99%的VC。酸轉(zhuǎn)化法工藝簡(jiǎn)單，操作步驟少，但反應(yīng)過(guò)程中選用濃鹽酸對(duì)設(shè)備腐蝕嚴(yán)重。另外，由于在反應(yīng)體系中引入了惰性溶劑或表面活性劑，使后期的分離造成不便堿轉(zhuǎn)化法我國(guó) VC生產(chǎn)廠家均采用堿法轉(zhuǎn)化2- KLG生產(chǎn)VC。東北制藥總廠等生產(chǎn)單位將2-KLG與甲醇在濃硫酸催化下生成2-酮基- L-古龍酸甲酯，該酯在NaHCO3作用下發(fā)生內(nèi)酯化反應(yīng)生成VC鈉鹽。該法避免了酸催化的上述缺點(diǎn)

11、，且操作工藝簡(jiǎn)單，反應(yīng)條件溫和，適合于規(guī)?；a(chǎn)，但是在生產(chǎn)中的反應(yīng)周期過(guò)長(zhǎng)，甲醇單耗高。有些單位嘗試用CH3ONa代替NaHCO3進(jìn)行堿轉(zhuǎn)化，轉(zhuǎn)化率可高達(dá)92.6%，但產(chǎn)品質(zhì)量較差，且甲醇鈉價(jià)格貴，造成生產(chǎn)成本較高。由 VC鈉鹽制備VC所采取的主要方法是硫酸酸化法和樹(shù)脂交換法。硫酸酸化法操作簡(jiǎn)單，但需妥善控制甲醇的濃度和pH值,才能使硫酸鈉與VC得以分離。氫型離子樹(shù)脂交換法設(shè)備龐大，操作復(fù)雜，且需經(jīng)常再生樹(shù)脂，增加了酸耗，酸液大量排放容易對(duì)環(huán)境造成威脅。目前，人們正在積極探索使用雙極性膜( Bipol ar Membrane Electrodialysis，BME)來(lái)代替?zhèn)鹘y(tǒng)的酸化工藝，其工

12、作原理為：在直流電場(chǎng)作用下，雙極性膜中的水被離解成H+和OH-，H +替換 VC鈉鹽中的 Na+結(jié)合成離解度小的 VC , 原 VC鈉鹽中的 Na+在電場(chǎng)的作用下通過(guò)陽(yáng)離子交換膜從 VC鈉鹽中分離出來(lái), 并和OH-結(jié)合生成NaOH。雙極性膜電滲析法無(wú)需外加物料可將VC鈉鹽轉(zhuǎn)化成VC，過(guò)程簡(jiǎn)單，能耗低，投資少，轉(zhuǎn)化率高，其副產(chǎn)品和 NaOH稀溶液也可被有效利用，對(duì)環(huán)境無(wú)污染，有望應(yīng)用到實(shí)際生產(chǎn)中。3.3 葡萄糖直接發(fā)酵法不能以葡萄糖作為直接發(fā)酵原料是二步發(fā)酵法的最大缺陷之一。國(guó)外較早就開(kāi)始了細(xì)菌串聯(lián)發(fā)酵葡萄糖產(chǎn)生2-KLG的研究。Sonoyama研究發(fā)現(xiàn)，歐文氏菌的突變株(Erwinia)可將D

13、-葡萄糖氧化成為2，5-二酮基-D-葡萄糖酸, 再經(jīng)棒狀桿菌屬、短桿菌屬、節(jié)桿菌屬、假單胞菌屬、芽孢桿菌屬或葡萄球菌屬等其中的某些菌株還原成2-KLG。考慮若能將歐文氏菌和棒狀桿菌相關(guān)的特性結(jié)合于一種微生物中, 構(gòu)建VC基因工程菌，就可實(shí)現(xiàn)從D-葡萄糖到2- KLG的一步發(fā)酵。近年來(lái)，基因工程菌的研究已成為世界上熱點(diǎn)課題之一，美國(guó)、瑞士、法國(guó)、日本等許多國(guó)家都著力開(kāi)展了此方面的研究。1985年，美國(guó) Genentech公司 Anderson等人成功地分離純化了棒桿菌(Corynebacterium sp. )ATCC31090的2，5- DKG還原酶, 并分析了該酶N-端的40個(gè)氨基酸序列，用

14、原位雜交法從部分基因文庫(kù)中篩選到一個(gè)基因片段，再以已知片段為探針得到了完整基因，最終該基因被重組到了另一株發(fā)酵生產(chǎn)菌草生歐文氏菌 (E.herbicola ATCC21998)中, 得以有效表達(dá), 從而實(shí)現(xiàn)了從 D- 葡萄糖到 2- KLG的一步發(fā)酵。該法的合成效率很低，只有5%左右， 主要是由于合成2，5-DKG的3種關(guān)鍵酶 D-3葡萄糖脫氫酶、D-葡萄糖酸脫氫酶、 2-酮基-D-古龍酸脫氫酶(存在于周質(zhì)中 )與 2，5-DKG還原酶 (存在于胞質(zhì))在細(xì)胞中所處位置的較大差異造成。后來(lái)Grindley等經(jīng)過(guò)改進(jìn), 將棒桿菌的2，5 -DKG還原酶的基因在E.citreus上表達(dá)，將收率提高至

