植物組織培養(yǎng)技術(shù)考試復(fù)習(xí)題

1、植物組織培養(yǎng)技術(shù)考試復(fù)習(xí)題一、填空題1、組織培養(yǎng)的理論依據(jù)是： 植物細(xì)胞的全能性。2、根據(jù)培養(yǎng)的外植體材料不同，可將植物組織培養(yǎng)分為以下幾種類型： 愈傷組織培養(yǎng) 、 器官培養(yǎng) 、 胚培養(yǎng) 、 細(xì)胞培養(yǎng) 、 原生質(zhì)體培養(yǎng) 、 遺傳轉(zhuǎn)化 。3、植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室一般劃分為 洗滌室 、 培養(yǎng)基配置室 、 緩沖室 、 無菌接種室 、培養(yǎng)室、觀察室、馴化室等分室，其中植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室對(duì)無菌條件要求最嚴(yán)格的區(qū)域是 無菌接種室 。4、培養(yǎng)基成分主要包 水分 、 無機(jī)鹽類 、 有機(jī)營養(yǎng)成、植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì) 、 天然物 質(zhì) 、 pH 、 凝固劑 。5、目前應(yīng)用最廣泛的組培基本培養(yǎng)基是 MS培養(yǎng)基 。6、培養(yǎng)基

2、最常用的碳源是 糖類物質(zhì) ，使用濃度在1%-5% 常用 3 %。7、培養(yǎng)基中加入活性炭的目的： 減少外植體的褐變 。8、生長(zhǎng)素/細(xì)胞分裂素的高低決定著外植體的發(fā)育方向，其比值高則有利于 根 的形成； 其比值低則有利于 芽 的形成。9、一個(gè)已停止分裂的成熟細(xì)胞轉(zhuǎn)變?yōu)榉稚鸂顟B(tài)，并形成未分化的愈傷組織的現(xiàn)象稱為_脫分化_10、某些生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)及抗生素、酶類物質(zhì)遇熱不穩(wěn)定，對(duì)其滅菌時(shí)不能進(jìn)行 (高壓蒸汽 )滅菌，而要進(jìn)行 過濾方法滅菌 。11、確定花粉發(fā)育時(shí)期最簡(jiǎn)捷有效的方法是 壓片鏡檢法 。12、液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基最主要的區(qū)別是：固體培養(yǎng)基中添加了 瓊脂粉 ，而液體培養(yǎng)基一般不添加。13、細(xì)胞懸

3、浮培養(yǎng)的方法有 分批培養(yǎng) 和 連續(xù)培養(yǎng) 。14、外植體滅菌常用的消毒劑是 酒精 ，使用濃度一般為 7075 。15、具有防止褐變作用的維生素是 抗壞血酸（維生素c） 。16、常用防止褐變的試劑有 有機(jī)酸 、 硫代硫酸鈉 。17、組培中按照污染的對(duì)象分，常見的污染類型有 細(xì)菌性污染 、 真菌性污染 。18、在使用超凈工作臺(tái)進(jìn)行無菌操作前，應(yīng)先將借種器械放進(jìn)超凈工作臺(tái)，并打開 紫外線燈和風(fēng)機(jī)組工作 進(jìn)行消毒20分鐘左右。19、配制培養(yǎng)基調(diào)節(jié)pH值時(shí)常用 氫氧化鈉溶液 和 稀鹽酸溶液 。20、某溶液在使用前已配制成100倍的母液，在使用時(shí)，若需要配制1/2 L的培養(yǎng)基，則需要吸取母液的量是 5ml

4、。21、 原球莖 是蘭科植物特有的一種快繁方式。22、組織培養(yǎng)植株的再生途徑有兩條，分別是： 器官發(fā)生途徑 和 胚胎發(fā)生途徑 。23、一般進(jìn)行外植體培養(yǎng)時(shí)，須誘導(dǎo)形成新的分生組織，即形成 愈傷組織 。24、在使用完移液槍后，應(yīng)注意 調(diào)回至該移液槍最大量程 。25、植物組織培養(yǎng)快速繁殖技術(shù)的基本過程包括 材料的初代培養(yǎng) 、 繼代培養(yǎng) 、 生根培養(yǎng) 、 馴化培養(yǎng) 。26、接種室每隔三個(gè)月會(huì)定期進(jìn)行熏蒸消毒，一般使用 甲醛 和 高錳酸鉀。二、選擇題：1、20世紀(jì)30年代，植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域有兩大發(fā)現(xiàn)，一是（ B ）族維生素對(duì)植物生長(zhǎng)的重要性，二是生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的發(fā)現(xiàn)。 A、A B、 B C、 C D、

5、E2、( B ）下列哪種不是原生質(zhì)體分離所用的酶_ _。 A、纖維素酶 B、淀粉酶 C、果膠酶 D、半纖維素酶3、( D )下列哪種在MS培養(yǎng)基中不起促進(jìn)生長(zhǎng)作用_。 A、氨基酸 B、肌醇 C、維生素 D、瓊脂4、下列激素，（ D ）是天然的A、 IBA B、 NAA C、 BA D 、 ZT5、下列不能作為植物組織培養(yǎng)的材料是：（ D ）A、秋海棠的葉 B、馬鈴薯的塊莖 C、成熟的花粉 D、木質(zhì)部中的導(dǎo)管細(xì)胞6、離體培養(yǎng)中，對(duì)溫度的調(diào)控比對(duì)光照更為重要，培養(yǎng)室一般所用的溫度是（ C）A、15-35 B、23-32 C、 252D、20-237、外植體表面滅菌可選擇的表面滅菌劑的種類較多，但滅

6、菌效果最好的是（ B）A、2次氯酸鈉 B、 0.1氯化汞 C、70酒精 D、吐溫808、生根培養(yǎng)一般可采用12或者14MS培養(yǎng)基，并加入適量的（ D）。 A、2.4-D B、赤霉素 C、細(xì)胞分裂素D、生長(zhǎng)素9、影響培養(yǎng)基凝固程度因素有（ D）A、瓊脂的質(zhì)量好壞 B、高壓滅菌的時(shí)間與溫度C、培養(yǎng)基的PH D、以上都是10、下列不屬于大量元素的鹽是（C）A、 NH4NO3 B、 KNO3 C、 ZnSO4.7H2O D、 MgSO4.7H2O11、接種操作中一方面要建立（ A）的概念，對(duì)可能有菌的地方進(jìn)行嚴(yán)格消毒處理，另一方面操作時(shí)干凈利落，不可拖泥帶水。 A、無菌 B、 污染 C、科學(xué) D、滅菌

7、12、在組織培養(yǎng)中，月季、菊花是通過（ A）方式快繁；蝴蝶蘭是通過（ ）方式快繁的。A、 無菌短技型，原球莖發(fā)生型 B、原球莖發(fā)生型，無菌短技型 C、 無菌短技型，器官發(fā)生型D、胚狀體發(fā)生型，原球莖發(fā)生型13、為了誘導(dǎo)芽的形成，培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素的濃度（A）A 、比值大 B、 比值小C、 比值相等 D、 比值的大小沒有關(guān)系14、為了誘導(dǎo)根的形成，培養(yǎng)基中細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素濃度（B）A 、比值大 B、 比值小 C、 比值相等 D、 比值的大小沒有關(guān)系15、植物病毒病害防治上，植物病毒脫毒技術(shù)得到了廣泛的應(yīng)用，下列脫毒技術(shù)效果最好、應(yīng)用最廣泛的是（C ）。A、熱處理脫毒法B、莖尖培養(yǎng)脫毒法

8、C、熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合的脫毒法D、基因工程技術(shù)脫毒法16、熱處理法中，最主要的影響因素是（D ）。A、溫度 B、時(shí)間C、濕度 D、溫度和時(shí)間17、根據(jù)特異性的抗原抗體反應(yīng)可檢測(cè)植物病毒的存在，這種檢測(cè)方法是（ C）。A、直接鑒定法 B、電子顯微鏡鑒定法C、血清學(xué)鑒定法 D、分子生物學(xué)鑒定法18、( B )大多數(shù)植物組織培養(yǎng)培養(yǎng)基最適pH為 。 A、5.0-7.0 B、5.0-6.0 C、3.0-4.0 D、7.0-8.019有一種植物經(jīng)初代培養(yǎng)得到株無菌苗，以后按每天繼代增殖一次，每次增殖倍數(shù)為倍，一年后繁殖苗有C A、 3410株 B 、4 312株 C 、 310株 D、 412株20