15、49%。所有這些都為最終構(gòu)建基因工程菌打下了基礎(chǔ)。二步發(fā)酵法發(fā)酵條件優(yōu)化“二步發(fā)酵法”是在“萊氏法”一步發(fā)酵的基礎(chǔ)上繼續(xù)經(jīng)過(guò)氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobacter oxydans)(俗稱小菌)和其伴生菌芽孢桿菌(Bacillus spp.)(俗稱大菌)兩種菌株的混合發(fā)酵1- 2生產(chǎn)Vc的前體物質(zhì)2-酮基- L-古龍酸(2- KLG)。該方法在Vc生產(chǎn)中一直占據(jù)著主導(dǎo)地位。本實(shí)驗(yàn)研究了混合菌系的發(fā)酵條件，優(yōu)化混合菌系的發(fā)酵工藝。1 實(shí)驗(yàn)材料1.1菌種 氧化葡萄糖酸桿菌(Gluconobacter oxydans)(俗稱小菌), 蠟狀芽孢桿菌(Bacillus cereus), 巨大芽孢桿菌

16、(Bacillus megatherium)(俗稱大菌)。1.2 培養(yǎng)基 種子培養(yǎng)基：L-山梨糖 1.5%，玉米漿0.3%，蛋白胨0.5%，尿素0.4%，KH2PO4 0.1%，MgSO4·7H2O 0.02%，CaCO3 0.03%，pH6.87.0, 121滅菌30 min。一次投糖發(fā)酵培養(yǎng)基：L-山梨糖8%，玉米漿1.5%，尿素0.01%，MgSO4·7H2O 0.01%, 消沫劑0.005%，酵母膏0.01%，(NH4)2SO4 0.01%，CaCO3 0.05%，pH6.56.7，121滅30 min，分離培養(yǎng)基。2 實(shí)驗(yàn)方法2.1 種液的制備 用適量無(wú)菌水洗斜面

17、，然后取少量混菌液接種到250 mL三角瓶培養(yǎng)48 h, 涂布到分離培養(yǎng)基平皿上，培養(yǎng)45d后大小菌搭配，然后在(30±1) 條件下茄子瓶斜面培養(yǎng)4d，經(jīng)搖瓶擴(kuò)大培養(yǎng)后，最后接到10 L不銹鋼種子罐中培養(yǎng)1824 h，即為生產(chǎn)用種液。2.2 2-酮基L-古龍酸(2-KLG)濃度的測(cè)定 碘量法測(cè)定。3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析3.1 起始糖濃度對(duì)糖酸轉(zhuǎn)化率的影響起始糖濃度對(duì)糖酸轉(zhuǎn)化率的影響起始糖濃度/%46810酸量/(mg/mL)39.0256.6473.6678.61轉(zhuǎn)化率/%90.5287.6085.4572.95發(fā)酵培養(yǎng)基中不同的L-山梨糖起始濃度可以明顯地改變菌系大小菌之間的數(shù)量比例，

18、有效地調(diào)節(jié)混合菌系的產(chǎn)酸代謝。表2中數(shù)據(jù)說(shuō)明，當(dāng)發(fā)酵培養(yǎng)基中L-山梨糖的起始濃度為10%時(shí)產(chǎn)酸量最高，但是糖酸轉(zhuǎn)化率最低，這可能是因?yàn)檫^(guò)高的糖濃度會(huì)抑制菌體產(chǎn)酸。起始糖濃度為4%時(shí)，轉(zhuǎn)化率高達(dá)90.52%，但是在大生產(chǎn)中投糖量過(guò)低會(huì)造成其他資源的浪費(fèi)，降低設(shè)備的有效利用率，提高發(fā)酵成本。所以采用8%的起始糖濃度最為合適。3.2 微量元素對(duì)新菌系生長(zhǎng)代謝的影響微量元素對(duì)菌系酸量的影響生長(zhǎng)因子VB1VB2VB1+ VB2產(chǎn)酸量/(mg/mL)72.0671.8474.44轉(zhuǎn)化率/%83.5883.3386.35在發(fā)酵培養(yǎng)基中添加(VB10.01%，VB20.01%)混合后的VB1和VB2 混合物要