9、、(D )下列哪種在MS培養(yǎng)基中不起促進(jìn)生長(zhǎng)作用_D_。 A、氨基酸 B、肌醇 C、維生素 D、瓊脂21、植物病毒病害防治上，植物病毒脫毒技術(shù)得到了廣泛的應(yīng)用，下列脫毒技術(shù)效果最好、應(yīng)用最廣泛的是（ C）。A、熱處理脫毒法B、莖尖培養(yǎng)脫毒法C、熱處理與莖尖培養(yǎng)相結(jié)合的脫毒法D、基因工程技術(shù)脫毒法22、下列物質(zhì)不能用高溫蒸汽滅菌的是（C ）A、鑷子 B、濾紙 C、抗生素類 D、6-BA23、( A )下列那種不是無性繁殖的器官_。A、種子 B、枝條 C、塊莖 D、塊根22、( B ) 植物離體保存的主要步驟是 。離體培養(yǎng)物的保存離體培養(yǎng)與祛除病原物 種質(zhì)離體收集遺傳穩(wěn)定性鑒定A、B、C、D、24

10、、 ( C ) 原生質(zhì)體純化步驟大致有如下幾步 。將收集到的濾液離心，轉(zhuǎn)速以將原生質(zhì)體沉淀而碎片等仍懸浮在上清液中為準(zhǔn)，一般以500rmin離心15min。用吸管謹(jǐn)慎地吸去上清液。將離心下來的原生質(zhì)體重新懸浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次離心，去上清液，如此重復(fù)三次。將原生質(zhì)體混合液經(jīng)篩孔大小為40100um的濾網(wǎng)過濾，以除去未消化的細(xì)胞團(tuán)塊和篩管、導(dǎo)管等雜質(zhì)，收集濾液。用培養(yǎng)基清洗一次，最后用培養(yǎng)基將原生質(zhì)調(diào)到一定密度進(jìn)行培養(yǎng)。一般原生質(zhì)體的培養(yǎng)密度為104106ml。A、 B、 C、 D、25、( D )下列有關(guān)細(xì)胞全能性的含義，正確的是 。A、每個(gè)生物體內(nèi)的所有細(xì)胞都具

11、有相同的功能 B、生物體內(nèi)的任何一個(gè)細(xì)胞可以完成該個(gè)體的全部功能 C、生物體的每一個(gè)活細(xì)胞都具有發(fā)育成完整個(gè)體的潛能 D、生物體的每個(gè)細(xì)胞都經(jīng)過產(chǎn)生、分裂、分化、生長(zhǎng)、衰老、死亡的全過程 26、( D )下列不屬于活性炭在組織培養(yǎng)中的作用是_。A、吸附有毒物質(zhì) B、減少褐變，防止玻璃化 C、創(chuàng)造黑暗環(huán)境，增加培養(yǎng)基的通透性，利于根的生長(zhǎng) D、增加培養(yǎng)基中的養(yǎng)分三、名詞解釋1、植物組織培養(yǎng)：又稱植物離體培養(yǎng)，是在無菌和人工控制的條件下，利用合適的培養(yǎng)基，完成對(duì)植物的器官，組織，細(xì)胞以及原生質(zhì)體的培養(yǎng)，使其按人們的意愿生長(zhǎng)，增殖或再生完整植株的一門生物技術(shù)。2、脫分化：是指一個(gè)成熟個(gè)體恢復(fù)分化狀態(tài)

12、，失去已分化組織，形成愈傷組織的過程。3、離體培養(yǎng)：在植物組織培養(yǎng)中，把植物體的組織或細(xì)胞離體在一定條件下培養(yǎng)。4、愈傷組織：植物培養(yǎng)中，植物細(xì)胞表現(xiàn)其全能性，經(jīng)過脫分化，形成的一團(tuán)無序生長(zhǎng)的薄壁組織。5、細(xì)胞懸浮培養(yǎng)：是指植物的細(xì)胞和細(xì)胞小聚體在液體培養(yǎng)基中進(jìn)行培養(yǎng)，使之在體外繁殖，生長(zhǎng)，發(fā)育，并在培養(yǎng)過程中保持很好的分散性的技術(shù)。6、玻璃化現(xiàn)象：是試管苗的一種生理失調(diào)癥狀，當(dāng)植物材料進(jìn)行離體培養(yǎng)時(shí)，有些組培苗的嫩莖，葉片往往會(huì)出現(xiàn)半透明狀和水漬狀的現(xiàn)象。7、外植體：進(jìn)行植物組織培養(yǎng)中作為離體培養(yǎng)材料的器官或組織的片段。在繼代培養(yǎng)時(shí)，將培養(yǎng)的組織切段移入新的培養(yǎng)基時(shí)，這種切段也稱外植體。8、

13、馴化現(xiàn)象：在植物組織培養(yǎng)的早期研究中，發(fā)現(xiàn)一些植物的組織經(jīng)長(zhǎng)期的繼代培養(yǎng)發(fā)生了一些變化，在前期的繼代培養(yǎng)中需要生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)的植物材料，其后加入少量或不加入生長(zhǎng)調(diào)節(jié)物質(zhì)就可以繼續(xù)生長(zhǎng)的現(xiàn)象。四、簡(jiǎn)答題：1.簡(jiǎn)述培養(yǎng)基配制的基本過程答：1）取出母液并按順序排好，并將有機(jī)營養(yǎng)物質(zhì)貯液溶化待用。2）再取出潔凈各種的玻璃器皿如：燒杯，玻璃棒，移液管，移液槍，量筒放在指定位置。3）取一個(gè)大燒杯，倒入三分之一的純水，并依母液所需量按順序加入，并不斷攪拌。4）再加入蔗糖，瓊脂，并加熱使其完全溶解。5）加入植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，用純水定容。6）調(diào)節(jié)pH，用預(yù)先配制好的氫氧化鈉溶液或稀鹽酸溶液進(jìn)行調(diào)節(jié)。7）將培養(yǎng)基分裝

14、到各培養(yǎng)器皿，并封好瓶口。2.在植物組織培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中，造成污染的因素有哪些？答：1）培養(yǎng)基和各種使用器具消毒不徹底2）外植體滅菌不徹底，雜菌殘存外植體表面3）超凈工作區(qū)域污染4）操作人為因素帶入5）環(huán)境不潔凈3.簡(jiǎn)述外植體的消毒過程。清水清洗清潔精清洗吸干水分70酒精清洗升汞清洗無菌水清洗。4.簡(jiǎn)述緩解和減輕褐變的措施。1）外植體和培養(yǎng)材料進(jìn)行2040d的遮光或暗培養(yǎng)，可以減輕一些種類的褐變現(xiàn)象；2）選擇適宜的培養(yǎng)基，調(diào)節(jié)激素用量，控制溫度和光照，降低溫度，減少光照；3）選擇年齡適宜的外植體材料進(jìn)行培養(yǎng)；4）在培養(yǎng)基中，加入抗氧化劑和其他抑制劑如抗壞血素，可以有效地抑制褐變；5）連續(xù)轉(zhuǎn)移，對(duì)易褐變的材料可間隔1224h的培養(yǎng)后，再轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)基上，連續(xù)培養(yǎng)處理710d后，褐變現(xiàn)象便會(huì)得到控制或大為減輕；6）添加活性炭等吸附劑，這是生產(chǎn)上常用的降低褐變的有效方法。5.脫毒苗的鑒定方法有哪些？1）指示植物病毒鑒定法；2）抗血清鑒定法；3）電子顯微鏡鑒定法；4）分子生物學(xué)方法。6.植物細(xì)胞懸浮培養(yǎng)中單細(xì)胞分離的方法有哪些？1）從培養(yǎng)愈傷組織中分離單細(xì)胞