19、比添加等量的單一微量元素VB1(0.01%)或 VB2(0.01%)對(duì)菌系產(chǎn)酸的影響大, 使菌系對(duì)L-山梨糖的轉(zhuǎn)化率達(dá)到86.35%。這是因?yàn)樗鼈兛梢蕴岣呋旌习l(fā)酵中大小菌之間的協(xié)調(diào)性，增強(qiáng)菌體代謝活力。3.3 起始 pH 值對(duì)菌系產(chǎn)酸量的影響起始 pH 值對(duì)菌系產(chǎn)酸量的影響pH6.06.57.07.5產(chǎn)酸量/（mg/mL）72.1273.3470.2368.84時(shí)間/h37.537.540.041.5菌系發(fā)酵培養(yǎng)基起始 pH 值為 6.5時(shí)菌體產(chǎn)酸量最高, 發(fā)酵周期短。但是pH6.77.6最有利于大菌的生長(zhǎng)，pH7.38.6有利于小菌的生長(zhǎng)，如果在發(fā)酵過(guò)程中根據(jù)大、小菌不同的生理特征進(jìn)行分段調(diào)

20、節(jié)pH值則會(huì)取得更好的發(fā)酵收率。3.4 通風(fēng)量對(duì)菌系產(chǎn)酸的影響通風(fēng)量對(duì)菌系產(chǎn)酸分析圖中空白對(duì)照和調(diào)節(jié)溶氧量后的產(chǎn)酸變化曲線可以看出, 在發(fā)酵到12 h 以前使其溶氧量控制在30%以下，有利于大菌快速生長(zhǎng)。12 h 以后調(diào)高通氣量使溶氧量達(dá)到30%40%之間，使小菌大量繁殖，較大的通氣量可以縮短小菌的延遲期，促進(jìn)混合菌系的產(chǎn)酸，縮短發(fā)酵周期。但是過(guò)大的通氣量，不僅造成生產(chǎn)上的浪費(fèi)，而且嚴(yán)重影響了大小菌代謝的協(xié)調(diào)性。這說(shuō)明通風(fēng)量的大小不僅影響大小菌之間的數(shù)量比例、生長(zhǎng)狀態(tài)和產(chǎn)酸量，而且也影響大小菌的生長(zhǎng)周期。3.5 CaCO3濃度對(duì)菌系產(chǎn)酸的影響圖中的曲線顯示，在發(fā)酵培養(yǎng)基中CaCO3濃度為0.0

21、5%時(shí)菌系產(chǎn)酸量最高，低于或高于該濃度時(shí)菌系產(chǎn)酸量都稍低，這是由于過(guò)低的CaCO3濃度不利于緩沖發(fā)酵液中的酸，造成酸的反饋抑制作用，而較高的CaCO3 濃度又會(huì)導(dǎo)致發(fā)酵液pH的變化，降低菌系的代謝活力。4 結(jié)論 目前，在 Vc二步混菌發(fā)酵合成2- KLG的工業(yè)化生產(chǎn)過(guò)程中，發(fā)酵培養(yǎng)基中合適的 L- 山梨糖起始濃度、碳酸鈣濃度、氮源、微量元素、起始 pH 值、通風(fēng)量等可以有效地調(diào)節(jié)2-KLG的產(chǎn)量，優(yōu)化菌系的生理狀態(tài)。促進(jìn)大小菌之間的協(xié)調(diào)，使其達(dá)到最佳發(fā)酵狀態(tài)。VC是我國(guó)自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)開(kāi)發(fā)的首批西藥之一，也是我國(guó)最主要的出口創(chuàng)匯原料藥之一。二步發(fā)酵法是我國(guó)VC生產(chǎn)的主要工藝方法，然而該法不能直接以

22、葡萄糖為發(fā)酵原料，且涉及二步發(fā)酵三種菌，工序繁瑣。采用基因工程等先進(jìn)技術(shù)，選育直接以葡萄糖為發(fā)酵原料的優(yōu)良菌株和優(yōu)化發(fā)酵條件將是我國(guó)VC生產(chǎn)技術(shù)研究的主要方向。此外，目前世界上很多國(guó)家正嘗試以真核生物為研究對(duì)象，利用它們合成VC的代謝途徑開(kāi)發(fā)更加環(huán)保的生物合成方法。從我國(guó)的二步發(fā)酵法推廣后逐步取代萊氏法這一過(guò)程可以預(yù)測(cè)，隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展和更具優(yōu)勢(shì)的生物合成 VC方法的不斷涌現(xiàn)，生物法必將完全取代化學(xué)法在VC生產(chǎn)中的地位，為了保持我國(guó)在世界VC生產(chǎn)上的優(yōu)勢(shì)地位，必須加強(qiáng)VC生產(chǎn)的基礎(chǔ)研究工作。參考文獻(xiàn)1 季光輝，燕方龍，苗春等.新型絮凝劑用于維生素C發(fā)酵液預(yù)處理J. 沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，1997，14(2)：88- 902 陳雷，張銘錫.維生素C生產(chǎn)提取除蛋白工藝的改進(jìn)J. 黑龍江醫(yī)藥，2001，14( 6): 447-4483陳永林，劉梅城，翟振山.板式超濾技術(shù)在VC